复方地黄防治AD大鼠海马CA1区神经元突触超微结构改变的实验研究

目的:研究复方地黄对AD大鼠海马CA1区神经元突触超微结构改变的影响.方法:在腹腔注射D-半乳糖造成大鼠衰老的基础上,海马注射Aβ1-40造成拟老年性痴呆学习记忆损害模型,灌胃复方地黄水溶液,观察突触超微结构变化.结果:大鼠跳台筛选模型,统计复方地黄对老年性痴呆大鼠海马神经元突触超微结构的影响.结论:复方地黄能够保护神经元突触超微结构,对老年性痴呆大鼠学习记忆能力有增强和提高作用.     

复方地黄对AD大鼠行为学改变及海马CA1区神经元形态结构的影响

目的：观察复方地黄对阿尔茨海默病（Alzheimer’sDisease,AD）模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元形态结构的影响。方法：在腹腔注射D一半乳糖造成大鼠衰老的基础上,海马CA1区注射喹啉酸（QA）造成拟老年性痴呆学习记忆损害模型,复方地黄汤治疗后,观察光、电镜下海马CA1区神经元形态的变化。结果：复方地黄可明显缩短AD大鼠的Morris水迷宫潜伏期、增加平台象限路程比和跨平台次数,明显减轻海马CA1区神经元的损伤,阻止神经元数量上的过度缺失,明显修复线粒体,保护高尔基复合体、粗面内质网的形态,减少突触的溶解。结论：复方地黄对AD模型大鼠受损的神经行为学有明显的改善,对损伤的神经元有一定的保护作用;尤其对损伤突触有一定程度的修复.     

复方地黄对衰老大鼠学习记忆及脑内AchE、SOD活性影响的实验研究

目的:观察复方地黄对衰老模型大鼠学习记忆的影响并探讨其与脑内AchE、SOD的关系.方法:用D-半乳糖皮下注射造成衰老大鼠模型,并给予复方地黄灌胃治疗,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆水平;生化检测脑内AchE、SOD活性变化.结果:复方地黄可明显提高衰老大鼠学习记忆水平,显著降低脑内AchE水平,提高脑内SOD活性.结论:复方地黄增强衰老大鼠学习记忆活动与脑内AchE、SOD活性水平有关.     

复方地黄对AD大鼠行为学改变及海马CA1区神经元形态结构的影响

目的:观察复方地黄对阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元形态结构的影响。方法:在腹腔注射D-半乳糖造成大鼠衰老的基础上,海马CA1区注射喹啉酸(QA)造成拟老年性痴呆学习记忆损害模型,复方地黄汤治疗后,观察光、电镜下海马CA1区神经元形态的变化。结果:复方地黄可明显缩短AD大鼠的Morris水迷宫潜伏期、增加平台象限路程比和跨平台次数,明显减轻海马CA1区神经元的损伤,阻止神经元数量上的过度缺失,明显修复线粒体,保护高尔基复合体、粗面内质网的形态,减少突触的溶解。结论:复方地黄对AD模型大鼠受损的神经行为学有明显的改善,对损伤的神经元有一定的保护作用;尤其对损伤突触有一定程度的修复。     

补肾健脾方对AD大鼠AchE、ChAT及海马神经元凋亡的影响

目的研究中药补肾健脾方对阿尔茨海默（AD）大鼠血清及海马组织中乙酰胆碱酯酶（AchE）、胆碱转移酶（ChAT）及神经细胞凋亡的影响。方法雄性SD大鼠随机分为5组：正常组、模型组、假手术组及补肾健脾复方制剂小剂量、大剂量干预组。采用鹅膏蕈氨酸毁损大鼠脑Meynert基底核制备AD动物模型,中药补肾健脾方分别以3.6g/（kg.d）、7.2g/（kg.d）灌胃。30d后以水迷宫测试大鼠学习及记忆能力,对各组大鼠血清及脑海马匀浆中AchE、ChAT的活性进行测定,运用电镜技术及免疫组化检测海马中神经细胞的凋亡及Bax、Bcl-2的表达。结果与模型组比较,补肾健脾复方制剂大、小剂量干预组大鼠的平均逃避潜伏期明显缩短（P〈0.05）,血清及匀浆中AchE的活性下降（P〈0.05）,ChAT活性增高（P〈0.05）,脑皮质的细胞凋亡显著减少（P〈0.05）,脑皮质中Bax阳性神经元数量明显降低（P〈0.05）,Bcl-2阳性神经元的数量显著增加（P〈0.05）。结论补肾健脾方可在抑制AchE活性的同时增加ChAT的活性,并可通过调节Bax/Bcl-2的表达减少海马组织中神经细胞的凋亡。     

复方地黄对老年痴呆动物模型学习记忆能力的影响

目的:探讨复方地黄对D-半乳糖致老年痴呆小鼠模型的学习记忆能力的影响及其机制。方法:sc10%D-半乳糖6周建立小鼠老年痴呆模型,然后用复方地黄3.37,1.75 g.kg-1 ig 4周,对照组和模型组给予等量生理盐水。用Y型迷宫检测小鼠的学习记忆能力,同时检测小鼠脑组织一氧化氮(NO)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:与空白组相比,模型组小鼠学习能力降低(p<0.01)。给予小鼠高剂量复方地黄后,小鼠上述变化明显改善,与模型组相比差异具有统计学意义(p<0.01)。结论:复方地黄可改善D-半乳糖致痴呆小鼠模型的学习记忆能力,其机制可能与复方地黄能使小鼠脑组织中NO含量降低和SOD活性升高有关。     

地黄饮子对AD模型大鼠定位航行学习记忆的影响

目的:观察中医古方地黄饮子改善老年性痴呆模型大鼠定位航行学习记忆功能的作用强度.方法:应用Morris水迷宫检测地黄饮子对D-半乳糖致亚急性衰老合并右侧海马CA1区注射凝聚态Aβ1-40所致AD模型大鼠定位航行学习记忆改善情况.结果表明:地黄饮子能够改善模型大鼠的定位航行学习记忆能力,缩短模型大鼠在水迷宫中定位航行实验逃避潜伏期,提示地黄饮子对AD模型大鼠的定位航行学习记忆能力有一定的改善作用.     

复方地黄对阿尔茨海默大鼠神经递质改变的实验研究

在腹腔注射D-半乳糖造成大鼠衰老的基础上,双侧海马注射喹啉酸造成拟阿尔茨海默病(AD)学习记忆损害模型。观察AchE、MAO、5-HT的活性,检测复方地黄对AD大鼠神经递质的影响。结果:复方地黄能够降低AchE、MAO活性,增加5-HT含量,证明复方地黄对AD有保护和治疗作用。     

寿尔智胶囊对AD模型大鼠突触超微结构的影响

研究发现:在阿尔茨海默病(AD)患者脑中,突触数量减少较神经元丧失更为显著[1]。AD患者的大脑内不但存在有突触数目减少、结构异常、而且包括功能蛋白都有不同程度的表达异常。PSD的形态变化是突触功能活动变化的重要结构基础。突触功能活动变化时,某些酶及其底物蛋白的磷酸化,使其分子构型发生改变,进而引起PSD厚度增加或变薄[2]。本研究观察了AD大鼠海马组织中突触超微结构的变化及寿尔智胶囊的干预     

加减地黄饮子对所致AD大鼠学习记忆及抗氧化作用的影响

目的：观察加减地黄饮子对实验性痴呆大鼠的防治作用。方法：凝聚态Aβ1-40直接定向注射右侧海马CA1区造成AD大鼠模型，以大鼠跳台实验检测各组大鼠学习记忆行为，测定脑组织中SOD活性、MDA及脂褐素含量，光镜观察海马病理变化。结果：加减地黄饮子可以通过清除自由基，提高抗氧化能力，改善细胞的退化、变性程度，提高Aβ致痴呆鼠的学习记忆能力。结论：加减地黄饮子可以通过影响自由基水平对老年性痴呆大鼠有一定的防治作用。     

Aβ海马注射对大鼠学习记忆影响及加减地黄饮子的干预作用

目的:观察加减地黄饮子对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ-1-40)诱导的AD模型大鼠学习记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰化转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)表达的影响。方法:采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ-1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)动物模型。采用Morris水迷宫测试大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数评价大鼠学习记忆能力及加减地黄饮子的干预作用。采用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术测定海马区ChAT表达。结果:模型组大鼠在定位航行试验中寻找隐匿平台平均逃避潜伏期较正常组显著延长,空间探索试验中跨越原平台位置次数明显减少(P<0.01),加减地黄饮子组平均逃避潜伏期较模型组显著缩短,跨越原平台位置次数明显增加(P<0.01),但多奈哌齐组和加减地黄饮子组比较差异无显著性(P>0.05)。免疫组化实验结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠海马区ChAT蛋白表达下降(P<0.01)。与模型组比较,加减地黄饮子组ChAT蛋白表达升高(P<0.01)。结论:加减地黄饮子对AD模型大鼠的学习记忆功能减退具有改善作用,可能与增强海马神经元ChAT表达,进而使Ach的合成增加有关。     

复方地黄对AD大鼠学习记忆及Wnt通路相关蛋白表达的影响

目的:观察复方地黄对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆及Wnt通路相关蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:采用Morris水迷宫筛选出健康Wistar大鼠,随机分为正常组,模型组,复方地黄高、低剂量(3.37,1.35 g·kg-1)组,加兰他敏(0.6 mg·kg-1)组。双侧海马区注射β-淀粉样蛋白(Aβ)23-35造模(每侧10μL),注射后第9天,ig相应药物,持续30d。采用水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,用免疫组化、免疫印迹及实时荧光定量PCR检测大鼠海马Wnt通路相关蛋白轴蛋白(Axin)及细胞周期蛋白(Cyclin D1)表达。结果:模型组大鼠逃避潜伏期和首次到达原平台象限的时间均较正常组显著增多(P0.01)。与模型组比较,加蓝他敏组及复方地黄高、低剂量组大鼠逃避潜伏期和首次到达原平台象限的时间明显减少(P0.05)。复方地黄高剂量组较加兰他敏组首次到达原平台象限的时间减少(P0.05)。免疫组化结果显示阳性表达Axin在胞质,Cyclin D1在胞核。免疫印迹法及实时荧光定量PCR结果显示,与正常组大鼠比较,模型组大鼠海马Axin mRNA及蛋白表达显著增高(P0.01);与模型组比较,复方地黄高、低剂量组及加兰他敏组大鼠海马Axin mRNA及蛋白表达明显降低(P0.05),Cyclin D1mRNA及蛋白表达明显升高(P0.05)。结论:复方地黄可以改善AD模型大鼠学习记忆能力,其作用机制可能与降低AD大鼠海马Wnt通路相关蛋白Axin,增强Cyclin D1表达密切相关。     

复方地黄对老年痴呆大鼠学习记忆及海马GDNF mRNA表达的影响

目的:探讨复方地黄对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠海马GDNF mRNA表达的影响.方法:通过Morris水迷宫筛选40只健康Wistar大鼠随机分出正常组10只(常规饮水和饲料,不给予任何处理),其余3组大鼠均采用链脲佐菌素(STZ)致AD模型,模型组10只造模后不进行治疗.造模后第6天开始治疗,安理申组(0.4 g·kg-1·d-1)和复方地黄组(含生药10 g·kg-1 ·d-1),每组10只,疗程4周.用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,用原位杂交法和RT-PCR检测大鼠海马胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)GDNF mRNA的表达.结果:模型组大鼠学习能力比正常组降低(P＜0.05),复方地黄大鼠上述变化明显改善,与模型组差异显著(P＜0.05).与正常组大鼠比较,模型组大鼠海马GDNF mRNA表达降低明显(P＜0.05);与模型组比较,复方地黄组大鼠海马GDNF mRNA表达明显增加(P＜0.05).结论:复方地黄可能通过增强AD大鼠海马GDNF mRNA表达而起到对神经保护作用.     

电针“智三针”对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马CA1区突触相关蛋白表达的影响

目的:观察电针"智三针"对血管性痴呆(VaD)大鼠学习记忆及海马CA1区突触后致密物-95(Psd-95)和突触囊泡膜蛋白(Syp)表达的影响,探讨电针"智三针"调控神经元突触可塑性从而改善VaD学习记忆的可能机制。方法:将48只造模成功的大鼠随机分为VaD模型组、尼莫地平组、电针智三针组,每组16只,采用改良Pulsinelli四血管阻断法(4-VO)制作VaD大鼠模型,另取12只未造模大鼠为假手术组。Morris水迷宫检测各组大鼠行为学,免疫组织化学法检测大鼠海马CA1区Psd-95和Syp阳性细胞表达,蛋白质印迹法检测大鼠海马CA1区Psd-95和Syp蛋白的表达情况。结果:与假手术组比较,VaD模型组大鼠在2 d后逃避潜伏期明显延长,而第三象限游泳时间和跨越平台次数明显减少(P<0.05);与VaD模型组比较,电针智三针组大鼠逃避潜伏期缩短、跨越平台次数增加(P<0.05)。与假手术组比较,VaD模型组大鼠海马CA1区Psd-95与Syp蛋白表达量明显减少(P<0.05);与VaD模型组比较,电针智三针组与尼莫地平组大鼠海马CA1区Psd-95与Syp蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论:电针"智三针"可能通过增加海马CA1区Psd-95和Syp的表达,调控海马CA1区突触可塑性,减少神经元突触丢失,从而达到改善VaD大鼠学习记忆的作用。     

地黄饮子对AD模型大鼠的学习记忆及胆碱能损害的影响

目的：探讨地黄饮子对AD鼠学习记忆及胆碱能损害的影响。方法：模型组以D-半乳糖（D-gal）腹腔注射合并β淀粉样蛋白（Aβ）注射海马制备AD动物模型,各治疗组分别在造模的同时灌胃地黄饮子和抗脑衰胶囊、哈伯因。运用穿梭箱检测各组大鼠的学习记忆能力,采用生化法检测各组大鼠脑匀浆AchE,免疫组化方法观察SYN蛋白的变化。结果：中药治疗组均可使各组大鼠潜伏期降低、主动回避反应阳性率明显升高,被动逃避时间显著降低,表明主动、被动反应水平均有所回升,有显著性差异。灌服中药后各治疗组脑组织AchE活性降低,大鼠海马、皮层神经元SYN蛋白表达增加。结论：地黄饮子对痴呆鼠学习记忆能力的提高及改善神经元损伤的作用,可能与地黄饮子改善鼠脑神经元胆碱能损害,来上调海马和皮层神经元SYN蛋白的表达有关。     

白芍总苷对脑缺血大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元的保护作用

目的:研究白芍总苷对脑缺血大鼠学习记忆能力的影响以及对海马CA1区神经元的保护作用并初探其机制。方法:通过结扎双侧颈总动脉制备大鼠脑缺血模型,术后第二天开始连续28 d灌胃给药白芍总苷(50、100、200 mg·kg~(-1)),每天1次。28 d后,通过Morris水迷宫实验和跳台实验评价大鼠学习记忆能力;HE染色观察海马CA1区神经元形态,TUNEL染色观察海马CA1区神经元凋亡状况,免疫组织化学(IHC)法检测海马Bcl-2、Bax表达,检测抗氧化酶活性和MDA含量。结果:100、200 mg·kg~(-1)白芍总苷能够显著缩短脑缺血大鼠逃避潜伏期,显著缩短跳台潜伏期、增加跳台次数(P0.05或P0.01);明显改善海马CA1区神经元病理性形态结构变化和细胞凋亡状况,显著降低凋亡指数(Apoptosis Index,AI)(P0.01),显著上调海马Bcl-2表达、下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax值(P0.05或P0.01),显著改善抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)活性并降低MDA含量(P0.05或P0.01)。结论:白芍总苷具有改善脑缺血大鼠学习记忆能力的作用;可能与其抑制海马CA1区神经元病变、调节Bcl-2和Bax表达、抑制海马CA1区细胞凋亡有关。     

地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8学习记忆能力及海马神经元结构的影响

目的研究地黄饮子对快速老化小鼠P8(SAMP8)学习记忆能力及海马组织病理形态的影响,探讨其治疗老年性痴呆的药效及作用机制。方法运用小鼠跳台行为学实验检测地黄饮子对SAMP8小鼠的学习记忆能力的影响;HE染色和电镜观察检测SAMP8小鼠海马形态结构和超微结构。结果模型组SAMP8小鼠跳台实验潜伏期缩短(第1天208.19±65.42,第2天254.76±48.99),与空白组SAMR1小鼠(第1天248.17±27.59,第2天296.35±3.17)比较有非常和/或显著差异(P<0.05,P<0.01)。给药后,地黄饮子组潜伏期(第1天277.06±7.86,第2天295.36±5.17)与模型组(第1天208.19±65.42,第2天254.76±48.99)比较非常显著性延长(P<0.01)。相同组的第2天潜伏期与第1天比较,除模型组以外,其他各组均非常显著延长(P<0.01)。模型组与空白组比较,伴有海马锥体细胞形态结构、超微结构的改变。给药后,地黄饮子减轻SAMP8小鼠的海马病理损伤状况。结论地黄饮子对SAMP8小鼠的学习记忆能力有改善作用。     

加减地黄饮子对糖尿病大鼠海马CA1区神经元c-fos表达的影响

目的:观察加减地黄饮子对糖尿病大鼠海马CA1区神经元c-fos表达的影响。方法:腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,于造模4周后以免疫组化法观察加减地黄饮子对糖尿病大鼠海马CA1区神经元c-fos表达的影响。结果:加减地黄饮子防治组大鼠海马CA1区神经元c-fos阳性细胞密度和平均光密度(8.13±1.70,0.46±0.08)较糖尿病组(9.25±2.36,0.56±0.06)均降低(P<0.05)。结论:加减地黄饮子可以有效防治糖尿病大鼠海马神经元退行性变化。     

地黄饮子加减方对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元损伤的影响

目的:观察地黄饮子加减方对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元的影响。方法:将84只SD雄性大鼠,按随机原则选出12只大鼠作为假手术组,其余72只大鼠采用两血管阻断法制备血管性痴呆模型,筛选60只模型大鼠,每组12只,随机分为模型组,尼莫地平组(0. 011 g·kg~(-1)),地黄饮子加减方高、中、低(4. 54,2. 27,1. 14 g·kg~(-1))剂量组。连续灌胃30 d后,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,苏木素-伊红(HE)观察海马CA1区神经元形态结构改变,透射电镜观察海马CA1区神经元超微结构变化,原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测海马CA1区细胞凋亡水平,免疫组化(IHC)检测海马CA1区组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长,穿越原平台次数显著减少(P 0. 01),海马CA1区神经元形态均有不同程度地损伤,凋亡率显著增加(P 0. 01),PI3K,Akt的积分吸光度和平均积分吸光度明显降低(P 0. 01),Caspase-3的积分吸光度和平均积分吸光度显著增高(P 0. 01);与模型组比较,各给药组大鼠逃避潜伏期缩短(P 0. 05,P 0. 01),穿越原平台次数增加(P 0. 05,P 0. 01),PI3K,Akt的积分吸光度和平均积分吸光度值显著增高(P 0. 01),Caspase-3的积分光密度和平均积分吸光度不同程度降低(P 0. 05,P 0. 01)。结论:地黄饮子加减方可改善血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力和海马CA1区神经元损伤,潜在机制可能与PI3K/Akt信号转导途径的激活,抑制大鼠海马CA1区神经细胞的凋亡有关。     

地黄饮子对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠学习记忆功能的影响

目的：探讨地黄饮子对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆功能的影响。方法：选取ICR小鼠40只,随机分成空白组（8只）、AD模型组（32只）,采用D-半乳糖复合给药造模25 d后,将造模成功的小鼠随机分为AD模型组（13只）、地黄饮子组（13只）,地黄饮子组连续灌胃25 d（16 g/kg）,采用水迷宫检测阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆能力。结果：与模型组比较,地黄饮子组与模型组潜伏时间相比P=0.024,给药组与模型组经过目标象限次数相比P=0.009 8,两组之间有显著性差异（P〈0.05）;地黄饮子能缩短潜伏时间,增加经过目标象限次数。结论：地黄饮子能改善阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆。