补肾中药对去卵巢大鼠骨组织ER、OPG表达的促进作用

通过检测去卵巢大鼠给予补肾中药后腰椎内ERmRNA及OPG mRNA的表达,进一步探讨补肾中药防治骨质疏松的分子机制.将雌性3月龄SD大鼠48只,随机分为卵巢切除 补肾中药防治(HDP),卵巢切除 雌激素(倍美力)防治(ER),骨质疏松(卵巢切除)(OVX)及正常对照组(SHAM)4组,每组12只.术后12周处死大鼠,取L3椎体,异硫氰酸胍一步法提取总RNA,嵌套式反转录聚合酶链反应(NRT-PCR),扩增待检测各组ERmRNA及OPGmRNA的表达.同时取L4椎体,行骨组织形态计量学检测.结果显示HDP组ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率分别为75.0%和66.7%;EP组ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率均为83.3%;OVX组各例ER mRNA均无表达,2例OPG mRNA呈弱阳性表达(阳性率为16.7%);SHAM组呈ER mRNA及OPG mRNA阳性表达.χ2检验,HDP组与ER组比较ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率均无显著性差异(P＞0.05);该两组与OVX组比较,ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率均有高度显著性差异(P＜0.01);而与SHAM组比较,HDP组ERmRNA,ER组ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率无显著性差异(P＞0.05),但HDP组OPG mRNA阳性表达率有显著性差异(0.01＜P＜0.05).骨组织形态计量学检测,OVX组骨体积、骨小梁厚度及骨小梁数目均比SHAM组显著减少,而骨小梁间隔显著增大.同EP组相似,HDP组骨体积、骨小梁厚度显著增加,虽也使骨小梁间隔稍有减少,但与OVX组比较无统计学差异.表明补肾中药通过直接作用于骨组织中ER,增强ER mRNA的表达,并刺激OPG的分泌,从而有望替代雌激素,对去卵巢大鼠的骨质疏松有明显的防治作用.     

补肾方药的不同组分对骨质疏松大鼠的影响

目的 :观察补肾方药的不同组分对骨质疏松大鼠多指标的影响。方法 :每周 2次肌肉注射地塞米松 0.1mg·100g^-1体重 ,加喂食低钙饲料 (钙含量 0.2% ) ,饮用蒸馏水 ,诱发大鼠骨质疏松。模型成功后 ,应用经不同浓度醇提处理的补肾方药的不同组分进行治疗 ,之后取血和骨组织 ,观察骨质疏松大鼠的血生化指标及骨形态计量学参数的变化。结果 :补肾方药的A ,B ,C ,D各组分对大鼠一般状况的改善程度 ,对血钙、磷、碱性磷酸酶 (ALP) ,甲状旁腺素 (PTH) ,降钙素 (CT) ,CT/PTH ,雌二醇 (E₂ ) ,睾酮 (T) ,T/E₂ 和骨组织形态计量学等多指标的影响 ,均不及总组分。结论 :补肾方药经处理后 ,可能破坏或损失了某些有效成分或是破坏了其整体集合作用 ,而使各组分的治疗效果均不如总组分为佳。     

补肾方药对骨质疏松大鼠骨基质Ⅰ型胶原表达的影响

目的 :探讨补肾方药预防糖皮质激素诱导大鼠骨质疏松发生的机制。方法 :通过肌肉注射地塞米松造成骨质疏松模型 ,观察补肾中药对骨密度的影响 ,从骨骼中提取 m RNA,采用 RT- PC方法对 型胶原m RNA进行半定量。结果 :病理组大鼠的骨密度及骨骼中 型胶原 m RNA的表达明显降低 ( P<0 .0 5) ,而补肾方药组的骨密度及 型胶原 m RNA的表达明显高于地塞米松组 ( P<0 .0 5)。结论 :地塞米松抑制 型胶原 m RNA在骨骼的表达 ,补肾方药可通过提高 型胶原 m RNA在骨的表达而预防骨质疏松的发生。     

补肾益气生精中药对去卵巢大鼠骨组织Smad4表达的影响

目的:研究补肾益气生精中药对去卵巢(OVX)大鼠TGF-β1信号转导分子Smad4表达的调节,探讨Smad4在骨质疏松发病中的作用机制及补肾益气生精中药对其调节作用.方法:用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,给予补肾益气生精中药防治12周,并以尼尔雌醇为阳性对照,用双能-X线骨密度仪检测大鼠离体股骨骨密度,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、免疫组化(SABC)法和Westem blot杂交法分别检测Smad4 mRNA、蛋白的表达及其在组织中的定位.结果:卵巢切除大鼠离体股骨骨密度显著下降,骨组织中Smad4的蛋白及mRNA表达水平均下降.补肾益气生精中药能够提高去卵巢大鼠的骨密度,并且可以从蛋白及mRNA水平提高骨组织中Smad4的表达.结论:TGF-β1的信号转导分子Smad4表达水平的下调可能是原发性骨质疏松症发生的重要机制,补肾益气生精中药通过上调Smad4的表达而有效改善骨密度.     

温阳补肾方对去卵巢大鼠骨质疏松的影响

目的:研究温阳补肾方对去卵巢大鼠体内血清雌激素、骨密度及骨矿含量的影响。方法:取3月龄SPF级健康雌性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、治疗组和阳性对照组,每组10只。正常组行假手术,其余3组行双侧卵巢摘除术,术后30天开始治疗给药,给药12周后测定各组大鼠血清雌二醇,并以双能X线骨密度测定仪测定骨密度及骨矿含量。结果:温阳补肾方能够明显增加去卵巢骨质疏松大鼠血清雌二醇及骨密度、骨矿含量。结论:温阳补肾方可提高雌激素水平,增加骨密度、骨矿含量,对绝经后骨质疏松症有防治作用。     

补肾方剂对去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

目的:观察补肾方剂预防去卵巢大鼠骨质疏松的作用和作用机理。方法:将大鼠切除双侧卵巢,实验分为假术组、去势组和去势加中药组。另选雌性小鼠,切除卵巢,检测阴道角化上皮细胞阳性率。结果:与假术组比较,去势组胫骨骨小梁体积百分比(TBV%)明显下降(P<0.01),股骨头、股骨近端和远端骨密度(BMD)明显下降(P<0.05)。去势加中药组使 TBV%上升,股骨头、股骨颈和远端处 BMD 上升,与去势组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。去势小鼠加中药组阴道角化上皮细胞阳性率与去势组小鼠比较无显著差异(P>0.05)。结论:补肾方剂有延缓去卵巢大鼠骨质疏松作用,这一作用不是类雌激素作用的结果。     

补肾健脾活血方药对实验性老年骨质疏松大鼠骨微结构的影响

目的 :探讨补肾健脾活血方药对老年骨质疏松症的防治作用 ,寻求符合老年骨质疏松症病机特点的防治方法。方法 :采用 15月龄雌雄性大鼠肌注地塞米松复制老年骨质疏松症模型 ,观察补肾健脾活血方药对老年骨质疏松大鼠股骨病变的影响 ,并与补肾活血方药、健脾活血方药进行比较。结果 :补肾健脾活血组、补肾活血组、健脾活血组的相对骨体积 ,平均骨小梁宽度均高于病理对照组 (P <0 0 5～ 0 0 1) ;补肾健脾活血组的相对骨体积、平均骨小梁宽度均高于补肾活血组和健脾活血组 (P <0 0 5～ 0 0 1)。结论 :补肾健脾活血方药防治老年骨质疏松症作用优于补肾活血方药和健脾活血方药 ,补肾健脾活血法是符合老年骨质疏松症病机特点的有效防治方法     

补肾中药对去卵巢骨质疏松大鼠股骨mGluR5表达的影响

目的探讨补肾中药对双侧卵巢摘除引起的骨质疏松大鼠m GluR5表达的影响。方法取3月龄SPF级雌性SD大鼠40只,随机分为假手术组(Sham group)、模型组(Model group)、中药组(TCM group)、雌激素药物治疗组(E group),每组10只。对sham组大鼠施行假手术,其余4组行双侧卵巢摘除术。术后30d进行相应的给药实验,TCM组按10g/kg生药剂量灌胃,E组按0.2mg/kg剂量灌胃,Sham及Model组灌服等量的生理盐水。12周后测定各组大鼠血清中I型胶原羧基端肽(β-Crosslaps)、总I型胶原氨基端延长肽(P1NP)、Ca和P的含量;以双能X线骨密度测定仪测定大鼠的骨密度;Western blot方法检测股骨骨骺m GluR5蛋白表达。结果 Model组BMD为(0.137±0.013)g/cm2,血清Ca/P比值为(1.65±0.37)、P1NP浓度(4.388±0.400)ng/m L、Glu表达(0.424±0.061)与假手术组比较显著降低(P0.05),β-Crosslaps浓度(0.745±0.075)ng/m L、m GluR5表达(0.855±0.116)较假手术组高(P0.01);TCM组BMD为(0.156±0.006)g/cm2,血清Ca/P比值为(2.59±0.55)、P1NP浓度为(5.749±0.611)ng/m L、Glu表达(0.702±0.080)与模型组比较显著增高(P0.01),β-Crosslaps浓度(0.648±0.069)ng/m L、m GluR5表达(0.553±0.070)显著降低(P0.01);E组组BMD(0.146±0.006)g/cm2、Glu表达(0.547±0.075)低于TCM组(P0.05),而其β-Crosslaps浓度为(0.649±0.052)ng/m L、P1NP浓度为(5.516±0.351)ng/m L、Ca/P比值为(2.70±0.55)则与TCM组没有差异(P0.05)。结论补肾中药能有效防止去卵巢模型大鼠骨质疏松的形成,可能通过调节骨内谷氨酸进一步介导骨重建而发挥作用。     

补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织RANKL/OPG基因表达的影响

目的:研究补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)基因表达的影响,探讨补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的分子机制.方法:通过卵巢去势的方法造成大鼠骨质疏松模型,造模后随机分为6组:假手术组、模型组、仙灵骨葆组(5.0 g·kg-1)、补肾基础组(5.4 g·kg-1)、通络组(0.9 g·kg-1)、补肾通络组(6.3 g·kg-1).ig给药,1次/d,共10周.治疗10周后,在无菌条件下取出大鼠L3椎体,剔除软组织及骨膜,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测骨组织RANKL/OPG基因mRNA的表达.结果:与模型组相比,补肾通络组、补肾基础组、通络组RANKL mRNA表达明显下降,RANKL/OPG明显下降(P＜0.01),3组间比较,补肾通络组的干预作用明显优于补肾基础组与通络组(P＜0.05).结论:补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的作用机制可能与调控RANKL mRNA表达,改善RANKL/OPG,从而抑制破骨细胞活性,降低骨吸收有关.     

补肾中药方剂联合二甲双胍治疗2型糖尿病伴骨质疏松临床研究

目的:观察补肾中药方剂联合二甲双胍对2型糖尿病(T2DM)伴骨质疏松患者的治疗效果。方法:将96例T2DM伴骨质疏松患者根据随机数字表法分为对照组和观察组各48例。对照组给予阿仑膦酸钠和补肾中药方剂治疗,观察组在对照组的基础上加用二甲双胍治疗,比较治疗前后2组患者视觉模拟评分(VAS)、腰椎及股骨颈的骨密度(BMD)、骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)以及不良反应发生率。结果:治疗前,2组VAS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组VAS评分低于治疗前(P<0.05),且观察组VAS评分低于对照组(P<0.05)。治疗前,2组腰椎、股骨颈BMD比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组腰椎、股骨颈BMD均高于治疗前(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。治疗前,2组B-ALP、TRACP-5b水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组B-ALP、TRACP-5b水平均低于治疗前(P<0.05);观察组B-ALP水平高于对照组(P<0.05),TRACP-5b水平低于对照组(P<0.05)。观察组不良反应发生率为10.42%,对照组为12.50%,2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾中药方剂联合二甲双胍治疗T2DM伴骨质疏松患者具有较好的临床疗效,不仅能有效减轻患者疼痛,还能显著改善患者BMD及骨代谢,且不良反应少。     

补肾化瘀方药调整免疫衰老的机理研究

本实验从三方面研究八味丹坤调整免疫衰老与改善自由基代谢的关系。结果表明老年小鼠白细胞介素２（ＩＬ－２）产生降低，过氧化脂质（ＬＰＯ）含量增加，过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性下降，给药后上述指标均得到调整，臭氧入小鼠的上述指标出现类似衰老的变化，给药后，ＬＰＯ含量降低，同时ＣＡＴ和ＩＬ－２活性得到增强，且两者呈线性相关，在脾淋巴细胞培养液中另入过氧化氢（Ｈ２Ｏ２），发现可使淋巴细胞ＩＬ－２产生明显减少，同     

补肾中药对拟痴呆小鼠胆碱能M－受体功能及胆碱酯酶活性的影响

选用氯化铝溶液制备拟痴呆小鼠动物模型，研究补肾中药对拟痴呆小鼠大脑皮层组织中胆碱能Ｍ－受体结合容量和胆碱酯酶活性的影响。结果表明，拟痴呆小鼠Ｃｅｒ中ＡｃｈＥ活性比正常青年小鼠明显提高，而Ｍ－受体Ｒｔ值显著降低（Ｐ〈０．００１）。补肾中药可明显降低拟痴呆小鼠Ｃｅｒ中ＡｃｈＥ活性（Ｐ〈０．０５￣０．０１），增加Ｍ－受体Ｒｔ值（Ｐ〈０．００１）。提示补肾中药能通过降低拟痴呆小鼠Ｃｅｒ中ＡｃｈＥ活性，增加     

补肾中药对拟痴呆小鼠胆碱能M－受体功能及胆碱酯酶活性的影响

选用氯化铝溶液制备拟痴呆小鼠动物模型，研究补肾中药对拟痴呆小鼠大脑皮层组织（Ｃｅｒ）中胆碱能Ｍ－受体结合容量（Ｒｔ）和胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）活性的影响。结果表明，拟痴呆小鼠Ｃｅｒ中ＡｃｈＥ活性比正常青年小鼠明显提高（Ｐ＜０．０１），而Ｍ－受体Ｒｔ值显著降低（Ｐ＜０．００１）。补肾中药可明显降低拟痴呆小鼠Ｃｅｒ中ＡｃｈＥ，活性（Ｐ＜０．０５～０．０１），增加Ｍ－受体Ｒｔ值（Ｐ＜０．００１）。提示补肾中药能通过降低拟痴呆小鼠Ｃｅｒ中ＡｃｈＥ活性，增加Ｍ－受体Ｒｔ值，明显提高记忆能力。补肾中药有防治脑功能减退和防治早老性痴呆的作用。     

补肾方剂防治去卵巢大鼠骨丢失作用机制的探讨

目的:探讨补肾方剂对去卵巢大鼠骨丢失的疗效作用及其作用机理。方法:选用6月龄雌性SD大鼠,切除卵巢并诱发的骨质疏松模型,分别设为假手术组、模型组、雌二醇组和中药治疗组,治疗3个月后,观察大鼠骨密度、骨组织形态学及骨代谢相关生化指标。结果:补肾方剂组大鼠与模型组大鼠比较:补肾方剂可提高大鼠的平均骨密度,病理切片可见骨小梁明显致密,骨髓腔缩小。其生化指标显示雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、皮质醇(COR)、雌激素水平升高,而睾酮(T)水平明显降低,各指标之间统计分析均有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾方剂有类似雌激素样作用,可有效防治卵巢切除大鼠的骨量丢失,可作为绝经后骨质疏松症的预防用药。     

补肾中药对老年神经－内分泌和免疫系统作用机理的研究

在观察补肾中药对老年人肾上腺皮质储备机能、淋巴细胞糖皮质激素受体作用的基础上，从各内分泌轴不同层次的机能和下丘脑神经递质的变化，探讨了补肾中药的作用机理。认为衰老时机体神经－内分泌和免疫机能的下降系下丘脑在其中起到主导作用。补肾中药对衰老机体神经－内分泌和免疫系统的广泛作用，其关键在于调整了下丘脑的机能失调；补肾中药的作用方式可能是多成份、多环节、多途径、多层次的综合协调作用。     

补肝强肾壮骨方联合烫熨治疗绝经后骨质疏松症疗效观察

目的:观察补肝强肾壮骨方联合烫熨治疗绝经后骨质疏松症临床疗效.方法:将126例绝经后骨质疏松症患者随机分为对照组和研究组各63例.对照组采用烫熨疗法治疗,研究组在对照组治疗的基础上口服补肝强肾壮骨方治疗,治疗3个月,比较两组患者治疗前后VAS评分、Oswestry功能障碍指数及骨密度.结果:两组患者治疗后VAS评分降低...     

补肾中药对老年神经－内分泌和免疫系统作用机理的研究

在观察补肾中药对老年人肾上腺皮质储备机能，淋巴细胞皮质激素受体作用的基础上，从各内分泌轴不同层次的机能和下丘脑神经递质的变化，探讨了补肾中药的作用机理，认为衰老时机体神经－内分泌和免疫机能的下降系下丘脑在其中起到主导作用，补肾中药对衰老机体神经－内分泌和免疫系统的广泛作用，其关键在一调整了下丘脑的机能失调；补肾中药的作用方式可能是多成份，多环节，多途径，多层次的综合协调作用。     

补肾壮骨胶囊对去势雌性大鼠骨质疏松症的影响

目的:了解补肾壮骨胶囊对卵巢切除大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法:采用临床检验方法测定补肾壮骨胶囊对卵巢切除大鼠血清钙、磷、血清碱性磷酸酶的影响,用骨形态计量学方法检测补肾壮骨胶囊对卵巢切除大鼠右后肢股骨治疗反应。结果:与假手术组相比,模型对照组的血钙、血磷显著下降,碱性磷酸酶升高。相对骨体积明显缩小(P<0.01)。与模型对照组相比,补肾壮骨胶囊高、低剂量组血钙、血磷显著升高,碱性磷酸酶下降,相对骨体积明显增加(P<0.05)。结论:补肾壮骨胶囊对卵巢切除大鼠骨质疏松症有明显的防治作用。