离子色谱法测定栀子中Cl-, Br-, NO3-, SO42-, PO43-5种阴离子的含量

目的: 建立一种同时测定中药栀子药材中Cl^-,Br^-,NO₃^-,SO₄^2-,PO₄^3-阴离子的含量测定方法。 方法: 采用离子色谱法,IonPac AS11-HC阴离子色谱柱,氢氧化钾梯度淋洗,电导检测栀子中5种无机阴离子。 结果: Cl^-,Br^-,NO₃^-,SO₄^2-,PO₄^3-的线性范围良好,加样回收率介于97%~102%,栀子中Cl^-,Br^-,NO₃^-,SO₄^2-,PO₄^3-重复性良好,含量分别为0.084%,0.063%,0.070%,0.30%,0.12%。 结论: 离子色谱法可以同时检测栀子中5种阴离子,灵敏度高,结果准确可行,为栀子的质量控制提供了一种简便快速的方法。     

Two New 3, 4-seco-Lanostane Triterpenoids from Stems of Kadsura heteroclita

Objective To find new triterpenoids from the stems of Kadsura heteroclite. Methods The constituents were isolated and purified by various column chromatographies. Their structures were elucidated mainly on the basis of 1D (¹H-, ¹³C-, and DEPT), 2D (HSQC, HMBC, and ROESY) NMR and mass spectral analysis, also compared with literature data. Results Four triterpenoids were isolated and identified as 3-ethyl manwuweizate (1), 26-methyl manwuweizate (2), manwuweizic acid (3), and anwuweizonic acid (4). Conclusion Compounds 1 and 2 are new triterpenoids.     

葛根素通过circ-TLK1/miR-367-3p/TLR4抑制SK-N-SH细胞氧糖剥夺损伤

目的探讨葛根素对缺血性脑卒中(ischemicstroke,IS)神经细胞损伤的保护作用及机制。方法建立氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH损伤模型,以葛根素进行干预,采用q RT-PCR法检测细胞circ-丝氨酸/苏氨酸蛋白扰动样激酶1(tousled-like kinase1,TLK1)和miR-367-3p mRNA表达情况;采用MTT法检测细胞存活率;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;采用Western blotting检测细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)蛋白表达情况。采用生物信息学在线软件预测miR-367-3p与circ-TLK1、TLR4之间的靶向关系;采用双荧光素酶标记实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)实验验证靶向结合关系。结果与模型组比较,葛根素能够明显提高OGD诱导的SK-N-SH细胞存活率(P0.05、0.01、0.001),显著降低细胞凋亡率(P0.01、0.001),显著降低IL-6和TNF-α水平(P0.01、0.001)。模型组circ-TLK1 mRNA表达水平显著升高(P0.001),葛根素抑制circ-TLK1 mRNA表达水平(P0.001),过表达circ-TLK1能够逆转葛根素对OGD诱导的SK-N-SH细胞损伤保护作用(P0.01、0.001)。circ-TLK1能够靶向负调控miR-367-3p表达,模型组miR-367-3p mRNA表达水平显著降低(P0.001),葛根素显著上调miR-367-3p m RNA表达水平,抑制miR-367-3p能够逆转葛根素对OGD诱导的SK-N-SH细胞损伤保护作用(P0.05、0.001)。miR-367-3p能够靶向负调控TLR4蛋白表达,模型组TLR4蛋白表达水平显著升高(P0.001),葛根素显著下调TLR4蛋白表达水平(P0.001),过表达TLR4能够逆转葛根素对OGD诱导的SK-N-SH细胞损伤保护作用(P0.05、0.001)。circ-TLK1能够通过结合miR-367-3p调控TLR4表达。结论葛根素能够通过作用于circ-TLK1/miR-367-3p/TLR4对IS神经细胞损伤起到保护作用。     

昆仑雪菊提取物对糖尿病大鼠胰岛素抵抗IRS-1/PI3K/GLUT4信号通路的影响

目的:观察昆仑雪菊提取物对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠血糖、胰岛素分泌水平及胰岛素受体底物-1/磷脂酰肌醇(-3)激酶/葡萄糖转运蛋白4(IRS-1/PI3K/GLUT4)信号传导通路的影响。方法:将35只雄性STZ诱导的糖尿病Wistar大鼠随机分为5组,模型组、昆仑雪菊提取物低、中、高剂量组、吡咯列酮组,每组7只;另选7只SPF级雄性Wistar大鼠为正常组。正常组和模型组灌服生理盐水,昆仑雪菊低、中、高剂量组,分别按100,200,400 mg·kg~(-1)·d~(-1)剂量灌胃,吡咯列酮组灌服吡咯列酮10 mg·kg~(-1)·d~(-1)。连续4周。4周后,心包外抽血,离心取血清;取胰腺组织。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠胰岛素(INS)分泌水平;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测骨骼肌IRS-1,PI3K,GLUT4的蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测骨骼肌GLUT4的mRNA表达。结果:灌胃4周后,经检测发现昆仑雪菊提取物对降低糖尿病大鼠体重作用不明显,但对空腹血糖、餐后2 h血糖具有降低作用,并在一定程度上能够促进胰岛素分泌,促进调节因子IRS-1,PI3K,GLUT4的表达,与模型组比较有显著性差异(P0.05)。结论:昆仑雪菊提取物可降低2型糖尿病大鼠血糖,促进胰岛素分泌,提高大鼠骨骼肌IRS-1,PI3K,GLUT4的表达,改善胰岛素抵抗。     

Effect of Chinese herbs on CYP3A4 activity and expression in vitro

Ethnopharmacological relevance

Traditional Chinese Medicine (TCM) has become more popular among cancer patients in the Western world, who often use Chinese herbs as adjuvant therapy to reduce the adverse effects of conventional chemotherapy. However, pharmacokinetic (PK) interactions between Chinese herbs and anticancer drugs can occur and have dramatic consequences for these patients. Currently, only a few possible PK interactions between Chinese herbs and conventional Western drugs have been documented.

Aim of the study

Since the drug-metabolizing enzyme cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) contributes to most of the PK interactions with (anticancer) drugs, the effect of four Chinese herbs (Oldenlandia diffusa, Codonopsis tangshen, Rehmannia glutinosa and Astragalus propinquus) on the activity and expression of CYP3A4 was investigated in vitro.

Materials and methods

Ethanol and water–ethanol extracts of the four Chinese herbs were prepared from raw material. CYP3A4 inhibition was assessed by the use of Supersomes^™ in a fluorescence assay. Furthermore, CYP3A4 induction was evaluated in a human pregnane X receptor (hPXR)-mediated CYP3A4 reporter gene assay and a quantitative real time PCR assay, both in human colon adenocarcinoma-derived LS180 cells (LS180).

Results

Extracts of Oldenlandia diffusa, Codonopsis tangshen, Rehmannia glutinosa and Astragalus propinquus inhibited CYP3A4 in human CYP3A4 Supersomes^™ (IC₅₀ values: 17–83 µg/mL). Oldenlandia diffusa and Rehmannia glutinosa significantly induced PXR-mediated CYP3A4 (p<0.001). Oldenlandia diffusa also significantly induced CYP3A4 mRNA levels (p<0.001 at 250 µg/mL).

Conclusions

Concomitant use of Oldenlandia diffusa and Rehmannia glutinosa could result in induction of CYP3A4, leading to a reduced efficacy of drugs that are CYP3A4 substrates and have a narrow therapeutic window. Because of the possible enhanced toxicity caused by CYP3A4 inhibition, clinical effects of CYP3A4 inhibition by Astragalus propinquus and Codonopsis tangshen must also be taken into account. In conclusion, herb–drug interactions between Chinese herbs and various CYP3A4 substrates can occur. Further research to investigate the clinical relevance of the interactions caused by Oldenlandia diffusa, Codonopsis tangshen, Rehmannia glutinosa and Astragalus propinquus is required.     

响应曲面法(RSM)优化人参皂苷Rh_4和Rk_3的制备工艺

目的以人参皂苷Rh_4(GRh_4)和Rk_3(GRk_3)的生成量作为考察指标,利用响应曲面法(RSM)优化GRh_4和GRk_3的制备工艺。方法利用HPLC测定GRh_4和GRk_3的量,以人参皂苷Rg1(GRg1)为底物,采用高温热裂解,对影响热裂解的酸浓度、反应温度及时间进行考察,运用RSM选择最优GRh_4和GRk_3的热裂解工艺条件。结果经HPLC测定,根据Design Expert 7.1.6软件预测经高温热裂解GRg1制备GRk_3和GRh_4的最佳工艺参数:甲酸浓度为0.02%,反应温度为116.4℃,反应时间为2.22 h;在此条件下GRk_3和GRh_4之和最大为123.56 mg,得率为61.78%。结论 RSM优化后的高温热裂解条件,适合大规模制备GRk_3和GRh_4。     

采用Fe3O4磁性粒子降低橡胶膏剂中天然橡胶的过敏性

目的使用KH-550改性后的Fe3O4磁性粒子处理天然橡胶及其衍生物,降低其中水溶性蛋白质的量,降低其过敏性。方法超声处理后用磁场分离含蛋白质吸附的Fe3O4。含KH-550改性后的Fe3O4磁性粒子溶液与天然橡胶及其衍生物进行去蛋白处理,通过考马斯亮蓝法考察去蛋白质效率,去蛋白质橡胶对小鼠进行胸腺指数、脾脏指数和酶联免疫法测定。结果去蛋白处理后,天然橡胶及其衍生物中蛋白质明显降低,未测到小鼠过敏性。结论使用KH-550改性后的Fe3O4磁性粒子处理天然橡胶及其衍生物可以用来制备橡胶膏剂低致敏的骨架材料。     

清肝活血方调控Caspase-4/Caspase-3/GSDME介导的细胞焦亡改善酒精性肝损伤

[目的] 研究清肝活血方（QGHXR）通过调控半胱天冬酶（Caspase）-4/Caspase-3/GSDME 细胞焦亡通路防治酒精性肝病（ALD）的作用机制。[方法] 将18只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和QGHXR组复制ALD小鼠模型。检测血清肝功能、血脂水平;苏木精-伊红（HE）染色及油红O染色观察肝脏病理改变及肝脏脂质沉积状况;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot）法及免疫荧光染色检测Caspase-4/Caspase-3/GSDME通路相关基因及蛋白表达情况。[结果] 与空白对照组比较,模型组小鼠肝组织三酰甘油（TG）水平明显升高（P＜0.01）,血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平升高（P＜0.05）,血清白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平升高（P＜0.05）;肝脏组织出现病理改变及脂质沉积现象;肝组织IL-1B、IL-6、TNF-α、NLRP3 mRNA表达水平升高。与模型组比较,QGHXR组小鼠肝组织TG水平明显降低（P＜0.01）,血清ALT、AST、总胆红素（TBIL）、总胆汁酸（TBA）水平降低（P＜0.05）,血清TG、IL-6、TNF-α 水平降低（P＜0.05）以及血清高密度脂蛋白（HDL）水平升高（P＜0.01）;血清中血脂、肝脏病理改变及脂质沉积现象缓解;GsdmeN、Caspase-4、Caspase-3和C-Caspase-3基因及蛋白水平降低（P＜0.05）。[结论] QGHXR可通过调节Caspase-4/ Caspase-3/GSDME介导的细胞焦亡通路改善ALD小鼠肝损伤和脂质沉积。     

雷公藤PTEN基因全长克隆及表达分析

目的获得雷公藤Tripterygium wilfordii磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase,PTEN)基因的c DNA全长,并预测其生物学功能。方法根据雷公藤转录组数据设计引物,对雷公藤PTEN(TwPTEN)基因进行全长克隆;通过生物信息学方法对得到的TwPTEN基因进行分析,主要包括多重序列比对,蛋白结构预测和构建进化树分析等。结果根据分析结果 TwPTEN基因全长为2 247 bp,共编码614个氨基酸,等电点为5.84,相对分子质量为66 900,多重序列比对显示其与其他植物的PTEN基因具有较高的同源性。雷公藤悬浮细胞经外源茉莉酸甲酯(Me JA)诱导后,实时荧光定量结果显示,TwPTEN的表达量明显增加,并在12 h达到最高,提示PTEN基因与植物的次生代谢产物的产生有关。结论本研究首次从雷公藤悬浮细胞中克隆得到PTEN基因,为进一步研究TwPTEN基因的功能奠定基础。     

新蒲饮联合奥美拉唑对Hp相关性胃炎及TLR4/JAK2/STAT3通路的影响＊

目的 探讨新蒲饮联合奥美拉唑对Hp相关性胃炎的疗效研究及对TLR4/JAK2/STAT3通路影响。方法 本研究将50只C57BL/6（B6）小鼠随机分成对照组（10只）和造模组（40只）。利用快速尿素酶法及吉姆萨染色证实Hp感染小鼠模型建立后，将40只造模组小鼠随机分成模型组、新蒲饮组（纯中药组）、新蒲饮联合奥美拉唑组（中西结合组）、阿莫西林 + 克拉霉素 + 奥美拉唑肠溶片组（西药组），各组小鼠分别给予相应生理盐水或药物14天。提取小鼠胃组织蛋白做免疫组化和Western Blotting，通过检测TLR4、JAK2及STAT3的表达变化情况，分析不同药物的治疗效果。结果 通过Hp连续灌胃后，吉姆萨染色发现模型组明显有Hp堆积成簇，提示造模成功。同时，本研究发现模型组相比对照组而言，TLR4、p-JAK2和p-STAT3表达均明显升高。用药后，与模型组相比，纯中药组、中西结合组和西药组Hp感染明显下降，且Western Blotting和免疫组化均提示TLR4、p-JAK2和p-STAT3表达有不同程度下降，JAK2和STAT3总蛋白在上述几组中未发现有明显改变。结论 新蒲饮联合奥美拉唑可以通过TLR4/JAK2/STAT3通路治疗Hp相关性胃炎。     

HCV-NS3/4A protease inhibitory iridoid glucosides and dimeric foliamenthoic acid derivatives from Anarrhinum orientale

Four new compounds were isolated from the methanol extract of the aerial parts of Anarrhinum orientale: 6'-O-cinnamoylmussaenosidic acid (1), 6'-O-cinnamoyl-8-O-(6'-O-cinnamoylglucopyranosyl)mussaenosidic acid (2), (2E,6E)-8-{[(2E,6E)-8-hydroxy-2,6-dimethylocta-2,6-dienoyl]oxy}-2,6-dimethylocta-2,6-dienoic acid (3), and (2E,6E)-8-{[(2E,6E)-8-acetoxy-2,6-dimethylocta-2,6-dienoyl]oxy}-2,6-dimethylocta-2,6-dienoic acid (4). The known 8-O-cinnamoylmussaenosidic acid (5) was also identified. All five compounds were tested for inhibition of the hepatitis C virus (HCV) protease. Compounds 1 and 5 exhibited moderate activity, while 2 and 3 showed weak effects. No inhibitory activity on the human serine protease was observed for any of these compounds, which may infer the selectivity toward the viral protease. A computational docking study of the isolated compounds against HCV protease was used to formulate a hypothetical mechanism for the inhibitory activity of the active compounds on the enzymes tested.     

氨基表面修饰磁性纳米粒子(MNP-NH_2)对黄酮类和有机酸类成分选择吸附研究

目的制备氨基表面修饰磁性纳米粒子(amino-modified Fe_3O_4 nanoparticles,MNP-NH_2)并将其作为吸附剂,研究其对黄酮类及有机酸类成分的吸附性能。方法制备MNP-NH_2磁性纳米粒子,扫描/透射电镜、傅里叶红外光谱仪及振动样品磁强计对其结构进行表征;通过研究对12种单体成分吸附性能探讨MNP-NH_2的吸附规律;将其应用到金银花药材中,研究超声时间、温度、离子强度及p H值对吸附能力的影响,采用L9(34)正交试验考察MNP-NH_2对金银花5种成分的洗脱条件,并研究其循环利用性能。结果制备的MNP-NH_2结构稳定、分布均匀,有良好的磁性;其吸附量与黄酮类、有机酸类化合物邻位酚羟基存在和个数有关;离子浓度和温度对吸附过程几乎无影响,p H值对不同类化合物的吸附过程影响较大,最佳吸附条件为30℃下超声40 min,洗脱条件为5 m L 20%冰乙酸溶液(甲醇-水60∶40)的洗脱液,超声40 min。结论 MNP-NH_2可用于对金银花中有效成分提取,对其中黄酮类成分保持较高的吸附率,同时MNP-NH_2的循环使用与再生性良好,为复杂中药及天然药物有效成分提取应用提供新的研究思路。     

桔梗汤总黄酮对慢性阻塞性肺病大鼠TLR4/TRIF/IRF3通路的影响＊

目的 考察桔梗汤总黄酮（FPG）对慢性阻塞性肺病（COPD）大鼠的治疗作用，研究其对TLR4/TRIF/IRF3和TLR4/MyD88通路的影响，探讨其治疗COPD可能的分子机制。方法 建立COPD大鼠模型，将60只SD大鼠分为空白组、模型组、阳性对照组及不同剂量的桔梗汤总黄酮治疗组，经过3周治疗后，通过分析大鼠肺功能指标、肺灌洗液中IL-6、IL-12、TNF-α的含量、血清中IFN-α、IFN-β的含量、肺组织病理切片及MyD88、TLR4、TRAM、TRIF、TRAF6、IRF3、P-IRF3蛋白表达量变化，探讨桔梗汤总黄酮防治COPD的分子机制。结果 各个剂量组的桔梗汤总黄酮均可明显缓解COPD模型大鼠的肺部通气功能，可显著抑制COPD大鼠肺灌洗液中IL-6、IL-12、TNF-α的含量，抑制其血清中IFN-α、IFN-β的含量，以上结果均呈现明显的剂量依赖性；Western blot实验结果表明，桔梗汤总黄酮对COPD大鼠肺组织中的MyD88无显著影响，但可显著降低其中TLR4、TRAM、TRIF、TRAF6、IRF3、P-IRF3蛋白表达，差异具有统计学意义。结论 桔梗汤总黄酮治疗COPD可能是通过抑制TLR4/TRIF/IRF3通路发挥作用，不是通过TLR4/MyD88经典通路实现的。     

鹰嘴豆芽素A通过调节TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路减轻卵清蛋白诱导哮喘大鼠的气道炎症

[目的] 探讨鹰嘴豆芽素A（BCA）通过调节Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘大鼠气道炎症的影响。[方法] 将SD大鼠分为对照（CK）组、模型（Model）组、低剂量BCA组（BCA-L组,25 mg/kg）、高剂量BCA组（BCA-H组,100 mg/kg）、地塞米松阳性对照组（Dex组,1 mg/kg）、BCA-H+LPS（TLR4激活剂）组（100 mg/kg+0.1 mg/kg）,每组12只。除CK组,其他组均通过OVA诱导构建哮喘大鼠模型。建模成功24 h后,进行给药处理,给药每日1次,持续10 d。利用动物肺功能测定仪检测大鼠吸气阻力、呼气阻力、肺通气顺应性的变化;吉姆萨（Giemsa）染色检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、淋巴细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数;酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测BALF中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、干扰素-γ（IFN-γ）水平;苏木精-伊红染色法（HE）染色检测大鼠肺组织病理变化;免疫组化检测大鼠肺组织中嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）表达;蛋白质印迹法（Western Blot）检测大鼠肺组织中TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达。[结果] 与CK组比较,Model组大鼠吸气阻力、呼气阻力、BALF中细胞总数、淋巴细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数、TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平升高,肺组织中的支气管及血管周围炎性细胞浸润明显,肺组织中Eotaxin阳性染色面积百分数、TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达升高,肺通气顺应性降低（P<0.05）;与Model组比较,BCA-L组、BCA-H组、Dex组对应指标变化趋势与上述相反（P<0.05）;LPS减弱了高剂量BCA对哮喘大鼠气道炎症的改善作用。[结论] BCA可能通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路减轻OVA诱导哮喘大鼠的气道炎症。     

益胃饮含药血清对胃癌细胞MFC增殖凋亡及NR4A3/HGF表达的影响

目的:探讨不同浓度益胃饮对体外培养的胃癌细胞MFC的增殖、凋亡及NR4A3蛋白表达的影响。方法:MFC细胞经不同浓度益胃饮含药血清处理后,采用MTT法检测药物对肿瘤细胞的抑制作用,显微镜观察细胞形态学改变;采用流式细胞仪及Annexin V/PI染色的方法检测益胃饮含药血清对MFC胃癌细胞周期及凋亡的影响,并以RT-PCR芯片技术(Mouse TumorM etastasis PCR Array)分析该方对胃癌细胞MFC肿瘤相关基因表达的影响;结果:益胃饮含药血清浓度在4%~12%时,对肿瘤细胞的生长有抑制作用,且呈时间剂量依赖性。流式细胞仪分析结果显示,细胞凋亡百分率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而增加,而RT-PCR芯片技术分析结果显示NR4A3表达则随之增强而HGF显著下调。结论:益胃饮含药血清对人胃癌细胞MFC增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡,其作用机制可能是益胃饮通过促进Nr4 a3表达,下调HGF而达到的。     

附子配伍甘草对CYP3A4体内活性的影响研究

目的:建立测定血浆中盐酸丁螺环酮的超高效液相色谱(UPLC)方法。考察附子配伍甘草对CYP3A4体内活性的影响。方法:ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×10 mm,1.7μm);2.0 mmol.L-1醋酸铵(pH 7.4,A)-乙腈(B)梯度洗脱,0～2.2 min,10%～60%B,2.2～2.5 min,60%B,2.5～3.0 min,60%～75%B,3.0～3.5 min,75%B,3.5～4.0 min,75%～10%B;检测波长243 nm;流速0.3 mL.min-1。结果:方法的线性范围0.078 125～20.0μg(r=0.997 5);平均回收率85.62%(RSD 6.8%,n=6)。本方法专属性好,重复性好,可用于血浆中盐酸丁螺环酮的测定。大鼠口服附子水煎液后口服盐酸丁螺环酮,盐酸丁螺环酮的AUC0-2 h比生理盐水组下降了52.8%(P<0.05),CL/F是生理盐水组的2.22倍(P<0.05)。附子配伍甘草组与生理盐水组比较无明显变化。结论:附子水煎液对大鼠CYP3A4酶有诱导作用,附子配伍甘草对大鼠CYP3A4则无明显影响,提示甘草可纠正附子对CYP3A4活性的诱导作用。     

氮素形态对菘蓝氮代谢、光合作用及生长的影响

目的:研究氮素形态对菘蓝生长、相关酶活性及光合特性的影响,为菘蓝氮肥的合理施用提供一定依据.方法:采用砂培方法栽培菘蓝,测定同一氮素水平不同氮素形态处理下,菘蓝生物量、硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性及光合相关参数.结果:菘蓝生物量随铵硝比的降低先增加后下降,全铵营养(NH_4~+-N/NO_3~--N=100:0)下最小,当NH_4~+-N/NO_3~--N为50:50时最大;提高硝态氮的比例,菘蓝叶片中硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性呈现先升后降的抛物线状变化规律;铵硝比为75:25时,菘蓝净光合速率最大,全铵营养下最低.结论:适量增硝有利于促进菘蓝的生长、提高相关酶活性和净光合速率.     

氮素形态对半夏植株氮代谢及主要化学成分的影响

目的: 研究氮素形态对半夏植株氮代谢及主要化学成分的影响。 方法: 采用无土栽培半夏,同一氮素水平不同氮素形态处理,测定半夏不同部位硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)活性,铵态氮(NH₄⁺-N)、硝态氮(NO₃^--N)含量,块茎中总游离有机酸、生物碱、鸟苷含量,统计半夏珠芽和块茎产量。 结果: 随NH₄⁺-N/NO₃^--N的上升,半夏NR活性呈下降趋势;叶片、叶柄及块茎中硝态氮含量呈先升后降的趋势,根中硝态氮含量呈下降趋势;叶片、 叶柄及根中GS活性呈上升趋势,块茎中GS活性呈先升后降趋势;叶片、块茎及根中铵态氮含量先升后降,叶柄中铵态氮含量呈上升趋势。NH₄⁺-N/NO₃^--N为75:25时, 块茎、珠芽及合计产量均最高。全硝态氮营养下,块茎中总生物碱和鸟苷质量分数最高,分别为0.245%, 0.019 7%。铵态氮和硝态氮配比为50:50时,半夏总有机酸质量分数最高,达到了0.7%以上;全硝态氮处理下,总有机酸含量最低。 结论: 铵态氮、硝态氮复合施用对半夏植株氮代谢指标、产量和主要化学成分影响显著。     

Antitumor agents, 130, Novel 4 beta-arylamino derivatives of 3',4'-didemethoxy-3',4'-dioxo-4-deoxypodophyllotoxin as potent inhibitors of human DNA topoisomerase II.

A series of ortho-quinone analogues 1-28 of podophyllotoxin possessing various C-4 beta-aniline moieties have been synthesized and evaluated for their inhibitory activity against human DNA topoisomerase II, their activity in causing cellular protein-linked DNA breakage, and their cytotoxicity against KB cells. Compounds 8-12, 15, 19, and 23-28 are better than or comparable to etoposide in their inhibition of the human DNA topoisomerase II, while compounds 8-10 and 22 are comparable to or more potent than etoposide in causing DNA breakage. There is an apparent lack of correlation between cytotoxicity and the ability of these compounds to cause protein-linked DNA breaks or inhibit DNA topoisomerase II. This suggests that in addition to the mechanism of the topoisomerase II involving DNA breakages, other mechanisms of action, such as the radical mechanism or the direct adduct formation of the ortho-quinone with DNA or protein, may also involve and account for the apparent KB cytotoxicity. Two different modes of DNA topoisomerase II inhibition for 8-28 were proposed.     

基于PBPK-TO模型预测CYP3A4调节剂对卡博替尼PK/PD的影响

目的 建立卡博替尼的生理药动学及其主要靶点的靶点占有率联用(PBPK-TO)模型,并预测CYP3A4的调节剂(抑制剂和诱导剂)对其PK/PD的影响。方法 通过运用公式和收集参数,建立卡博替尼的PBPK模型,利用文献实测值进行验证,并联合主要靶点的结合、解离速率常数(k_on、k_off)搭建成PBPK-TO模型;通过结合CYP3A4竞争型抑制剂酮康唑、时间依赖抑制剂地拉韦啶和诱导剂利福平的PBPK模型,研究其对卡博替尼的PK/PD的影响。结果 成功建立了卡博替尼PBPK-TO模型;联合用药时,酮康唑、地拉韦啶和利福平对卡博替尼最大血药浓度(c_max)和激酶靶点的最大靶点占有率(TO_max)均无显著性影响;酮康唑能使卡博替尼血浆药物浓度-时间曲线下面积(AUC_0-t)增加34%,3个主要靶点的靶点占有率大于60%的持续时间(D_TO>60%)均增加30%以上;地拉韦啶能使卡博替尼AUC_0-t增加16%,3个主要靶点的D_{TO >60%}均增加20%以上;利福平能使卡博替尼AUC和靶点的D_{TO >60%}减少70%以上。此外,也研究了联合用药时临床合理的剂量调整方案,当单独使用卡博替尼60 mg作为治疗剂量时,与酮康唑联用剂量需要降低至40 mg;与地拉韦啶联用,不需要调整剂量;与利福平联用时,剂量需要增加到80 mg。结论 建立的PBPK-TO模型能较好地预测CYP3A4抑制剂、诱导剂对卡博替尼PK/PD的影响,为药物相互作用模型研究和临床使用剂量调整提供新思路。