ELISA法检测献血者HBsAg应用分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)在献血者HBsAg检测中的应用、影响因素及解决方法。方法利用ELISA法,对无偿献血者血液标本进行HBsAg初检、复检两次检测;实验结果0.7≤s/co<1的标本,使用原试剂进行双孔复试。结果 13796份血液标本,HBsAg阳性共24份;0.7≤s/co<1的标本57份,经双孔复试,阳性标本2份。结论应重视OD值接近临界值标本的复核工作;加强对血液标本、仪器设备及检测试剂的质量管理,规范实验操作,提高重复性;建议生产二步法试剂,避免产生高值钩状效应,提高血液安全水平。     

抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用

目的获得抗HBsAg单链抗体(HBScFv)的单克隆抗体,并初步研究其在抗HBsAg类小分子抗体及其融合蛋白质的纯化、活性鉴定方面的应用。方法利用杂交瘤技术,以大肠杆菌表达的重组抗HBScFv为抗原,免疫Balb/c小鼠,再将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合。通过ELISA法、Western-blot鉴定特异性单克隆抗体,通过免疫双扩散法鉴定单抗亚型,并将筛选到的高效价单抗用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及ELISA鉴定。结果建立了9株能够稳定分泌抗HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株,其细胞上清效价为1∶160~1∶12 800,腹水效价为1∶50 000~1∶400 000;单克隆抗体的亚类分析结果显示有6株为IgG1,其余3株为IgG2a。初步应用结果表明制备的单克隆抗体14F7可用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及活性鉴定。结论成功建立了能够稳定分泌HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株。     

乙型肝炎血清学模式对ELISA一步法检测HBsAg的影响

目的：探讨ＥＬＩＳＡ一步法检测两种没乙型肝炎血清学模式标本ＨＢｓＡｇ吸光度值差异的原因。方法：将同一时间内ＥＬＩＳＡ一步法检测的所有ＨＢｓＡｇ阳性标本分为ＨＢｅＡｇ阳性与ＨＢｅＡｇ阴性两种血清学模式，地其原因清及１：１０稀释血清的ＨＢｓＡｇ吸光度值进行比较。结果：当用原血清ＥＬＩＳＡ一步法试验时，ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ均阳笥标本的ＨＢｓＡｇ吸光度值显著低于ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性标本，而将标     

快速ELISA定性检测HBsAg的研究

我们根据ＥＬＩＳＡ的检测原理，用提高温育及呈色温度来缩短检测时间，探索出快速检测法既提高了工作效率，又明显降低了成本。经半年多时间的应用，效果满意，现介绍如下。１材料１．１试剂盒选择：ＨＢｓＡｇ酶标测定试剂盒，上海荣盛生物技术有限公司（批号：９７１２...     

检测HBsAg后带现象的观察与体会

HBSAg检测是诊断乙型肝炎的定性试验,结果的准确性将直接关系到临床医生的诊断与治疗。本文所介绍的应用酶联免疫法（ELISA）检测HBSAg后带现象直接影响到结果的准确性．所谓的后带现象是指在血清免疫学检验中,抗原抗体需要有一定的的比例才可出现可见反应,如果比例不适即可发生抑制反应的现象。抗体过剩称抑制带为前带,抗原过剩则称后带。本文所介绍后带现象,以引起乙肝检测者和临床医生的注意,现报道如下。1材料与方法1．l检测对家均为我院门诊病人,其中乙型肝炎E抗原（＊＊e＊出阳性伴乙型肝炎核心抗体（抗一HBC）阳性血清…     

市售HBsAg检测ELISA免疫逃逸变异检测能力的再评价

目的考核现行市售ELISA试剂对野生及免疫逃逸变异HBsAg的检测能力。方法采用一组市售ELISA试剂对本室既往研制的高浓度与定值基因重组G145R变异HBsAg质控物，部颁血清HBsAgELISA检测质控物，多种乙肝病毒免疫逃逸变异重组S蛋白表达产物（细胞培养上清），以及一组经特殊选择的临床血清进行检测，并与既往有关检测资料进行比较。结果自制G145R变异HBsAg质控物与抗HBsG6mAb的结合能力较一年前降低40．7％，但仍保持留较为完好的免疫反应性。以此及部颁质控血清进行考核，10份市售试剂中6份对IEMHBsAg的检测能力与野生HBsAg相当（比较显色强度大于90．0％，相对应敏感指数大于0．5），3份试剂出现不同程度的降低（比较显色强度介于83．5％～50．7％，相对应敏感指数介于0．25～0．125），1份试剂仅表现出极弱的检测现象（比较显色强度为11．20％，相对应敏感指数0．0039）。采用ELISAI、J及L等试剂对一组临床标本进行检测，阳性率分别为6．23％、14．89％、19．21％，前者HBsAg检出率较后两者显著为低（P〈0．05及0．01），后两者阳性率间亦表现出显著的差异（P〈0．05）。结论现行国产试剂对IEMHBsAg检测能力较既往已大幅度提高，采用以单一G145R变异HBsAg制备的质控物仅能部分评价它们对IEMHBsAg的检测能力。     

各型乙型肝炎患者血清中HBsAg—PHSA受体的研究

乙型肝炎病毒(HBV)和人肝细胞上都有聚合人血清蛋白受体(PHSA—R),循环血液中的PHSA起联结分子作用,使HBV附着和侵入肝细胞。1984年Pontisso等认为活跃的乙型肝炎病毒复制与HBV颗粒上多聚白蛋白受体的表达呈正相关。     

乙型肝炎特异性转移因子制备的研究

本文介绍了使用纯化的人HBsAg—HBV免疫羊后,在其免疫应答的高峰期宰杀,收集脾脏制各乙肝特异性的转移因子(HBV TF),然后对其进行理化特性分析及免疫学活性的分析。HBV TF是一小分子的多肽类物质,不引起机体的免疫排斥反应及过敏反应,生物活性强。正常对照组:淋巴细胞转化率为29.3％,实验组:淋巴细胞转化率为53.7％,两组实验结果具有明显的差异,本实验提示HBV TF在细胞免疫中起着重要的作用,有可能成为一种有希望的乙肝病毒拮抗剂。     

145例HBsAg阳性患者血清抗—HAV—IgM的检测分析

甲型肝炎(甲肝)通常是一种自限性疾病。多数患者在发病后数周内恢复。近年来有文献报道甲肝有慢性化趋势,并有较高的病死率和肝外表现的发生。为了解乙肝重叠甲肝病毒感染情况,本文对145例 HBsAg 阳性血清标本进行抗—HAV—1gM 检测。现将结果报告如下。1 检测对象:按1991年(上海)全国病毒性肝炎会议的诊断依据划分临床分型,145例中     

HBsAg阳性的列车乘务员血清乙肝指标的检测分析

铁路是我国现阶段主要的交通运输渠道，作为列车服务员(包括餐车工作人员)每天接触大量南来北往的旅客，因而与乙肝的传播有着更为密切的关系。为了解我分局列车乘务员中乙肝病毒的感染情况，我们将2000～2003年在健康体检中确定为HBsAg阳性的人员乙肝五项指标进行检验分析，结果报道如下：     

猪囊虫抗原的提纯及ELISA试剂诊断应用研究

本文报告用Sephadex G-200层析技术纯化猪囊尾蚴的囊液及囊体粗抗原,将所得6种纯化抗原组分和2种粗抗原在相同条件下,对74例囊虫病人血清、42例脑囊虫病人脑脊液、91例健康人血清及30份正常脑脊液进行检测,结果表明:纯化囊液抗原CF_1组分对病人血清和脑脊液标本的检出阳性率分别为94.6%和95.2%,都明显高于其它各抗原组分(阳性率血清为78.4%～48.6%,脑脊液为83.3%～40.5%),对91例健康人血清标本和30例正常脑脊液标本检测均无假阳性反应,其它各抗原组分对91例健康人血清标本检测假阳性率为6.59%～19.78%,对30例正常脑脊液标本检测无假阳性反应。提示CF_1抗原是较敏感、特异的囊虫病ELISA试验诊断抗原。     

抗乙肝特异性转移因子和核糖核酸体外生物活性的实验研究Ⅰ.抗-HBS和HBsAg活性研究

本文选用固相放射免疫法(SPRIA)检测和考察了抗乙肝特异性转移因子(TF)和核糖核酸(RNA)中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗-HBs)的含量,结果证明,此两种制剂中均不含有抗-HBs和HBsAg,说明在现工艺条件下这两种制剂没有携带HBsAg的危险,是安全可靠的;同时也从侧面反映了此两种制剂的作用机理主要是细胞介导免疫。此外本文还对制剂中成分对HBsAg和抗-HBs测定的影响干扰作用进行了初步探讨。     

CHO细胞表达重组HBsAg聚合蛋白的研究

目的 :为提高重组乙肝疫苗的产量与质量 ,研究了纯化工艺最后一步凝胶过滤柱层析的重组HBsAg聚合蛋白。方法 :采用超声与DNA酶处理 ,凝胶过滤柱层析的步聚回收重组HBsAg。结果 :重组HBsAg纯化工艺的终收率从 35 %左右提高到 48%。重组乙肝疫苗的细胞免疫原性有了增强。结论 :以回收的重组HBsAg制备的重组乙肝疫苗在纯度、免疫原性和稳定性方面达到了世界卫生组织的标准。     

三种中草药及其复方体外对HBsAg HBeAg分泌的抑制

国外有资料显示,赤芍、蚤休、何首乌体外有抑制乙型肝炎患者血清中HBsAg的作用[1],国内有人报道上述3种单方水煎液有抑制血清中HBV DNA复制作用[2].HBV的装配需HBsAg、HBeAg、HBcAg和HBV DNA,它们的减少将影响HBV的复制[3].本文从以下两个方面研究中草药赤芍、蚤休、何首乌及它们的复方体外抑制HBV的复制作用:①上述3种中草药及其复方的大鼠血清液对HBV的HBsAg、HBeAg表达抑制.②比较上述3种中草药单方与复方抗HBV的HBsAg、HBeAg的     

硼氢化物聚合物试剂的制备及其应用

采用价廉易得的硼氢化钾代替硼氢化钠与717~＃强碱性阴离子交换树脂反应,合成了硼氢化物聚合物还原试剂,本法经济、简便,所得试剂的还原容量为3.50mmol/g干树脂,用于某些羰基化合物的还原反应,取得了较好效果。