乌头各组织部位生物碱类成分动态差异性研究

目的:比较不同采收期乌头不同组织中乌头总碱和双酯型生物碱(新乌头碱、乌头碱和次乌头碱)的含量,为毒性及药效学研究提供依据.方法:用酸性染料比色法测定乌头不同组织中总生物碱的含量;反相高效液相色谱法测定新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量,流动相为乙腈-40 mmol· L-1乙酸铵水,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长240 nm,柱温30℃.结果:6月4日之前采收的乌头的不同组织部位总生物碱含量明显小于6月18日和7月3日,乌头最佳采收期可确定为6月底至7月初.乌头地上部分乌头类总生物碱的含量小于地下部分,不同采收期乌头各组织部位中乌头类总生物碱和双酯型生物碱含量顺序大体为:须根＞子根＞母根＞叶片≈茎秆.结论:该研究初步了解了乌头各组织部位生物碱类成分的动态变化规律,确认了乌头的最佳采收期及各组织部位生物碱类成分的含量差异.     

不同干燥方法对附子提取物中双酯型生物碱的影响

目的:了解不同干燥方法对附子提取物中双酯型生物碱的影响,确定适宜的干燥方法。方法:采用高效液相色谱方法,对冷冻干燥、烘箱干燥、真空干燥和喷雾干燥等不同干燥方法所得附子提取物中的中乌头碱、乌头碱和次乌头碱等3种双酯型生物碱的含量进行测定。结果:不同干燥方法所得附子提取物中的中乌头碱、乌头碱和次乌头碱的损失率为:冷冻干燥分别为7.14%、5.71%、5.41%;烘干分别为56.43%、31.43%、32.43%;真空干燥分别为29.29%、34.29%、10.81%;喷雾干燥分别为14.29%、11.43%、8.11%。结论:喷雾干燥对附子提取物中的中乌头碱、乌头碱和次乌头碱3种双酯型生物碱的影响较小,可低成本地进行工业化生产,是附子合适的干燥方法。     

液质联用技术追踪生物碱类成分在川乌茎叶生长周期的动态变化规律

目的研究川乌茎、叶中生物碱类成分在不同生长期的含量变化。方法采用Phenomenex C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),质谱采用ESP多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式扫描;建立HPLC-MS/MS方法同时测定川乌茎叶中乌头碱、新乌头碱、印乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、乌头原碱、尼奥林、附子灵、宋果灵、塔拉乌头胺、去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱14种生物碱的含量。结合主成分分析(PCA)追踪川乌茎叶在生长过程中不同生物碱的含量变化规律。结果 14种生物碱在各自浓度范围内线性关系良好(r~20.990 0),定量限为2.27～18.27 ng/mL,平均回收率在94.73%～104.50%。结果表明,川乌茎叶中均含有相当量的生物碱,且茎中生物碱总量高于叶,茎在5、6、7、8月的生物碱总量分别为0.087 1%、0.182 8%、0.141 0%、0.199 4%,呈现波浪形上升趋势,8月份到达峰值;叶在5、6、7、8月生物碱总量分别为0.074 7%、0.075 9%、0.0814%、0.0589%,呈现出先上升后下降的变化趋势,叶中生物碱的总量7月最高。结论 PCA发现茎、叶中生物碱含量在不同时期表现出不同的变化趋势。茎中生物碱在采收期达到峰值,生物碱含量可观,具有成为新药用资源的潜力与开发价值。     

浸泡程度对川乌炮制品传统质量及生物碱成分的影响

目的:考察川乌2010年版《中国药典》炮制法中"浸泡至内无干心"的科学性。方法:制备浸泡不及、适中和太过的川乌浸泡品及其蒸制品,观察性状,按2010年版《中国药典》方法测定各样品中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱含量。结果:浸泡适中炮制品易于切制,饮片片型平坦,不易破碎。浸泡使生物碱类成分含量降低,随浸泡程度加深,双酯型生物碱总量的降低率分别为28.7%,36.8%,44.9%,单酯型生物碱总量的降低率分别为21.8%,25.5%,40%。蒸制使双酯型生物碱含量显著降低,较生品均降低>98%;单酯型生物碱含量显著增加,约为生品2倍。结论:川乌浸泡至"内无干心"蒸制品中生物碱类成分变化适中,饮片质量较佳,川乌浸泡至"内无干心"具有一定科学性。     

附子生物碱分布规律研究

目的:探讨附子中生物碱的分布规律,为确定合理的加工炮制方法、有效控制附子饮片质量提供参考.方法:将附子横向与纵向分割为不同部分,分别以HPLC法测定乌头碱、新乌头碱和次乌头碱等成分含量.结果:在横向上,新乌头碱、次乌头碱及总生物碱均以韧皮部含量最高、表皮与皮层含量最低,而乌头碱却以髓部含量最高、韧皮部含量最低;在纵向上,各种生物碱含量变化的大体趋势均表现为先降低后升高再降低.结论:附子中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的分布具有一定的规律性,掌握此规律性,可为附子的加工炮制与质量控制提供参考.     

附子双酯型生物碱的提取工艺研究

目的:探讨附子中3种双酯型生物碱提取的影响因素,确定适宜的提取条件。方法:采用HPLC法测定中乌头碱、乌头碱和次乌头碱的含量,采用单因素试验法,对附子双酯型生物碱的提取工艺进行研究。结果:最佳双酯型生物碱提取工艺为:在15℃条件下,将附子粗粉置于10倍无水乙醇中冷浸3次,每次1 d,双酯型生物碱收率为0.57%,质量分数为18.81%,其中中乌头碱、乌头碱和次乌头碱收率分别为0.16%、0.032%和0.38%。结论:该提取方法高效、低毒、经济、操作方便,适合工业化生产。     

X-5大孔树脂纯化新乌头碱和乌头总碱

目的：对影响X-5树脂分离纯化乌头总生物碱和新乌头碱的各种因素进行系统的研究,使分离工艺达到最优化。方法：以川乌总碱和新乌头碱的含量为指标,考察X-5型大孔树脂分离纯化乌头总生物碱和新乌头碱的最佳吸附及洗脱条件。结果：X-5树脂纯化乌头总生物碱和新乌头碱的最佳工艺为上样液浓度含生药1 g·mL^-1,药液pH 12,吸附时间为6 h,7 BV pH 8的95％乙醇洗脱效果好。X-5树脂可重复使用5次。经X-5树脂处理乌头总碱提取率可达80%以上,终产品总生物碱纯度可达30%以上。结论：该方法能明显提高新乌头碱和乌头总碱的纯度。     

高效液相色谱法测定草乌类药用植物活性成分含量

 目的采用高效液相色谱测定草乌类药用植物中中乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量,对草乌类植物进行质量与资源评价。方法建立高效液相色谱方法,采用Phenomenex ODS色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-醋酸铵缓冲溶液(pH10.5)(54∶46)为流动相,流速为1.0mL·min^-1;检测波长为240nm。结果中乌头碱在0.28～2.80μg内呈良好的线性关系(r=0.9991),平均回收率为98.9%(n=5),RSD=0.93%;乌头碱在0.136～1.36μg内呈良好的线性关系(r=0.9992),平均回收率为97.4%(n=5),RSD=1.18%;次乌头碱在0.248～2.48μg内呈良好的线性关系(r=0.9991),平均回收率为98.4%(n=5),RSD=1.11%。北乌头、乌头与小白掌含有中乌头碱、乌头碱、次乌头碱3种生物碱;多根乌头含有中乌头碱、乌头碱2种生物碱;其他的样品含微量或几乎没有。多根乌头的3种生物碱总量最高。结论本方法分离效果好,分析速度快,方法稳定,结果准确。     

液-质联用测定乌头饮片中生物碱的含量

目的建立乌头饮片中生物碱含量的测定方法。方法采用液-质联用方法,测定乌头类不同饮片中乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的含量。液相色谱采用InertsilODS-3色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-醋酸铵缓冲液(60:40);流速:0.2mL/min;柱温:30℃。结果建立了液-质联用方法测定乌头饮片中生物碱含量的方法,并测得了25批乌头不同饮片的结果。结论液-质联用方法具有灵敏、专属性强的特点,适用于微量生物碱的检测。     

草乌及其炮制品中毒性生物碱的分离和测定

本文采用薄层层析-光密度法分离和测定草乌及其炮制品中乌头碱(aconitine)、中乌头碱(mesaconitine)和下乌头碱(hypaconitine)三种毒性生物碱的含量。结果表明此法具有简便、分离效果满意、重现性好的优点,可作为控制乌头类药材中上述三种毒性生物碱的方法之一。     

3种藏药秦艽花脂溶性成分的GC-MS分析

目的： 分析西藏秦艽花,麻花秦艽花和川西秦艽花脂溶性的成分。方法： 采用索氏提取法获得脂溶性成分,经GC-MS技术结合计算机检索对其化学成分进行分离和鉴定,用色谱峰面积归一化法计算各个组分峰的相对含量。结果： 从西藏秦艽花,麻花秦艽花和川西秦艽花的脂溶性成分中分别鉴定了38,35,27个化合物,占其各自总量的94.31%,83.09%,80.84%。3种秦艽花脂溶性成分存在一定程度的差异,西藏秦艽花的主要成分为饱和烷烃（59.33%）、醇类（14.53%）、有机酸（6.43%）、酮类（3.84%）,麻花秦艽花的主要成分为饱和烷烃（28.24%）、醇类（17.51%）、有机酸（8.09%）、酯类（7.55%）,川西秦艽花的主要成分为饱和烷烃（24.79%）、醇类（5.79%）、生物碱（17.03%）、醌类（16.60%）、酯类（2.78%）。其中川西秦艽花的脂溶性成分跟其他2种的区别较大,预示其药理活性的不同。结论： 通过对其脂溶性成分和含量的分析评价与比较, 为开发利用秦艽花资源提供科学依据。     

中药复方灌肠治疗溃疡性结肠炎临床疗效Meta分析

[目的] 系统评价中药复方灌肠治疗溃疡性结肠炎（UC）随机对照试验（RCT）的临床疗效及安全性。[方法] 两位研究者独立系统检索中药复方灌肠治疗UC的全部临床RCT中英文文献。数据库包括：中国生物医学文献数据库（CBM）、中国知网知识发现网络平台（CNKI）、重庆维普科技数据库（VIP）和万方数据知识数据库（Wanfang Database）、Pubmed、Embase、Cochrane电子期刊全文数据库,检索时间均从建库至2019年2月9日。两位研究者独立提取资料,如遇分歧,请求第三方协助解决。同时使用Review Manager 5.3及Stata15.0软件进行本研究的数据处理。[结果] 最终共纳入17篇文献,共计1 597例UC患者。中药复方灌肠治疗UC的临床总有效率优于对照组[I²=0%,RR=1.31,95%CI（1.25,1.37）,P<0.000 01],亚组分析显示,中药复方灌肠较氨基水杨酸类溶液灌肠[I²=0%,RR=1.31,95%CI（1.24,1.38）,P<0.000 01]或栓剂纳肛[I²=16%,RR=1.32,95%CI（1.16,1.51）,P<0.000 1]或柳氮磺胺吡啶（SASP）灌肠[I²=0%,RR=1.29,95%CI（1.23,1.36）,P<0.000 01]或美沙拉嗪灌肠[I²=4%,RR=1.37,95%CI（1.22,1.54）,P<0.000 01]都有较好的疗效;中药复方灌肠改善中医症状积分优于对照组[I²=23%,MD=-1.42,95%CI（-2.38,-0.46）,P=0.004];中药复方灌肠改善肠黏膜积分优于对照组[I²=0%,MD=-0.29,95%CI（-0.50,-0.07）,P=0.01];中药复方灌肠改善Mayo积分优于对照组[I²=89%,MD=-2.50,95%CI（-4.25,-0.75）,P=0.005];中药复方灌肠的不良反应发生率较对照组无明显差异[I²=59%,RR=0.41,95%CI=（0.05,3.29）,P=0.40]。亚组分析显示,中药复方灌肠不良反应发生率较美沙拉嗪栓纳肛[I²=0%,RR=0.14,95%CI（0.02,1.11）,P=0.06]或SASP灌肠[I²=82%,RR=1.20,95%CI（0.02,77.88）,P=0.93]皆无明显差异;中药复方灌肠治疗UC的复发率较对照组更低[I²=0%,RR=0.34,95%CI（0.16,0.72）,P=0.005]。[结论] 中药复方灌肠治疗UC较氨基水杨酸类药物的临床疗效更佳且安全性更高。     

掌叶半夏脂溶性成分GC-MS研究

目的:分析掌叶半夏脂溶性成分的化学成分。方法:对乙醇提取后氯仿萃取得到的脂溶性成分进行了GC-MS分析。HP-5MS色谱柱(0.25 mm×0.25 mm×30 m);程序升温,进样口温度280℃,进样量1.0μL,分流比10∶1。结果:共分离鉴定出三氯乙酸1.86%,顺式-1,2-环己二醇3.56%,庚基氢过氧化物1.66%,Z型-2-十一碳烯5.54%,1-丁氧基-2-乙基己烯4.13%,吡咯并[1,2-A]吡嗪-1,4-二酮6.36%,棕榈酸23.32%,10-十一碳炔酸33.81%,环戊烷十一酸1.11%,2,5-哌嗪,3-苄基-6-异丙基2.95%,2-溴(正)壬烷1.04%,吡咯并[1,2-A]吡嗪-1,4-二酮,六氢-3(苯)5.73%,4-乙基四氢-2H-噻喃1.77%,1,2,2溴二十二烷1.26%,1,1-二氯-2,2,3,3-四甲基环丙烷2.31%,(Z,Z,Z)-6,9,12-十八三烯苯基甲基酯等19种成分。结论:进一步确定了掌叶半夏脂溶性部分的化学成分,为掌叶半夏的抗肿瘤作用深入研究提供参考。     

16种植物挥发油对柏子仁黄曲霉菌的抑制作用考察

目的:从16种植物(香茅、香叶、松节、山苍子、薄荷、干姜、丁香、姜黄、红花椒、肉桂、罗勒、迷迭香、青花椒、竹叶花椒、八角茴香、肉豆蔻)挥发油中筛选出对黄曲霉菌生长有较好抑制效果的植物挥发油。方法:采用平板培养法从柏子仁药材表面分离得到黄曲霉菌,利用水蒸气蒸馏法提取16种植物挥发油,采用滤纸片熏蒸后测定黄曲霉菌的菌落直径,对16种植物挥发油抑制黄曲霉菌生长的效果进行研究。结果:采用性状、显微及DNA条形码鉴定的方法从柏子仁药材上成功分离了黄曲霉菌,上述16种植物挥发油对黄曲霉菌的抑菌率分别为2. 93%,0. 05%,0. 37%,76. 07%,0. 34%,0. 15%,50. 05%,8. 51%,1. 43%,58. 20%,0. 07%,2. 60%,8. 73%,100. 00%,52. 62%,0. 07%。结论:16种植物挥发油对黄曲霉菌均有着不同程度的抑菌活性,其中竹叶花椒挥发油、山苍子挥发油、肉桂挥发油的抑菌效果较好,可为柏子仁生长储藏过程中防治黄曲霉菌的污染提供参考,并为植物挥发油作为中药仓储过程中的抑菌剂提供应用依据。     

铁线莲皂苷体内抗肿瘤作用研究

目的:研究铁线莲皂苷的体内抗肿瘤作用。方法:采用肉瘤180(S180)、肝癌腹水型(HepA)和白血病腹水型(P388)3种小鼠移植性肿瘤模型进行试验。结果:铁线莲皂苷对小鼠移植性肿瘤S180,HepA,P388均有显著的抑制作用。当剂量为0.3,0.6,1.2g.kg^-1时,对小鼠移植性肿瘤S180抑制率分别为42.78%,52.06%,58.25%(P<0.05~0.01),对移植性肿瘤HepA抑制率分别为37.44%,52.05%,59.36%(P<0.05~0.001),对移植性肿瘤P388抑制率分别为34.50%,46.78%,54.39%(P<0.05~0.01)。结论:铁线莲皂苷对小鼠移植性肿瘤有显著的抑瘤作用。     

应用UPLC-MS/MS观测6种中药对尿酸盐体外溶解度的影响＊

目的 建立水基质溶液中尿囊素含量的测定方法，观测6种治疗痛风常用中药对尿酸盐体外溶解度的影响。方法 采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法定量分析9组溶液中尿酸盐溶解后产生的尿囊素含量：实验组溶剂为6种治疗痛风常用中药的超声水提取溶液，对照组溶剂为超纯水、5%碳酸氢钠溶液和尿酸酶溶液。结果 尿囊素的色谱在1.40 min出峰，在0.1-100 ng·mL^-1范围内线性关系良好（r² = 0.9995），平均加标回收率为102.36%（n = 6），RSD为2.33%。尿囊素浓度与溶液pH值无线性相关；溶解时间24 h，土茯苓、黄柏和海金沙组尿囊素浓度与超纯水组均无统计学差异（P > 0.05）；溶解时间24 h，山慈菇、苍术和大黄组尿囊素浓度均高于超纯水组（P < 0.05）；溶解时间24 h，山慈菇组尿囊素浓度高于5%碳酸氢钠组（P < 0.05）；尿酸酶组的尿囊素浓度在1 h和24 h溶解时间内均为9组中最高（P < 0.05）。通过尿酸盐溶液中分解产生的尿囊素含量估算尿酸盐的溶解度（1 h，24 h），以1h超纯水组的溶解度为100%：超纯水组（100%，121%），山慈菇组（279%，463%），土茯苓组（69%，172%），海金沙组（21%，97%），苍术组（105%，400%），大黄组（146%，311%），黄柏组（65%，74%），尿酸酶组（8247%，12454%）和5%碳酸氢钠组（63%，285%）。结论 本方法可灵敏、准确地测定尿酸盐在水基质中药溶液中溶解后产生的尿囊素含量。山慈菇、苍术和大黄对尿酸盐的体外溶解度有一定促进作用，但未能达到临床溶解痛风石的要求。土茯苓、黄柏和海金沙对MSU的溶解无促进作用。     

Urotensin Ⅱ对心功能的影响及其作用机制探讨

 目的应用Langendorff离体心脏灌注的方法,观察不同浓度尾加压素II(Urotensin Ⅱ,UII)对正常与心衰大鼠心功能的影响,及特异性的PKA抑制剂(KT5720)对UII作用于大鼠心脏效应的影响,探讨UII作用于心脏的可能机制。方法在langendorff离体心脏灌注的模型上,观察:①UII处理组:给予不同浓度的UII后,正常及心衰大鼠心功能的变化;②KT5720+UII处理组:在灌流KT5720基础上给予UII(IC₅₀),正常与心衰大鼠心功能指标的变化;③KT5720对照组:给予KT5720后正常与心衰大鼠心功能的变化。结果①UII处理组:给予不同浓度的UII(10^-10、10^-9、10^-8和10^-7mol·L^-1),①灌注正常大鼠心脏后,左心室压最大上升速率(+dp/dt_max)分别降低16.48%、25.53%、31.53%、34.47%,左心室压最大下降速率(-dp/dt_max)分别降低22.78%、33.63%、46.09%、51.73%;②灌注心衰大鼠心脏后,+dp/dt_max分别降低19.01%、26.05%、34.36%、37.27%,-dp/dt_max分别降低27.71%、38.72%、53.41%、60.12%。心衰大鼠的抑制率大于正常大鼠。⑵KT5720+UII处理组:KT5720基础上灌注UII(IC₅₀),①正常大鼠+dp/dt_max降低5.37%,-dp/dt_max降低7.59%;②心衰大鼠+dp/dt_max降低3.27%,-dp/dt_max降低3.15%。+dp/dt_max、-dp/dt_max抑制率与UII组(IC₅₀)比较,均有统计学差异(正常大鼠P<0.01;心衰大鼠P<0.01)。③KT5720对照组:给予KT5720后,①正常大鼠+dp/dt_max降低5.99%,-dp/dt_max降低7.63%;②心衰大鼠+dp/dt_max降低2.84%,-dp/dt_max降低2.96%;与KT5720对照组的±dp/dt_max抑制率比较无统计学差异(正常及心衰大鼠P值均>0.05)。结论UII对正常大鼠及心衰大鼠心脏功能均呈剂量依赖性抑制,KT5720可以阻断UII对大鼠心脏的抑制作用,UII对心功能的抑制作用可能是通过PKA途径起作用。     

市售黄芩饮片的炮制质量

目的:测定黄芩药材和不同厂家的黄芩饮片中黄芩素转化率,对黄芩饮片的炮制质量进行探讨。方法:采用HPLC测定黄芩药材和不同厂家的黄芩饮片中黄芩苷与黄芩素的含量,并测定其超声自身酶解后的黄芩素含量,计算各自的黄芩素转化率。结果:黄芩药材中黄芩素的转化率为81.1%,按药典方法炮制的黄芩饮片的黄芩素转化率为5.3%,不同厂家的黄芩饮片的黄芩素转化率依次为76.3%,73.0%,54.81%,52.7%,61.3%,71.5%。结论:市售黄芩饮片的炮制质量偏低。     

不同生物源农药对内蒙古地区蒙古黄芪白粉病的田间防效研究

目的：探究不同生物源农药对蒙古黄芪白粉病的防治效果,为内蒙古地区蒙古黄芪生态种植专用生物源农药的选择提供依据。方法：在内蒙古自治区呼和浩特市和林格尔县,以清水为空白对照、25%多菌灵为阳性对照,选择市售、农业中白粉病防治效果较好的11种生物源农药（1.5%苦参·蛇床素、0.5%小檗碱、哈茨木霉菌+枯草芽孢杆菌、80%硫磺、几丁聚糖、0.3%丁子香酚、5%氨基寡糖素、大蒜素、0.5%大黄素甲醚、碳酸氢钠、解淀粉芽孢杆菌）,施药3次,以病叶率、病情指数为考察指标,研究不同药剂对蒙古黄芪白粉病的防治效果。结果：给药前不同组别间病叶率差异无统计学意义,表明试验田各组别蒙古黄芪白粉病发病情况基本一致;在第3次给药7 d后,与空白对照相比,1.5%苦参·蛇床素、80%硫磺、25%多菌灵和碳酸氢钠组的蒙古黄芪病叶率显著降低（P<0.05）,表明防治效果较好,其中1.5%苦参·蛇床素、80%硫磺与阳性对照防治效果相当,三者间防治效果差异无统计学意义;12种药剂中80%硫磺、1.5%苦参·蛇床素、25%多菌灵的平均防治效果为49.26%、33.95%、39.78%,防治效果较好,三者间防治效果差异...     

Volatile constituents of Xylopia frutescens,X. pynaertii and X. sericea: Chemical and biological study

The essential oils from three Xylopia species (X. frutescens, X. pynaertii, X. sericea), Annonaceae, have been examined by GC and GC/MS, and screened for bacteriostatic and fungistatic activities. The main components of each oil have been identified. The major constituents of X. frutescens stem bark oil were α-cubebene (25.2%) and δ-cadinol (27.4%). The root of X. pynaertii was rich in elemol (27.1%), while the stem bark oil contained δ-cadinene (10.3%), γ-muurolene (10.1%) and cubenol (12.6%). The major components of X. sericea root bark oil were p-cymene (22.8%) and α-gurjunene (13.8%). These oils exhibited moderate bacteriostatic and fungistatic activities.