针刺对AD模型大鼠海马凋亡相关蛋白Caspase-3的影响

目的:观察针刺对AD模型大鼠海马凋亡相关蛋白Caspase-3的影响。方法:SD大鼠20只,连续6w腹腔注射D-半乳糖(120mg·kg-1)和亚硝酸钠(45mg·kg-1)建立AD模型后随机分成模型组、针刺组(n=10),同时设立非模型组(n=10)。造模后第21d,针刺组大鼠予以针刺百会和肾俞穴治疗,而模型组大鼠不予以治疗。针刺治疗结束后大鼠立即处死,采用免疫组化法检测非模型组、模型组、针刺组大鼠海马Caspase-3表达。结果:免疫组化结果显示模型组大鼠海马Caspase-3表达明显增加,与对照组比较有显著差异(P0.01);而针刺组Caspase-3的表达明显减少,与模型组比较(P0.01)。结论:针刺可抑制大鼠海马Caspase-3表达。     

Iduna调控Hippo/YAP通路抑制炎症反应从而减轻围术期小鼠的神经认知障碍

目的：探讨Iduna对老龄小鼠围术期神经认知障碍（PND）过程中炎症因子的影响并分析Hippo/YAP信号通路在此发挥的作用。方法：取20只C57BL/6老龄小鼠分为对照（control）组和模型（model）组（行剖腹探查术诱导建立PND小鼠模型），每组10只，用荧光定量PCR检测PND小鼠脑组织中Iduna的mRNA水平。在PND造模前，通过侧脑室注射Iduna过表达腺相关病毒（AAV）载体、sh-Iduna AAV载体和（或）Hippo/YAP信号通路抑制剂CA3。将40只C57BL/6老龄小鼠分为control+AAV9-Con组、control+AAV9-Iduna组、model+AAV9-Con组和model+AAV9-Iduna组，每组10只，在造模后7 d，用水迷宫实验检测动物学行为，用Western blot检测脑组织中YAP和TAZ表达，用ELISA法检测脑组织中IL-6、TNF-α、TGF-β1和IL-10水平。将40只C57BL/6老龄小鼠分为control+DMSO组、control+CA3组、model+DMSO组和model+CA3组，每组10只，在造模后...     

慢性脑低灌注状态再灌注后大鼠海马p21和p53蛋白的表达

目的通过建立大鼠慢性脑低灌注模型,探讨慢性脑低灌注状态再灌注后大鼠海马p21和p53蛋白的表达。方法45只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=5),模型不灌注组(n=20),模型再灌注组(n=20),模型再灌注组大鼠按再灌注压后不同时间点分组(12h、24h、48h、72h组),每个时间点各5只(n=5)。采用右侧颈外静脉—颈总动脉端侧吻合和双侧颈外动脉及对侧横窦引流静脉结扎的方法,建立慢性脑低灌注动物模型,术后3个月阻断颈部动静脉分流造成模型组大鼠脑组织再灌注。应用免疫组化SABC法和显微图像分析方法检测慢性脑低灌注状态再灌注后大鼠海马CA1区p21和p53蛋白的表达。结果p21和p53蛋白在对照组大鼠海马CA1区无表达,在模型不灌注组中弱表达,模型再灌注组于术后12h开始有表达,48h达高峰,72h后逐渐降低。模型再灌注组海马CA1区p21和p53蛋白阳性细胞平均光密度值明显大于模型不灌注组(P<0.01)。结论慢性脑低灌注状态再灌注后,海马CA1区p21和p53蛋白的表达上调,二者可能对正常灌注压突破(NPPB)后迟发性神经功能障碍的发生起促进作用。     

花姜酮对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨花姜酮对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝损伤的保护作用。方法:70只Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组(SO组,n=10);重症急性胰腺炎组(SAP组,n=40);花姜酮(ZER)预处理组(ZER组,n=10),ZER药物对照组(ZER-CON,n=10)。其中SAP组又分为造模1h、3h、6h、12h四个时间亚组(n均=10)。SAP组及ZER组大鼠采用胆胰管逆行注射5%硫磺胆酸钠(STC)溶液(1ml/100Kg)造模;SO组及ZER-CON组则向胆胰管注入等量生理盐水。ZER组及ZER-CON组于造模前30min由股静脉注射10mg/Kg的ZER溶液。比较各组大鼠于造模12h死亡情况、腹水量、血清淀粉酶(AMY)、磷脂酶(PLA2)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平以及胰腺肝脏组织病理学评分(分级)。结果:ZER-CON组大鼠死亡率、腹水量、AMY、PLA2、ALT、AST水平以及胰腺和肝脏组织病理学评分(分级)与SO组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。SAP组上述指标明显高于SO组,差异有统计学意义(均P0.05)。ZER组上述指标与SAP组相比明显降低(均P0.05),但均高于SO组和ZER CON组(P0.05)。结论:ZER对SAP大鼠肝脏损伤具有一定的保护作用。     

人骨髓间充质干细胞移植对缺氧缺血性脑病新生大鼠学习记忆功能的影响

目的 研究人骨髓间充质干细胞(hMSC)经脑室移植后对新生鼠缺氧缺血性脑病(HIE)模型的治疗作用及观察植入细胞的存活、迁移及对大鼠远期学习记忆功能的影响.方法 体外分离、扩增正常人骨髓间充质干细胞,移植前用CM-DiI标记.7日龄新生SD大鼠随机分为假手术组(n=10)、HIE组(n=10)、HIE-hMSC组(n=20).HIE-hMSC组:建立HIE模型后72 h,将hMSC(1×106细胞/μl)5μl采用立体定向移植到乳鼠侧脑室.大鼠6周龄时行Morris水迷宫实验检测其学习记忆功能.取大鼠脑组织制作快速冰冻切片直接在荧光显微镜下观察移植细胞的存活及迁移.部分脑组织制成石蜡切片,HE染色计数海马CA1区存活神经元数.结果hMSC移植到大鼠脑室后能存活至少5周,移植后2周细胞沿移植针道呈条索状分布,并发出红色荧光;移植后5周,细胞分布较前稀疏,损伤组织中可见移植细胞.大鼠的空间学习记忆功能有所改善,水迷宫平均逃逸潜伏期HIE-hMSC组(45.5±16.5) s较HIE组(74.5±7.5)s显著缩短(P<0.05),原平台像限的搜索时间HIE-hMSC组(47±10)s显著长于HIE组(36±8)s(P<0.01).HIE-hMSC组左侧海马CA1区存活神经元数为(94±23)个/mm,较HIE组(61±12)个/mm显著增多(P<0.05).结论 hMSC 经脑室移植到缺氧缺血性脑病的新生SD乳鼠后,hMSC能存活至少5周,并迁移至损伤脑组织.大鼠的远期学习记忆功能有所改善,海马CA1区存活神经元数增多.     

缺血再灌注对大鼠海马血管紧张素Ⅱ受体样蛋白1表达的影响

目的:探讨缺血再灌注(I/R)对大鼠海马血管紧张素Ⅱ受体样蛋白1(APJ)表达的影响.方法:利用完全随机数字法将大鼠分为假手术组(sham)和缺血再灌注组(I/R),每组30只,每组又分为15、30和60 d等三个时间点(n=10).建立大鼠I/R损伤模型,造模7 d后采用Morris水迷宫定位航行试验检测I/R大鼠学...     

卡托普利与洛伐他汀联用对阿霉素肾病大鼠血清TNF-α的影响

目的:探讨卡托普利与洛伐他汀联用对阿霉素肾病大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响及保护肾脏作用的可能机理.方法:雄性SD大鼠150只,适应性喂养2周后,随机抽取18只为对照组(A组);另外132只制作阿霉素肾病模型,造模2周末,4只造模失败,8只死亡,120只造模成功的大鼠随机分为4组:B组为模型对照组(n=30),C为卡托普利治疗组(n=30),D组为洛伐他汀治疗组(n=30),E组为卡托普利和洛伐他汀联合治疗组(n=30).分别于2、4、6周末,遵循随机化原则,按n=6,分层抽取各组样本,收集24h尿液及血液标本待测.结果:和模型组比较,卡托普利组、洛伐他汀组及联合治疗组血清TNF-α及胆固醇、三酰甘油浓度均降低,蛋白尿减少,血清白蛋白浓度升高;两药联用疗效更为明显.结论:卡托普利与洛伐他汀联用可进一步降低血清TNF-α浓度,对阿霉素肾病大鼠具有添加的肾脏保护作用.     

钾通道阻断剂对大鼠海马神经元迟发性死亡的保护作用

<正> 我们以往的研究表明,脑缺血再灌流后细胞膜兴奋性降低可能是海马CA1区锥体细胞迟发性死亡的机制之一,而膜兴奋性降低与钾通道活动增强密切相关.因此,本实验研究了钾通道阻断剂TEA对短暂性前脑缺血后海马CA1区锥体细胞死亡的影响,以期探讨钾通道在神经元迟发性死亡中的作用.成年雄性Wistar大鼠(200～250g)随机分为6组:(1)正常对照组,(2)缺血组,(3)1.25mM TEA组,(4)2.5mM TEA组,(5)5mM TEA组,(6)生理盐水对照组.实验采用改良的四血管闭塞法制作15分钟前脑缺血模型.再灌注30分钟后,经侧脑室分别给子5ul生理盐水或TEA溶液(终浓度分别为1.25mM、2.5mM、5mM),每日1次,连续7天.常规病理石蜡切片(片厚5um),光镜下计数CA1区存活的锥体细胞密度(个/mm).结果:正常对照组:192±12(n=10);缺血组:7±2(n=10);生理盐水对照组:21±7(n=8);1.25mM TEA组:20±3(n=10);2.5mM TEA组:69±13(n=8);5mM TEA组:61±14(n=4).经统计,2.5mM TEA组、5mM TEA组与缺血组及生理盐水对照     

TTX对糖尿病大鼠机械刺激诱发C纤维高频放电的抑制作用

目的:探讨糖尿病大鼠机械刺激诱发C纤维高频放电的机制。方法:24只SD大鼠随机分为对照组和模型组,模型组腹腔注射70 mg/kg链脲菌素制作糖尿病模型,对照组腹腔注射相同剂量的生理盐水。造模前48 h、造模后48 h和4周分别取尾静脉血测血糖浓度;造模前3 d,造模后3、7、14、21、28 d通过刺激后爪,采用vonFrey法测定大鼠50%机械缩爪阈值(PWT)。取造模后4周的大鼠,分离尾神经,测定传导速度以确定纤维类型,并给予60 s的阈上(100 g)机械刺激,记录单根C纤维的放电。在糖尿病大鼠的尾巴上暴露尾神经,给予100nmol/L的TTX 10 min后施加60 s阈上(100 g)机械刺激,观察并记录其放电。结果:造模后48 h模型组(n=12)随机血糖浓度高于16.7 mmol/L的比率为91.7%,与对照组(n=12)比较,模型组在48 h、4周时血糖明显增高;造模后3周模型组PWT明显低于对照组(P<0.05);糖尿病组大鼠C纤维对60 s阈上(100 g)机械刺激诱发的放电数明显高于对照组;加100 nmol/L低浓度的TTX后,糖尿病大鼠中C纤维对机械刺激的放电数明显减少(P<0.01)。结论:低浓度的TTX可以抑制糖尿病大鼠机械诱发的C纤维高频放电。     

p38MAPK信号通路参与睡眠剥夺大鼠认知功能的损害

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在睡眠剥夺大鼠认知障碍中的作用机制.方法 100只雄性SD大鼠随机分成对照组(n=20)、模型组(n=40)、抑制剂SB203580组(n=40).改良多平台法建立睡眠剥夺大鼠模型.睡眠剥夺1d、3d、5d、7d,电镜观察海马区神经细胞形态变化,免疫组织化学法...     

大鼠骶神经钳夹伤致神经源性膀胱模型的建立及评估

目的建立并评估大鼠骶神经钳夹伤后神经源性膀胱模型。方法将25只健康雌性大鼠随机分为对照组(n=10)和钳夹伤组(n=15)。钳夹伤组对大鼠双侧骶2神经进行钳夹伤,对照组仅暴露双侧骶2神经。造模后观察大鼠自主排尿情况,4周后检测尿流动力学指标,并对膀胱和骶神经进行组织形态学观察。结果造模48 h后钳夹伤组大鼠下腹部膀胱充盈,自主排尿受限,对照组大鼠可自主排尿。造模4周后钳夹伤组大鼠的最大膀胱容量大于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);钳夹伤组大鼠漏尿点压及膀胱内压高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。造模4周后钳夹伤组大鼠的膀胱明显胀大,HE染色膀胱壁肌层厚度小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠双侧骶2神经钳夹伤可建立神经源性膀胱模型,造模方法简单易行且模型稳定。     

螺内酯对DM2大鼠肾脏保护及ICAM-1表达的影响

目的:观察螺内酯对2型糖尿病(DM2)大鼠血、尿细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达及肾脏组织结构和功能的影响.方法:将30只健康SD雄性大鼠随机分为正常对照组(NC组)n=10,DM2模型组(DM组)n=10,DM2模型+螺内酯治疗组(SPI组)...     

2.106 糖尿病动物模型血浆和肠道组织中P物质含量的变化及其意义

目的通过糖尿病动物模型检测血浆和肠道组织中P物质(SP)的含量,探讨糖尿病性胃肠病与胃肠激素的关系.方法雄性大鼠20只,随机分为正常组(n=10)和糖尿病组(n=10).按100mg/k g给造模大鼠单剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ),建立糖尿病模型.在造模后4周后采血,用放射免疫法(RIA)同批测定血浆和肠道组织中SP含量.结果 1.正常组血浆中SP含量显著高于糖尿病组(P＜0.05).2.正常组十二指肠中SP含量显著低于糖尿病组(P＜0.05).远端结肠SP含量正常组显著低于糖尿病组(P＜0.01),见表.结论糖尿病组十二指肠和远端结肠组织中的SP含量较正常组明显增高,说明P物质的变化对糖尿病胃肠病的发生发展有一定相关作用.表正常组和糖尿病组大鼠造模前后血浆和肠道组织中SP含量比较     

电针结合康复训练通过SDF-1/CXCR4信号通路对癫痫大鼠的保护机制研究

目的 探讨电针结合康复训练通过SDF-1/CXCR4信号通路对癫痫大鼠的保护机制.方法 70只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=30)、治疗组(n=20)与中和组(n=10),采用氯化锂联合戊四氮致构建癫痫大鼠模型,观察癫痫大鼠认知功能、癫痫发作频次、持续时间;TUNEL方法检测癫痫大鼠海马区凋亡程度...     

发育期大鼠癫痫持续状态后海马内HIF-1α表达对Notch信号通路的影响

目的:探究发育期大鼠癫痫持续状态(SE)后海马内低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达对Notch信号通路的影响。方法:出生后21 d SD大鼠168只按随机数字表法分为对照组(NS,n=56)、模型组(SE,n=56)和干预组(2ME2,n=56)。其中SE组腹腔注射10 mg/ml戊四氮(PTZ,80 mg/kg)溶液制作癫痫持续状态模型,NS组腹腔注射等剂量生理盐水,2ME2组在癫痫持续状态模型建立后立即腹腔注射2-甲氧基雌二醇(2ME2,15 mg/kg)溶液。分别于造模成功后1、4、6、8、12 h和24 h处死大鼠取出海马组织,应用Western Blot方法检测HIF-1α、Notch-1蛋白含量;另外将各组造模成功后6 h的大鼠进行灌注并取脑,应用免疫组化染色法检测海马齿状回(DG)区HIF-1α和Notch-1的阳性细胞数。结果:HIF-1α、Notch-1蛋白在NS组均平稳表达;在SE组存在明显的表达时程和表达高峰,1 h时表达即开始增多,8 h达高峰,然后逐渐减少,且各个时间点的表达均明显高于NS组,差异有统计学意义(P0.05);HIF-1α被特异性抑制剂2ME2干预后,HIF-1α、Notch-1的表达均较SE组明显减少,差异有统计学意义(P0.05),其中6 h时达最低值。在此时间点,SE组HIF-1α、Notch-1的阳性细胞数均明显高于NS组和2ME2组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:发育期大鼠癫痫持续状态后HIF-1α可能部分参与了Notch信号通路的激活与调控。     

多沙唑嗪干预对α_1肾上腺素能受体抗体阳性糖尿病大鼠心肌的保护作用

目的:探讨多沙唑嗪干预对α1肾上腺素能受体自身抗体(α1R-Ab)阳性糖尿病(DM)大鼠心肌转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原表达的影响及其心肌保护作用。方法:Wistar大鼠分为5组:A组(正常对照组,n=10)、B组(DM模型组,n=10)、C组(DM+多沙唑嗪干预组,n=10)、D组(α1R-AbDM组,n=8)和E组(α1R-AbDM+多沙唑嗪干预组,n=8)。腹腔注射链脲佐霉素(STZ)复制T2DM模型。造模成功后,D组和E组于当周、第4、8、12、16周尾静脉注射α1R-Ab注射液(100μg/100g),建立α1R-AbDM模型。C组和E组均从注射α1R-Ab起每日给予多沙唑嗪0.36mg/Kg灌胃,持续16周。A组不予任何处理。16周后处死各组大鼠,取左室心肌组织常规病理切片和超薄切片,采用免疫组化检测左室心肌TGF-β1和Ⅰ型胶原表达量,电镜观察心肌超微结构。结果:A组大鼠心肌TGF-β1和Ⅰ型胶原表达明显低于B、C、D、E组(均P<0.01),C组心肌TGF-β1和Ⅰ型胶原表达低于B组(P<0.05),E组心肌TGF-β1和Ⅰ型胶原表达亦明显低于D组(P<0.05);电镜下,A组心肌未见明显异常;D组心肌线粒体减少,排列紊乱,呈空泡变性,间质胶原增生,微血管基底膜增厚;而E组心肌病变较D组明显减轻;C组心肌病变亦较B组明显减轻。结论:多沙唑嗪可通过抑制α1R-Ab阳性DM大鼠心肌组织中TGF-和Ⅰ型胶原表达,减轻DM大鼠心肌间质纤维化,保护心肌。     

氯化锂匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马神经元GPER1表达的变化

目的:观察G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)在癫痫大鼠海马神经元中表达的变化。方法:成年雄性SD大鼠分成对照组(control)和癫痫组(epilepsy),利用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品方法制备癫痫模型,分别在1、2、3、7、14 d和28 d,利用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,利用尼氏染色观察大鼠海马神经元形态变化;利用免疫组化和Western Blot技术观察GPER1在海马的表达。结果:水迷宫结果显示,与Control组相比,造模14 d的大鼠逃逸潜伏时间明显延长(P 0. 05),穿越目标象限区域的次数较Control组显著降低(P 0. 05)。尼氏染色结果显示:与Control组相比,造模1 d和2 d的大鼠CA1及CA3区锥体细胞层细胞及DG区颗粒细胞层细胞体积缩小,细胞间距增加,尼氏染色减弱;造模3和7 d的大鼠细胞体积明显缩小,细胞间隙明显增大,尼氏染色加深,CA1及CA3细胞数量明显减少;造模14 d和28 d的大鼠神经元体积逐渐向正常恢复,但仍较Control组小。免疫组化结果显示:GPER1免疫阳性细胞以海马锥体细胞和齿状回颗粒细胞为主,主要分布在细胞膜。与Control组相比,造模2 d和3 d的大鼠海马CA1及CA3区GPER1表达增加(P 0. 05),7 d后增加最明显(P 0. 01),14、28 d后表达下降;在DG区,造模3 d及7 d的大鼠GPER1表达增加(P 0. 05),14 d后表达下降(P 0. 05),28 d大鼠无显著差异。Western Blot结果显示:与Control组比较,造模2 d和3 d的大鼠GPER1相对表达量开始增高,7 d后明显增高(P 0. 05),14 d及28 d的大鼠表达降低。结论:GPER1在海马神经元的表达随着神经元损伤的加重而增高,随着神经元损伤的恢复逐渐降低,提示其表达变化与神经元的损伤与修复有关。     

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤后GFAP表达和脑组织水肿的影响

探讨川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞表达胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)以及对脑组织含水量的影响。将70只SD大鼠随机分为3组:脑缺血后1、3、5、7、10d模型组(n=30,每个时间点用6只)、川芎嗪预处理组(n=30,每个时间点用6只)和假手术组(n=10,每个时间点用2只)。采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO),应用免疫组化法观察星形胶质细胞GFAP的表达,干湿重法测定脑组织的含水量。结果显示:川芎嗪预处理组大鼠各时间点海马CA1区的GFAP阳性细胞数量显著增多,与缺血模型组比较均有显著性差异(P<0.05)。缺血再灌注后脑组织含水量持续性增加,到3d达到最高峰,5d时仍较高,以后逐渐降低;川芎嗪组各时间点的脑组织含水量均低于缺血模型组(P<0.05)。上述研究结果提示川芎嗪可引起星形胶质细胞活化、保护神经元、减轻脑水肿,具有防治脑缺血再灌注损伤的作用。     

创伤性应激障碍样大鼠海马GABA受体表达的变化

目的:使用单次延长刺激(SPS)模型,考察创伤后应激障碍对大鼠海马CA1和CA3亚区GABA受体蛋白表达的变化。方法:大鼠分为未造模组、SPS造模后1天和14天组。采用旷场测试中的中央区停留时间和高架十字测试中的开臂/(开臂+闭臂)指数来评价SPS模型诱发的创伤后应激障碍样行为,即焦虑和过度觉醒状态;并使用蛋白印迹检测大鼠海马CA1和CA3亚区的GABA_A和GABA_B受体的表达量。结果:和其他两组相比,SPS造模后14天组在旷场测试时中央区停留时间及高架十字测试时的开臂/(开臂+闭臂)指数均显著降低(P0.05),同时在CA1和CA3区的GABA_A和GABA_B受体蛋白表达水平均降低(P0.05)。结论:海马CA1区和CA3亚区的GABA_A和GABA_B受体蛋白表达异常可能参与了SPS模型诱发的大鼠创伤后应激障碍样行为。     

NSC23766改善大鼠脑缺血后认知功能缺陷

目的:探讨Rac1在大鼠海马CA1区缺血性神经元损伤中的作用.方法:健康成年雄性SD大鼠制作四动脉闭塞全脑缺血模型,实验动物随机分为Sham、缺血再灌组(ischemia/reperfusion,I/R)、溶剂对照(Vehicle)组(I/R+生理盐水)、NSC23766组(I/R+NSC23766).采用激光共聚焦显微镜技术观察海马CA1区生存神经元.利用Morris水迷宫观察脑缺血再灌注后大鼠的空间学习记忆功能的变化情况.结果:与缺血再灌注组相比,Rac1抑制剂NSC23766组海马CA1区神经元生存数量增加;大鼠缺血后的空间学习记忆缺陷明显得到改善.结论:Rac1的激活可能是导致大鼠缺血再灌注后神经元损伤的重要因素,其抑制剂NSC23766可有效减轻这种损伤,为临床治疗缺血性脑中风提供理论依据.