miRNA-221和miRNA-222在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的:研究miRNA-221、miRNA-222在人肝癌细胞株及肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达,探讨二者与患者临床病理特征间的关系.方法:从体外培养的人肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97和46例手术切除的HCC组织及毗邻癌旁组织中提取总的RNA,用微小RNA的引物反转录后,用miRNA-221、miRNA-222特异性引物做荧光定量聚合酶链反应,并分析miRNA-221、miRNA-222表达水平与各临床病理参数间的关系.结果:肝癌细胞株MHCC-97中miRNA-221、miRNA-222的表达较肝癌细胞株HepG2、Huh7显著升高;HCC组织中miRNA-221、miRNA-222的平均表达水平较癌旁组织分别上调1.72±1.17,1.76±1.14倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).miRNA-221、miRNA-222表达水平与HCC肿瘤TNM分期和包膜浸润有关,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:miRNA-221、miRNA-222显著高表达可能在HCC发生、发展中发挥重要作用,尤其与肝癌细胞的侵袭、转移有关.     

常规化疗药物诱导卵巢癌OVCAR-3细胞凋亡特点的分析

目的：观察抗卵巢癌药物顺铂、紫杉醇和阿霉素对卵巢癌细胞系ＯＶＣＡＲ－３体外生长和生存的影响并分析由它们所致的细胞死亡性质。方法：采用细胞形态学观察、细胞动力学检测及ＤＮＡ片段化分析等细胞和分子生物学方法,研究化疗药物对卵巢癌细胞的凋亡诱导作用。结果：上述药物在抑制ＯＶＣＡＲ－３细胞生长的同时可不同程度地诱导细胞凋亡。其中,紫杉醇诱导细胞凋亡的能力最强;较低剂量紫杉醇（１０＾－８Ｍ）和顺铂（２μｇ／     

miRNA-196b过表达对K562细胞增殖、凋亡及survivin、Cox-2表达的影响

背景与目的：BCR-ABL融合基因是慢性粒细胞白血病发病的分子病理基础,也是诊断慢性粒细胞白血病、观察疗效、评估预后等的有效指标。miRNA-196b在急性粒细胞白血病中低表达并对疾病的发展起主要作用。在慢性粒细胞白血病中miRNA-196b的靶基因为BCR-ABL,miRNA-196b过表达抑制BCR-ABL融合基因的表达。生存素(survivin)是BCR-ABL的一个下游基因,已在多种肿瘤中发现survivin与环氧化酶-2(Cox-2)协同调节细胞的增殖凋亡。本研究旨在探讨miRNA-196b过表达对K562细胞增殖、凋亡及survivin、Cox-2 mRNA表达的影响。方法：实验分为K562-196b组、空载K562-pLV组与K562组,采用CCK-8法检测细胞增殖;采用AnnexinⅤ-PE检测细胞凋亡;采用实时荧光定量PCR法检测Cox-2、survivin mRNA的表达情况。结果：miRNA-196b过表达可以明显抑制K562细胞增殖;K562-196b组细胞凋亡率显著高于K562组(P<0.05);miRNA-196b组中survivin基因显著低表达(P<0.05),Cox-2基因中无明显变化(P>0.05)。结论：miRNA-196b对K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡有显著作用;miRNA-196b过表达可下调survivin基因的表达,为miRNA-196b作为慢性粒细胞性白血病的治疗靶点提供了依据。     

miRNA-21调节PTEN表达影响宫颈癌HeLa细胞的生物学行为

目的： 探讨抑制miRNA-21表达对宫颈癌HeLa细胞中PTEN的表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。 方 法： 以脂质体介导anti-miRNA-21（anti-miRNA-21转染组）、anti-miRNA-21-neg（阴性对照组）转染HeLa细胞,同时设空白对照组（未转染组）。应用Real-time PCR技术检测3组细胞中miRNA-21的表达,Western blotting 检测3组细胞中PTEN的表达,MTT法检测3组细胞的增殖能力,Transwell实验检测3组细胞的侵袭能力。结果： Anti-miR-21转染组与阴性对照组相比,HeLa细胞中miRNA-21的表达量明显降低\[（0.187±0.027）vs （0.861±0.144）,P＜0.01\]。转染 anti-miRNA-21 96 h后,HeLa细胞增殖抑制率明显升高\[（49.44±1.97）% vs （4.36±0.64）%,P＜0.01\]。Anti-miR-21转染组与阴性、空白对照相比, Hela细胞的侵袭细胞数明显减少\[（29.4±2.1）vs （40.4±2.9）、（41.2±2.6）个,均P＜0.01\];PTEN蛋白的表达则明显增加\[（1766.00±35.56）vs（726.00±5.48）、（729.25±17.73）,均P<0.01\]。 结论： 抑制miRNA-21的表达后,宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭能力明显下降,其机制可能与上调PTEN的表达有一定关系。     

上调miRNA-145表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响

目的探讨上调miRNA-145表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法收集人正常肺上皮细胞株BEAS-2B和非小细胞肺癌细胞株A549,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两种细胞中miRNA-145的相对表达量。以Lipofectamine^TM 2000转染试剂将miRNA-145模拟物和阴性对照质粒转染至A549细胞中,分别作为miRNA-145组和NC组,以只加入转染试剂的A549细胞作为对照组,RT-PCR检测各组细胞中miRNA-145的相对表达量。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术(FCM)检测上调miRNA-145表达对细胞增殖和凋亡的影响。给予不同放射剂量X线照射后采用克隆形成实验检测细胞的放射敏感性。结果A549细胞中miRNA-145的相对表达量明显低于正常肺上皮BEAS-2B细胞(P<0.01);转染后,miRNA-145组细胞中miRNA-145的相对表达量高于对照组(P<0.05);转染后,NC组与对照组细胞中miRNA-145的相对表达量比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);miRNA-145组细胞转染24、48、72 h的光密度(OD)值均低于对照组(P<0.05);转染48 h后,miRNA-145组细胞的凋亡率高于对照组(P<0.05);2、4、6、8 Gy剂量的X线照射后miRNA-145组细胞的存活分数(SF)均低于对照组,放射增敏比(SER)为1.491。结论与正常肺上皮BEAS-2B细胞比较,A549细胞中miRNA-145的相对表达量较低,上调其表达能够抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡,增强放射敏感性。     

miRNA-221表达与甲状腺乳头状癌临床病理分期的关系研究

目的：探讨miRNA-221在甲状腺乳头状癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法选取甲状腺乳头状癌（30例）、甲状腺良性病变（25例）及正常甲状腺组织（25例）共80例。采用real-time PCR法检测miR-NA-221在甲状腺乳头状癌组织、良性病变组织及正常甲状腺组织样本中的表达,并分析miRNA-221的表达与甲状腺乳头状癌的临床病理特征的相关性。结果 miRNA-221在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于甲状腺良性病变组织和正常甲状腺组织（P<0.05）;miRNA-221的表达水平与甲状腺乳头状癌组织的病理分级具有明显的相关性（r=0.823,P<0.05）。结论 miRNA-221在甲状腺乳头状癌组织中表达升高,且与甲状腺乳头状癌的组织病理分级相关,miRNA-221在甲状腺乳头状癌的发生发展中有重要作用。     

miRNA-145在卵巢癌组织中的表达及其对增殖、迁移与侵袭的影响

摘 要：［目的］ 检测不同卵巢组织中miRNA-145的表达,并探讨miRNA-145在卵巢细胞SKOV-3增殖、迁移与侵袭的作用。［方法］ 采用定量聚合酶链反应（qPCR）测定正常卵巢组织、卵巢癌旁组织与卵巢癌卵巢组织的miRNA-145表达水平,随机将SKOV-3细胞分为正常对照组、空白病毒组和病毒转染组,分别采用MTT法测定各组细胞的增殖情况,采用qPCR测定miRNA-145的表达水平,采用划痕实验测定迁移能力,采用Transwell小室法测定侵袭能力。［结果］ 卵巢癌组织miRNA-145表达水平为0.56±0.23,较卵巢癌旁组织和正常卵巢组织显著性降低（P<0.05）。卵巢癌组织miRNA-145表达水平与患者国际妇产科联合会分期和组织分化程度相关（P<0.05）,但与年龄无关（P >0.05）。病毒转染组细胞的miRNA-145表达水平为4.63±0.47,较正常对照组和空白病毒对照组显著性增加（P<0.05）。病毒转染组细胞在培养24h、48h和72h时OD值分别为0.68±0.15、1.17±0.23和1.62±0.26,均较正常对照组和空白病毒对照组显著性降低（P<0.05）。病毒转染组细胞的划痕宽度为675±46μm,较正常对照组和空白病毒对照组显著性增大（P<0.05）。病毒转染组穿膜细胞数量为36±6个,较正常对照组和空白病毒对照组显著性降低（P<0.05）。［结论］ miRNA-145低表达可能与卵巢癌的发生发展有关,过表达miRNA-145能够抑制卵巢癌细胞株的增殖、迁移和侵袭。miRNA-145可以作为治疗卵巢癌的新作用靶点。     

腹腔积液细胞 miRNA-221含量对胰腺癌的价值

目的腹腔积液细胞微小RNA-221(miRNA-221)含量对胰腺癌的诊断价值。方法前瞻性、连续性纳入收治临床表现为腹腔积液的患者,将确诊为胰腺癌的研究对象分入实验组,将非胰腺癌的良性疾患分入对照组。比较两组患者腹腔积液细胞miRNA-221含量及相关危险因素指标间的差异性。结果两组患者组间资料单因素比较显示:吸烟史、饮酒史、糖尿病病史、胰腺炎病史、上腹部CT疑似阳性、KPS量表、直接胆红素(DBi L)、癌胚抗原(CEA)、糖抗原19-9(CA19-9)、糖抗原242(CA242)、腹腔积液细胞miRNA-221、腹腔积液细胞miRNA-21等共计12项指标存在差异(P均<0.05)。logistic回归分析显示:腹腔积液细胞miRNA-221与KPS量表、DBi L、CEA、CA242同为诊断胰腺癌的敏感指标。腹腔积液细胞miRNA-221的ROC曲线下面积(AUC)为0.784,临界值为6.69 ng/ml,依据临界值分组,则临界值以上的胰腺癌患者的人数显著高于临界值以下组的(P<0.05)。联合检测KPS量表、DBi L、CEA、CA242用于诊断胰腺癌的AUC为0.832,约登指数(YI)为0.6038。加入腹腔积液细胞miRNA-221后联合诊断的AUC增至0.863、YI增至0.6482。结论腹腔积液细胞miRNA-221是诊断胰腺癌的独立敏感因素,单项指标检测即具有良好的诊断价值,将其联用能够显著增大胰腺癌的诊断价值,对于该病的早期诊断具有重要临床意义,是当前胰腺癌诊断体系的良好补充。     

miRNA-9对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡的作用及其机制

目的：通过提高骨肉瘤MG-63细胞miRNA-9的表达,探讨miRNA-9对MG-63细胞增殖及凋亡的影响及可能的作用机制。方法：MG-63细胞随机分为实验组、阴性对照组和空白组。实验组转染miR-NA-9（ Oligo）,阴性对照组转染阴性对照核苷酸序列（ microRNA negative control sequence）,空白组不做转染。qRT-PCR检测细胞miRNA-9、CXCR4的表达。CCK-8法检测3组细胞的增殖;流式细胞术比较3组细胞的凋亡水平。结果：与阴性对照组和空白组相比,转染组细胞中miRNA-9表达升高;miRNA-9高表达的骨肉瘤细胞增殖速率降低、细胞凋亡率增加、CXCR4 mRNA转录水平下调,差异有统计学意义。结论：CXCR4基因参与miRNA-9抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖过程,同时促进细胞凋亡。     

miRNA-93在膀胱癌中的表达及其对T24细胞生物学特性的影响

目的：探讨miRNA-93在膀胱癌中的表达及对人膀胱癌细胞株T24细胞生物学特性的影响及其作用机制。方法：选取郑州大学附属南阳市中心医院泌尿外科2010年5月至2016年5月收治的79例膀胱癌患者病理组织标本及配对癌旁正常组织,通过qRT-PCR检测miRNA-93的表达水平。沉默miRNA-93后,采用CCK-8法、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞增殖和迁移能力的变化及细胞的凋亡情况;Western blotting检测AKT/p-AKT、GSK3β/p-GSK3β蛋白表达水平的变化。结果：miRNA-93在膀胱癌组织及癌细胞中高表达,且表达水平与癌灶大小、淋巴结转移、病理分级及T分期有关（均P<005）。沉默miRNA-93后,T24细胞的增殖能力显著降低（P<0.05）,沉默miRNA-93促进T24细胞的凋亡并抑制其迁移;同时,沉默miRNA-93后p-AKT和p-GSK3β的蛋白表达水平均显著下降（P<0.05）。结论： miRNA-93能够促进人膀胱癌细胞株T24细胞的增殖和迁移,并抑制凋亡,其作用机制可能与下调p-AKT、p-GSK3β蛋白表达有关,提示miRNA-93可以作为诊断和靶向治疗膀胱癌的潜在作用位点。     

miRNA-375对胰腺癌细胞Panc-1增殖和凋亡的影响

  目的  探讨miRNA-375的外源性表达对人胰腺癌细胞Panc-1增殖和凋亡的影响。   方法  将miRNA-375表达质粒或对照质粒转染Panc-1细胞, qRT-PCR方法检测miRNA-375在转染细胞中的表达水平, 细胞计数法、流式细胞术分别检测外源性miRNA-375表达后Panc-1细胞增殖、凋亡和周期的变化情况。   结果  miRNA-375表达质粒组与对照组比较, 其miRNA-375表达诱导性升高, 细胞增殖受到抑制, 细胞凋亡率增加, 细胞周期阻滞于G₀~G₁期。   结论  在胰腺癌细胞Panc-1中增加miRNA-375的表达, 可抑制细胞增殖, 促进细胞凋亡和细胞周期阻滞, miRNA-375在胰腺癌细胞Panc-1中可能发挥潜在的抑癌基因作用。      

葡萄糖对卵巢癌细胞生长增殖影响体外研究

目的 葡萄糖是维持肿瘤细胞存活的重要能量来源,有关研究表明低糖与无糖条件有可能抑制肿瘤细胞生长,成为潜在的肿瘤治疗方式.本研究通过给予不同浓度葡萄糖刺激SKOV3与A2780卵巢癌细胞系,分析其细胞增殖、细胞周期与细胞凋亡的改变,探讨葡萄糖对卵巢癌细胞生长增殖的影响.方法 在体外配制含不同葡萄糖浓度(0、2.5、 5.5、 25.0 mmol/L)的培养基,分别模拟无糖、低血糖、正常血糖及高血糖水平的体内环境,观察不同葡萄糖浓度对卵巢癌细胞的增殖、凋亡与细胞周期的影响.结果 高糖促进卵巢癌细胞SKOV3和A2780的增殖,干预48 h后,增殖幅度约为无糖组的1.841~1.942倍;低糖与无糖条件诱导卵巢癌细胞发生G1期阻滞,与高糖组相比,SKOV3细胞G1期比例以(40.699±1.131)%增加至(58.619±2.643)%,A2780细胞以(46.348±2.150)%增加至(54.770±2.475)%;低糖与无糖条件亦诱导细胞凋亡,SKOV3与A2780细胞无糖组中凋亡细胞比例分别为(14.015±0.827)%和(12.930±1.127)%.结论 本研究通过探讨葡萄糖对卵巢癌细胞生长与增殖的影响,证明低糖与无糖条件诱导卵巢癌细胞发生G1期阻滞、细胞凋亡并抑制其生长增殖.若进一步给予相应葡萄糖抑制剂干预,可能为卵巢癌的临床治疗提供新思路.     

高表达的miR-301b和miR-769-5p对非小细胞肺癌A549细胞生长的影响

目的:探讨高表达的miR-301b和miR-769-5p对非小细胞肺癌A549细胞生长的影响。方法:采用实对荧光定量聚合酶链反应检测A549细胞中miR-301b和miR-769-5p的表达;使用 qRT-PCR检测增殖相关基因miRNA表达的变化,并将实验组miR-301b和miR-769-5p表达量上调(与阴性对照组比较);采用MTT法检测并对比A549细胞增殖的改变;采用流式细胞仪检测并对比A549细胞周期以及凋亡的改变。结果:qRT-PCR结果表明,浸染了miR-301b和miR-769-5p过表达载体的A549细胞中miR-301b和miR-769-5p水平明显高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.01)。miR-301b过表达使G0/G1期的A549细胞增加,S和G2/M期的细胞减少;miR-769-5p过表达使G0/G1和G2/M期细胞增加,S期细胞减少。结论:miR-301b对靶基因FOXF2具有调控作用,miR-769-5p对靶基因ARID1A具有调控作用。miR-301b和miR-769-5p的过表达对肺癌A549细胞的细胞周期产生了明显影响,但没有影响细胞增殖和凋亡,miR-301b和miR-769-5p有可能成为肺癌分子靶向治疗调控效应靶点,可以进一步探索研究。     

Twist下调影响卵巢癌细胞株A2780顺铂敏感性的研究

目的:探讨Twist对卵巢癌细胞株A2780顺铂敏感性及细胞增殖凋亡的影响。方法:通过Western blot筛选细胞株,构建小干扰RNA,qPCR筛选Twist-siRNA,将构建成功的Twist-siRNA逆转录于上皮性卵巢癌细胞株A2780中,通过CCK-8细胞术及流式细胞术,研究下调Twist对卵巢癌细胞株的增殖、凋亡及对化疗药物顺铂的影响。结果:选择人卵巢癌细胞株A2780,引入小干扰RNA后,Twist表达降低;细胞的增殖能力下降,凋亡增加（P＜0.05）,差异有统计学意义。si-Twist组相比对照组Twist基因的表达量明显降低, 且呈现一定的顺铂浓度依懒性差异(P<0.05）。结论:下调Twist可抑制卵巢癌细胞A2780的增殖,促进其凋亡;下调Twist卵巢癌细胞A2780对顺铂的敏感性增加。     

敲低BTF3基因表达对膀胱癌细胞T24生物学功能的影响

目的:探究BTF3基因对人膀胱癌细胞株T24生物学功能的影响。方法:通过慢病毒感染的方法,构建BTF3基因低表达的T24细胞株。通过体外平板克隆实验检测克隆形成,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:RT-PCR和Western blotting证实BTF3低表达的T24细胞株构建成功。与对照组的细胞相比,敲低BTF3的表达能够抑制T24细胞克隆形成和细胞增殖,促进细胞凋亡。结论:我们的研究结果证明了BTF3在人膀胱癌细胞株T24中的重要性,提示BTF3不仅可能与膀胱癌的发生有关,而且可能成为膀胱癌潜在的治疗靶点和生物标记物。     

吉非替尼与紫杉醇联合对卵巢癌细胞凋亡影响的观察

目的:探讨吉非替尼联合紫杉醇诱导人卵巢癌细胞凋亡的影响。方法:吉非替尼单独或联合紫杉醇作用卵巢癌HO8910细胞,以蛋白质印迹法检测EGFR下游信号磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和细胞核增殖抗原(PCNA),以MTT法检测细胞增殖率,FCM法检测细胞周期分布和凋亡。结果:吉非替尼单用在0.25～4.00μmol/L浓度范围内呈浓度依赖性抑制卵巢癌HO8910细胞增殖,1.0μmol/L浓度单独作用24h则细胞周期主要分布于G1期,p-Akt、p-ERK和PCNA蛋白水平下降,72h时细胞凋亡增加,与对照组比较,差异均有统计学意义,P<0.05。吉非替尼与紫杉醇合用不仅能更显著的抑制细胞增殖,而且凋亡细胞显著增加(P<0.05),与对应浓度单用紫杉醇比较,差异均有统计学意义,P<0.05。结论:吉非替尼与紫杉醇合用能显著抑制卵巢癌HO8910细胞增殖、诱导凋亡,两种药物合用具有协同作用。     

硅和玻璃片基上的三维微结构对乳腺癌MCF-7细胞生长的影响

目的〖HT5"SS〗： 研究硅和玻璃片基上的三维微结构对乳腺癌MCF7细胞生长的影响。〖HT5W〗方法〖HT5"SS〗： 采用SU8光刻胶光刻微加工技术在硅和玻璃片基表面制造沟槽、五角星、齿轮状3种三维微结构,与乳腺癌MCF7细胞共培养,用倒置显微镜与扫描电镜观察三维微结构对肿瘤细胞的形态、分布、生长的影响,采用MTT法分析三维微结构对肿瘤细胞增殖的影响, 用流式细胞仪分析凋亡细胞。〖HT5W〗结果〖HT5"SS〗： 成功制作微米尺度带有不同深宽比的沟槽、五角星、齿轮。显微镜观察显示,MCF     

miR-144-3p靶向zeb1调控卵巢癌细胞SKOV3的增殖和凋亡

目的:探讨miR-144-3p是否通过靶向E盒锌指结合蛋白1（zeb1）调控卵巢癌细胞SKOV3的增殖和凋亡。方法:qRT-PCR检测miR-144-3p在卵巢癌细胞和正常人卵巢上皮细胞中的表达差异。在卵巢癌细胞SKOV3中转染miR-144-3p mimics,MTT法测定细胞增殖,PI单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中cyclinD1、p27、C-caspase-3蛋白表达。生物信息学软件预测miR-144-3p的靶基因可能为zeb1,荧光素酶报告系统鉴定其靶向关系。在卵巢癌细胞SKOV3中共转染miR-144-3p mimics、pcDNA3.1-zeb1,利用上述方法测定细胞增殖、周期和凋亡变化。结果:miR-144-3p在卵巢癌细胞中的表达水平低于正常人卵巢上皮细胞。转染miR-144-3p mimics后的卵巢癌细胞SKOV3增殖能力下降,细胞周期被阻滞在G1期,细胞凋亡增多,细胞中cyclinD1蛋白表达减少,p27、C-caspase-3蛋白表达增加。miR-144-3p靶向调控zeb1表达。pcDNA3.1-zeb1可以逆转miR-144-3p mimics对卵巢癌细胞增殖抑制、周期阻滞和凋亡促进作用。结论:miR-144-3p靶向zeb1抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖并诱导细胞凋亡。     

小檗胺对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制

目的:探讨小檗胺对胃癌细胞（AGS和SGC-7901）增殖、凋亡的影响并探讨其分子机制。方法:利用MTT 实验检测胃癌细胞的增殖,利用集落形成实验检测胃癌细胞的生长, 流式细胞技术检测胃癌细胞的凋亡率以及细胞周期, Western blot检测凋亡相关蛋白的表达水平。结果:小檗胺（0~64 μg/ml）能够剂量依赖性以及时间依赖性的抑制 AGS和SGC-7901细胞的增殖 （P＜0.05）。集落形成实验结果显示小檗胺(32 μg/ml)能够抑制AGS和SGC-7901细胞的生长 （P＜0.05）。流式细胞实验显示,小檗胺(32 μg/ml)同时能够促进AGS和SGC-7901细胞的凋亡 （P＜0.05）,增殖G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例 （P＜0.05）。Western blot实验结果显示小檗胺(32 μg/ml)能够增加AGS和SGC-7901细胞的cleaved caspase-3,cleaved caspase-9以及Bax的蛋白水平,同时降低Bcl-2的蛋白水平 （P＜0.05）。结论:小檗胺能够抑制胃癌细胞的增殖,其机制可能与改变细胞周期以及促进细胞凋亡有关。     

醋酸甲羟孕酮体外诱导卵巢癌SKOV-3细胞株凋亡的研究

目的:研究醋酸甲羟孕酮体外诱导卵巢癌SKOV-3细胞株凋亡的作用机制.方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度醋酸甲羟孕酮(1×10-4、1×10-3、1×10-2和1×10-1 mmol/L)和LY294002(PI3K抑制剂,1.4×10-3 mmol/L)对人卵巢上皮癌SKOV-3细胞株生长的抑制作用.蛋白质印迹法检测不同浓度醋酸甲羟孕酮作用下,细胞内Akt、p-Akt和Bcl-2蛋白表达水平的变化.结果:醋酸甲羟孕酮以剂量依赖方式抑制SKOV-3细胞的体外增殖(P<0.01),这种抑制作用可被LY294002所阻断.随着醋酸甲羟孕酮使用剂量的增大,SKOV-3细胞内p-Akt和Bcl-2蛋白表达水平逐步降低,P<0.05.与对照组相比,醋酸甲羟孕酮浓度为1×10-4 mmol/L时,p-Akt表达量下降约28%,Bcl-2表达量下降约10%;当醋酸甲羟孕酮浓度上升至1×10-1 mmol/L时,p-Akt表达量下降约35%,Bcl-2表达量下降约27%.不同药物浓度组间Akt表达水平差异无统计学意义,P>0.05.结论:醋酸甲羟孕酮能够体外诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡,可能与抑制Akt发生磷酸化相关.