甲状腺激素干预H-ras12V转基因肝癌小鼠对肝肿瘤的影响研究

目的 探讨甲状腺素（TH）水平对H-ras12V转基因肝癌小鼠肝肿瘤的影响。方法 将45只H-ras12V转基因肝癌小鼠随机分为甲状腺机能亢进症组、甲状腺机能减退症组和对照组,分别给予甲状腺素片、丙硫氧嘧啶片或蒸馏水灌胃制造不同的TH水平状态,待小鼠7月龄后,测量肝脏肿瘤指标。结果 甲状腺机能亢进症组小鼠血清T3和T4分别为（226.5±79.0） ng/dL,和（1.0±0.5） μg/dL,显著高于甲状腺机能减退症组【分别为（148.9±52.1） ng/dL和（0.8±0.4） μg/dL,P<0.05】,也显著高于对照组【分别为（175.3±63.9） ng/dL和（0.9±0.4） μg/dL,P<0.05】;甲状腺机能亢进症组小鼠游离T3和T4分别为（0.5±0.2） pmol/L和（4.3±1.4） pmol/L,显著高于甲状腺机能减退症组【分别为（0.3±0.1） pmol/L和（1.8±0.5） pmol/L,P<0.05】,也显著高于对照组【分别为（0.4±0.2） pmol/L和（1.9±0.7） pmol/L,P<0.05】;甲状腺机能亢进症组小鼠肿瘤数为（7.9±3.2）个,肿瘤直径超过2 mm的数量为（4.1±2.7）个,肝/体质量比为（8.6±2.4）,显著低于甲状腺机能减退症组【分别为（14.0±7.3）个、（9.9±4.8）个和（13.5±4.6）,P<0.05】,也显著低于对照组【分别为（11.4±5.3）个、（7.7±3.1）个和（11.3±3.5）,P<0.05】。结论 甲状腺素水平的高低能影响H-ras12V转基因肝癌小鼠肝脏肿瘤生长,甲状腺素可以有效抑制肿瘤的发展。     

自身免疫性肝炎患者肝组织程序性死亡受体1表达及其临床意义探讨*

目的 观察自身免疫性肝炎（AIH）患者肝组织程序性死亡受体1（PD-1）表达情况及其临床意义。方法 2015年5月~2017年4月我院收治的AIH患者68例（活动期48例,缓解期20例）,在超声引导下使用BARD一次性全自动活检枪行肝穿刺活检术取得肝组织。另选择同期肝血管瘤患者13例,经手术取得肝组织。采用ABC法检测肝组织PD-1表达。比较肝组织PD-1表达情况并采用Pearson相关分析其与血生化学和血清学指标的相关性。结果 48例活动期AIH患者血清TBIL、AST、ALT、ALP和GGT水平分别为（72.1±48.9） μmol/L、（243.1±170.4） U/L、（345.3±217.7） U/L、（154.3±94.6） U/L和（86.5±43.5） U/L,显著高于20例缓解期患者【分别为（14.8±4.2） μmol/L、（28.3±8.7） U/L、（27.6±8.8） U/L、（73.3±51.3） U/L和（71.3±27.3） U/L,P<0.05】;活动期患者血清GLO和IgG水平分别为（34.3±11.3） g/L和（23.2±7.5） g/L,显著高于缓解期【分别为（30.7±10.2） g/L和（11.7±4.6） g/L,P<0.05】; 68例AIH患者肝组织PD-1表达阳性率为（13.61±6.87）%,显著高于对照组的（2.25±0.68）%（P<0.05）,而48例活动期患者肝组织PD-1表达阳性率为（16.56±7.81）%,显著高于缓解期组的（6.56±3.21）%（P<0.05）;48例活动期患者肝组织界面性肝炎为93.75%,淋巴细胞浸润为89.58%,单管破坏性炎症为6.25%,而20例缓解期患者无界面性肝炎、淋巴细胞浸润或单管破坏性炎症表现;活动期AIH患者肝组织PD-1表达阳性率与血清TBIL （r=0.996,P<0.001）、AST（r=0.989,P<0.001）、ALT（r=0.995,P<0.001）、ALP（r=0.998,P<0.001）、GGT（r=0.995,P<0.001）、GLO（r=0.996,P<0.001）和IgG（r=0.997,P<0.001）均呈正相关,在缓解期AIH患者,肝组织PD-1表达阳性率与血清TBIL （r=0.999,P<0.001）、AST（r=0.999,P<0.001）、ALT（r=0.999,P<0.001）、ALP（r=0.999,P<0.001）、GGT（r=0.999,P<0.001）和IgG（r=0.999,P<0.001）呈正相关（P<0.001）。结论 AIH患者肝组织PD-1表达增强,与肝组织炎症活动度密切相关,其参与肝损伤的作用机制还需要进一步探讨。     

MiR-384对HFFA诱导的Hepa1-6细胞sirt3/FOXO1信号通路的影响*

目的 观察MiR-384对HFFA诱导的Hepa1-6细胞sirt3/FOXO1信号通路的影响。方法 取Hepa1-6细胞,加入OA和PA储存液,使两者终浓度分别为1 mmol/L和0.5 mmol/L,培养24 h,建立非酒精性脂肪性肝炎体外细胞模型。测定肝细胞内活性氧水平评估模型建立的情况。分别以miR-384模拟物、miR-ctrl、miR-384抑制剂、miR-384抑制剂-ctrl、沉默信息调节因子3（Sirt3）或si-ctrl转染细胞48 h。使用FCM测定各组细胞ROS水平,采用Western blot法检测各组细胞sirt3、FOXO1及抗氧化蛋白锰超氧化物歧化酶（MnSOD）和抗氧化蛋白过氧化氢酶（CAT）表达,采用专用试剂盒检测SOD和CAT活性。结果 与正常组（0.66±0.01）比,miR-384模拟物组和si-sirt3组细胞内活性氧（ROS）水平显著升高[分别为（37.3±1.13）和（10.4±0.36）,P<0.01];与HFFA组（29.4±0.98）比,HFFA/miR-384抑制剂组细胞 ROS水平显著降低[（12.8±0.41）,P<0.01];与正常组（0.75±0.04）Hepa1-6细胞sirt3蛋白表达水平比,HFFA组显著降低[（0.23±0.01）,P<0.01];与HFFA组比,HFFA/sirt3组显著增加[（0.83±0.03）,P<0.01];与HFFA/sirt3组比,HFFA/sirt3/miR-384组显著降低[（0.46±0.02）,P<0.01];与对照组比, miR-384模拟物组Hepa1-6细胞sirt3蛋白、Forkhead 转录因子O亚家族( FOXO)成员 FOXO1蛋白表达显著减少[分别为（0.2±0.01）和（0.3±0.01）,P<0.01],而CAT和MnSOD表达显著增加[分别为（2.3±0.05）和（2.4±0.06）,P<0.01];与HFFA组比,HFFA/ miR-384抑制剂组Hepa1-6细胞sirt3蛋白和FOXO1蛋白表达显著增加[分别为（0.5±0.02）和（0.7±0.01）,P <0.01],MnSOD和CAT表达水平显著降低[分别为（1.6±0.04）和（2.0±0.03）,P<0.01];与NAFLD组SOD（327±3.45）和CAT（386±4.03）活性比,正常组SOD和CAT[分别为（425±5.49）和（512±6.04）,P<0.01]和 miR-384抑制剂组SOD和CAT活性[分别为（406±4.79）和（447±5.38）,P<0.01]显著升高。结论 miR-384表达可导致HFFA诱导的Hepa1-6细胞氧化损伤加重,部分可能是通过抑制sirt3/FOXO1途径实现的。     

中药方剂赤白汤对D-氨基半乳糖诱导的急性肝衰竭小鼠肠道菌群的影响研究*

目的 探讨中药方剂赤白汤对急性肝衰竭小鼠肠道菌群的影响。方法 将48只小鼠随机分为正常组、模型组、大剂量中药组、中剂量中药组、小剂量中药组和丽珠肠乐组,每组8只。先给动物生理盐水、中药或丽珠肠乐灌胃8 d,采用D-氨基半乳糖/脂多糖腹腔注射诱导急性肝衰竭（ALF）。采用平板活菌计数法检测小鼠粪便肠道菌群。结果 模型组小鼠血清ALT水平为（1983.3±629.0） U/L,显著高于正常组[（36.9±7.5）U/L,P<0.001],肝脏指数为（6.7±0.6）%,显著高于正常组[（5.2±0.3）%,P<0.001],大肠杆菌为（8.7±0.5） lgCFU/粪便和肠球菌为（9.5±0.3） lgCFU/粪便,显著高于正常组[（7.6±0.9）lgCFU/粪便,P<0.01和（8.8±0.2） lgCFU/粪便,P<0.001],乳酸杆菌为（9.3±0.3） lgCFU/粪便和双歧杆菌为（10.1±0.4） lgCFU/粪便,显著低于正常组[（10.4±0.5） lgCFU/粪便,P<0.001和（11.2±0.5） lgCFU/粪便,P<0.001];与模型组比,大、中、小剂量中药和丽珠肠乐处理动物肝组织出血、坏死改善,肠道菌群部分恢复。结论 中药方剂赤白汤具有改善急性肝衰竭小鼠肝功能和肠道菌群紊乱的作用。     

肝脏CT三维重建评估肝门部胆管癌根治术临床应用研究*

目的 探讨CT三维重建评估在肝门部胆管癌根治术中的临床应用价值。方法 回顾性分析2013年1月~2017年1月收治的33例肝门部胆管癌（HCCA）患者的临床资料,19例术前采用CT三维重建评估,14例术前经CT检查评估。将CT检查数据导入3D-liver三维重建软件,建立肝脏三维模型。结果 19例三维重建组患者行R0切除12例（63.2%）,14例对照组R0切除6例（42.9%,P<0.05）;术中出血量分别为（425.3±124.5）ml和（539.4±234.7）ml（P<0.05）;手术时间分别为（3.2±1.3） h和（4.1±2.5） h（P<0.05）;术后住院时间分别为（11.7±4.8）d和（13.9±5.4）d （P<0.05）;术后并发症发生率分别为10%和12%（P>0.05）。结论 CT三维重建评估HCCA肿瘤侵犯、肝血管变异和受累情况,制定恰当的肝切除手术预案,能提高肿瘤R0切除率,减少术中出血量和手术时间。     

复方鳖甲软肝片对二乙基亚硝胺所致原发性肝癌大鼠肝组织PCNA和α-SMA表达的影响*

目的 研究复方鳖甲软肝片对二乙基亚硝胺（DEN）所致原发性肝癌大鼠肝癌组织增殖细胞核抗原（PCNA）和平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。方法 将40只SD大鼠随机平均分为对照组、模型组、大剂量和小剂量复方鳖甲软肝片处理组,每组均为10只。应用DEN注射法制备原发性肝癌模型,分别给予复方鳖甲软肝片0.625 g.kg^-1和1.25 g.kg^-1或生理盐水灌胃,连续给药20周。采用免疫组化法检测肝组织PCNA和α-SMA表达。结果 大剂量组肝脏质量、肝脏癌变率、肝脏指数和肝表面癌结节数分别为（17.34±1.78）g、10.0%、（3.10±0.72）和（3.16±0.45）个,显著低于模型组 【（25.59±2.38） g、100.0%、（4.95±0.58）和（14.14±2.37）个,P<0.05】;小剂量组肝脏质量、肝脏癌变率、肝脏指数和肝表面癌结节数分别为（19.89±1.80）g、30.0%、（3.89±0.81）和（7.38±1.01）个,也显著低于模型组（P<0.05）;大剂量组PCNA和α-SMA相对表达量分别为（5.98±1.12）和（7.96±1.37）,小剂量组分别为（9.23±1.34）和（12.34±2.88）,均分别明显低于模型组【（19.59±2.67）和（25.12±3.19）,P<0.05】。结论 复方鳖甲软肝片对DEN所致原发性肝癌大鼠具有较好的防治作用,可能是通过调节肝组织PCNA和α-SMA表达发挥作用的。     

let-7a调控自噬对缺氧状态下原发性肝癌HCCLM3细胞增殖的影响*

目的 探讨let-7a调控自噬对缺氧状态下原发性肝癌HCCLM3细胞增殖的影响。方法 将HCCLM3细胞分为常氧组、缺氧组和缺氧let-7a组,分别给予不同的处理。各组设6个平行孔,培养72 h。采用吖啶橙染液法测定HCCLM3细胞自噬率,采用MTT法检测HCCLM3细胞活力,使用流式细胞仪分析HCCLM3细胞周期G1,采用酶联免疫吸附法测定培养上清let-7a、细胞周期D1蛋白（cyc D1）和血管内皮生长因子（VEGF）水平。结果 缺氧let-7a组细胞存活率为（49.7±9.5）%,显著低于常氧组或缺氧组的（100.0±0.0）%或（119.1±13.1）%（P<0.05）,缺氧组细胞存活率显著高于常氧组（P<0.05）;缺氧let-7a组细胞周期G1期和细胞自噬率分别为（89.6±16.1）%和（49.3±7.4）%,显著高于常氧组或缺氧组的（56.3±11.0）%和（13.2±8.1）%或（69.7±14.1）%和（23.5±5.5）%（P<0.05）,缺氧组细胞周期G1期和自噬率显著高于常氧组（P<0.05）;缺氧let-7a组细胞let-7a蛋白水平为（96.1±9.3） μmol/L,显著高于常氧组或缺氧组的（33.4±7.1）μmol/L或（65.3±5.2）μmol/L（P<0.05）,cyc D1和VEGF水平分别为（72.3±8.8）μmol/L和（56.3±6.3）μmol/L,显著低于常氧组或缺氧组的（124.1±7.2）μmol/L和（114.1±5.2） μmol/L或（98.2±6.7） μmol/L和（85.2±8.1）μmol/L（P<0.05）,缺氧组let-7a蛋白显著低于常氧组（P<0.05）,cyc D1和VEGF显著高于常氧组（P<0.05）。结论 上调let-7a在肝癌HCCLM3细胞的表达能诱发细胞自噬,使得细胞在G1期往S期的分化过程发生障碍,抑制细胞在缺氧环境中的增殖,其机制可能与细胞CYC D1和VEGF表达下调有关。     

白藜芦醇对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织SIRT3表达的影响*

目的 研究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织沉默交配型信息调节因子2同源蛋白3（SIRT3）的表达变化,探讨其在NASH发病中的作用及白藜芦醇对其的影响。方法 60只SD大鼠被随机分为正常对照组、NASH模型组和白藜芦醇处理组,每组20只。采用高脂饲料喂养建立NASH大鼠模型。制备新鲜肝组织匀浆,检测肝组织内活性氧（ROS）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。常规检查肝组织病理学变化和超微结构的变化。采用免疫组化法分析SIRT3蛋白的亚细胞定位,采用Western Blot定量检测SIRT3蛋白的表达。结果 模型组大鼠肝指数、血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C含量和氧化应激水平显著高于对照组（P<0.01）,药物处理组显著低于模型组（P<0.01）;模型组大鼠非酒精性脂肪性肝病活动性评分（NAS）为（6.83±0.41）分,显著高于对照组[（0.24±0.08）分,P<0.01],处理组为（3.27±0.29）分,显著低于模型组（P<0.01）;模型组大鼠肝细胞线粒体半定量评分为（3.24±0.21）分,显著高于对照组[（0.17±0.03）分,P<0.01],处理组为（1.39±0.12）分,显著低于模型组（P<0.01）;免疫组化检测显示SIRT3蛋白在细胞核和细胞质中均有表达,模型组SIRT3蛋白相对表达量为（0.24±0.03）,显著低于对照组[（0.58±0.02）,P<0.01],而处理组为（0.46±0.03）,显著高于模型组（P<0.01）。结论 NASH大鼠肝组织SIRT3表达量下降,白藜芦醇干预可通过上调SIRT3的表达改善NASH病理学变化。     

Orionin对急性肝衰竭小鼠的保护作用及其对肝组织细胞因子水平的影响*

目的 探讨冬凌草甲素（Oridonin）对脂多糖/D-氨基半乳糖氨（LPS/D-Gal）联合诱导的急性肝衰竭（ALF）小鼠的保护作用及其对肝组织细胞因子水平的影响。方法 取150只小鼠,随机分成5组,每组 30 只。采用LPS/D-Gal腹腔注射建立小鼠ALF模型,设生理盐水对照组、Oridonin对照组、LPS/D-Gal诱导模型组和LPS/D-Gal处理及不同剂量Oridonin干预组。采用Real-time PCR法检测肝组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1α、IL-1β和IL-6 mRNA水平。结果 模型组小鼠48 h存活率为0.0% （0/30）,而两个Oridonin干预组小鼠48 h存活率分别提高至64.5% （19/30）和80.6% （24/30,P<0.01）; 组织病理学检查显示模型组小鼠肝细胞呈大块或/和亚大块坏死,肝小叶结构消失,残存肝细胞肿胀、空泡变性,肝窦肿胀充血,炎细胞浸润。Oridonin干预组小鼠肝细胞坏死、空泡变性和炎细胞浸润等较模型组有明显的改善;模型组小鼠血清ALT和AST水平分别为（345.3 ± 54.1） U/L和（500.2±53.5） U/L,明显高于对照组的[（42.3±0.6）U/L和（117.1±9.8）U/L,P<0.01],两个Oridonin干预组分别为 （303.9±39.5） U/L和（340.6±2.8） U/L及[（130.2±38.3） U/L和 （209.8±36.2） U/L,P<0.05];模型组小鼠肝组织TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6 mRNA水平显著高于正常对照组（P<0.01）,而两个Oridonin干预组肝组织TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6 mRNA水平显著低于模型组 （P<0.01）。结论 Oridonin对LPS/D-Gal诱导的ALF小鼠具有显著的保护作用,其作用机制可能与降低肝组织细胞因子水平有关。     

非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织脯氨酰内肽酶蛋白及其活性变化*

目的 观察高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）小鼠肝脏脯氨酰内肽酶（PREP）蛋白水平及活性的变化。方法 随机将40只雄性C57BL/6J小鼠分成普通饲料和高脂饲料喂养组,分别在喂养4 w和16 w处死小鼠。检测血生化指标,观察肝组织病理学变化并计算NAFLD活动度积分（NAS）;采用荧光定量PCR法、Western blot法和Suc-Gly-Pro-AMC底物法分别检测肝组织PREP mRNA、蛋白水平和活性变化。结果 在高脂饮食喂养4 w,模型组小鼠肝细胞出现轻度脂肪变,NAS积分为（3.43±0.79）,较对照组显著升高;在高脂饮食喂养16 w,模型组小鼠体质量、肝指数、ALT、甘油三脂、总胆固醇和空腹血糖分别为（32.93±2.72）g、（4.64±0.46）%、（53.64±22.01） IU/L、（1.18±0.17） mmol/L、（4.34±0.44） mmol/L和（5.67±0.87） mmol/L,显著高于对照组【分别为（28.19±1.23）g、（4.02±0.11）%、（28.60±4.01） IU/L、（0.99±0.15） mmol/L、（2.94±0.18） mmol/L和（4.26±0.65） mmol/L,P<0.05】;模型组肝组织NAS积分为（5.60±1.43）,显著高于对照组【（0.40±0.70）,P<0.01】; PREP蛋白水平与对照组相比无显著性差异,但PREP mRNA水平和酶活性分别为对照组的（1.81±0.34）倍（P<0.01）和（1.36±1.78）倍（P<0.05）。结论 小鼠肝组织PREP活性变化可能参与了小鼠非酒精性单纯性脂肪肝向脂肪性肝炎的转变。     

经皮经肝胆囊穿刺引流术联合延期胆囊切除术治疗急性胆囊炎患者近期疗效研究*

目的 观察经皮经肝胆囊穿刺引流术（PTGBD）联合延期腹腔镜胆囊切除术（LC）治疗急性胆囊炎患者的近期临床效果。方法 2015年8月~2017年8月我院收治的94例急性胆囊炎患者被分为两组,47例观察组患者采取PTGBD联合延期LC治疗,另47例对照组采取急诊LC治疗。结果 观察组 手术时间为（83.2±34.1） min,显著短于对照组【（119.0±36.4） min,P<0.05】,手术失血量为（33.7±15.5） ml,显著少于对照组【（60.4±16.7） ml,P<0.05】,术后肛门排气时间为（23.5±6.6） h,显著短于对照组【（27.2±5.1） h,P<0.05】,术后腹腔引流时间为（3.4±2.0） d,显著短于对照组【（9.1±3.1）d,P<0.05】,而总住院时间为（11.2±4.7） d,显著长于对照组【（8.3±3.0）d,P<0.05】;观察组腔镜中转开腹率和直接开腹率分别为4.3%和0.0%,显著低于对照组的17.0%和12.8%（P<0.05）;术后72 h,观察组白细胞计数、谷丙转氨酶、谷草转氨酶和总胆红素水平显著低于对照组（P<0.05）;观察组短期并发症发生率为8.5%,显著低于对照组的29.8%（P<0.05）。结论 采取PTGBD联合延期LC治疗急性胆囊炎患者临床疗效确切,可有效降低腔镜手术中转开腹率和术后并发症发生率,临床上应尽量避免急诊行LC手术。     

血浆置换联合连续性血浆透析滤过治疗慢加急性肝衰竭患者临床疗效及其对血浆细胞因子水平的影响

目的 研究使用连续性血浆透析滤过（CPDF）和血浆置换（PE）治疗慢加急性肝衰竭（ACLF）患者的临床疗效及其对血浆细胞因子水平的影响。方法 2012年3月~2017年4月西京医院收治的ACLF患者92例,其中46例接受常规护肝和支持治疗,另46例观察组在常规治疗的基础上联合使用CPDF和PE治疗。采用ELISA法检测血清细胞因子水平,采用脂多糖法测定血清内毒素水平,使用L-8800氨基酸自动检测仪测定血清芳香族和支链氨基酸水平。结果 在治疗后,观察组血清凝血酶原时间国际标准化比值（INR）和总胆红素（TBIL）水平显著低于,而血清白蛋白（ALB）水平显著高于对照组（P<0.05）;观察组血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素（IL）-6和IL-8水平显著低于对照组[分别为（68.9±43.3） pg/ml对（89.7±39.5） pg/ml、（53.3±39.7） pg/ml 对（69.4±41.2） pg/ml和（271.7±135.4） pg/ml 对 （307.6±147.2） pg/ml,P<0.05];观察组血清内毒素水平为0.2（0.2,0.4） EU/ml,显著低于对照组【1.1（0.8,1.7） EU/mL,P<0.05】,血氨水平为（64.8±19.4） μg/L,显著低于对照组【（80.3±31.1） μg/L,P<0.05】,芳香氨基酸水平为2.1（1.5,2.7） mg/dL,显著低于对照组【（2.3（1.8,2.5） mg/dL,P<0.05】,而支链氨基酸水平为（2.6±0.5）mg/dL,显著高于对照组【（2.1±0.1） mg/dL,P<0.05】;在治疗6个月末,观察组死亡15例（32.6%）,而对照组死亡20例（43.5%,P>0.05）。结论 使用PE联合CPDF治疗ACLF患者能降低血清毒素和细胞因子水平,短期改善肝功能指标,但是否能提高患者生存率,还需要继续研究。     

自体外周血干细胞移植治疗乙型肝炎肝硬化患者临床疗效及其对外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的 研究应用自体外周血干细胞（PBSC）移植治疗乙型肝炎肝硬化患者的临床疗效及其对外周血T淋巴细胞亚群的影响。方法 2014年4月~2017年4月我院收治的乙型肝炎肝硬化患者95例,被随机分为移植组48例和对照组47例。两组均接受护肝、降酶和恩替卡韦抗病毒治疗,另48例患者再接受自体PBSC经肝动脉移植治疗。使用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群,使用Fibroscan扫描仪检测肝脏硬度,采用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-6 （IL-6）,采用免疫透射比浊法检测血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）。结果 在治疗后6 m,移植组患者血清总胆红素（TBIL）水平为（16.4±1.2） μmol/L,显著低于对照组的（22.5±2.6） μmol/L（P<0.05）,血清白蛋白（ALB）水平为（35.2±4.0） g/L,显著高于对照组的（31.6±3.7） g/L（P<0.05）;移植组外周血CD3⁺细胞百分比为（67.9±6.5） %,显著高于对照组的【（60.3±5.5） %,P<0.05】,CD4⁺为（42.7±3.8） %,显著高于对照组的【（38.2±3.5） %,P<0.05】,CD4⁺/ CD8⁺细胞比值为（1.5±0.2）,显著高于对照组的【（1.4±0.1）,P<0.05】;移植组肝硬度值为（7.1±0.1）kPa,显著低于对照组[（7.9±0.1） kPa,P<0.05],Child-Pugh评分为（5.5±1.5）,显著低于对照组[（7.4±2.3）,P<0.05];移植组血清TNF-α水平为（28.0±8.7） pg/mL,显著低于对照组[（36.2±8.6）pg/mL,P<0.05], IL-6水平为（6.0±2.2） mg/L,显著低于对照组[（8.7±3.5） mg/L,P<0.05], hs-CRP水平为（18.9±5.6） pg/mL,显著低于对照组[（25.2±7.9） pg/mL,P<0.05]。结论 自体外周血干细胞移植治疗乙型肝炎肝硬化患者近期疗效较好,能有效降低血清细胞因子水平,改善肝功能。     

胆管细胞癌细胞CD147表达及其临床意义*

目的 探讨CD147在肝胆管结石并发胆管细胞癌（ICC）组织的表达及其临床意义。方法 收集肝胆管结石并发ICC标本30例、对应的癌旁肝组织标本30例和正常肝标本10例。采用qRT-PCR法检测组织CD147 mRNA水平,采用免疫组化法检测CD147蛋白的表达;采用Western-Blotting法检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和9（MMP-9）蛋白的表达;采用肯德尔（Kendall）等级相关分析CD147 mRNA、CD147、MMP-2和MMP-9表达的相关性。结果 经qRT-PCR检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147mRNA水平为（3.67±1.88）,显著高于癌旁组织【（1.52±0.57）,P<0.01】和正常肝组织【（1.05±0.32）,P<0.01】,癌旁组织高于正常肝组织（P<0.01）;>5 cm ICC组织CD147 mRNA相对水平（2.73±0.97）显著高于<5 cm肿瘤组织【（1.03±0.32）,P<0.01】,有淋巴转移（2.68±0.74）组织显著高于无转移组织【（1.07±0.44）,P<0.01】,肿瘤分化程度低组织（2.71±0.86）显著高于中高分化组织【（1.06±0.42）,P<0.01】;不同年龄和性别患者ICC组织CD147 mRNA水平无显著性差异（P>0.05);经免疫组化检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147蛋白表达相对水平为（27.95±4.90）,显著高于癌旁组织【（13.34±9.59）,P<0.01】和正常肝组织【（2.18±0.66）,P<0.01】,而癌旁组织高于正常肝组织（P<0.01）;ICC组织MMP2表达量为（1.06±0.13）,显著高于癌旁组织【（0.20±0.03）,P<0.01】和正常肝组织【（0.15±0.02）,P<0.01】,而癌旁组织MMP2表达量显著高于正常肝组织（P<0.01）;肝胆管结石并发ICC组织MMP9表达量为（0.93±0.12）,显著高于癌旁组织【（0.17±0.03）,P<0.01】和正常肝组织【（0.15±0.03）,P<0.01】,而癌旁组织MMP9表达量显著高于正常肝组织（P<0.01）;在ICC组织中,CD147mRNA水平与MMP2蛋白表达呈正相关（r=0.457,P<0.05）;CD147mRNA水平与MMP9蛋白表达也呈正相关（r=0.428,P<0.05）;CD147蛋白与MMP2蛋白表达呈正相关（r=0.543,P<0.05）,CD147蛋白与MMP9蛋白表达也呈正相关（r=0.517,P=0.05）。结论 CD147 mRNA、CD147、MMP2、MMP9均在肝胆管结石并发ICC组织中表达增强,CD147的表达可能促进了MMP2和MMP9的表达上调,它们可能共同参与了胆管癌的发生和发展过程。     

甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织AMPK信号通路的影响*

目的 研究甘草酸二铵脂质配位体（DGLL）对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法 以高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,在造模成功后分别给予DGLL或多烯磷脂酰胆碱（PPC）灌胃16周。采用免疫组化法检测肝组织磷酸化的磷酸腺苷激活蛋白激酶α（P-AMPKα）蛋白表达,采用Real-time PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-1）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）、酰基辅酶A氧化酶（ACO）、肝脏型脂肪酸结合蛋白（L-FABP）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）mRNA。结果 DGLL组血清瘦素为（3.87±0.38）ng/ml,显著低于模型组【（4.68±0.39）ng/ml,P<0.01】或PPC组【（4.55±0.24）ng/ml,P<0.01】;DGLL组脂联素为（12.27±0.64）μg/ml,显著高于模型组【（10.46±0.28）μg/ml,P<0.01】,但与PPC组【（12.13±0.56）μg/ml,P>0.05】比,无统计学差异;DGLL组大鼠肝组织P-AMPKα蛋白阳性表达面积为（8.38±3.27）%,显著高于模型组【（1.81±0.90）%,P<0.01】或PPC组【（5.50±0.73）%,P<0.05】;DGLL组肝组织PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 mRNA水平分别为（1.07±0.14、0.91±0.05、1.61±0.54）,显著高于模型组【分别为（0.26±0.12、0.14±0.01、0.10±0.03,P<0.05】,但ACO mRNA水平（0.23±0.09）与模型组比,无统计学差异【（0.24±0.02）,P>0.05】;PPC组PPAR-γ和CPT-1 mRNA水平分别为（0.65±0.16）和（0.22±0.05）,显著低于DGLL组（P<0.05）,而GLUT-4和ACO mRNA水平（1.32±0.12和0.14±0.05）与DGLL组比,无统计学差异（P>0.05）;DGLL组肝组织ACC mRNA水平为（1.67±0.23）,显著低于模型组【（3.31±0.02）,P<0.05】或PPC组【（2.69±0.14）,P<0.05】;DGLL组L-FABP mRNA水平为（1.06±0.04）,显著低于模型组【（1.26±0.02）,P<0.05】,而与PPC组【（1.06±0.09）,P>0.05】比,无统计学差异。结论 DGLL能降低NAFLD大鼠血脂、血糖、胰岛素、HOMA-IR、瘦素水平,升高脂联素,并增加肝组织P-AMPKα蛋白表达,上调PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 mRNA水平、下调L-FABP和ACC mRNA水平,这些作用可能与其激活AMPK通路和改善NAFLD糖脂代谢紊乱有关。     

椎旁阻滞联合全身麻醉在肝血管瘤切除术中的应用和效果研究

目的 研究椎旁阻滞联合全身麻醉在预防肝血管瘤切除患者术后疼痛的效果。方法 2014年6月~2016年12月收治的肝血管瘤患者123例,采用数字奇偶法分为观察组62例和对照组61例,在行手术切除肿瘤时分别采用全身麻醉联合椎旁阻滞麻醉或仅采取全身麻醉。采用视觉模拟疼痛评分法（VAS）测定疼痛程度,采用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和可溶性髓样细胞触发受体-1（sTREM-1）。结果 术后3 h、24 h和48 h,观察组VAS评分分别为（3.6±1.1）分、（3.1±0.9）分和（2.9±0.7）分,显著低于对照组【分别为（4.5±1.5）分、（3.8±1.2）分和（3.5±1.0）,P<0.05】;术后24 h和72 h,观察组血清TNF-α水平分别为（135.1±21.8） pg/mL和（99.3±18.2） pg/ml,显著低于对照组【（230.5±32.1） pg/ml和（183.7±22.7） pg/ml,P<0.05】,血清sTREM-1水平分别为（215.9±29.6） pg/ml和（168.5±25.3） pg/ml,显著低于对照组【（295.4±41.6） pg/ml和（241.8±27.4） pg/ml,P<0.05】;观察组术后拔管时间为（5.3±1.9）h,显著短于对照组【（6.3±2.1） h,P<0.05】,住ICU时间为（25.5±8.6） h,明显短于对照组【（31.6±9.8） h,P<0.05】,住院日为（9.4±2.1） d,明显短于对照组【（10.6±2.4） d,P<0.05】,舒芬太尼用量为（1.5±0.3） mg,明显低于对照组【（2.5±0.4） mg,P<0.05】;术后恢复进食时间为（2.3±0.5） d,明显短于对照组【（3.5±0.6） d,P<0.05】;观察组疼痛相关不良事件发生率为16.2%,明显低于对照组的34.4%（P<0.05）。结论 在全身麻醉的基础上增加椎旁阻滞麻醉有助于减轻肝血管瘤切除患者术后疼痛程度,减少疼痛相关不良事件,促进康复。     

聚乙二醇化干扰素α-2a联合利巴韦林治疗代偿期丙型肝炎肝硬化患者临床疗效研究*

目的 探讨应用聚乙二醇化干扰素α-2a联合利巴韦林治疗代偿期丙型肝炎肝硬化患者的临床疗效。方法 2003年1月~2016年12月我院就诊的代偿期丙型肝炎肝硬化患者122例,采用随机数字表法分成两组,每组61例。给予对照组常规护肝治疗,给予观察组聚乙二醇化干扰素α-2a联合利巴韦林治疗24~48 w。随访两组24 w。采用实时荧光定量RT-PCR法检测血清HCV RNA,采用全自动生化分析仪检测血生化指标,采用化学发光法检测血清层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PC Ⅲ）、透明质酸（HA）,常规使用Fibroscan行肝脏硬度检测（LSM）。结果 在治疗结束时,观察组血清HCV RNA水平为（2.0±0.4） lg IU/ml,显著低于对照组【（3.8±1.3）lg IU/ml,P<0.05】;血清AST和ALT水平分别（46.03±24.05） U/L和（36.32±20.1） U/L,显著低于对照组【（78.7±21.1） U/L和（51.2±20.9） U/L,P<0.05）;观察组血清LN、PCⅢ和HA水平分别为（126.3±29.0）μg/L、（212.3±43.8）μg/L和（211.4±42.0）μg/L,均显著低于对照组【（140.3±32.1）μg/L、（267.5±39.8）μg/L和（329.6±68.4）μg/L,P<0.05】;观察组LSM为（13.6±2.4） kPa,显著低于对照组【（17.6±5.2）kPa,P<0.05】;在随访时发现,观察组血清ALT复常率和持续病毒学应答率（SVR）均显著高于对照组（分别为93.4%对45.9%和72.1%对9.8%,P<0.05）,而疾病进展发生率为3.3%,显著低于对照组的13.1%（P<0.05）。结论 应用聚乙二醇化干扰素α-2a联合利巴韦林抗病毒治疗代偿期丙型肝炎肝硬化患者可显著提高SVR,延缓肝纤维化进展,稳定肝功能指标。     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清角蛋白18水平及其与患者预后的关系探讨*

目的 探讨乙型肝炎病毒相关性慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF）患者血清角蛋白18（K-18）水平变化及其对患者预后的预测价值。方法 2015年1月~2017年1月我院收治的HBV-ACLF患者100例,另选择性别和年龄相匹配的慢性乙型肝炎（CHB）患者30例和健康人30例。采用酶联免疫吸附试验法检测血清K18（M30和M65）水平。随访3 m。应用受试者工作特征曲线（ROC）分析M30/M65比值和终末期肝病模型（MELD）预测患者预后的效能。结果 ACLF患者血清M30、M65水平和M30/M65比值分别为（1.0±0.1） lg U/L、（3.4±0.3） lg U/L和（0.3±0.1）,与CHB患者【分别为（2.1±0.1） lg U/L、（3.3±0.2） lg U/L和（0.6±0.0）】或者健康人【分别为（2.1±0.1） lg U/L、（2.1±0.1） lg U/L和（1.0±0.2）】比,有显著性统计学差异（P<0.05）;68例生存患者MELD评分为（18.2±.0）,显著低于32例死亡患者的【（26.1±3.3）,P<0.05】,血清M65水平为（2.9±0.2） lg U/L,显著低于死亡患者的【（4.1±0.5） lg U/L,P<0.05】,M30/M65比值为（0.4±0.1）,显著高于死亡患者的【（0.2±0.1）,P<0.05】;MELD评分预测ACLF患者死亡的截断点为23.21,其AUC为0.650,预测的灵敏度、特异度和正确性分别为85.5%、65.0%和72.0%,而M30/M65比值预测ACLF患者死亡的截断点为0.30,其AUC为0.875,预测的灵敏度、特异度和正确性分别为94.5%、85.0%和85.0%,显著优于MELD评分（P<0.05）。结论 K18（M30和M65）与肝脏疾病的严重程度有关。早期检测血清M30和M65水平可能有助于对HBV-ACLF患者预后的判断。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠内生性乙醇和肝组织乙醇代谢相关酶的变化*

目的 观察高脂饮食和高果糖饮食对大鼠肝脏病理、内生性乙醇、乙醇代谢酶的影响。方法 将SD大鼠18只随机分为正常组（n=6）,予以普通饲料喂养,高果糖组（n=6）接受普通饲料和含20%果糖水喂养,高脂组（n=6）接受高脂饲料喂养。造模16 w后,取肝组织进行非酒精性脂肪性肝病活动性评分（NAS）;采用Biovison试剂盒检测门静脉血乙醇水平;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织乙醇脱氢酶（ADH1）和乙醛脱氢酶（ALDH2）mRNA水平;采用Western blot法测定肝组织ADH1和ALDH2蛋白表达水平;使用乙醇脱氢酶活性试剂盒测定肝组织匀浆乙醇脱氢酶活性。结果 在16 w末,高果糖组大鼠肝组织表现为脂肪变性,高脂组大鼠肝组织主要表现为NASH;高脂组大鼠NAS评分为5.40±0.32,显著高于对照组【（1.10±0.25）,P<0.05】和高果糖组【（2.94±0.40）,P<0.05】 ;高脂组大鼠血清内生性乙醇水平【（1.30±0.15）nmol/μL】显著高于正常组【（1.00±0.10）nmol/μL,P<0.05）】和高果糖组【（1.04±0.23）nmol/μL,P<0.05）】;高脂组大鼠ADH1 mRNA水平显著高于正常组（（1.30倍,P<0.05）和高果糖组（1.36倍,P<0.05）;高脂组大鼠ALDH2mRNA水平显著高于正常组（1.55倍,P<0.05）和高果糖组（1.44倍,P<0.05）;高脂组大鼠ADH1蛋白表达显著高于正常组（2.56倍,P<0.05）和高果糖组（2.52倍,P<0.05）;高脂组大鼠ALDH2蛋白表达显著高于正常组（1.41倍,P<0.05）和高果糖组（1.57倍,P<0.05）;高脂组大鼠肝脏乙醇脱氢酶活性为（175±28）μ/L,显著高于正常组【（72±13）μ/L,P<0.05）】和高果糖组【( 78±9)μ/L,P<0.05）】。结论 高脂饮食造模大鼠内生性乙醇浓度显著升高,乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶蛋白水平升高,乙醇脱氢酶活性显著升高。     

慢性乙型肝炎与慢性丙型肝炎患者临床和肝组织病理学特征分析

目的 分析慢性乙型肝炎（CHB）与慢性丙型肝炎（CHC）患者临床特征及肝组织病理学表现的差异。方法 2013年~2017年我院诊治的CHB患者300例和CHC患者100例,收集临床资料并行肝活检组织病理学检查。结果 本组资料显示,CHC患者年龄显著大于【（47.6±12.8）岁对（36.3±9.7）岁】、病程显著长于【（13.1±0.9）年对（6.2±1.8）年】、基础疾病显著多于（39.0%对18.7%）、经血感染显著多于（63.0%对36.7%）、母婴传播显著少于（3.0%对29.7%）、吸毒感染显著多于（40.0%对7.0%）和性传播显著少于（14.0%对26.7%）CHB患者（P<0.05）;CHB患者血清ALT水平为（76.5±10.8） U/L,AST水平为（111.2±21.3） U/L,与CHC患者的【（105.2±20.8） U/L和（98.3±20.1） U/L】比,差异显著（P<0.05）;CHC患者肝组织炎症分级>G2者为83.0%,显著高于CHB患者的48.7%（P<0.05）,而肝纤维化分期>S2者为65.0%,也显著高于CHB患者的28.3%（P<0.05）。结论 CHC患者由于病程长,发病隐匿,肝组织损伤更明显,需要积极的治疗。