液相色谱-质谱联用在药物代谢研究中的应用

目的:介绍液相色谱-质谱联用技术在药物代谢研究中的应用进展。方法:以国内外大量有代表性的论文为依据,进行分析、整理和归纳。结果:该项技术是一种快速、微量、专属、准确的分析和鉴定代谢物最有效的方法之一,可以快速获得化合物的大量信息,已成为药物代谢及新药研究的重要工具。结论:该项技术在高通量快速筛选、寻找先导化合物以及新药研究等方面发挥重要作用。     

液相色谱-质谱联用技术在体内药物代谢分析研究领域的应用

目的探讨液相色谱-谱联用（LC-S）技术在体内药物代谢分析研究领域中的应用。方法查阅文献，综述液质联用技术在体内药物代谢分析研究中的应用情况。结果随着各种软离子化技术，特别是电喷雾、离子喷雾、大气压化学电离的引入，LC-S技术对高极性化合物的分析具独特优势，在药物代谢分析研究中发挥着日趋重要的作用，在很大程度上替代了传统的气质联用技术，简化了样品（特别是结合型代谢物）的处理过程。结论LC-S技术在中药、抗菌药物、呼吸系统及抗变态反应药、循环系统药物及其代谢物的分析检测中应用广泛．     

液相色谱-质谱-质谱联用法测定人血浆中阿德福韦的浓度

目的:建立快速、灵敏的液相色谱-质谱-质谱联用(LC-MS-MS)法测定人血浆中阿德福韦的浓度,并研究其在中国男性健康志愿者人体内的药动学。方法:以乙腈-0.1%甲酸为流动相,采用梯度洗脱,以5-溴尿嘧啶为内标。血浆样品经乙腈沉淀蛋白后用二氯甲烷提取,经ZorbaxXDB-C8柱分离后,通过电喷雾离子化三重四极杆串联质谱仪,以多反应检测(MRM)方式进行测定。结果:阿德福韦的线性范围为0.167～83.3μg.L-1(r=0.9989),平均相对回收率在88.3%～110.0%之间,日内、日间精密度的RSD均小于12%,阿德福韦的定量下限为0.167μg.L-1。结论:该方法具有快速、准确、灵敏等优点,适用于阿德福韦的药动学研究。     

液相色谱-质谱联用技术在体外药物代谢物筛查中的应用

高效液相色谱与质谱联用技术已是现代药物发现中药物代谢产物筛查和鉴定最强大的分析手段,可以从品种繁多的样品中得到丰富的信息。本文关注这些技术在体外代谢研究中的应用,尤其是在筛查和鉴定生物转化形成的化学稳定代谢产物或反应性代谢产物方面的应用。为满足指定检测任务需审慎考虑选择合适的检测仪器,在代谢产物筛查中飞行时间质谱和静电场轨道阱质谱检测效率明显高于其他类型质谱。     

液相色谱-质谱／质谱联用法测定健康志愿者血清中阿德福韦

目的:建立测定人血清中阿德福韦的液相色谱-质谱/质谱联用(LC～MS/MS)方法。方法:血清样品经甲醇沉淀蛋白,上清液吹干,200μL流动相复溶,离心,取40μL进样。色谱柱为 Diamonsil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(20:80:0.1,v/v/v),流速0.6 mL·min~(-1),采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应监测方式测定样品浓度。监测离子对分别为 m/z274→m/z162(阿德福韦)和 m/z226→m/z135(内标阿昔洛韦)。结果:阿德福韦在1.25～160μg·L~(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.9992,n=5),最低定量限为1.25μg·L~(-1)。低、中、高3种浓度质控样品的日内、日间精密度小于8.64%,方法回收率99.20%～101.98%,阿德福韦提取回收率56.50%～59.26%。结论:该方法灵敏度高,定量准确,适用于阿德福韦酯人体药代动力学研究。     

色谱-质谱联用技术在中药代谢研究中的应用

色谱-质谱联用技术作为一种具分离和鉴别为一体的分析方法,应用于中药单体及其复方成分代谢的研究中,开创了中药药代动力学研究的新思路。     

代谢组学技术在乳腺癌标志物筛选中的应用进展

代谢组学是“后基因组学”时期的一门新兴学科,其同基因组学、转录组学、蛋白质组学共同构成了系统生物学的核心内容。代谢组学对生物体系在生理或病理状态下所有内源性小分子代谢产物的动态变化进行分析,从而探索内源性小分子物质与疾病发生发展间的关系。目前,代谢组学被广泛应用于肿瘤标志物筛选、疾病诊断、新药研究与开发等多个领域。近年来,国内外学者通过代谢组学技术分析了乳腺癌患者的代谢物轮廓特征,筛选出有价值的潜在标志物,为乳腺癌的预防、早期诊断和个体化治疗开辟了新途径。本文针对这些乳腺癌潜在代谢标志物进行综述。     

基于胆汁酸代谢谱对自身免疫性肝炎小鼠模型的早期预判研究

目的:采用液相色谱质谱联用仪(LC-MS/MS)测定胆汁酸代谢谱的分析方法评价刀豆蛋白A诱导自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠模型.方法:小鼠经30 mg· kg-1刀豆蛋白A诱导后可成功建立AIH模型(可称为模型组);而经20 mg· kg-1刀豆蛋白A诱导后其生化、病理指标均未发...     

液相色谱-质谱联用技术在药物分析中的应用

液相色谱-质谱（LC—MS）联用技术体现了色谱和质谱优势的互补,将色谱的高分离性能和质谱的鉴别力强的特点相结合,组成了较完美的现代分析技术。本文介绍近年来液-质联用技术在药物分析研究领域的应用,随着液相色谱一质谱质联用技术的不断完善、发展,必将在药物分析中占据越来越重要的地位。     

基于气相色谱质谱联用技术的代谢组学在小儿原发性肾病综合征中的应用

目的:通过分析原发性肾病综合征(PNS)患儿血浆代谢物,构建与PNS相关的代谢途径网络,发现潜在的生物标志物以辅助临床诊断。方法:采用气相色谱质谱联用(GC-MS)技术分析22例PNS患儿及22例健康儿童血浆代谢物,利用预处理软件XCMS进行数据预处理,主成分分析(PCA)与偏最小二乘判别分析(PLS-DA)对两组差异性代谢产物进行分析。结果:构建了PCA与PLS-LDA模型,PCA模型中变量的可解释率和可预测率为43.6% 和12.9%,PLS鄄LDA 模型中变量的可解释率和可预测率分别为79.8%和59.2%,共筛选出15种差异性代谢物,主要有胆固醇、柠檬酸、亚油酸及氨基酸等,其中乳酸盐、亚油酸、软脂酸、丙酮酸、胆固醇含量升高,其余10种代谢物含量降低。结论:筛选出的15种差异性代谢物变化导致糖酵解、糖异生、脂类代谢和蛋白质代谢减弱,三羧酸循环紊乱。该研究为进一步明确PNS发病机制提供了新的科学依据,并有助于疾病诊断和预后评估。     

基于液质联用技术的代谢组学生物样本——血液及尿液的收集和处理

代谢组学是定性及定量描述内源性代谢物变化的科学,正广泛应用于疾病诊断和预后过程中。血液和尿液是代谢组学研究中常用的生物样本,但因其代谢物繁多、成分复杂,亟须使用灵敏度高、特异性强的分离分析技术。液相色谱-质谱联用（liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS）技术分析速度快、分离效率高,非常适用于代谢组学等方面的研究。生物样本的采集、处理过程是实验中最关键的一步,直接决定着实验结果的准确性,因此生物样本预处理过程的标准化显得尤为重要。本文综述了常用的生物流体—血液和尿液的收集、处理及储存方法,以期为有关代谢组学研究提供参考。     

基于液-质联用技术的乳腺癌血清代谢组学分析

目的：应用代谢组学的方法观察乳腺癌患者的血清代谢产物变化规律，并将其用于发现诊断乳腺癌病情进展及治疗的生物标志物。 方法：收集正常人和乳腺癌病人的血清标本，分为正常人组49例，乳腺癌组31例。经超高效液相色谱-三重四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC/Q-TOF-MS）检测，将所得数据输入SIMCA-14.0软件，对其进行多变量统计分析。如主成分分析法（PCA）和正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）模式识别分析各代谢物的变化。 结果：乳腺癌和正常组血清产物水平呈现不同的分布。 结论：代谢组学方法可展示乳腺癌血清中代谢产物的变化特点，为进一步发现乳腺癌发病的生物机制奠定基础。     

液质联用技术在中药化学成分定性分析中的研究进展

中药化学成分复杂,寻找中药化学成分快速识别与定性的方法是亟待解决的问题。液质联用技术具有分离能力强、检测灵敏度高和专属性强等特点,在中药研究中发挥重要作用。为了寻找快速定性中药化学成分的方法,加快中药现代化的步伐,从四级杆飞行时间串联质谱、静电场轨道阱质谱和离子淌度质谱3种质谱技术以及诊断离子、分子网络、最佳碰撞能、碰撞截面、定量结构-保留关系模型5种研究方法对近年来液质联用技术在中药化学成分定性分析方面的发展进行综述,以期为中药质量控制和中药现代分析提供新的思路和方法。     

A comparison of the mouse bioassay with liquid chromatography-mass spectrometry for the detection of lipophilic toxins in shellfish from Scottish waters.

Some lipophilic shellfish toxins (LSTs) can cause human illness due to eating shellfish that have become naturally contaminated following filter feeding on toxin producing algae. A mouse bioassay (MBA) is widely used to detect LSTs in regulatory monitoring of shellfish. However, the MBA is imprecise giving only a positive or negative result and is prone to interference from other compounds. In this study, liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) was compared to the MBA, with the aim of substituting the in vivo assay for monitoring shellfish from Scottish waters. Overall, it was not feasible to demonstrate equivalence of LC-MS with the MBA, but due to the detection of a range of LSTs, it is considered that LC-MS methods capable of detecting multiple analogues are accepted by international markets of shellfish to assure consumer protection.     

Comparative Analysis of Aristolochic Acids in Aristolochia Medicinal Herbs and Evaluation of Their Toxicities

Aristolochic acids (AAs) are a group of nitrophenanthrene carboxylic acids present in many medicinal herbs of the Aristolochia genus that may cause irreversible hepatotoxicity, nephrotoxicity, genotoxicity and carcinogenicity. However, the specific profile of AAs and their toxicity in Aristolochia plants, except for AAs Ι and ΙΙ, still remain unclear. In this study, a total of 52 batches of three medicinal herbs belonging to the Aristolochia family were analyzed for their AA composition profiles and AA contents using the UPLC-QTOF-MS/MS approach. The studied herbs were A. mollissima Hance (AMH), A. debilis Sieb.etZucc (ADS), and A. cinnabaria C.Y.Cheng (ACY). Chemometrics methods, including PCA and OPLS-DA, were used for the evaluation of the Aristolochia medicinal herbs. Additionally, cytotoxicity and genotoxicity of the selected AAs and the extracts of AMH and ADS were evaluated in a HepG2 cell line using the MTT method and a Comet assay, respectively. A total of 44 AAs, including 23 aristolochic acids and 21 aristolactams (ALs), were detected in A. mollissima. Moreover, 41 AAs (23 AAs and 18 ALs) were identified from A. debilis Sieb, and 45 AAs (29 AAs and 16 ALs) were identified in A. cinnabaria. Chemometrics results showed that 16, 19, and 22 AAs identified in AMH, ADS, and ACY, respectively, had statistical significance for distinguishing the three medicinal herbs of different origins. In the cytotoxicity assay, compounds AL-BΙΙ, AAΙ and the extract of AMH exhibited significant cytotoxicities against the HepG2 cell line with the IC₅₀ values of 0.2, 9.7 and 50.2 μM, respectively. The results of the Comet assay showed that AAΙ caused relatively higher damage to cellular DNA (TDNA 40–95%) at 50 μM, while AAΙΙ, AMH and ADS extracts (ranged from 10 to 131 μM) caused relatively lower damage to cellular DNA (TDNA 5–20%).     

超高效液相色谱-质谱法同时测定双黄连胶囊中的3种有效成分

目的 建立了同时测定双黄连胶囊中的绿原酸、黄芩苷和连翘苷3种有效成分的超高效液相色谱-电喷雾电离质谱(HPLC-ESI/MS)分析方法.方法 采用Waters BEH-C18色谱柱,以含0.2%甲酸的0.4mmol·L-1醋酸钠(A相)、甲醇(B相)为流动相进行梯度洗脱,在ESI正离子模式下,采用选择离子反应监测方法进行测定,用峰面积进行定量.结果 绿原酸、黄芩苷和连翘苷的线性范围分别0.05～50mg·L-1,0.10～500mg·L-1和0.01～25mg·L-1;检出限分别为0.010,0.020,0.002mg·L-1.3种成分的加样回收率为97.2%～101.6%,相对标准偏差小于2.3%.结论 该法快捷、准确、重复性好,可用于双黄连胶囊中的3种有效成分含量的同时测定.     

基于 HPLC多成分定量结合化学模式识别分析不同产地蒺藜质量差异

目的 建立同时测定蒺藜中槲皮素、山柰酚、异鼠李素、白杨素、蒺藜皂苷、蒺藜皂苷K、蒺藜皂苷D、蒺藜呋甾皂苷B、蒺藜苷元、海柯皂苷元、薯蓣皂苷元和替告皂苷元含量的方法,探索主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）及灰色关联度分析（GRA）模型在蒺藜质量差异评价中的应用。方法 采用HPLC法,以乙腈-0.05%磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长为360、203 nm;通过对多指标成分含量结果进行PCA、OPLS-DA分析,同时建立GRA模型,综合分析不同产地蒺藜质量差异。结果 方法学验证结果均符合《中国药典》要求; 12种成分在各自范围内线性关系良好（r＞0.999）,平均加样回收率（n＝9）在96.92%～100.18%（RSD＜2.0%）。PCA、OPLS-DA分析显示蒺藜苷元、异鼠李素、山柰酚和槲皮素是影响蒺藜产品质量的主要潜在标志物。GRA相对关联度0.339 7～0.597 1,蒺藜质量存在一定产地差异。结论 HPLC同时测定蒺藜中12个成分,简便可靠,PCA、OPLS-DA和GRA可用于不同产地蒺藜质量差异分析。     

基于HPLC指纹图谱及定量测定的益气逐瘀利水方质量评价研究

目的：建立益气逐瘀利水方的HPLC指纹图谱,并测定4种成分含量,为益气逐瘀利水方产业化开发的质量控制提供参考。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长245 nm,建立10批益气逐瘀利水方指纹图谱。采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）进行相似度评价,结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）模式识别技术进行质量评价,同时进行含量测定。结果：10批益气逐瘀利水方标准汤剂指纹图谱相似度均大于0.995,标定出共有峰24个,指认其中的4个共有峰（14号峰毛蕊异黄酮葡萄糖苷、15号峰阿魏酸、17号峰汉防己乙素、19号峰粉防己碱）,CA、PCA及OPLS-DA将10批样品分成2类。定量分析方法学考察结果良好,10批样品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、汉防己乙素、粉防己碱的定量结果分别为43.98~64.18、107.32~167.95、122.63~175.21、391.62~582.02 μg·g^-1。结论：所建立的益气逐瘀利水方指纹图谱及定量测定方法稳定性好、重复性高,可更加全面系统地评价益气逐瘀利水方的质量。     

Fast and non-invasive serum detection technology based on surface-enhanced Raman spectroscopy and multivariate statistical analysis for liver disease

This study explored a rapid and nondestructive liver disease detection technique based on surface-enhanced Raman spectroscopy (SERS) to realize the early diagnosis, prevention, and treatment of liver disease. SERS signals of serum were obtained from 304 normal individuals, 333 patients with hepatopathy, and 99 patients with esophageal cancer. The Raman spectra of different diseases were compared and diagnostic models of liver disease were established using orthogonal partial least squares discriminant analysis (OPLS-DA). The classification efficiencies of the different models were comprehensively evaluated through the receiver operating characteristic (ROC) curve and ten-fold cross validation. Area under the ROC curve is of greater than 0.97, indicating excellent classification of the groups. The accuracy rate of the test set reached 95.33%, and the lowest was 81.76% using the ten-fold cross validation. Thus, OPLS-DA combined with serum SERS is a rapid and non-invasive technique for the diagnosis of liver disease.     

染料木素在乳腺癌MCF-7细胞内的代谢研究

目的研究染料木素在乳腺癌细胞中的代谢行为。方法将10μmol.L-1染料木素与乳腺癌MCF-7细胞在37℃下孵化一定时间后终止反应。采用UPLC-MS-MS法测定孵化液中染料木素及II相代谢产物的浓度。结果染料木素在乳腺癌MCF-7细胞中可迅速代谢为7或4′-葡萄糖醛酸结合物以及7或4′-硫酸结合物。孵化24、48和72 h后,每100μg孵化样品蛋白中,7-葡萄糖醛酸结合物的生成率分别为2.9、5.2和8.9μg.h-1,4′-葡萄糖醛酸结合物的生成率分别为1.1、1.9和3.0μg.h-1,7-硫酸结合物的生成率分别为20.3、32.9和47.3μg.h-1,4′-硫酸结合物的生成率分别为1.7、3.1和4.5μg.h-1。结论染料木素在乳腺癌MCF-7细胞中的主要代谢产物是7-硫酸结合物。