白蒺藜对光损伤小鼠光感受器细胞的保护作用

目的 探讨白蒺藜对小鼠视网膜光损伤的保护作用.方法 采用10 000 lux白炽光光照30 min建立视网膜光损伤模型,将BALB/c小鼠分为正常对照组、模型组和治疗组,每组各6只.光照前0.5h治疗组腹腔注射白蒺藜水煎液100 μL(生药100mg/20 g),正常对照组和模型组腹腔注射等量生理盐水.光照后3h、7d分别通过OCT检测小鼠视网膜形态学改变;造模后7d处死小鼠,取眼球固定、包埋、切片进行HE染色,视紫红质和短波敏感视蛋白(short wave-length sensitivity opsin,M-opsin)的免疫荧光化学染色,观察视网膜病理改变情况.结果 正常对照组内外核层结构清楚、界限明显,视网膜视杆细胞内外节排列整齐;模型组视网膜结构层次模糊且外核层变薄,与正常对照组差异显著;治疗组小鼠视网膜结构与正常对照组没有显著差异.与正常对照组比较,模型组视紫红质和M-opsin表达降低,治疗组显著提高了视紫红质和M-opsin的表达.模型组较正常对照组视网膜外核层厚度显著变薄(P＜0.05);治疗组较模型组能显著性预防小鼠视网膜外核层变薄(P＜0.05).结论 小鼠视网膜光损伤模型造模成功,白蒺藜对光损伤视网膜具有显著的保护作用.     

白蒺藜醇甙对混合培养鼠视网膜神经节细胞的作用

目的观察刺蒺藜单体成分白蒺藜醇甙(tribulus fruit alcohol     

白蒺藜皂苷对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞的保护作用

目的:观察白蒺藜皂苷(gross saponins from tribulus terrestrisL,GSTT)及灯盏细辛注射液[Erigeron Breviscapus(Vant.)Hand-Mazz,EBHM]对慢性高眼压模型兔视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的保护作用。方法:健康新西兰白兔24只,随机分为对照组、高眼压组、EBHM治疗组和GSTT治疗组,高眼压组和EBHM治疗组及GSTT治疗组的兔眼前房内注射20g/L甲基纤维素制成慢性高眼压模型,EBHM治疗组的兔每日耳缘ivEBHM注射液4.5mg/kg,GSTT治疗组的兔每日耳缘iv GSTT注射液5mg/kg,高眼压持续4wk时,处死实验兔,摘取眼球,做RGCs电镜检查。结果:造模后各组眼压均升高,电镜下高眼压组相对于GSTT治疗组及EBHM注射液治疗组,RGCs超微结构有明显损伤。结论:GSTT及EBHM注射液对慢性高眼压兔RGCs均具有保护作用。     

bcl-XL抗视网膜光感受器细胞凋亡作用的实验研究

目的评价抗凋亡基因bcl-XL对视网膜光感受器细胞的抗凋亡作用.方法首先建立谷氨酸损伤的SD大鼠视网膜光感受器细胞凋亡模型.将体外培养的光感受器细胞分为A组(正常对照组)、B组(谷氨酸组)及C组(rAd-gfp-bcl-XL转染+谷氨酸组);其中C组在加入谷氨酸前48 h用滴度为6.5×l012 pfu/mL的重组腺病毒rAd-gfp-bcl-XL转染光感受器细胞;荧光显微镜下观察光感受器细胞中的绿色荧光蛋白表达情况;用免疫组化法分析rAd-gfp-bcl-XL转染细胞和未转染细胞Bcl-XL蛋白水平;DNA琼脂糖凝胶电泳以评判3个组神经元凋亡发生与否及凋亡程度;采用Hoechst33258染色做正常核和凋亡核的形态学检测.结果免疫组化检测结果表明转染细胞与未转染细胞的Bcl-XL蛋白表达水平有差异,DNA电泳分析发现B组呈典型的DNA"梯度"条带,而A组和C组几乎无DNA"梯度"条带,核形态学检测结果亦证实转染组较未转染组的核有明显差异.结论重组腺病毒介导转染的bcl-XL对体外培养的视网膜光感受器细胞有抗凋亡作用,提高视网膜光感受器细胞bcl-XL的表达水平可能为视网膜变性疾病提供潜在有效的治疗方法.     

bcl-X_L抗视网膜光感受器细胞凋亡作用的实验研究

目的　评价抗凋亡基因bcl XL 对视网膜光感受器细胞的抗凋亡作用。方法　首先建立谷氨酸损伤的SD大鼠视网膜光感受器细胞凋亡模型。将体外培养的光感受器细胞分为A组 (正常对照组 )、B组 (谷氨酸组 )及C组 (rAd gfp bcl XL 转染 +谷氨酸组 ) ;其中C组在加入谷氨酸前 4 8h用滴度为 6 5×l0 12 pfu/mL的重组腺病毒rAd gfp bcl XL 转染光感受器细胞 ;荧光显微镜下观察光感受器细胞中的绿色荧光蛋白表达情况 ;用免疫组化法分析rAd gfp bcl XL 转染细胞和未转染细胞Bcl XL蛋白水平 ;DNA琼脂糖凝胶电泳以评判 3个组神经元凋亡发生与否及凋亡程度 ;采用Hoechst332 5 8染色做正常核和凋亡核的形态学检测。结果　免疫组化检测结果表明转染细胞与未转染细胞的Bcl XL 蛋白表达水平有差异 ,DNA电泳分析发现B组呈典型的DNA“梯度”条带 ,而A组和C组几乎无DNA“梯度”条带 ,核形态学检测结果亦证实转染组较未转染组的核有明显差异。结论重组腺病毒介导转染的bcl XL 对体外培养的视网膜光感受器细胞有抗凋亡作用 ,提高视网膜光感受器细胞bcl XL 的表达水平可能为视网膜变性疾病提供潜在有效的治疗方法。     

应重视视网膜光化学损伤光感受器细胞凋亡的研究

视网膜退行性变性包括年龄相关性黄斑变性、视网膜色素变性等,其重要病理特征为进行性视网膜光感受器细胞凋亡,目前尚无有效的治疗方法.近年来许多流行病学调查和实验研究表明,可见光可促使视网膜退行性变性恶化,因此视网膜光化学损伤和光感受器细胞凋亡的研究成为重要的研究方向.(中华眼科杂志,2009,45:196-198)     

锂对视网膜色素变性小鼠光感受器细胞凋亡的保护作用

目的 研究锂在视网膜色素变性小鼠模型上对光感受器细胞凋亡的神经保护作用.方法 实验研究.FVB/NJ视网膜色素变性小鼠出生后立刻用含锂的食物喂养,7和14 d时摘除眼球做视网膜冰冻切片,同时取血测血清锂浓度.HE、TUNEL和视杆细胞免疫荧光染色进行视网膜组织形态、光感受器细胞凋亡分析.结果 光镜下可见,对照组外核层可见TUNEL阳性细胞,出生后14 d外核层厚度和细胞层数(3或4层)明显低于7 d时的厚度(9或10层),而锂喂养组出生后14 d外核层的厚度和细胞层数明显高于对照组,与出生7 d时的外核层厚度及细胞层数无明显差异.结论 锂能够保护视网膜色素变性小鼠光感受器细胞免于凋亡.(中华眼科杂志,2008,44:248-252)     

内源性促红细胞生成素对大鼠脱离视网膜光感受器细胞的保护作用

背景促红细胞生成素（EPO）对多种视网膜疾病模型中视网膜神经元具有一定的保护作用,但EPO对视网膜脱离（RD）后光感受器细胞是否具有保护作用尚不清楚。目的探讨内源性EPO对RD状态下光感受器细胞的保护作用及可能机制。方法利用视网膜下腔注射质量分数1．4％透明质酸钠建立大鼠RD模型,按每组情况各组玻璃体腔内分别单次注射PBS或不同剂量的外源性可溶性EPO受体（EPOsR）,采用计算机产生随机数字法将72只SD大鼠随机平均分为正常对照组、RD组、RD＋PBS组、RD＋EPOsR2、20、200ng组。分别于造模后3d和14d用过量麻醉法处死大鼠并获得大鼠视网膜标本,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测光感受器细胞的凋亡情况,并分别采用Westernblot和免疫荧光法检测视网膜中caspase-3的活性,RD造模后14d进行组织病理学检查并测量外核层（ONL）厚度。结果RD造模后3d,RD组ONL出现凋亡细胞核,玻璃体腔注射EPOsR组光感受器细胞凋亡进一步增加,随着玻璃体腔注射EPOsR的剂量增加,ONL凋亡细胞核有增加趋势。Westernblot和免疫荧光检测结果均显示,各组视网膜caspase-3表达的条带灰度值分别为（0．15±0．04）、（0．49±0．03）、（0．50±0．07）、（0．63±O．03）、（0．69±0．04）、（0．83±0．04）,各组的总体差异有统计学意义（F=76．016,P=0．000）,RD＋EPOsR200ng组的caspase-3活性均强于其他各组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。RD造模后14d,正常对照组、RD组、RD＋PBS组、RD＋EPOsR2、20、200ng组的ONL厚度分别为（47．39±3．39）、（33．96±3．54）、（31．83±5．21）、（31．40±2．63）、（24．99±2．06）、（19．30e3．71）μm,总体差异有统计学意义（F=44．733;P=0．000）;EPOsR处理组ONL厚度明显薄于单纯RD组和RD＋PBS组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论RD状态下,EPOsR通过剂量依赖的方式诱导视网膜细胞的凋亡和caspase-3活性增强,而缺氧状态下视网膜神经上皮的内源性EPO表达增强可通讨抑制casDase-3活性和抗凋亡作用发挥对光感受器细胞的保护作用。     

牛膝多肽对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)介导的视网膜光感受器细胞损伤的保护作用

目的 探讨牛膝多肽(ABPP)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)介导的光感受器细胞损伤的保护作用,并初步探讨ABPP保护作用的可能机制.方法 在培养的光感受器细胞RGC-5中加入不同浓度的ABPP(0.05 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.50 mg·L-1、1.00 mg·L-1、5.00 mg·L-1)...     

体外诱导猪Müller细胞定向分化为光感受器细胞的研究

背景 大鼠、小鼠Müller细胞在体外能诱导分化为表达视网膜光感受器细胞特异标记的细胞,但目前有关成年猪Müller细胞分化为视网膜光感受器细胞的研究鲜有报道.目的 研究成年猪Müller细胞于体外定向诱导后分化成视网膜第一级传导神经元光感受器细胞.方法 消化成年猪眼视网膜组织,分离Müller细胞行体外继代单层贴壁培养.使用定向分化培养基对P2、P3和P4代Müller单层贴壁细胞及先形成细胞球悬浮培养2—3d,然后再对贴壁细胞进行诱导分化,最后结合细胞形态和免疫荧光染色结果鉴定Müller细胞以及诱导分化效果.结果 免疫荧光染色结果显示,P2,P3和P4 Müller细胞均能表达Müller细胞特异蛋白分子标记,即谷氨酸合成酶(GS),P3 Müller细胞还同时表达另一种Müller细胞特异蛋白分子标记,神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP).免疫荧光染色分析并计算视网膜光感受器细胞特异标记视紫质Rhodopsin阳性率,P2 Müller单层贴壁分化细胞为(27.99±6.53)％,P2悬浮细胞球分化为(16.54±3.40)％.P2悬浮细胞球诱导分化后形态更趋向神经元,而P2代Müller单层贴壁细胞分化后形态仍趋向于成纤维细胞.随着培养代数的增加,细胞球定向分化Rhodopsin阳性表达程度逐渐减弱,P2、P3和P4 Rhodopsin阳性率分别为(56.23±7.32)％、(35.26±8.55)％和(12.68±3.18)％,差异无统计学意义(F=2.618,P=0.099).同代细胞随着诱导时间的延长,Rhodopsin阳性表达有所减弱,差异无统计学意义(P=0.099),但分化细胞形态更为细长.结论 成年猪Müller细胞离体培养后可定向分化为表达视网膜光感受器样细胞特异标记的细胞.细胞球悬浮培养2～3d,以及延长诱导分化时间都能使得分化细胞形态更为细长.     

中药刺蒺藜对兔视网膜神经细胞的作用

目的:观察中药刺蒺藜对高眼压兔视网膜神经节细胞(RGCs)的作用。方法:将16只健康新西兰兔随机分为正常组(A组)、高眼压组(B组)和高眼压治疗组(C组),以20g/L甲基纤维素前房注射建立B,C组兔慢性高眼压模型,C组予以每日静脉注射刺蒺藜针剂5mg/kg,连续用药30d后摘取眼球进行RGCs观察及视网膜神经纤维层(RNFL)厚度测量。结果:造模后各组眼压均有升高,HE染色切片中C组RGCs变性程度及RNFL受损程度明显低于B组(P<0.01)。结论:中药刺蒺藜能在一定程度上保护高眼压状态下的视网膜神经节细胞。     

Metallothionein protects retinal pigment epithelial cells against apoptosis and oxidative stress

The retina expresses metallothionein (MT) which has been reported to protect cells against oxidative stress and apoptosis. The types of MT expressed by human retinal cells were identified by laser capture microdissection and RT--PCR and it was found that MT-2a is expressed by retinal pigment epithelial (RPE) cells, photoreceptor cells, inner nuclear layer cells and ganglion cells while MT-1a is expressed by RPE cells and MT-3 by cells of the neural retina. MT is induced in cultured human RPE cells under stress conditions such as the presence of glucocorticoids, interleukin-1/TNF alpha, oxygen and TGF beta 1. Cultured human D407 RPE cells were transfected with plasmids that allowed the expression of MT to be controlled via the tet operator protein by the level of tetracycline in the medium. These experiments showed that elevation of MT levels by transfection of RPE cells protects them against toxic levels of cadmium, heme- and iron-induced oxidation and UV light-induced apoptosis.     

高脂诱导肥胖小鼠的视网膜变性及其与氧化应激的关系

目的:探讨高脂饮食建立的C57BL/6小鼠肥胖模型的视网膜变性的超微结构改变及其与氧化应激的关系。方法:高脂饲料喂养19wk后,小鼠分为肥胖抵抗(DIO-R)组和肥胖倾向(DIO)组,同时对照组小鼠给予基础饲料。应用光镜、透射电镜及TUNEL法检测3组小鼠视网膜超微结构的改变及凋亡情况,并应用生化方法检测视网膜的氧化和抗氧化指标。结果:与对照组及DIO-R组比较,DIO组小鼠视网膜及外核层(ONL)变薄(P<0.01);感光细胞出现凋亡及坏死,其外段视盘膜排列紊乱,部分溶解、断裂,神经节细胞体积变小,细胞质分布紊乱,核染色质固缩;TUNEL法检测结果显示,在ONL层可见较多的凋亡细胞,其细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。与对照组比较,DIO组小鼠视网膜匀浆丙二醛(MDA)含量明显升高(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)活力显著下降(P<0.05)。结论:高脂诱导的肥胖可导致C57BL/6小鼠视网膜变性及细胞凋亡,其机制可能与氧化应激有一定关系。     

Melatonin protects human retinal pigment epithelial (RPE) cells against oxidative stress

Oxidative stress is involved in the pathogenesis of age-related macular degeneration (AMD). Administration of conventional antioxidants has been shown to slow the progression of AMD and vision loss. Melatonin, an endogenous neurohormone produced by the pineal gland and retina, has been reported to be a potent antioxidant and free radical scavenger. In this study we tested whether melatonin can protect retinal pigment epithelial (RPE) cells against hydrogen peroxide (H(2)O(2))-induced cell death. Since mitochondrial DNA (mtDNA) is preferentially susceptible to oxidative damage, we tested whether melatonin can reduce H(2)O(2)-induced mtDNA lesions. A human RPE cell line (ARPE-19) was cultured and exposed to H(2)O(2) (100 and 200 microm) for 1 hr to induce cell death. Prior to H(2)O(2) treatment, cells were treated with various concentrations (0.1-200 microm) of melatonin for 2, 24 or 72 hr. Control cells received either melatonin or ethanol alone. Cell viability, as determined by MTT assay, showed no significant (P>0.05) protection against H(2)O(2) toxicity in cells receiving 2- and 24-hr pretreatment of melatonin at either concentration. However, when melatonin was administered diurnally for 3 consecutive days, this prolonged treatment markedly reduced H(2)O(2)-induced cell death (P>0.05) MtDNA damage, as assessed with quantitative PCR, was significantly decreased (P<0.05) in RPE cells pretreated with melatonin as compared to those without melatonin treatment. These results suggest that melatonin may play a role in protecting RPE cells from oxidative stress.     

A hypothesis for treating inflammation and oxidative stress with hydrogen sulfide during age-related macular degeneration

Age-related macular degeneration (AMD) is a leading cause of blindness and is becoming a global crisis since affected people will increase to 288 million by 2040. Genetics, age, diabetes, gender, obesity, hypertension, race, hyperopia, iris-color, smoking, sun-light and pyroptosis have varying roles in AMD, but oxidative stress-induced inflammation remains a significant driver of pathobiology. Eye is a unique organ as it contains a remarkable oxygen-gradient that generates reactive oxygen species (ROS) which upregulates inflammatory pathways. ROS becomes a source of functional and morphological impairments in retinal pigment epithelium (RPE), endothelial cells and retinal ganglion cells. Reports demonstrated that hydrogen sulfide (H2S) acts as a signaling molecule and that it may treat ailments. Therefore, we propose a novel hypothesis that H2S may restore homeostasis in the eyes thereby reducing damage caused by oxidative injury and inflammation. Since H2S has been shown to be a powerful antioxidant because of its free-radicals’ inhibition properties in addition to its beneficial effects in age-related conditions, therefore, patients may benefit from H2S salubrious effects not only by minimizing their oxidant and inflammatory injuries to retina but also by lowering retinal glutamate excitotoxicity.     

Enhanced expression of glutathione-S-transferase A1-1 protects against oxidative stress in human retinal pigment epithelial cells

Glutathione-S-transferases (GSTs) play an important role in protection mechanisms against oxidative stress. We sought to determine whether over-expression of human GSTA1-1 in RPE cells is able to attenuate H(2)O(2)-induced oxidative stress. SV40-transformed human fetal RPE cells were stably transfected with pRC/hGSTA1-1 vector which carries a full-length of human GSTA1-1 cDNA. The control RPE cells were either non-transfected or transfected with control vector pRC. Expression of hGSTA1-1 protein in these cells was confirmed by Western blot and immunocytochemical analyses. The protective effects of hGSTA1-1 on cell viability and mitochondrial DNA (mtDNA) damage caused by H(2)O(2) were examined with MTT assay and quantitative PCR (QPCR), respectively. The hGSTA1-1 transfected RPE cells exhibited a similar morphology and growth rate as control RPE cells. Immunocytochemical analysis showed robust expression hGSTA1-1 in hGSTA1-1 transfected cells versus background staining in control cells. Western blotting of protein extracts from cells transfected with hGSTA1-1 revealed a 26 kDa protein band which corresponds to the size of recombinant mature hGSTA1-1. The active GST present in the hGSTA1-1 transfected cells was approximately three times higher than in control cells. The MTT assay showed a significantly greater viability of hGSTA1-1 cells in response to H(2)O(2) (100 and 200 microm) compared to control cells (p<0.05). QPCR indicated that mtDNA damage was significantly decreased in hGSTA1-1 cells than in control cells (p<0.05). Human GSTA1-1 transfection protect against RPE cell death and mtDNA damage caused by H(2)O(2), suggesting an important role of GST in protection against oxidative stress in RPE cells.     

青蒿素对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮（RPE）细胞氧化应激损伤的抑制作用

目的　探讨青蒿素对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激损伤的抑制作用。方法　将ARPE-19细胞接种于96孔板，每孔7×10³个细胞，细胞贴壁后分别加入不同浓度青蒿素，筛选对细胞增殖有效的最佳药物浓度。将APRE-19细胞分成4组。对照组:不做特殊处理；过氧化氢组:加入100 μmol·L^-1过氧化氢作用细胞24 h；青蒿素组:加入青蒿素30 μmol·L^-1，作用细胞24 h；青蒿素预保护组:加入30 μmol·L^-1青蒿素预保护细胞24 h后加入100 μmol·L^-1 过氧化氢作用24 h。利用MTT法筛选青蒿素对ARPE-19细胞作用的最佳药物浓度；通过Hoechst33342染色及线粒体膜电位观测细胞凋亡情况；检测细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）含量和活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）阳性细胞数；Western blot法检测相关蛋白表达水平。结果　MTT法检测发现，30 μmol·L^-1的青蒿素对细胞增殖作用最强 （均为P<0.01）。青蒿素预保护组与过氧化氢组相比，细胞增殖率升高，凋亡细胞数显著减少，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。线粒体膜电位染色显示，青蒿素预保护组与过氧化氢组相比绿色染色减少，红色染色增多，说明青蒿素预保护组凋亡细胞数减少。与对照组相比，青蒿素组ARPE-19细胞中SOD含量显著增加（P<0.05）；与过氧化氢组相比，青蒿素预保护组细胞内SOD含量明显增高（P<0.05），说明青蒿素能增加细胞内抗氧化物质，减少细胞凋亡。与对照组相比，青蒿素组ROS阳性细胞减少（P<0.05）；与过氧化氢组相比，青蒿素预保护组ROS阳性细胞亦明显减少（P<0.05），说明青蒿素可减少过氧化氢诱导的活性氧物质积聚。通过Western blot检测发现，青蒿素能促进ARPE-19细胞内AKT的磷酸化，过氧化氢组ARPE-19细胞内Caspase-3、PARP、 Keap1相对表达升高，Bcl-2、Nrf2、HO-1降低；青蒿素预保护组ARPE-19细胞内Caspase-3、PARP、 Keap1相对表达降低，Bcl-2、Nrf2、HO-1升高，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　青蒿素通过调节Nrf2/keap1信号通路来减小过氧化氢诱导的ARPE-19细胞的氧化应激损伤。     

艾塞那肽对4-羟基壬烯醛诱导人视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤的抑制作用

目的观察艾塞那肽(exendin-4,EX4)对4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激损伤的抑制作用。方法体外培养人RPE细胞(ARPE-19),采用CCK-8法检测不同浓度EX-4处理后细胞增殖情况;利用倒置显微镜观察对照组、EX4处理组、4-HNE组和4-HNE+EX4处理组细胞形态变化;利用荧光显微镜观察各组细胞的活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)生成;运用流式细胞仪检测各组RPE细胞内ROS含量变化;化学比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量变化。结果 100.0 nmol·L^-1 EX4对RPE细胞具有较强的保护作用,在此浓度下对10μmol·L^-1 4-HNE引起的氧化应激损伤具有较强的抑制作用(P<0.05)。荧光显微镜观察发现,与对照组相比,4-HNE组亮绿色高荧光信号...     

视网膜色素上皮细胞氧化应激相关microRNA的鉴定

目的：应用miRNA表达谱芯片筛选视网膜色素上皮细胞与氧化应激相关的miRNA,为更加全面深入地研究年龄相关性黄斑病变(age-related macular degeneration,AMD)发生的分子机制提供新的思路。

方法：培养D407细胞,分别使用100、200、400μmol/L H₂O₂处理细胞24h后,Trizol试剂抽提细胞总RNA,使用Exiqon miRCURY LNA^TM microRNA表达谱芯片(miRBase 16.0数据库)检测不同浓度处理后D407细胞miRNA的表达差异,并将不同浓度处理后的变化进行聚类分析。使用Stem loop realtime PCR对芯片结果进行验证,并运用生物信息学方法预测差异miRNA调控的靶基因。

结果：芯片所包含的1 425个已知miRNA中,共有367个在不同浓度H₂O₂处理后表达发生变化。通过Treeview软件进行聚类分析发现miR-31等17个miRNA随H₂O₂浓度的升高呈现逐渐降低的趋势,miR-206等7个则逐渐升高。PCR验证显示芯片结果准确性较好。

结论：H₂O₂作用前后RPE的miRNA表达存在明显差异,miRNA作为转录后水平的调节分子,参与了细胞氧化应激反应,可能在AMD的发生发展中起有重要作用。