甘草甜素对角膜上皮损伤愈合中炎症反应的抑制作用

目的　探讨甘草甜素对角膜上皮损伤愈合中炎症反应的抑制作用。方法　取SPF级健康8周龄的雄性C57BL/6J小鼠60只,随机分为治疗组和对照组,每组30只,两组小鼠右眼建立角膜上皮损伤模型,左眼不做处理。治疗组用甘草甜素溶液滴眼,对照组用PBS滴眼,连续滴眼3 d。造模后0 h、24 h、48 h、72 h,使用100 g·L"^-1荧光素钠溶液染色观察两组小鼠的角膜上皮缺损面积;通过HE染色观察两组角膜组织结构变化;采用免疫组织化学染色法检测角膜基质层中白细胞介素-1（interleukin-1,IL-1）β的表达以及中性粒细胞的浸润情况。结果　造模后24 h、48 h、72 h,治疗组角膜上皮缺损率分别为（78.75±5.81）%、（21.58±4.53）%、（0.83±0.72）%,明显低于对照组的（87.74±3.57）%、（32.21±4.02）%、（3.80±1.86）%,差异均有统计学意义（均为P<0.01）。造模后72 h,HE染色结果显示:治疗组角膜上皮生长2～3层,上皮细胞排列欠规则;对照组角膜上皮生长0～2层,上皮细胞排列紊乱。造模后72 h,免疫组织化学染色结果显示:两组角膜基质层中IL-1β的阳性表达均降低,治疗组角膜基质层中IL-1β的平均光密度值为0.21±0.03,明显低于对照组（0.31±0.03）,差异有统计学意义（P<0.01）。另外,造模后72 h,两组角膜基质层的中性粒细胞数量大幅度减少,治疗组为每200倍视野（10.66±5.13）个,较对照组［（40.00±6.08）个］明显减少,差异有统计学意义（P<0.01）。结论　角膜上皮损伤时,甘草甜素能有效降低角膜基质层中 IL-1β 的表达和中性粒细胞浸润,从而减轻炎症反应,促进角膜上皮愈合。     

电子烟对小鼠角膜上皮和结膜杯状细胞的影响

目的：研究电子烟对小鼠角膜上皮组织结构及结膜杯状细胞的影响。方法：实验研究。18只雄性c57BL小鼠，5～6周龄，随机分为A、B、C组，每组6只。A组不做任何干预，B组采用0 mg尼古丁电子烟进行干预，C组采用12 mg尼古丁电子烟进行干预。每日2次，每次30 min。干预12周后，行苏木精-伊红染色观察角膜上皮情况，透射电子显微镜下观察小鼠角膜上皮组织超微结构变化，免疫荧光染色观察Mucin 5AC阳性表达的杯状细胞的改变。各组间结果数据采用单因素方差（One-way ANOVA）分析和事后分析。结果：干预12周后，A组上皮细胞层数为5.0±0.7，而B、C组上皮细胞层数分别为7.0±0.7和7.0±0.6，A组与B、C组间差异有统计学意义（F=18.50，P<0.001），而B组和C组间差异无统计学意义。与A组相比，B、C组角膜上皮微绒毛明显减少（F=153.50，P<0.001），长度变短（F=29.54，P<0.001），排列紊乱。在结膜穹隆部的上皮中，B组和C组的Mucin 5AC阳性细胞数目比A组明显减少（F=420.10，P<0.001），但是B组和C组之间Mucin 5AC阳性细胞数目差异无统计学意义。结论：电子烟会损伤小鼠角膜上皮的组织结构，减少结膜杯状细胞的数目。     

环境烟草烟雾对小鼠泪膜功能和角膜上皮组织结构的影响

目的　探讨环境烟草烟雾（enviromental tobacco smoke,ETS）对小鼠泪膜功能和角膜上皮组织结构的影响。方法　选取SPF级c57BL雄性小鼠12只,随机分为对照组和ETS干预组,每组6只。对照组不进行ETS干预,ETS干预组进行ETS干预,每天2次,一次30 min,干预12周。在干预前及干预后对各组小鼠进行泪膜功能检测,包括泪膜破裂时间、荧光素染色(FL)评分;干预后摘取小鼠角膜组织,行HE染色,在光学显微镜下观察小鼠角膜上皮结构变化情况。结果　干预12周后,对照组泪膜破裂时间和FL评分与干预前相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05);而ETS干预组泪膜破裂时间较干预前明显缩短,FL评分较干预前明显增加,差异均有统计学意义（均为P<0.05)。ETS干预组干预12周后泪膜破裂时间较对照组明显缩短,FL评分较对照组明显增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05);两组干预前泪膜破裂时间和FL评分差异均不明显（均为P>0.05）。FL染色结果显示:干预12周后,对照组小鼠角膜上皮完整,角膜染色呈阴性;ETS干预组整个角膜上皮荧光素着染区域明显增加,呈点片状。HE染色结果显示:干预12周后,对照组未见角膜上皮层数的改变,厚度也基本未变,基底细胞仍为单层柱状上皮细胞,表层上皮较完整;ETS干预组可见角膜上皮细胞层数增多,厚度增加,细胞排列紊乱,表层上皮细胞有损失及脱落,角膜表面不光滑。干预前对照组小鼠上皮细胞为（5±1）层,干预后基本不变;ETS干预组干预后为（7±1）层;干预后两组上皮细胞层数比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　ETS会影响小鼠泪膜功能,损伤小鼠角膜上皮的组织结构。     

PM2.5对小鼠泪膜功能和角膜上皮组织结构的影响

目的 观察PM2.5对小鼠泪膜功能和角膜上皮组织结构的影响.方法 24只雄性6～8周龄BALB/c小鼠,随机分为A、B两组,每组12只.B组采用5 mg·mL-PM2.5混悬液滴眼,A组采用PBS滴眼,每天4次.分别在干预后1d、4d、7d对各组小鼠进行泪膜功能检测,包括泪液分泌功能、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)、荧光素染色(fluorescein staining,FL),并于干预后7d行苏木精-伊红染色观察角膜上皮情况.结果 干预后4d、7d,A组泪液分泌量、BUT较干预前无明显变化,差异均无统计学意义(均为P＞0.05),而B组泪液分泌量、BUT较干预前明显分别减少和恶化,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).干预后7d,A组FL评分较干预前无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05),而B组FL评分较干预前明显增加,差异有统计学意义(P=0.003).干预后7d,A组上皮细胞层数为(4±1)层,而B组上皮细胞层数为(7±1)层,差异有统计学意义(P＜0.05).与A组比较,B组整个角膜FL着染明显增加,角膜表面上皮细胞层损伤,层数增厚.结论 PM2.5会影响小鼠泪膜功能,损伤小鼠角膜上皮的组织结构.     

高强度光照损伤致TgAPPswePS1转基因鼠脉络膜新生血管形成

目的 研究在光照损伤作用下TgAPPswePS1转基因鼠脉络膜新生血管形成情况.方法 以20只6个月龄阿尔茨海默病转基因鼠(TgAPPswePS1鼠)为研究对象,其中12只行10 000 lux光照处理,每天光照12 h、连续光照6个月为实验组,余8只不作处理为对照组,实验组与对照组小鼠在实验结束时进行取材,切片行HE染色及甲苯胺蓝染色观察视网膜各层结构改变,测量新生血管形成数量,同时检测实验组与对照组视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)铺片上p-淀粉样蛋白(β-amy-loid protein,Aβ)与血管内皮生长因子表达情况,予以定量并进行统计学分析.结果 与对照组比较,光照6个月后,实验组小鼠视网膜发生明显改变,其中以外核层与光感受器层变化最明显;RPE细胞出现空泡、色素不均一、细胞间的连接断裂等改变,视网膜切片上可见脉络膜新生血管突破RPE进入视网膜内,对新生血管进行统计,发现脉络膜新生血管发生率为18.75％.光照损伤后,血管内皮生长因子在实验组RPE上呈阳性表达,可见细胞浆内弥散性表达和沿血管壁的阳性染色,较对照组表达量增加(6.59±1.14)倍,差异有统计学意义(P＜0.05).Aβ在实验组的RPE铺片上存在强阳性表达,通过Z-stack检测发现Aβ沉积类似Drusen状,位于RPE下;而对照组中未见此类免疫阳性反应,与对照组比较Aβ沉积增加(6.45±2.93)倍,差异存在统计学意义(P＜0.05).结论 强光光照损伤TgAPPswePS1鼠后,视网膜存在明显变化,可发生脉络膜新生血管,提示阿尔茨海默病转基因鼠在光照损伤下可以作为脉络膜新生血管的一种动物研究模型.     

苯扎溴铵和西酞普兰对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的影响

目的　通过对光学相干断层扫描血管造影技术（optical coherence tomography angiography,OCTA）的应用,探究苯扎溴铵和西酞普兰对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的影响。方法　选取60只小鼠随机均分为5组,其中A组为阴性对照组,B组用PBS眼液滴眼;C组用苯扎溴铵眼液滴眼;D组腹腔注射西酞普兰混悬液;E组苯扎溴铵眼液滴眼联合腹腔注射西酞普兰混悬液。在注射（滴眼）后2周,利用OCTA进行角膜分区,分别测量5组小鼠角膜各区域的角膜上皮和角膜全层厚度,并计算平均值。结果　A组角膜上皮及角膜全层厚度分别为（66±7）μm、（141±11）μm,B、D两组角膜上皮均为（66±8）μm,角膜全层厚度均为（140±12）μm,C组分别为（73±10）μm、（141±14）μm,E组分别为（76±12）μm、（141±15）μm。注射（滴眼）后2周,与注射（滴眼）前相比,A组、B组及D组角膜上皮厚度及角膜全层厚度略有变化,差异均无统计学意义（均为P＞0.05）,而C组和E组各区域角膜上皮厚度及角膜全层厚度明显增厚,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。注射（滴眼）后2周,E组较C组相比,角膜上皮厚度及角膜全层厚度增厚更为显著,差异有统计学意义（P＜0.05）。各组注射后与注射前相比,C组和E组角膜上皮厚度和角膜全层厚度平均值明显增大,差异有统计学意义（均为P＜0.05）;与A组相比,C组和E组角膜上皮厚度和角膜全层厚度平均值明显增大,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　应用OCTA测量发现,单独使用西酞普兰对角膜厚度无明显影响,苯扎溴铵可使角膜上皮及角膜全层厚度增厚,且西酞普兰对其增厚具有协同作用。     

蒙脱石滴眼液对小鼠泪膜功能和角膜上皮厚度的影响

目的　研究蒙脱石滴眼液对小鼠泪膜功能和角膜上皮厚度的影响。方法　将24只BALB/C小鼠随机分成A组和B组,每组12只。A组用15 g·L^-1蒙脱石混悬液滴眼,B组用等量PBS滴眼,每天3次。分别在滴眼前和滴眼后1 d、4 d、7 d对2组小鼠进行泪液分泌试验、泪膜破裂时间（break up time,BUT）检测和角膜荧光素（fluorescein,FL）染色评估,滴眼后7 d利用光学相干断层扫描血管造影（optical coherence tomography angiograph,OCTA）进行角膜分区,分别测量2组小鼠不同区域角膜上皮厚度。结果　A组与B组泪液分泌量有差别（F=19.731,P=0.009）,A组较B组泪液分泌量低,泪液分泌破坏显著,且2组泪液分泌量的差别有随着处理时间延长逐渐变大的趋势;滴眼后4 d和7 d,两组泪液分泌量比较,差异均有统计学意义（t=3.847、5.695,P=0.026、0.009）。A组较B组BUT缩短（F=22.432,P=0.001）,泪膜破坏明显,且2组泪膜破坏程度的差别随着处理时间延长而有变大的趋势,滴眼后4 d和7 d,两组BUT比较,差异均有统计学意义（t=5.753、5.695,P=0.024、0.009）。A组较B组角膜FL染色评分增加（F=14.753,P=0.003）,角膜上皮细胞损伤明显,且2组角膜FL染色的差别有随着处理时间延长逐渐变大的趋势,滴眼后4 d和7 d,两组FL评分比较,差异均有统计学意义（t=7.536、9.864,P=0.031、0.012）。滴眼后7 d,与B组相比,A组各区域角膜上皮厚度均变厚,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　蒙脱石滴眼液会破坏小鼠的泪液分泌功能和泪膜稳定性,并损伤小鼠角膜上皮细胞,使角膜上皮变薄。     

白藜芦醇对碱烧伤小鼠角膜纤维化反应的抑制作用

目的　探索白藜芦醇（RSV）对碱烧伤小鼠角膜纤维化反应的抑制作用。方法　选取SPF级、健康6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠48只,按照随机数字表法分为正常对照组、模型组和RSV组,每组16只。模型组和RSV组小鼠右眼建立角膜碱烧伤模型,左眼不做任何处理。RSV组小鼠用2 g·L^-1RSV溶液滴眼,模型组小鼠用相同剂量的羟丙基-β-环糊精溶液滴眼,连续滴眼 21 d。正常对照组小鼠不做碱烧伤和滴眼干预。碱烧伤后21 d,裂隙灯显微镜观察各组小鼠角膜混浊情况,对角膜混浊程度进行评分;通过HE染色观察各组小鼠角膜组织结构变化;采用免疫荧光染色观察各组小鼠角膜组织中α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅲ型胶原纤维蛋白α1链（COL3A1）的表达;利用Western blot检测各组小鼠角膜组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-SMA、COL3A1蛋白相对表达水平。结果　碱烧伤后21 d,RSV组小鼠角膜混浊评分为（2.25±0.89）分,明显低于模型组［（3.25±0.71）分］,差异有统计学意义（P=0.026）。HE染色结果显示,模型组小鼠角膜基质中细胞增多,给予RSV干预后细胞相对减少。免疫荧光染色结果显示,RSV组小鼠角膜组织中α-SMA和COL3A1的表达均弱于模型组。Western blot检测结果显示,RSV组小鼠角膜组织中TGF-β1（0.60±0.17）、α-SMA（0.27±0.05）、COL3A1（0.49±0.21）蛋白相对表达水平均显著低于模型组［TGF-β1（1.48±0.50)、α-SMA(0.55±0.18)、COL3A1(1.32±0.87）］,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　在小鼠角膜碱烧伤中,RSV可以有效抑制角膜组织中TGF-β1的表达及肌成纤维细胞的活化,减少COL3A1沉积,从而抑制角膜的纤维化反应,进而减轻角膜混浊程度。     

维生素A治疗苯扎氯铵诱导的小鼠干眼的实验研究

目的通过随机对照实验探讨维生素A对苯扎氯铵诱导的小鼠干眼的治疗作用。方法实验研究。选用BALB＆小鼠50只,使用0．25％的苯扎氯铵溶液局部点眼以诱导干眼。在第21天时根据泪膜破裂时间（BUT）、角膜荧光素钠染色、炎症指数等参数选择干眼表现程度相近的小鼠30只（60眼）并随机分为A、B、C三组,每组10只（20眼）。A、B组分别使用5000IU／（g·mD维生素A微乳剂和空白微乳剂滴眼,C组为空白对照组。在治疗的第0、1、3、5、7天检测BUT和角膜上皮荧光素钠染色、眼表炎症程度及基础泪液分泌量。7d治疗结束后取出小鼠眼球,进行HE及过碘酸．希夫（PAS）染色,角蛋白10（K10）免疫荧光标记,以及WesternBlot检测角膜组织中K10表达水平。对数据采用单因素方差分析。结果在药物治疗的第0、1、3、5天各项临床指标差异无统计学意义。治疗第7天时,A、B、C组BUT值分别为（4．20±0．89）s、（3．32±1．01）s和（3．28±0．74）s;其中A组的BUT值较B组和C组长,差异有统计学意义（F=6．825,P=-0．002）。A、B、C组角膜荧光素钠染色评分分别为3．74±1．31、5．47±1．81和5．83±1．54,其中维生素A微乳组较空白微乳组和空白对照组角膜荧光素钠染色分级轻．差异具有统计学意义（F=8．853,P〈0．01）。各组间的角膜炎症指数评分、基础泪液分泌量差异均无统计学意义。组织病理检查示维生素A组与空白微乳组和空白对照组比较,其角膜上皮形态较规整;PAS染色示维生素A组杯状细胞数量更接近正常小鼠。维生素A组的角膜上皮层几乎均不表达K10．而空白微乳组及空白对照组呈阳性表达。Westem Blot检测示维生素A组角膜中的K10水平低于空白微乳组和空白对照组。结论维生素A可以延长苯扎氯铵诱导的干眼小鼠的BUT,降低角膜上皮染色程度,抑制角膜上皮鳞状化生,并能增加结膜杯状细胞数量,有望用于干眼治疗。     

人羊膜作为载体体外培养兔角膜上皮细胞移植治疗碱烧伤动物的实验研究

目的观察培养生长于人羊膜的兔角膜上皮细胞使其扩增并移植治疗角膜碱烧伤的效果。为培养角膜上皮细胞移植技术及应用于临床实践提供最佳的理论和实验依据。方法新西兰白兔30只（30眼）,随机分为3组（n=10）,右眼制成碱烧伤模型。A组：角膜上皮细胞羊膜移植组;B组单纯羊膜移植组;C组为对照组（碱烧伤后不作任何移植）。术后观察角膜透明度、角膜新生血管及上皮修复情况,裂隙灯显微镜照相记录。3组均于术后1周、2周、1个月及3个月时各取1眼角膜标本行病理组织检查。结果A组除1眼移植片在第7天脱落外,所有移植片在术后3d水肿消退,角膜逐渐透明。B组移植片持续水肿,眼前段炎性反应稍重,但较碱烧伤对照组轻。C组角结膜高度水肿浑浊,烧伤后观察3个月未发现角膜恢复透明现象。病理组织检查显示：A组角膜及周边上皮细胞为多层结构,角膜新生血管消失,基质的炎性细胞浸润减退;B组覆盖上皮细胞表现为完整上皮细胞型,C组角膜浑浊,新生血管及肉芽组织形成。结论人羊膜作载体体外培养兔角膜上皮细胞移植重建角膜基底膜和角膜上皮结构治疗兔碱烧伤后的角结膜损伤是一种合理有效的方法。     

NF-κB抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯（PDTC）对角膜移植大鼠角膜组织的影响

目的　探讨核转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯（pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC）对角膜移植大鼠角膜组织的影响。方法　取14只Wistar大鼠为供体鼠，提供双眼角膜；28只SD大鼠为受体鼠，均以左眼为术眼，右眼设为正常对照，在显微镜下进行同种异体角膜移植术。手术完成后将28只SD大鼠随机分为3组，对照组（10只）以生理盐水滴左眼，实验组（10只）以1 mg·mL^-1 PDTC滴左眼，均为每天3次，每次1滴，空白组（8只）不做任何处理。术后第1天起，每组分别在术后第5天、第15天、第25天在裂隙灯下观察角膜新生血管的情况并进行评分。对各组角膜植片进行病理学及免疫组织化学染色观察，分析各组大鼠NF-κB及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在角膜植片的表达情况。结果　对照组、实验组、空白组角膜移植排斥反应发生的时间分别为（10.80±1.40）d、（23.40±2.30）d、（11.20±2.06）d，实验组排斥反应发生的时间较对照组明显延长，差异有统计学意义（P<0.01）。对照组新生血管一般术后第3~5天出现，并很快进入植片周边，沿缝线处向角膜植片中央粗大生长。实验组新生血管一般术后第5~7天出现，生长速度较慢，血管稀疏。术后不同时间实验组新生血管数、新生血管面积及排斥反应指数均小于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。角膜移植术后，实验组大鼠角膜上皮基底细胞内出现较多空泡，角膜基质层内出现间质水肿；炎症细胞浸润，并见新生的毛细血管；缝线及切口周围见大量淋巴细胞浸润，部分植片中央发生散在的炎症细胞浸润、角膜上皮部分脱落。对照组角膜植片水肿及炎症细胞的浸润程度较实验组明显增加，且对照组角膜植片显著增厚，基质结构疏松、紊乱；实验组角膜植片相对基质板层结构排列有序，新生血管数在相同时间内明显减少。免疫组织化学染色显示，NF-κB阳性细胞数，实验组为每400倍视野（4.236±0.856）个，较对照组［（18.451±1.234）个］明显减少，差异有统计学意义（P<0.05）；空白组大鼠角膜内鲜有阳性表达。VEGF阳性细胞数，实验组为每400倍视野（2.631±0.238）个，较对照组［（6.254±0.721）个］明显减少，差异有统计学意义（P<0.05）；空白组大鼠角膜内鲜有阳性表达。结论　大鼠进行同种异体角膜移植术后，NF-κB抑制剂PDTC可在一定程度上减少角膜新生血管的生成，抑制角膜移植排斥反应的发生。     

microRNA146a在干眼中的表达及作用

目的　研究microRNA146a在干眼小鼠模型中的表达及作用。方法　5周龄BALB/c雄性小鼠20只,左眼为正常对照组（20眼）,右眼为干眼组（20眼）。用2 g·L^-1苯扎氯铵诱导小鼠建立中重度干眼模型。造模完成3 d后,采用泪膜破裂时间（break-up time,BUT）和角膜荧光素钠染色（fluorescein staining,FLS）对小鼠进行眼表相关检查;随后随机选取10只小鼠,采用HE染色观察正常对照组和干眼组角膜和结膜的组织结构差异,结膜PAS染色后计数杯状细胞的量并对比;剩余10只小鼠分别提取角膜与结膜组织的总RNA,采用实时荧光定量PCR检测microRNA146a、白细胞介素（interleukin,IL）-1、IL-6、IL-8以及IL-1受体相关激酶1（IL-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1）和肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF6）的相对表达量。结果　完成干眼造模3 d后,干眼组BUT为 （3.640±0.493）s,明显低于正常对照组的（10.645±0.583）s,差异有统计学意义（P<0.05）;干眼组角膜FLS评分为（14.650±0.860）分,明显高于正常对照组的（1.233±0.927）分,差异有统计学意义（P<0.05）。小鼠角膜和结膜组织HE染色结果显示:与正常对照组相比,干眼组角膜上皮欠平整,细胞数量增多,角膜基质层胶原纤维排列紊乱,成纤维细胞活化;干眼组小鼠结膜上皮细胞数量增多,排列欠规整,并伴有缺损。小鼠结膜PAS染色结果显示:干眼组结膜杯状细胞数量为（9.500±4.506）个,相较于正常对照组的［（29.667±8.756）个］明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示:干眼组角膜和结膜中microRNA146a、IL-1、IL-6、IL-8的相对表达量相较于正常对照组均升高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。相较于正常对照组,干眼组角膜中IRAK1的相对表达量降低,TRAF6的相对表达量升高,而干眼组结膜中IRAK1的相对表达量升高,TRAF6的相对表达量降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　干眼时机体可通过增加microRNA146a的表达,以及其对炎症中靶点的调控作用,从而形成对干眼炎症反应的负反馈调节机制。     

组织因子靶向肽对激光诱导小鼠脉络膜新生血管形成的抑制作用

目的　探讨组织因子靶向肽（tissue factor targeting peptide,TF-TP）对激光诱导C57BL/6小鼠脉络膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV）形成的影响。方法　选取36只清洁级C57BL/6雌性小鼠分为3组:正常对照组、激光组和TF-TP给药组。激光光凝后第1天开始,TF-TP给药组每隔1 d应用5 μL微量进样器给予小鼠玻璃体内注射 1 μL 浓度为100 mg·L^-1的TF-TP,共3次。通过FFA评价各组小鼠CNV渗漏情况;采用组织病理学方法观察光凝后14 d各组小鼠CNV中央最大厚度;采用免疫组织化学法测定视网膜脉络膜组织中CD34的表达;通过Western blot检测小鼠RPE-脉络膜复合物中TF蛋白的表达。结果　激光组小鼠在光凝后14 d,视网膜光斑处可见明显荧光渗漏点,造影晚期呈弥漫性荧光扩散,总渗漏率为69.79%。TF-TP给药组小鼠视网膜光斑处可见轻度荧光渗漏,造影晚期可见渗漏处高荧光点但无扩散,总渗漏率为55.21%。TF-TP给药组的渗漏率低于激光组,差异有统计学意义（P=0.037）。TF-TP给药组CNV中央最大厚度为（60.02±2.48）μm,明显低于激光组（115.89±5.04）μm,差异有统计学意义（P＜0.05）。TF-TP给药组视网膜脉络膜组织中CD34表达的A值为0.09±0.03,明显低于激光组（0.16±0.01）,差异有统计学意义（P＜0.05）。正常对照组、激光组、TF-TP给药组TF蛋白的相对表达量分别为0.14±0.01、0.40±0.02、0.22±0.03。TF-TP给药组TF蛋白的相对表达量明显低于激光组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　TF-TP可以减小激光诱导的小鼠CNV厚度,降低视网膜脉络膜组织中CD34以及RPE脉络膜混合物中TF蛋白的表达,抑制小鼠CNV的形成。     

不同类型干眼对角膜地形图、角膜内皮细胞和角膜厚度的影响

目的　探讨不同类型干眼对角膜地形图、角膜内皮细胞和角膜厚度的影响。方法　采用角膜地形图仪检测泪液生成不足型干眼28例（53眼,A组）、蒸发过强型干眼29例（58眼,B组）、正常对照组26人（51眼,C组）角膜表面规则指数（surface regularity index,SRI）、角膜表面不对称指数（surface asymmetry index,SAI）、角膜表面散光值（cylinder,CYL）;采用角膜内皮镜检测3组中央、鼻侧、颞侧、上方、下方的角膜厚度及角膜内皮细胞情况,并作对比。结果　A组、B组、C组3组间SAI、SRI相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）。A组CYL值为（0.610±0.044）D,较B组的（0.740±0.068）D和C组的（0.870±0.075）D明显降低（P=0.023、0.003）,B组与C组CYL相比差异无统计学意义（P>0.05）。A组、B组各部位角膜厚度与C组相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）。A组中央及鼻侧六边形细胞百分比分别为（51.71±8.27）％和（50.83±10.23）％,均较C组的（56.35±8.66）％和（56.08±7.00）％降低（P=0.005、0.010）,B组各部位六边形细胞百分比与C组相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　不同类型干眼对角膜地形图的影响存在差异;干眼对角膜内皮细胞可能有一定影响;干眼患者角膜厚度与正常人相比无明显差异。     

蓝光对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的影响——基于光学相干断层扫描血管造影观察

目的　应用光学相干断层扫描血管造影（optical coherence tomography angiography，OCTA）观察蓝光对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的影响。方法　选取40只小鼠随机分为实验组和对照组，每组各20只，其中实验组小鼠每天8～16 h于蓝光环境下饲养，而对照组小鼠于正常环境下饲养。分别于照射前及照射后1周、2周、1个月、2个月、3个月，利用OCTA分别测量实验组和对照组小鼠的角膜上皮和角膜全层厚度。结果　与蓝光照射前相比，实验组、对照组分别在照射后1周、2周、1个月，各区域角膜上皮厚度无明显改变，差异均无统计学意义（均为P＞0.05）。与蓝光照射前相比，对照组在照射后2个月、3个月各区域角膜上皮厚度无明显改变，差异均无统计学意义（均为P＞0.05）。与对照组相比，实验组角膜上皮中央、N5、I5、T5区域明显增厚，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）；蓝光照射后3个月，与对照组相比，实验组小鼠角膜中央、内环及N6、T6区域角膜上皮厚度均明显增厚，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。蓝光照射前，照射后1周、2周、1个月、2个月、3个月，实验组与对照组相比，各区域角膜全层厚度比较无明显改变，差异均无统计学意义（均为P＞0.05）。两组角膜上皮厚度的极值，即最大值和最小值差值比较，差异有统计学意义（P<0.05），但两组角膜全层厚度最小值和最大值的差值比较无明显统计学意义（P＞0.05）。结论　蓝光能引起小鼠角膜上皮厚度改变，且中央区域改变较为明显，但短期内角膜全层厚度无明显改变。     

长期配戴软性角膜接触镜者角膜上皮的病理改变

目的研究软性角膜接触镜对角膜上皮组织的基底细胞数目、上皮厚度、基底细胞形态、增殖细胞核抗原（PCNA）等的影响。方法前瞻性病例对照研究。选择配戴软性角膜接触镜超过3年的患者33例（66眼,角膜接触镜组）和从未配戴软性角膜接触镜患者33例（66眼,对照组）,对所选患者,在去瓣准分子激光上皮下角膜磨镶术（Flap—freeEpi．LASIK）手术中,用Epi-K角膜上皮刀取下角膜上皮瓣。2组中各取30例（60眼）采用超声进行离体角膜上皮瓣厚度的测量和采用显微镜进行基底细胞计数,各取3例（6眼）进行石蜡切片及免疫组化染色,观察角膜上皮瓣基底细胞形态的变化和进行PCNA的测定。数据采用独立样本t检验进行分析。结果角膜接触镜组角膜上皮层厚度为（55．33±4．56）μm;对照组角膜上皮层厚度为（57．19±3．82）μm,二者之间差异有统计学意义（t=-2．422,P〈0．05）。角膜接触镜组基底上皮细胞数目减少,为（3872．6±153．2）eells／mm^2;对照组基底上皮细胞数目为（3989．2±289．6）cells／mm^2,二者之间差异有统计学意义（t=-2．757,P〈0．01）。角膜接触镜组较对照组角膜基底细胞排列疏松,细胞形态欠规整,基底膜较厚,相对粗糙。角膜接触镜组角膜上皮基底细胞可发现PCNA阳性细胞,而对照组无阳性细胞。结论长期配戴软性角膜接触镜可导致角膜上皮损伤：使角膜上皮层变薄;单位面积内的的角膜上皮基底细胞数量减少;角膜上皮的组织结构发生病理学改变,细胞形态发生改变。细胞之间的连接和基底膜遭到破坏,PCNA阳性细胞存在。     

无糖尿病视网膜病变的2型糖尿病患者黄斑区视网膜厚度变化:基于SD-OCT的观察

目的　观察无糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）的2型糖尿病患者黄斑区视网膜厚度变化。方法　选择2017年8月至10月在我院检查确诊无DR的2型糖尿病患者40例（40眼,无DR组）和健康志愿者70名（70眼,正常对照组）纳入研究。采用频域光学相干断层扫描成像（spectral domain optical coherence tomography,SD-OCT）以及自动化分层技术分别测量黄斑区视网膜全层（retina,R）、视网膜内层（inner retinal layer,IRL）和视网膜外层即感光细胞层（photoreceptor layer,PL）厚度,将黄斑区以中心凹为中心点,分别以直径为1 mm、3 mm和6 mm的3个同心圆进行分区（R总、R-1、R-3、R-6、IRL-1、IRL-3、IRL-6、PL-1、PL-3及PL-6）,对比两组间视网膜厚度差异。结果　无DR组患者PL-1、PL-3厚度分别为（71±4）μm、（66±2）μm,较正常对照组（73±3）μm、（67±2）μm明显变薄（均为P<0.05）。正常对照组中除IRL-6和PL-1外,其余测量区域不同性别间视网膜结构厚度差异显著（均为P<0.05）。无DR组男性患者PL-3、PL-6厚度分别为（67±2）μm、（65±2）μm,较正常对照组的（68±2）μm、（66±2）μm明显变薄（均为P<0.05）。无DR组女性患者PL-3、PL-6厚度分别为（65±2）μm、（63±2）μm,较正常对照组的（67±2）μm、（64±2）μm明显变薄（均为P<0.05）。其余测量区域组间差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　无DR组黄斑旁中心凹及中心凹周围视网膜PL厚度较正常对照组明显变薄,SD-OCT测量视网膜PL厚度有助于DR早期病变研究,并成为早期监测DR的重要生物学标志。     

人脐带间充质干细胞对大鼠视网膜光损伤的保护作用

目的　观察体外人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs）能否由视网膜匀浆上清液诱导分化为神经样细胞及移植到视网膜光损伤大鼠玻璃体内后存活、迁移、整合及分化的情况。方法　无菌条件下采集健康足月剖宫产胎儿的正常脐带组织，经2.5 g·L^-1胰蛋白酶和1 g·L^-1胶原酶消化、贴壁培养获得hUCMSCs。将CM-Dil标记的hUCMSCs注入光损伤大鼠玻璃体内，观察眼内整合分化情况，对正常对照组、光损伤组、PBS治疗组和hUCMSCs治疗组大鼠视网膜外核层层数和厚度进行对比分析。结果　hUCMSCs培养48 h后贴壁生长，呈长梭形，14 d后可见细胞融合成片。光损伤后大鼠视网膜外核层结构紊乱、细胞层数减少，厚度变薄，与正常对照组［（40.73±1.32）μm］相比，hUCMSCs治疗组［（31.28±1.79）μm］与PBS治疗组［（17.21±1.02）μm］及光损伤组［（12.68±1.42）μm］的视网膜外核层厚度均变薄（均为P<0.05）。与光损伤组相比，PBS治疗组和hUCMSCs治疗组视网膜外核层层数显著增加。结论　HUCMSCs移植到光损伤大鼠玻璃体内后能存活、迁移及整合到受损伤视网膜，hUCMSCs玻璃体内移植可抑制光损伤大鼠光感受器的凋亡。