百香果乙酸乙酯提取物预防化学性肝损伤和免疫性肝损伤的研究

目的：探讨百香果乙酸乙酯提取物对化学性肝损伤和免疫性肝损伤是否具有预防作用。方法：将适应性喂养的小鼠随机分为6组：空白对照组、模型对照组、阳性（联苯双酯）对照组（150 mg·kg^-1）、百香果乙酸乙酯提取物低剂量值（15 mg·kg^-1）、中剂量值（30 mg·kg^-1）、高剂量组（60 mg·kg^-1）,给药14 d后,除空白对照组外,其余各组腹腔注射1%四氯化碳或尾静脉注射ConA15 mg·kg^-1。动物模型构造成功后,小鼠禁食不禁水过夜,小鼠眼眶取血,并且颈椎脱臼处死,解剖小鼠取肝脏,测定血清和肝匀浆中的相关生化指标,并做肝脏的组织病理学检查。结果：百香果乙酸乙酯提取物可以预防肝损伤小鼠血清中的ALT、AST水平的升高,升高肝脏抗氧化系统中抗氧化酶CAT、SOD、GSH-Px的活性及其含量,降低过氧化产物MDA、TG的含量。肝脏组织病理学结果表明：百香果乙酸乙酯提取物对小鼠的肝脏有保护作用。结论：百香果乙酸乙酯提取物对化学性肝损伤以及免疫性肝损伤具有预防作用。     

雷公藤甲素致小鼠肝损伤对转运体Mrp2和Oatp2的影响

目的：通过多药耐药相关蛋白2（multidrug resistance protein 2,Mrp2）和有机阴离子转运多肽2（organic anion transporting polypeptides 2,Oatp2）初步探究雷公藤甲素诱导小鼠肝损伤的机制。方法：雄性ICR小鼠单次灌胃给予雷公藤甲素（1.0 mg·kg^-1）24 h后称重,摘眼球采血后分离血清,测定血清生化指标;取肝组织做病理切片;采用免疫印迹法检测肝脏组织中Mrp2和Oatp2的蛋白表达量。结果：与对照组相比,雷公藤甲素组肝重指数显著增加（P<0.05）,部分血清生化指标显著上升（P<0.05）,且肝细胞发生核碎裂和脂肪变性。雷公藤甲素组Oatp2的表达较对照组显著升高了32.79%（P<0.05）,而Mrp2的表达较对照组显著下降了45.47%（P<0.01）。结论：雷公藤甲素可能通过上调肝细胞膜转运体Oatp2和下调Mrp2,扰乱肝内胆红素和胆汁酸代谢排泄平衡,可能是雷公藤甲素诱导肝损伤的机制之一。     

不同剂量吡唑啉酮希夫碱衍生物铜配合物对小鼠的急性毒性实验

目的: 研究吡唑啉酮希夫碱衍生物铜配合物[Cu(PMPP-SAL)(EtOH)]对小鼠腹腔注射后急性毒性反应,评估其安全性。方法: 采取腹腔注射法给小鼠一次性给药,观察15 d内12.5,25,50,200,400,800 mg·kg^-1共6个剂量组小鼠的生长发育、行为变化、血液学变化。计算[Cu(PMPP-SAL)(EtOH)]腹腔注射半数致死率(LD₅₀)及95%的可信区间。结果: 高剂量组中毒小鼠均出现不同程度的呼吸心跳加快、抽搐等症状。经腹腔注射[Cu(PMPP-SAL)(EtOH)] LD₅₀为:33 mg·kg^-1,95%的可信限为:25.5~43 mg·kg^-1。25 mg·kg^-1剂量组与阳性药物(顺铂,DDP,12.5 mg·kg^-1)组相比具有相似的毒性作用。结论: 低浓度的[Cu(PMPP-SAL)(EtOH)]毒性较小,具有较好的安全性。     

异型南五味子醇提物对D-半乳糖胺/脂多糖致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：研究异型南五味子对D-半乳糖胺/脂多糖诱导小鼠肝损伤的保护作用。方法：ICR小鼠按体质量随机分为 6组,即正常组、模型组、联苯双酯（200 mg·kg^-1）组,异型南五味子醇提物低、中、高剂量（200、400、800 mg·kg^-1）组。每天给药一次,连续给药14 d,末次给药1 h后,除正常组外其余各组用600 mg·kg^-1 D-半乳糖胺和40 μg·kg^-1脂多糖腹腔注射以复制小鼠急性肝损伤模型,末次给药12 h后,摘眼球取血,取材。用生化法测定血清中ALT、AST水平,用酶联免疫法测定各组小鼠肝匀浆中SOD、MDA、MPO及GPx-2含量,测定血清及肝组织中 TNF-α、IL-6、IL-10炎性因子表达水平,并于光镜下检查肝组织病理变化。结果：与模型组比较,异型南五味子200、400、800 mg·kg^-1剂量均能显著降低血清中ALT、AST水平（P<0.05或P<0.01）,明显降低肝匀浆中MDA、MPO含量,显著升高SOD、GPx-2水平（P<0.05或P<0.01）,并能降低肝脏及血清中TNF-α、IL-6含量,升高IL-10的表达水平（P<0.05或P<0.01）。病理观察显示异型南五味子组能明显减轻肝脏灶性坏死、水肿,减少肝脏炎性细胞浸润。结论：异型南五味子对腹腔注射600 mg·kg^-1D-半乳糖胺和40 μg·kg^-1脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤具有较好的保护作用。     

抑制细胞自噬加剧雷公藤甲素所致小鼠肝毒性的研究

目的 探讨细胞自噬与雷公藤甲素所致小鼠肝毒性之间的联系。方法 将小鼠随机分为空白组、模型组、对照组和实验组,每组10只。模型组给予腹腔注射0.8 mg·kg^-1雷公藤甲素(40 mg·mL^-1);对照组给予腹腔注射50 mg·kg^-1氯喹(3 mg·mL^-1);实验组给予腹腔注射0.8 mg·kg^-1雷公藤甲素(40 mg·mL^-1)+50 mg·kg^-1氯喹(3 mg·mL^-1);空白组给予腹腔注射等量0.9%NaCl; 4组小鼠每2 d给药1次,连续给药3次。用蛋白质印迹法检测肝组织中微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化哺乳动物西罗莫司靶蛋白(p-mTOR)的表达水平,用酶联免疫吸附试验法检测胱天蛋白酶3(Caspase-3)和Caspase-9的表达情况。结果 模型组和空白组的LC3Ⅱ蛋白相对表达水平分别为1.18±0.07和0.69±0.04,p-Akt蛋白相对表达水...     

槲皮素-羟丙基-β-环糊精包合物对柔红霉素心脏毒性的保护作用

目的：研究槲皮素-羟丙基-β-环糊精包合物（QUE-HP-β-CD）对柔红霉素（DNR）心脏毒性的保护作用。方法：将实验小鼠分为6组：正常组每天腹腔注射等量生理盐水;DNR组从实验第9~19天每2日1次腹腔注射3 mg·kg^-1 DNR;包合物不同剂量组于实验第1~17天每日1次分别灌胃50,100,200 mg·kg^-1包合物,并于第9天用与DNR组相同的剂量和方式给予DNR;QUE组用100 mg·kg^-1QUE代替包合物,其余处理方法与包合物组完全相同。结果：QUE和不同剂量包合物均能抑制小鼠体质量降低,但100~200 mg·kg^-1包合物可显著改善DNR所致心肌肥大和心室重构,并使各项心肌酶恢复到正常水平;切片显示100 mg·kg^-1包合物能显著改善DNR所致心肌损伤。结论：QUE-HP-β-CD（100 mg·kg^-1）对抑制DNR所致小鼠心脏毒性效果最好。     

高乌头“毒性”部位及镇痛抗炎“药效”部位的筛选

目的：筛选高乌头的毒性及药效部位,探讨毒性与药效的关系,为高乌头"减毒存效"合理炮制提供科学依据。方法：采用小鼠急性毒性实验比较不同溶剂萃取部分的毒性,筛选高乌头的"毒性"部位,以热板法、扭体法及二甲苯致鼠耳肿胀实验考察不同剂量高乌头"毒性"部分对小鼠的镇痛抗炎作用。结果：高乌头不同溶剂萃取部分急性毒性强度差别较大,三氯甲烷部分的毒性最强,水提及正丁醇部分次之,LD₅₀分别为89.65,1 805.40,24 409.41 mg·kg^-1;石油醚、乙酸乙酯及乙醇部分毒性最小,最大给药量分别为2 686.01,3 108.13,28 376.21 mg·kg^-1。给药后120 min,1.5,4.5 mg·kg^-1的高乌头三氯甲烷部分均能提高小鼠热板痛阈值,且呈量效关系,镇痛作用优于1.6 mg·kg^-1氢溴酸高乌甲素组。注射乙酸15 min后,1.5,4.5 mg·kg^-1的高乌头三氯甲烷部分均能有效抑制乙酸所致小鼠的扭体次数,且呈量效关系,抑制率略低于1.6 mg·kg^-1氢溴酸高乌甲素组。在二甲苯致鼠耳肿胀实验中,1.5,4.5 mg·kg^-1的高乌头三氯甲烷部分均能有效缓解小鼠耳肿胀度,且呈量效关系,肿胀抑制率略低于1.6 mg·kg^-1消炎痛组。结论：高乌头三氯甲烷部分既是其毒性部位,又是其镇痛抗炎的主要药效部位,且呈量效关系,推测其镇痛抗炎活性与毒性存在一定的关联。     

百香果对酒精中毒小鼠的解酒作用及其护肝作用的研究

目的：探讨百香果提取物对酒精中毒小鼠的解酒作用以及对酒精性肝损伤的护肝作用。方法：将小鼠随机分为空白对照组,模型对照组,阳性（联苯双酯）对照组（150 mg·kg^-1）,百香果乙酸乙酯提取物低（15 mg·kg^-1）、中（30 mg·kg^-1）、高剂量组（60 mg·kg^-1）,按照相应的剂量灌胃,空白对照组和模型对照组给予相同体积的生理盐水。（1）1 h后,给予50%乙醇（6 g·kg^-1）,建立中毒模型。记录小鼠的醉酒时间与醒酒时间,并做统计学分析。（2）连续灌胃7 d,在末次给药后,除空白对照组给予生理盐水外,其余各组每隔8小时50%乙醇灌胃（6 g·kg^-1）1次,建立急性肝损伤模型。在末次乙醇灌胃1 h后,取血,解剖取肝脏,利用试剂盒测定血清和肝匀浆的生化指标。并将肝脏组织做组织病理学检查。结果：百香果乙酸乙酯提取物对酒精中毒的小鼠有解酒作用;与模型对照组相比,百香果乙酸乙酯提取物可以降低急性肝损伤体内谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的活性,增高肝匀浆中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）的活性及其含量,降低肝匀浆中丙二醇（MDA）、甘油三酯（TG）的含量。肝脏病理结果显示,百香果乙酸乙酯提取物有一定的护肝作用。结论：百香果乙酸乙酯提取物对乙醇中毒的小鼠有一定的解酒作用,并且对酒精性肝损伤有一定的预防肝损伤的作用。     

液-质联用测定Nrf2野生型和基因敲除型小鼠肝脏中16种胆汁酸

目的:建立测定小鼠肝脏中16种胆汁酸浓度的LC-MS/MS法,并将测定结果应用于比较Nrf2野生型和基因敲除型小鼠胆汁酸代谢谱。方法:小鼠肝脏样品加入70%乙腈匀浆,用甲醇沉淀匀浆液中的蛋白并高速离心,取上清液置进样瓶, 用Xtimate^TM C₁₈柱分离,以甲醇-醋酸铵及甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.25 ml·min^-1,进样5 μl分析。结果:16种胆汁酸在0.013~8.000 μmol·L^-1范围内,线性关系良好,定量下限浓度为0.013 μmol·L^-1,肝脏匀浆液加样回收率在94.9%~112.8%之间,日内、日间RSD均小于10.8%。结论:该方法准确可靠,灵敏度高,处理简便,适用于肝脏中胆汁酸浓度的测定,为生物样品中胆汁酸含量测定提供参考。     

LC-MS/MS测定大鼠血清中15种胆汁酸成分

目的 建立同时测定大鼠血清中15种胆汁酸浓度的液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。方法 血清样本用乙腈蛋白沉淀后,采用Xterra RP₁₈（4.6 mm×100 mm,3.5 μm）色谱柱分离操作,以乙腈-10 mmol·L^-1醋酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL·min^-1,用电喷雾离子源,负离子多反应监测。结果 15种胆汁酸成分在定量范围内线性关系良好,日内和日间精密度均<10%,低、中、高浓度提取回收率在69.93%~88.83%。结论 本研究建立的LC-MS/MS法简便、快速、专属性强,能够适用于大鼠血清中15种胆汁酸组分的检测。     

毛蕊花糖苷在大鼠体内吸收、分布及排泄研究

目的:采用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆及组织样品中毛蕊花糖苷的浓度,并探讨其在大鼠体内吸收、分布及排泄研究。方法:SD大鼠灌胃给予毛蕊花糖苷20,40,80,160 mg·kg^-1后,于不同时间点采血,给予40 mg·kg^-1剂量进行分布和排泄试验,测定血浆、组织和排泄物中的毛蕊花糖苷浓度,并用DAS 2.0软件拟合并计算药动学参数。结果:大鼠给药20,40,80,160 mg·kg^-1的毛蕊花糖苷后,药时曲线呈二室开放模型,主要药动学参数t_max,C_max,t_1/2α,AUC_0-t,AUC_0-∞,CL/F,V/F分别为(17.50±10.37)min、(0.313±0.04)mg·L^-1、(6.79±12.10)min、(21.39±4.03)mg·L^-1·min^-1、(22.39±3.89)mg·L^-1·min^-1、(1.83±0.30)L·min^-1·kg^-1、(179.10±52.77)L·kg^-1。大鼠给予40 mg·kg^-1的毛蕊花糖苷后,毛蕊花糖苷在尿液和粪便中36 h内的累积排泄百分数分别为(0.037±0.005)%、(0.004 2±0.000 8)%,胆汁中12 h内的累积排泄率基本为零。结论:毛蕊花糖苷在大鼠体内吸收符合一级动力学,分布在小肠和肺浓度最高,其次为胃和肌肉,其他组织都有少量的分布;且通过尿液、粪便和胆汁排泄量较少,其可能主要通过代谢过程进行消除。     

胆宁片中3种游离蒽醌类成分对急性胆汁淤积大鼠的防治作用

目的:研究胆宁片中大黄素、大黄素甲醚和大黄酚对急性胆汁淤积大鼠的防治作用。方法:采用ɑ-异硫氰酸萘酯(ANIT)复制胆汁淤积模型,实验分为正常对照组、ANIT模型组(60 mg·kg^-1)、胆宁片(3 g·kg^-1)、大黄素(40 mg·kg^-1)、大黄素甲醚(7 mg·kg^-1)和大黄酚(4 mg·kg^-1)保护组。除正常对照组和模型组其它各组大鼠均灌胃给予保护药,1次/天,连续9 d;第7次给保护药12 h后,模型组和其它各保护组动物均灌胃给予ANIT造模。造模48 h后观察各组大鼠胆汁流量变化,测定血清生化指标和检查肝脏病理组织形态。结果:胆宁片和大黄素能显著增加ANIT所抑制的大鼠胆汁流量;能显著降低ANIT导致的大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转氨酶(γ-GTP)、碱性磷酸酶(ALP)活性升高,以及逆转总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)和总胆汁酸(TBA)的水平;而且胆宁片和大黄素能显著改善大鼠肝脏的组织形态。结论:胆宁片和大黄素对ANIT所致的大鼠急性胆汁淤积具有明显的防治作用,其中大黄素可能为胆宁片发挥利胆药效的有效成分之一。     

不同剂量盐酸氨溴索对美罗培南在小鼠肺部浓度的影响

目的：探讨不同剂量盐酸氨溴索与美罗培南联合用药时,盐酸氨溴索对美罗培南在小鼠肺组织分布的药动学影响。方法：将198只小鼠随机分为3组,即对照组、低剂量组与高剂量组。实验用药均采用尾静脉给药方式,低、高剂量组分别给予不同剂量盐酸氨溴索（9 mg·kg^-1、45 mg·kg^-1）,对照组则给予等量生理盐水。随后3组实验动物均给予等量注射用美罗培南（75 mg·kg^-1）。于给药后不同时间点摘眼球放血,并取肺组织制备为组织匀浆样品。采用LC-MS/MS法测定肺组织匀浆样品中美罗培南的浓度,DAS 2.1.1软件拟合药动学参数,SPSS软件进行统计学差异分析。结果：3组间的药动学参数AUC_0-t、AUC_0-∞、t_1/2、t_max、CL、V、C_max均无显著性差异（P>0.05）。结论：不同剂量盐酸氨溴索与美罗培南合用后,对小鼠肺组织中美罗培南分布无影响。     

基于胆汁酸代谢谱对自身免疫性肝炎小鼠模型的早期预判研究

目的:采用液相色谱质谱联用仪(LC-MS/MS)测定胆汁酸代谢谱的分析方法评价刀豆蛋白A诱导自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠模型.方法:小鼠经30 mg· kg-1刀豆蛋白A诱导后可成功建立AIH模型(可称为模型组);而经20 mg· kg-1刀豆蛋白A诱导后其生化、病理指标均未发...