槲皮素对人肝癌细胞SMMC7721增殖的影响

目的：研究槲皮素人肝癌细胞SMMC7721生长抑制的影响。方法：采用^3H-TdR掺入法,MTT检测法和双层琼脂集落形成实验,观察了肝癌细胞的生长变化。结果：槲皮素对人肝癌细胞SMMC77231有显的抑制生长及增殖,并能使肝癌细胞出现脱落死亡,DNA生成物减少,肝癌细胞SMMC7721集落形成率降低。结论：本实验研究提示,槲皮素对肝癌细胞SMMC7721具有较强的抑制生长及增殖性,并可能用于对肿瘤的协同的治疗研究。     

肝动脉阻断对大鼠种植性肝癌的HIF-1α及VEGF表达的影响

目的探讨肝肿瘤行肝动脉栓塞术后肿瘤组织缺氧产生相关的分子生物学改变。材料与方法24只Wistar大白鼠肝左叶种植Walker-256肿瘤后随机分为两组,肿瘤植入后第8d行肝动脉结扎和单纯开腹手术。术后第1、3、7、12d各处死3只大鼠,取出肝肿瘤,通过免疫组织化学染色检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）表达,采用彩色图像分析系统计算平均光密度;SPSS软件作统计学分析。结果肝动脉结扎术后第1、3d,肝动脉结扎组的HIF-1α及VEGF表达显著高于剖腹对照组（P〈0．05）。术后第7、12d,HIF-1α与VEGF表达两组间无显著性差异（P〉0．05）。肝动脉结扎组中,HIF-1α与VEGF表达具有良好的相关性（r=0．60,P〈0．05）。结论肝动脉阻断后缺氧微环境刺激肿瘤细胞通过HIF-1通路产生适应性改变。     

人参皂苷Rg1对急性心肌梗死后VEGF和HIF-1α的作用

目的研究人参皂苷Rg1，对急性心肌梗死（AMI）后血管新生的影响及其作用机制。方法建立Wistar大鼠急性心肌梗死模型，104只大鼠分为假手术组、急性心肌梗死对照组、人参皂苷Rg1低剂量治疗组（1mg／kg）和高剂量治疗组（5mg／kg），于术后3、7、10、14天测定梗死区微血管密度，RT-PCR法检测梗死区心肌组织血管内皮生长因子（VEGF）和缺氧诱导因子1α（HIF-1α）mRNA，免疫组化法检测VFGF在梗死区内的表达。结果梗死区的血管生成数量稳定持续的增加，治疗组显著高于对照组（P〈0．01）；心肌梗死后VEGF、HIF-1α mRNA表达随缺血时间的延长（3、7、10天组）有增高趋势，治疗组明显升高（P〈0．01），14天时VEGF的增长出现停止或下降，而HIF-1α继续升高；假手术组VEGF表达明显低于各手术组。结论严重缺血可刺激心肌组织产生大量的VEGF、HIF-1α，其对缺血心肌起保护作用，人参皂苷Rg1可通过增加其表达而刺激心肌梗死区的血管生成和侧支循环建立。     

慢性高原病患者骨髓组织HIF-1α及VEGF表达水平和MVD变化

目的：了解HIF-1α及VEGF在慢性高原病（CMS）骨髓组织中的表达和MVD的变化,探讨血管新生在CMS发生、发展中的作用。方法：应用免疫组织化学SP法检测20例CMS患者（CMS组）及15例长期居住西宁地区健康人（对照组）骨髓组织中HIF-1α及VEGF的表达情况和MVD的变化（用CD34单抗标记的血管计数法）并进行比较分析。结果：CMS组HIF-1α及VEGF阳性表达率分别为80%及75%,均显著高于对照组（分别为26.67%及33.33%）（P〈0.05）;CMS组MVD为31.93±6.13,也明显高于对照组（24.94±6.18）（P〈0.01）。CMS组HIF-1α阳性表达率、VEGF阳性表达率、MVD及Hb相互间均呈显著正相关（均为P〈0.05）。结论：CMS骨髓组织中HIF-1α和VEGF表达升高,MVD增加,提示HIF-1α与VEGF协同促进血管生成和红细胞增殖,参与CMS的发生发展。     

槲皮素对大肠癌细胞SW116增殖的影响

目的 探讨了槲皮素对人大肠癌细胞SW116生长抑制的影响。方法 采用~3H-TdR掺入法,MTT检测法和双层琼脂集落形成实验,观察了大肠癌细胞的生长变化。结果 槲皮素对人大肠癌细胞SW116有显著的抑制生长及增殖,并能使大肠癌细胞出现脱落并伴有死亡,DNA生成物减少,大肠癌细胞SW116集落形成率降低。结论 本实验研究提示,槲皮素对大肠癌细胞SW116具有较强的抑制生长及杀伤性,并可能运用于协助临床对肿瘤的治疗研究。     

槲皮素对大肠癌细胞SW116增殖的影响

目的：探讨了槲皮素对人大肠癌细胞SW116生长抑制的影响。方法：采用3H－TdR掺入法，MTT检测法和双层琼脂集落形成，[观察了大肠癌细胞的生长变化。结果：槲皮素对人大肠细胞SW116有显的抑制生长及增殖，并能使大肠癌细胞出现脱落并伴有死亡，DNA生成物减少，大肠癌细胞SW116集落形成率降低，结论：本实验研究提示，槲皮素对大肠癌细胞SW116具有较强的抑制生长及杀伤性，并可能运用于协助临床对肿瘤的治疗研究。     

缺氧诱导因子-1α在兔VX2肝癌模型TACE术后的表达及其临床意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在兔VX2肝癌模型TACE术后的表达及其与肿瘤血管生成的相关性.方法 24只荷VX2瘤兔随机分为3组,每组8只.对照组:经肝动脉注入生理盐水2ml;TAE组:单纯碘油(UFLP)0.5～0.8 ml栓塞,TACE组:碘油抗癌药混悬液(UFLP THP)栓塞,UFLP 0.5～O.8 ml,THP 2 mg.于术后2周应用免疫组化法分别检测肿瘤组织中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,用CD34单克隆抗体标记肿瘤血管内皮细胞,计数肿瘤组织中的微血管密度(MVD).结果 TAE组和TACE组HIF-1α、VEGF表达与MVD值均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),HIF-1α与VEGF的表达及MVD的变化呈正相关(rs=0.537,P＜0.01;rs=0.423,P＜0.05).结论 TACE能明显上调HIF-1α的表达,HIF-1α通过调控其下级基因VEGF的表达而促进肿瘤血管的生成,影响肝癌的预后.     

缺氧诱导因子-1α对失血性休克血管反应性的调控作用及机制

目的 探讨失血性休克(hemorrhagic shock,HS)后大鼠肠系膜上动脉血管组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)表达变化规律及其调控血管低反应性发生的相关机制.方法 取大鼠HS模型肠系膜上动脉(superior mensenteric artery,SMA),离体血管环技术检测SMA血管反应性,RT-PCR法分析HIF-1α及内皮型一氧化氮合酶(endothelial-nitro oxide nitroxide synthase,eNOS)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的mRNA表达变化规律.分别采用硝酸还原酶法和放射免疫法测定其血浆NO和PGI含量变化.结果 与正常组相比,HS后HIF-1α、eNOS和COX-2 mRNA表达及其相应血浆产物NO和PGI含量显著增加.血管反应性表现为早期增高、晚期降低的双相变化.寡霉素处理可使eNOS和COX-2 mRNA及其产物NO和PGI表达表现不同程度受抑,对血管反应性表现为对早期的升高趋势的部分抑制和晚期低反应性的改善作用.结论 HIF-1α可能通过对eNOS-NO和COX-2-PGI通路,在休克后血管反应性双相向变化的形成中发挥重要调节作用.     

TACE治疗原发性肝癌后HIF-1α表达与肿瘤复发及转移的关系

经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗原发性肝癌是目前除手术外的首选治疗方法.但TACE术后造成肝癌组织内部绝对缺氧的微环境导致缺氧诱导因子-1(HIF-1)的分泌增多、降解减少,可上调靶基因如糖酵解酶、血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)等的表达,从而增强无氧酵解并诱导血管生成.其与恶性肿瘤的复发及转移密切相关.     

西妥昔单抗对人肝癌细胞HepG2的体外效应

目的探讨西妥昔单抗（爱必妥,cetuximab,Erbitux）对人肝癌细胞HepG2的体外效应。方法流式细胞术检测HepG2细胞表面表皮生长因子受体（EGFR）的表达。细胞划痕及Transwell实验检测西妥昔单抗对HepG2细胞迁移能力的影响。Western印迹检测西妥昔单抗对HepG2细胞EGFR、AKT及ERK表达及活化的影响。碘化丙啶（propidium lodide,PI）染色检测西妥昔单抗对细胞周期的影响。结果流式细胞分析结果显示,HepG2细胞表面存在较高水平的EGFR表达;细胞划痕及Transwell结果表明,西妥昔单抗对HepG2细胞迁移能力具有明显的抑制效应;Western印迹结果证明西妥昔单抗能显著降低HepG2细胞内EGFR、AKT及ERK的磷酸化水平;细胞周期分析显示西妥昔单抗作用24 h剂量依赖性影响HepG2细胞周期进程,并将其阻抑在G0/G1期。结论西妥昔单抗可以抑制高表达EGFR的肝癌细胞系HepG2胞内关键信号蛋白的活化,阻滞其细胞周期,抑制肝癌细胞的迁移能力。     

低氧诱导肾细胞癌786-O细胞HIF-1α的表达变化及意义

目的探讨缺氧条件下肾透明细胞癌786-O细胞缺氧诱导因子1α（HIF-1α）的表达变化及意义。方法786-O细胞在缺氧条件下培养不同时间（0、8、16、24h）后,RT-PCR法检测HIF-1α mRNA的转录情况;Western blot法检测HIF-1α蛋白表达变化。结果常氧状态下HIF-1α mRNA和蛋白均有一定表达。缺氧处理一定时间（8、16、24h）后786-O细胞HIF-1α mRNA表达没有明显改变（P〉0．05）,而HIF-1α蛋白表达水平显著升高（P〈0．01）。结论缺氧条件下786-O细胞HIF-1α表达变化主要在翻译水平而非转录水平。在蛋白水平对HIF-1α表达进行调控可作为肾透明细胞癌治疗的新靶点。     

乏氧辐射诱导人肝癌细胞HepG2的旁效应

目的 研究乏氧条件下辐射诱导人肝癌细胞 HepG2的旁效应及其发生机制。方法 采用条件培养基和细胞共培养两种方式,研究细胞在乏氧条件下经X线照射后对未照射旁细胞的影响。结果 乏氧可以显著降低细胞的直接辐射损伤效应,即微核的产生。 HepG2细胞微核率的氧增比约为1.6。无论是有氧还是乏氧条件下,受辐射细胞均可引起未受照射旁细胞微核率的显著增高,且旁效应程度基本相当,与辐射剂量也存在一定的相关性。另外,活性氧自由基(ROS)清除剂二甲基亚砜(DMSO)和iNOS抑制剂氨基胍(AG)均可显著降低乏氧条件下辐射旁效应引起的细胞微核率,DMSO的降低率为42.2%~46.7%,AG的降低率为42%。结论 ROS和NO及其下游信号因子在HepG2细胞乏氧辐射旁效应中具有重要作用。     

HIF-1α,VEGF-C在胃腺癌中表达及与淋巴结转移的关系

目的：研究缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子-C在胃腺癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系。方法：用免疫组化染色（S-P）法检测44例胃腺癌组织,20例胃正常组织中HIF-1α、VEGF-C的表达。结果：HIF-1α在胃腺癌组织标本中阳性率为59.01%（26/44）,正常胃粘膜组织标本中表达阳性率25.00%（5/20）,两组差异显著（P〈0.05）;VEGF-C在胃腺癌组织标本中阳性表达率为52.27%（23/44）,正常胃粘膜组织标本中表达阳性率20.00%（4/20）,两组差异显著（P〈0.05）;HIF-1α,VEGF-C在低分化腺癌中阳性率最高,但与癌组织分化程度间差异无显著意义（P〉0.05）,而在T1、2,T3、4表达差异显著（P〈0.05）,在淋巴结转移组与无淋巴结转移组表达差异显著（P〈0.05）;两者在年龄、性别、肿瘤部位方面无显著差异;在HIF-1α、VEGF-C共同表达组,淋巴结转移率显著高于非共同表达组;HIF-1α、VEGF-C在胃腺癌组织表达成正相关（rs=0.85,P〈0.05）。结论：HIF-1α、VEGF-C在胃腺癌组织中表达上调,其阳性表达可能在胃腺癌发生、发展和淋巴结转移过程中起重要作用;胃腺癌组织中HIF-1α和VEFG-C蛋白阳性表达成正相关;HIF-1α和VEFG-C联合检测对预测胃腺癌淋巴结转移,可能有一定的价值。     

缺氧对过氧化物酶体增殖物活受体α表达的影响

本文研究不同程度缺氧条件下,肺癌A5 4 9细胞内过氧化物酶体增殖的激活受体α(PPARa)和缺氧诱导因子1α(HIF - 1α)的表达状况,及反义封闭HIF - 1α后,对PPARa表达的影响,以了解PPARa和HIF - 1α的相关性。作者将A5 4 9细胞分为4组:对照组(A组)在5 %CO2 培养箱中37℃培养。将细胞装入小室,以2 0ml min的通气量连续通入5 %CO2 和95 %N2 的混合气体,分别缺氧条件下培养2 4h(B组) ,4 8h(C组)和72h(D组) ,观察不同缺氧时间对PPARa及HIF - 1α蛋白和mRNA表达水平的影响。为观察HIF - 1α对PPARa表达状况的影响,再设计4组:对…     

高压氧对家兔随意皮瓣血管内皮细胞生长因子和缺氧诱导因子的影响

目的 探讨高压氧对家兔随意皮瓣毛细血管增殖作用的机制.方法 建立家兔背部随意皮瓣模型,予高压氧治疗,观察3 d和7 d时对照组和高压氧组皮瓣的成活情况,皮瓣中毛细血管密度及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子(HIF-1)含量的变化情况.结果 3 d和7 d时,高压氧组皮瓣的成活面积明显高于对照组(P＜0.01);皮瓣毛细血管密度明显高于对照组(3 d时P＜0.05,7 d时P＜0.01);3 d和7 d时,高压氧组皮瓣VEGF表达明显高于对照组(P＜0.01),HIF-1、表达明显低于对照组(P＜0.05).结论 高压氧治疗提高随意皮瓣成活率的机制之一可能是通过增加皮瓣组织中VEGF的表达而促进新生毛细血管形成,高压氧治疗可下调皮瓣组织中HIF-1的表达.     

辐射暴露后HIF-1α介导的胰腺外分泌细胞能量代谢变化研究

目的 阐明胰腺外分泌细胞辐射损伤后线粒体损伤情况、能量代谢变化及其可能机制。方法 大鼠胰腺外分泌细胞AR42 J分为照射组与空白对照组,照射组予单次6 Gy X射线照射,空白对照组未做处理。分别检测24、48、72、96 h线粒体膜电位,24及48 h三磷酸腺苷（ATP）产生量、乳酸产生量,24 h活性氧（ROS）产生量;行免疫印迹试验检测辐照后24 h应激及能量代谢相关因子HIF-1α、LDHA、PDH表达情况。大鼠按照随机数表法分为照射组和对照组。对照组给予12 Gy X射线照射,对照组予假照射（0 Gy）,每组4只。实验结果经动物体内实验进一步验证。结果 与对照组相比,照射组细胞在接受辐照后24~96 h,线粒体膜电位呈进行性下降（t=5.438~17.687,P<0.05）,24及48 h ATP产生量下降（q=17.300、8.328,P<0.05）,乳酸产生量升高（q=21.790、16.250,P<0.05）,24 h ROS产生量升高（t=7.935,P<0.05）;辐照促使缺氧诱导因子HIF-1α表达显著升高,介导糖酵解的关键因子LDHA显著升高,PDH表达下调,应用小干扰RNA技术沉默HIF-1α表达在一定程度上消除了辐照诱导的上述蛋白表达的变化。这些结果得到动物体内实验的验证。结论 胰腺外分泌细胞在电离辐射应激下,通过上调HIF-1α表达,促使能量代谢方式发生转变,糖酵解途径加强,而经线粒体的有氧氧化受到抑制。     

不同海拔缺氧对大鼠心肌HIF-1α的影响研究

目的：探讨不同海拔（2 500m以内）条件下对大鼠心肌的损伤作用及NO、MDA与HIF-1α的关系.方法：实验Wistar雄性大鼠18只,分为A组（海拔55m）,B组（海拔1 520m）及C组（海拔2 260m）三组.在各海拔处标准饲养3日后处死取心脏,试剂盒测定低氧诱导因子（HIF-1α）,丙二醛（MDA）,一氧化氮（NO）.结果：C组与A组相比,HIF-1α、MDA明显增加（P＜0.01）,而NO明显降低（P＜0.05）;B组与A组相比,HIF-1α、MDA并无显著差异（P＞0.05）.结论：不同海拔对大鼠心肌的影响不同,在2 260m海拔缺氧条件下,大鼠心肌确实能形成一定程度的氧化损伤,同时自由基的增加及NO的减少能在一定程度上促进HIF-1α的稳定性.     

红景天甙对人肝癌细胞c-myc表达的逆转作用

目的:研究红景天甙对人肝癌细胞系SMMC-7721的c-myc表达的逆转作用。方法:通过不同剂量红景天甙处理体外培养的SMMC-7721细胞株,采用免疫组织化学检测细胞c-myc表达。结果:不同终浓度(0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml)的红景天甙均能抑制SMMC-7721细胞C-myc表达,抑制率分别为8.8%、21.6%和39.8%(P<0.01)。其抑制作用呈剂量效应正相关。结论:红景天甙可抑制SMMC-7721细胞内c-myc的表达,提示其在体外诱导肝癌细胞分化的可能。     

罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌TACE术后乏氧微环境中HIF-1α、VEGF及血清sICAM-1表达影响的研究

目的:观察罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌TACE术后乏氧微环境中HIF-1α、VEGF及血清sICAM-1表达的影响。方法:将大鼠肝包膜下种植法建立的大鼠移植性肝癌模型分为5组:非TACE对照组、TACE+NS对照组、TACE+罗勒胶囊大剂量组、TACE+罗勒胶囊中剂量组、TACE+罗勒胶囊小剂量组。对于非TACE对照组大鼠只进行开腹操作,不行TACE术,其余4组大鼠均行TACE术;术后分别给予不同剂量罗勒胶囊灌胃治疗。10d后处死大鼠,取出瘤块,观察形态学变化;采用免疫组化法检测瘤块中HIF-1α、VEGF的表达情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠血清中sICAM-1表达情况。结果:与TACE+NS组比较罗勒胶囊大剂量组瘤重明显降低(P<0.05);与非TACE组比较,TACE+NS组HIF-1α、VEGF及血清sICAM-1的表达均增高(P<0.05);罗勒胶囊治疗组HIF-1α、VEGF表达及血清sICAM-1较TACE+NS组表达显著降低(P<0.05),肝癌组织中VEGF(P<0.01,r=0.428)、血清sICAM-1的表达与HIF-1α(P<0.01,r=0.601)的表达具有明显相关性。结论:罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌具有改善TACE术后乏氧的作用,并通过降低术后肿瘤乏氧微环境中HIF-1α和VEGF及血清sICAM-1的表达,而起到对TACE术后肝癌侵袭转移的抑制作用。