特异性核酶诱导宫颈癌细胞凋亡的研究

目的：研究特异性抗HPV16E6核酶对宫颈癌细胞凋亡的影响。方法：设计特异性切割HPV16E6基因的核酶,构建抗HPV16E6核酶的真核表达质粒。以脂质体法将抗HPV16E6核酶、空载体质粒分别导入CaSKi细胞,命名为CaSKi-R,CaSKi-P细胞。Northern杂交细胞3种细胞中E6基因的表达。流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,并测定HPV16E6,c-myc,bal-2,p53,fas等蛋白的表达。将3种细胞在相差显微镜和荧光显微镜下观察,采用荧光（Hoechst33342）染色和TUNEL（TDT-mediated dUTP nick end labelling）2种方法测定细胞凋亡。结果：Northern杂交证实CaSKi-P中表达E6较CaSKi-P,CaS-Ki明显降低。与CaSKi-R细胞表达HPV16E6,c-myc,bcl-2蛋白明显减少,而表达p53明显增高;两者中fas蛋白的表达相近。CaSKi-P细胞中各基因的表达与CaSKi细胞无显著差异。结论：抗HPV16E6-Ribozyme的导入能诱导宫颈癌细胞凋亡,其原因可能在于病毒癌基因E6表达的降低,以及由此而引起的细胞内一系列基因表达的改变。     

HPV感染的形态特征及HPV型别与宫颈癌的临床病理联系

目的观察人乳头瘤病毒（HPV）感染的形态学改变,分析挖空细胞形态、HPV型别与宫颈鳞状细胞癌临床病理参数间的联系。方法对594例宫颈鳞状细胞癌进行了形态学观察,按照WHO标准进行组织学分型及分级。运用SPFIO—PCR技术进行HPVDNA扩增,并采用DEIA（DNA enzyme immunoassay）及LiPA（line probe assay）方法进行DNA检测及分型。结果经检测HPVDNA阳性者581例,其中394例具有HPV感染的组织学特点,即出现典型（104例）或不典型（290例）的挖空细胞,检出率为67．8％。36．2％的角化型及72．2％的高分化宫颈鳞状细胞癌中可见典型挖空细胞,而34．0％的非角化型及50．7％的低分化者中无挖空细胞。在HPV型别检测中,以HPV16阳性最多见为453例,其中高、中、低分化者分别为16例、389例及48例;其次为HPV18共43例,其中中分化者32例,低分化者11例;其他高危型HPV按照阳性数多少依次为HPV31、52、59、58、39、45、33、56、66、68、73,分别为17例、12例、12例、11例、6例、5例、5例、3例、2例、1例、1例;低危型HPV包括6及53各1例,且均同时伴有高危型HPV感染。结果显示,HPV16、HPV18阳性者较其他高危型HPV阳性者发病年龄轻;HPV18阳性者较HPV16阳性者分化程度低;HPV18阳性者较HPV16阳性者无挖空细胞病例所占比例较高（分别为48．8％及31．8％）;患者年龄越大FIGO分期越晚。结论挖空细胞形态与宫颈鳞状细胞癌的分化程度密切相关,典型挖空细胞多出现在分化较成熟的癌组织中,而分化较差者常无挖空细胞。HPV16、18是宫颈鳞状细胞癌最重要且最危险的HPV型别。HPV18阳性可能提示宫颈鳞状细胞癌恶性程度高。     

同源结构域相互作用蛋白激酶2在宫颈癌中的表达及其与人乳头瘤病毒感染和细胞凋亡的关系

目的 探讨宫颈癌中同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染和细胞凋亡的关系.方法 取50例宫颈癌组织和15例正常宫颈组织,采用免疫组化法测定HIPK2和HPV的表达,采用DNA原位末端标记(TUNEL)技术检测了细胞凋亡情况.结果 15例正常宫颈组织中,HIPK2、HPV和PCNA阳性表达者分别有1、3和4例,而50例宫颈癌组织中分别有44、39和45例,官颈癌组织HIPK2、HPV和PCNA的表达明显高于正常官颈组织(均P<0.05).宫颈癌组凋亡指数(AJ)为(1.6±0.7)%,正常宫颈组AI为(5.7±0.2)%,差异有统计学意义(P<0.01).在宫颈癌组织中,HIPK2表达与HPV表达呈正相关(r=0.467,P=0.0006),与AI呈负相关(r=-0.370,P=0.0083).结论 在宫颈癌中,HIPK2的表达与HPV感染和细胞凋亡密切相关,可能在宫颈癌发生、发展中起重要作用.     

宫颈癌组织IEX-1表达及其与HPV感染相关性研究

目的 即刻早期反应基因(immediate early response gene X-1,IEX-1)是一种凋亡易感基因,在多种人类恶性肿瘤中表达失调,但在宫颈癌组织中的表达相关研究较少,检测宫颈癌组织IEX-1的表达,了解其在宫颈癌发生发展中的作用,分析其与人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的关系.方法 收集2011-01-01-2015-10-31郑州大学第一附属医院病理科存档蜡块标本132份,采用免疫组化法检测IEX-1在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及良性宫颈病变组织中的表达情况,分析IEX-1的表达与宫颈癌临床病理关系.采用RT-qPCR法及蛋白质印迹法检测Siha(HPV16+)、HeLa(HPV18+)和C-33a(HPV-)3种宫颈癌细胞株中IEX-1mRNA及蛋白的表达,siRNA法靶向沉默E6后Siha细胞E6、IEX-1的mRNA及蛋白表达,分析与HPV感染的关系.结果 IEX-1在宫颈良性病变、CIN组织和宫颈癌组织中的表达分别为72.4％、58.7％和21.1％,差异有统计学意义,x2=21.345,p=0.001.宫颈癌组织IEX-1的表达与患者年龄、病理类型、HPV感染型别及FIGO分期无关,均P＞0.05.IEX-1的表达与宫颈癌分化程度、淋巴结转移情况及宫旁浸润密切相关,均P＜0.05.C 33a细胞中IEX-1 mRNA表达量为21.652±9.020,明显高于Siha细胞的1(t=7.34,P＜0.001)和HeLa细胞的1.742±0.854(t=6.21,P＜0.001);IEX-1蛋白表达量为18.017±1.351,明显高于Siha细胞的1.519±0.391(t=8.16,P＜0.001)和HeLa细胞的1.957±0.363(t=7.19,P＜0.001).干扰组E6 mRNA水平为0.218±0.106,低于阴性对照组的1.031±0.072(t=9.21,P＜0.001)和空白对照组(t=8.46,P＜0.001);干扰组E6蛋白表达量为0.184±0.274,低于阴性对照组的0.692±0.133(t=8.71,P＜0.001)和空白对照组的0.783±0.097(t=8.06,P＜0.001).干扰组IEX-1 mRNA水平为20.083±0.672,低于阴性对照组的1.193±0.408(t=9.04,P＜0.001)和空白对照组,t=7.56,P＜0.001;干扰组IEX-1蛋白表达量为0.672±0.135,低于阴性对照组的0.137±0.071(t=7.92,P＜＜0.001)和空白对照组的0.081±0.009(t=6.47,P＜0.001).结论 IEX-1在宫颈癌中表达降低,其表达水平与宫颈癌恶性程度呈负相关,可能参与了宫颈癌的发生与发展.IEX-1在宫颈癌细胞中的表达与HPV感染有关,但与感染的HPV型别无关.     

扁桃体鳞癌中HPV感染与EGFR、VEGF表达的相关性研究

目的:研究扁桃体鳞癌(squamous cell carcinomas of the tonsil tonsillar,SCCs)中人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor,EGFR)表达的关系,探讨HPV与EGFR和VEGF在扁桃体鳞癌发生中的交互效应。方法:采用多重实时荧光定量聚合酶链反应(multiplex real-time polymerase chain reaction,MT-PCR)检测85例扁桃体鳞癌HPV DNA及型别,通过HPV DNA分析进行HPV感染状况的测定;同时采用半定量免疫组化检测HPV(+)组和HPV(-)组中VEGF、EGFR蛋白表达情况。结果:扁桃体鳞癌中HPV感染率为49.4%(42/85),HPV-16型占所有感染者的比例为90.5%(38/42),明显高于其他型别;HPV(+)组EGFR蛋白表达明显低于HPV(-)组(P值均<0.01);HPV(+)组与HPV(-)组VEGF蛋白表达无明显差异;此外,VEGF表达与EGFR、患者的年龄、性别、TNM分期、组织学分级均无明显相关性。结论:HPV感染与扁桃体鳞癌的发生存在相关性,HPV相关的扁桃体鳞癌中,HPV基因可能通过改变EGFR表达致癌,为HPV致癌机理进一步研究提供一个新的视角,具有重要的理论意义。     

靶向切割HPV16E6 mRNA的核酶诱导宫颈癌细胞CaSKi凋亡的研究(英)

背景与目的:人乳头瘤病毒与宫颈癌的发生相关,核酶是一种能切割靶RNA的特殊RNA。本研究旨在探讨转染了靶向切割HPV16E6mRNA核酶的宫颈癌细胞株的表型,以及核酶对宫颈癌细胞增殖与调亡的作用。方法:计算机设计特异性切割HPV16E6mRNA的核酶,构建抗HPV16E6核酶(HRz)的真核表达质粒。以脂质体法将抗HPV16E6核酶、空载体质粒分别导入CaSKi细胞,命名为CaSKi-R和CaSKi-P细胞。Northern杂交检测3种细胞中E6基因的表达。流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,将3种细胞在相差显微镜和荧光显微镜下观察,采用荧光(Hoechst33342)染色和TUNEL(TDT-mediateddUTPnickendlabeling)两种方法测定细胞凋亡。流式细胞术测定HPV16E6、c-myc、bcl-2、p53、Fas等蛋白的表达。结果:RNA点杂交证实核酶mRNA能稳定表达于CaSKi-R细胞中。Northern杂交证实CaSKi-R中E6mRNA表达水平较CaSKi细胞明显降低,而CaSKi-P和CaSKi细胞的E6mRNA表达水平无差异。CaSKi-R细胞凋亡率明显高于CaSKi和CaSKi-P细胞,细胞周期阻滞于G2期,S期细胞百分率下降。抗HPV16E6核酶能明显减少CaSKi-R细胞中HPV16E6、c-myc、bcl-2蛋白的表达,增高p53蛋白的表达;这种现象并不发生于CaSKi-P细胞中。Fas蛋白的表达在3种细胞中都相近。结论:抗HPV16E6核酶的导入能诱导宫颈癌细     

环氧合酶-2在宫颈癌中的表达及其与HPV16感染的关系

目的：探讨环氧合酶-2(COX-2)在宫颈癌发生发展中的作用，分析COX-2与宫颈癌中HPV16感染之间的关系。方法：收集46例宫颈癌组织作为实验组，31例健康的宫颈组织作为对照组。用免疫组化方法检测各组的COX-2表达水平。用PCK方法检测宫颈癌组的HPV16DNA。结果：COX-2在宫颈癌组织中有较高表达；COX-2在宫颈癌组织中表达与年龄、临床分期、组织分化程度、浸润深度之间均无相关性。而与淋巴结转移有显著相关性；宫颈癌组织中HPV16DNA阳性率为5652％(26/46)。在COX-2表达阳性的宫颈癌组织中，HPV16DNA阳性组的染色分值明显高于HPV16DNA阴性组。结论：宫颈癌的发生发展中有COX-2的参与。并且COX-2与宫颈癌的转移密切相关。宫颈癌中COX-2高表达与HPV16感染可能有一定的相关性。     

人乳头瘤病毒与宫颈癌关系的研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)是能诱发宫颈癌的DNA病毒,尤其是高危型和混合感染.HPV的生物特性导致其具有致癌性,利用HPV的核酸检测可简便迅速地诊断宫颈癌,有利于早期治疗.鉴于HPV与宫颈癌的关系,HPV疫苗研制有重要意义.     

合肥地区食管鳞状细胞癌患者HPV感染调查及HR-HPV感染与预后的关系

目的:对合肥地区食管鳞状细胞癌患者人乳头瘤病毒(HPV)感染情况进行调查分析,并探讨高危型HPV(HR-HPV)感染与患者预后的关系.方法:选取2013年06月至2019年02月本院收治的384例合肥地区食管鳞状细胞癌(包括食管鳞状上皮高级别上皮内瘤变伴癌变)患者,均行HPV检测.统计分析纳入研究患者HPV感染情况,另...     

宫颈癌患者高危型HPV感染状况及其与血清Hmga1、CK19、CA125表达的相关性

目的 探讨宫颈癌患者高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染状况及其与血清高迁移率蛋白a1(Hmga1)、细胞角蛋白(CK)19、糖类抗原(CA)125表达的相关性。方法 选取宫颈癌患者63例作为研究组,同期纳入50例进行妇科健康体检的女性作为对照组,32例临床诊断宫颈上皮内瘤变(CIN)的女性为癌前病变组。观察3组女性高危型HPV感染状况及血清Hmga1、CK19、CA125水平表达。结果 FIGOⅠB期(87.5%)及FIGOⅡA期(92.3%)患者高危型HPV感染率高于CINⅠ期(38.5%)患者,同时FIGOⅡA期患者高危型HPV感染率高于CINⅡ期(62.5%)患者(P<0.05)。3组血清Hmga1、CK19和CA125水平宫颈癌组>癌前病变组>对照组(P<0.05);癌前病变程度越高的患者血清Hmga1、CK19和CA125水平越高(P<0.05)。血清Hmga1、CK19和CA125水平与宫颈癌病理类型无关(P>0.05),与患者肿瘤分化程度、FIGO分期及HPV病毒负荷量相关(P<0.05)。结论 高危型HPV感染状况与血清Hmga1...     

Aurora-A在宫颈癌及癌前病变中的表达以及与HPV感染的相关性研究

目的 分析正常宫颈、不同级别宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈鳞状细胞癌(Cervical squamous cell carcinoma,SCC)组织中Aurora-A的表达差异,观察其异常表达对宫颈癌变过程的影响及与人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)感染的相关性,了解Aroura-A在CIN与宫颈癌发病机制中的作用。方法 选取已进行宫颈管分泌物高危型HPV检测的宫颈活检或手术标本存档蜡块100例,其中正常宫颈组织20例,CIN1级组织20例、CIN 2级组织20例、CIN 3级组织20例,宫颈癌全部选取的是宫颈鳞状细胞癌组织20例。采用免疫组化方法检测Aurora-A蛋白的表达水平,并分析Aurora-A表达与HR-HPV感染的相关性。结果 Aurora-A在CIN以及宫颈癌中存在高表达(P＜0.05),且其阳性表达率随着宫颈病变程度的加深而增强,两者呈正相关性(r=0.475,P＜0.001);在高级别宫颈上皮内瘤变(CIN2、3)组织中,Aurora-A表达与HPV感染间存在正相关(V=0.591,P＜0.05)。结论 Aurora-A的异常表达可能与宫颈癌的发生发展密切有关,Aurora-A可能作为早期诊断CIN或宫颈癌的重要分子生物学指标,同时也可能是宫颈癌的潜在治疗靶点。     

RCAS1在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16感染的关系

背景与目的:表达在SiSo细胞上的受体结合肿瘤抗原(receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells,RCAS1)在多种肿瘤组织中呈高表达,并与肿瘤逃避免疫监视有关.本研究检测RCAS1蛋白在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16感染的相关性,并探讨其临床意义.方法:采用免疫组化SP(streptavidin-peroxidase)法,分别检测71例宫颈癌、76例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及20例正常宫颈上皮组织中RCAS1蛋白与HPV16 E7蛋白的表达,并分析两者的表达与临床病理因素的关系.结果:宫颈癌组织中,RCAS1蛋白主要表达于癌细胞膜和/或细胞浆,HPV16 E7蛋白主要表达于癌细胞核.正常宫颈上皮组织不表达RCAS1蛋白,CIN与宫颈癌组织中RCAS1蛋白的表达率分别为39.47%和77.46%,HPV16 E7蛋白的表达率分别为0.05%、28.94%和61.97%,提示随着宫颈病变恶性程度的进展,RCAS1与HPV16 E7表达均逐渐增强(P＜0.05).低分化宫颈癌组中RCAS1表达显著高于高、中分化宫颈癌组(P=0.002),但与患者年龄、临床分期及组织学分型无关(P＞0.05);HPV16 E7在鳞癌组中的表达显著高于腺癌组(P=0.000),但与患者年龄、临床分期、组织学分级无关(P＞0.05).RCAS1的表达与HPV16感染在宫颈癌中的表达呈正相关(r=0.780,P=0.000).结论:RCAS1基因在宫颈癌组织中表达增强,RCAS1表达强度与宫颈癌恶性程度相关;RCAS1阳性的宫颈癌组织中存在HPV16感染.     

鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。方法： 用免疫组化及TUNEL方法检测45例鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。结果： 鳞癌Fas/FasL表达高于基底细胞癌;Fas/FasL阳性细胞凋亡率高于阴性细胞。　结论： Fas/FasL系统与细胞凋亡密切相关,并在肿瘤侵袭中可能起重要作用。     

子宫颈鳞状细胞癌中人乳头瘤病毒感染与Rb相关基因蛋白的表达及其意义

 目的　探讨子宫颈浸润性鳞状细胞癌（ISCC）中高危型人乳头瘤病毒（HPV）16／18、31／33感染与Rb相关基因蛋白p16ink4a、CyclinD1、CDK4、Rb、E2F-1和Ki-67的表达情况并分析HPV及Rb相关蛋白与ISCC临床病理参数的相关性。方法　收集73例ISCC、30例高级别鳞状上皮内病变（HSIL）、32例低级别鳞状上皮内病变（LSIL）和21例正常子宫颈鳞状上皮（NCE）。采用原位杂交法检测HPV16／18、31／33DNA的表达;免疫组织化学二步法检测上述蛋白的表达。统计分析HPV、上述蛋白及临床病理参数的关系。结果　HPV16／18、31／33在四组总体间表达差异有统计学意义（P＜0.01）,HPV16／18阳性表达与脉管内瘤栓正相关（OR＝3.875）,HPV31／33阳性表达与临床分期正相关（OR＝3.5）;p16ink4a、CyclinD1、CDK4、Rb、E2F-1和Ki-67在四组总体间差异有统计学意义（P＜0.01）。Rb与Ki-67正相关（rs=0.250）;p16ink4a阳性表达与组织分级负相关（OR＝0.942）;CDK4阳性表达与组织分级正相关（OR＝1.033）;年龄与临床分期正相关（OR＝1.063）。结论　HPV16／18、31／33感染与ISCC的发生、发展密切相关;CDK4、Ki-67可作为子宫颈病变程度的客观参考指标;Rb在ISCC中的详细作用机制还需进一步探讨。     

广东省潮汕地区单中心头颈部鳞状细胞癌患者人乳头瘤病毒初步检测分析

目的探讨广东省潮汕地区单中心头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)患者人乳头瘤病毒(HPV)感染及亚型状况。方法收集2014年12月至2016年12月汕头大学医学院附属肿瘤医院167例HNSCC患者的肿瘤原发灶标本。采用免疫组织化学(IHC)法检测肿瘤组织中p16蛋白的表达,以肿瘤细胞p16蛋白阳性率≥76%为判断HNSCC存在HPV的依据,分析p16蛋白与患者临床病理因素的关系。采用原位杂交法(ISH)检测肿瘤组织中是否存在HPV 16、18 DNA;应用RNAscope法检测肿瘤组织中18种常见的高危HPV亚型(HPV HR 18)RNA的表达情况,分析p16蛋白阳性细胞比例≥50%的肿瘤组织中HPV HR 18阳性情况。结果患者p16蛋白强表达率为7.2%(12/167);低龄组(<50岁)p16蛋白强表达率高于高龄组(≥50岁)[17.2%(5/29)比5.1%(7/138),χ^2=5.321,P=0.021];口咽癌组p16蛋白强表达率高于非口咽癌组[29.4%(5/17)比4.7%(7/150),χ^2=14.019,P<0.01];性别、烟酒嗜好及肿瘤分期分层患者间p16蛋白强表达率差异均无统计学意义(均P>0.05)。ISH检测示,全部HNSCC原发灶均未发现HPV 16、18 DNA,重复实验结果一致。RNAscope法检测示,肿瘤细胞p16蛋白阳性率≥50%的19例患者中,3例(15.8%)肿瘤组织HPV HR 18 RNA阳性。结论潮汕地区HNSCC患者的HPV阳性率较低,以口咽癌患者最高,且呈年轻化趋势。潮汕地区HNSCC主要致HPV亚型可能并非HPV 16、18,而可能是包括HPV HR 18中的其他致病亚型。     

口腔鳞状细胞癌基质金属蛋白酶-9表达及其与血管生成的关系

[目的]探讨口腔鳞状细胞癌（OSCC）发生，发展过程中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）对微血管生成的意义。[方法]采用疫组化SP法对65例OSCC、40例非典型增生、22例正常口腔黏膜进行MMP-9、CD34免疫组化染色。检测OSCC、非典型增生、正常口腔黏膜中MMP-9的表达和微血管密度（MVD）．并分析MMP-9的表达与MVD之间，以及它们与OSCC临床病理特征之间的关系。[结果] OSCC组中MMP-9的表达与MVD值均高于非典型增生组，在非典型增生组中均高于正常口腔黏膜组：OSCC组、非典型增生组和正常口腔黏膜组中MMP-9表达与MVD有正相关趋势；MMP-9的表达与肿瘤大小、淋巴结转移密切相类．MVD与淋巴结转移密切相炎。[结论] MMP-9可能是OSCC的重要促血管生成因于之一。     

宫颈癌组织中CDC6、TFF2的表达及其与HPV16/18感染的相关性研究

背景与目的： 研究细胞分裂周期蛋白6(CDC6)、三叶因子2(TFF2)在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒(HPV)16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制。 材料与方法： 选择50例宫颈癌石蜡标本、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ20例、CIN Ⅱ-Ⅲ20例、正常宫颈组织20例,采用免疫组织化学方法检测CDC6、TFF2的表达,同时采用PCR技术检测HPV16/18 DNA,并对 HPV16/18感染情况与CDC6和TFF2表达的相关性进行分析。 结果： 在宫颈癌组织中CDC6的阳性率高于CIN和正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P<0.05),且CDC6阳性表达率与病理分级、淋巴结转移相关,差异具有统计学意义(P均<0.05)。在宫颈癌组织中TFF2的阳性率低于CIN和正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P<0.05),TFF2阳性表达率与年龄分组相关,差异具有统计学意义(P<0.05),其阳性表达率均与临床分期、病理分级、淋巴转移无相关关系(P均>0.05);以正常宫颈组织、CIN和宫颈癌为序 HPV16/18 DNA的阳性检出率逐渐升高,各组间的差异具有统计学意义(P<0.05),但与年龄、临床分期、病理分级、淋巴转移无相关关系(P均>0.05)。在宫颈癌组织中,CDC6与HPV16/18感染呈正相关(rs=0.386, P<0.05),TFF2与CDC6、HPV16/18感染呈负相关(rs=-0.356,P<0.05;rs=-0.500,P<0.05)。 结论： 宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中CDC6、TFF2表达的改变可能与 HPV16/18感染有关。CDC6的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关。     

人乳头瘤病毒的基因分型与宫颈腺癌的预后相关性研究

目的 探讨人乳头瘤病毒不同的基因分型在宫颈腺癌中的表达情况及其对宫颈腺癌预后的影响.方法 采用导流杂交的方法检测32例宫颈腺癌中HPV分型情况,分析不同的HPV基因分型与宫颈腺癌预后的关系.结果 宫颈腺癌中HPV阳性率为71.9％,其中HPV18阳性10例(43.5％),HPV16阳性8例(34.8％),其他型感染5例(21.7％),HPV感染与年龄相关,与其他临床病理因素无相关性,单因素分析显示宫颈腺癌的预后与FIGO分期、病理分级、淋巴结是否转移及HPV分型有关,多因素分析显示HPV分型是宫颈腺癌单独的预后因素.结论 HPV基因分型是宫颈腺癌单独的预后因素,HPV18型感染者比HPV16型感染者预后差.     

半乳糖凝集素-9在食管鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨半乳糖凝集素-9(galectin-9)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)组织及癌旁组织中的表达及对ESCC细胞迁移和侵袭能力的影响.方法:收集山东大学附属济南市中心医院胸外科于2012年1月至2013年1月期间手术切除的ESCC患者组织标本89例及距癌组织边缘5 cm以上的癌旁组织标本20例,采用免疫组化法检测ES-CC及癌旁组织中galectin-9蛋白的表达,并分析其与患者性别、年龄、浸润深度、肿瘤大小、分化程度、病理分期(pTNM)及淋巴结转移等临床病理特征之间的关系.采用脂质体介导法将pcDNA3.1-galectin-9转染食管癌EC9706细胞系,运用细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验,检测galectin-9表达上调对食管癌EC9706细胞迁移、侵袭能力的影响.结果:ESCC组织中galectin-9蛋白的阳性表达率明显低于癌旁组织[25.8％ (23/89) vs 50％ (10/20),P＜0.05],galectin-9蛋白的表达与ESCC患者肿瘤分化程度及淋巴结转移相关(均P＜0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度及病理分期无关(均P＞0.05).在食管癌EC9706细胞中过表达galectin-9后,与阴性对照组相比,肿瘤细胞的侵袭[(45.0±8.0) vs (160.0±12.0),P＜0.01]和迁移能力[(20.6±2.1) vs(87.6±4.9),P＜0.05]明显下降.结论:galectin-9的表达缺失参与了食管癌的发生、发展,ga-lectin-9可以抑制ESCC细胞的侵袭及迁移.     

宫颈癌组织中CDC6、CDK1的表达及其与HPV16／18感染的相关性研究

目的：研究CDC6、CDK1在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的相关性，以探讨宫颈癌的发生机制，进一步寻找宫颈癌诊断的新的分子标志物。方法：采用免疫组织化学方法对50例宫颈癌石蜡标本、宫颈上皮内瘤样病变CINI20例、CINⅡ-Ⅲ20例、正常宫颈组织20例进行CDC6、CDK1的检测，同时采用PCR技术检测HPV16/18感染情况。结果：在宫颈癌组织中CDC6、CDK1的阳性率高于CIN和正常宫颈组织，差异有显著性（均P〈0．05），且CDC6、CDKl阳性表达率与病理分级有关，差异有显著性（均P〈0．05），CDC6阳性表达率均与淋巴结转移有关（P〈0．05）；CDK1阳性表达率均与淋巴结转移无关（P〉0．05）；在宫颈癌组织中CDC6和CDK1的阳性表达率与年龄、临床分期无关（均P〉0．05）。HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高，差异有显著性（P〈0．05），但与临床分期、病理分级、淋巴转移、年龄无关（均P〉0．05）。CDK1和CDC6的表达有正相关性（L=0．529，P〈0．05）；CDC6与HPV16/18感染有关（r=0．386，P〈0．05）；CDK1与HPV16/18感染无关（rs=0．145，P〉0．05）。结论：宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中CDC6表达的改变可能与HPV16/18感染有关，且互相作用，共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生。这些指标综合分析可能为阐明HPV16/18的恶性转化机制以及为提高宫颈癌及其癌前病变诊断率提供参考依据。CDC6、CDK1的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关，可作为宫颈癌筛查、预后判断的有用指标。