血必净对鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠中性粒细胞翻译控制肿瘤蛋白表达的影响简

目的：探讨血必净注射液对鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠中性粒细胞翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠42只,随机分为对照组（n=6）、脓毒症组（n=18）和血必净组（n=18）。腹腔注射鲍曼不动杆菌悬液造模成功后,根据取血提取中性粒细胞的时间,脓毒症组和血必净组又随机各分为6、12和24h3个亚组,每亚组6只。Western—blotting方法检测中性粒细胞TCTP的表达,比较脓毒症和血必净各亚组TCTP的表达。结果：脓毒症各亚组中性粒细胞TCTP表达量较对照组均增高（P〈0．05）;血必净组各亚组中性粒细胞TCTP表达量分别较脓毒症各对应亚组均降低（P〈0．05）。结论：血必净注射液治疗脓毒症可能与抑制中性粒细胞TCTP的表达有关。     

血必净对脓毒症大鼠心肌保护作用的研究

目的观察血必净注射液对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、脓毒症模型组（CLP组）及血必净治疗组（XBJ组），每组10只。Sham组只开腹关腹，余同CLP组；CLP组采用盲肠结扎穿孔法造模；XBJ组造模后立即经腹腔注射血必净注射液8ml／kg。观察24h后检测血清肌钙蛋白Ⅰ（TnI）、脑钠肽（BNP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、自细胞介素（IL）-1B，留取左心室心肌组织观察超微结构的改变。结果①脓毒症状态下TnⅠ、BNP、TNF-α、IL-1β水平显著升高，应用血必净注射液后各项指标明显改善。②血必净组心肌组织超微结构的损害较脓毒症组明显减轻。结论血必净注射液能改善脓毒症大鼠的心肌损伤，其机制可能与下调TNF-α、IL-1β水平有关。     

mTOR-自噬通路对脓毒症小鼠海马小胶质细胞表型的影响

目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）-自噬通路对脓毒症小鼠海马小胶质细胞表型的影响。方法 54 只雄性 ICR 小鼠,按照随机数字表法分为 3 组（n=18）：假手术组（Sham 组）、脓毒症组（CLP 组）和脓毒症+mTOR抑制剂雷帕霉素组（CLP+Ra组）。Sham组只进行开腹手术操作;CLP组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症小鼠模型;CLP+Ra 组于造模前 6 h腹腔注射雷帕霉素（1.5 mg/kg）。于造模后 24 h各组取 6只,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测海马组织肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-10和转化生长因子（TGF）-β水平;采用免疫荧光染色法检测海马组织切片离子钙接头蛋白分子（Iba）-1/CD86和 Iba-1/CD206阳性细胞数量;采用蛋白免疫印迹法测定海马组织 mTOR磷酸化（p-mTOR）水平、自噬相关蛋白微管相关蛋白 1轻链 3Ⅱ（LC3Ⅱ）和 Beclin-1表达情况。结果 与 Sham组比较,CLP组 TNF-α、IL-1β、IL-10和 TGF-β水平升高,Iba-1/CD86和 Iba-1/CD206阳性细胞数量增加,p-mTOR水平上调,LC3Ⅱ和 Beclin-1表达下调（均 P＜0.05）。与 CLP组比较,CLP+Ra组 TNF-α和 IL-1β水平降低,IL-10和 TGF-β水平升高,Iba-1/CD86阳性细胞数量减少,Iba-1/CD206阳性细胞数量增加,p-mTOR水平下调,LC3Ⅱ和 Beclin-1表达上调（均 P＜0.05）。结论 mTOR-自噬通路通过调节小胶质细胞表型转化,影响脓毒症小鼠海马炎症反应。     

血必净对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用及其机制

目的探讨血必净对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肝损伤的保护作用及其对肝脏信号转导与转录激活因子（p-STAT₃）表达的影响。方法选择雄性SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、血必净组,每组24只。模型组、血必净组采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备重症SAP大鼠模型,血必净组制模后腹腔内一次性注射血必净4 m L/kg。假手术组打开腹腔,模拟上述操作,但不注射药物。模型组、血必净组于制模3、6、12 h随机取大鼠8只,假手术组同时间各取大鼠8只,心脏穿刺取血,检测血清ALT、AST。取血后处死,取肝组织行HE染色,观察肝组织病理改变;免疫组化染色及Western blotting法检测肝脏p-STAT₃蛋白表达。结果模型组、血必净组制模后各时间点血清ALT、AST水平均高于假手术组同期,且制模12 h明显高于制模3、6 h（P均<0.05）;血必净组制模后各时间点血清ALT、AST水平均低于模型组同期（P均<0.05）。肝组织病理观察显示,模型组、血必净组肝损伤程度重于假手术组,但轻于模型组。与模型组比较,血必净组肝脏p-STAT₃蛋白表达明显降低（P均<0.05）。结论血必净对重症SAP大鼠肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与抑制p-STAT₃表达有关。     

血必净对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用及其机制

目的探讨血必净对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肝损伤的保护作用及其对肝脏信号转导与转录激活因子（p-STAT₃）表达的影响。方法选择雄性SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、血必净组,每组24只。模型组、血必净组采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备重症SAP大鼠模型,血必净组制模后腹腔内一次性注射血必净4 m L/kg。假手术组打开腹腔,模拟上述操作,但不注射药物。模型组、血必净组于制模3、6、12 h随机取大鼠8只,假手术组同时间各取大鼠8只,心脏穿刺取血,检测血清ALT、AST。取血后处死,取肝组织行HE染色,观察肝组织病理改变;免疫组化染色及Western blotting法检测肝脏p-STAT₃蛋白表达。结果模型组、血必净组制模后各时间点血清ALT、AST水平均高于假手术组同期,且制模12 h明显高于制模3、6 h（P均<0.05）;血必净组制模后各时间点血清ALT、AST水平均低于模型组同期（P均<0.05）。肝组织病理观察显示,模型组、血必净组肝损伤程度重于假手术组,但轻于模型组。与模型组比较,血必净组肝脏p-STAT₃蛋白表达明显降低（P均<0.05）。结论血必净对重症SAP大鼠肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与抑制p-STAT₃表达有关。     

血必净对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用及其机制

目的探讨血必净对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肝损伤的保护作用及其对肝脏信号转导与转录激活因子（p-STAT₃）表达的影响。方法选择雄性SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、血必净组,每组24只。模型组、血必净组采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备重症SAP大鼠模型,血必净组制模后腹腔内一次性注射血必净4 m L/kg。假手术组打开腹腔,模拟上述操作,但不注射药物。模型组、血必净组于制模3、6、12 h随机取大鼠8只,假手术组同时间各取大鼠8只,心脏穿刺取血,检测血清ALT、AST。取血后处死,取肝组织行HE染色,观察肝组织病理改变;免疫组化染色及Western blotting法检测肝脏p-STAT₃蛋白表达。结果模型组、血必净组制模后各时间点血清ALT、AST水平均高于假手术组同期,且制模12 h明显高于制模3、6 h（P均<0.05）;血必净组制模后各时间点血清ALT、AST水平均低于模型组同期（P均<0.05）。肝组织病理观察显示,模型组、血必净组肝损伤程度重于假手术组,但轻于模型组。与模型组比较,血必净组肝脏p-STAT₃蛋白表达明显降低（P均<0.05）。结论血必净对重症SAP大鼠肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与抑制p-STAT₃表达有关。     

血必净注射液对严重脓毒症患者免疫功能的影响

目的 探讨血必净注射液对严重脓毒症患者免疫功能的影响.方法 选择我院EICU严重脓毒症患者60例,随机分为常规治疗组和血必净组,每组30例,常规治疗组给予常规治疗,血必净治疗组在常规冶疗的基础上给予血必净注射液.观察两组患者治疗前和冶疗后第7天T淋巴细胞亚群包括CD3＋、CD4＋、CD4/CD8比值和免疫球蛋白的变化.结果 治疗7 d后,两组患者免疫指标均有不同程度的恢复（P〈0.05）,与常规治疗组相比,血必净组CD3＋、CD4＋、CD4/CD8比值和IgG、IgA、IgM显著增加（P〈0.05或P〈0.01）.结论 血必净能有效恢复严重脓毒症患者免疫稳态,阻止病情恶化,从而改善预后.     

大肠杆菌亚型致脓毒症模型比较研究

目的 探讨不同种类大肠杆菌诱导的脓毒症模型损伤程度。方法 将152只小鼠随机数字表法分为对照组、DH5α 组、44102 组和 25922 组,每组 38 只。DH5α 组、44102 组和 25922 组分别腹腔注射 300 μL 浓度为 1.0×109CFU/kg的大肠杆菌DH5α、44102和25922,以不同种类大肠杆菌诱导脓毒症模型,对照组腹腔注射等体积生理盐水。（1）造模8 h后,每组各取4只小鼠,进行外周血细菌培养,计算细菌菌落数。（2）造模12 h后,通过酶联免疫吸附试验（ELISA）的方法检测血清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白介素（IL）-6水平（每组10只）;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）测定血清中晚期炎症因子高迁移率族蛋白1（HMGB1）水平（每组4只）;使用自动生化分析仪检测血清中丙氨酸 转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、血肌酐（CR）水平（每组10只）;取肺肝肾组织经甲醛固定后,进行苏木精-伊红（HE）染色（每组10只）。结果 DH5α组、44102组、25922组细菌菌落形成数量,炎症因子TNF-α、IL-6以及HMGB1蛋白,肝肾功能指标ALT、AST、CR、BUN均呈依次增高趋势（P＜0.01）。DH5α组、44102组、25922组的肺泡结构损伤程度、肝炎性细胞浸润程度及肾小球萎缩程度由重到轻依次为25922组、44102组、DH5α组,对照组肺、肝、肾组织无明显损伤。结论 大肠杆菌25922诱导脓毒症模型损伤严重,可用于研究脓毒症初期炎症风暴阶段的动物模型;大肠杆菌44102诱导脓毒症模型损伤适中,可用于无需限定脓毒症分期实验的动物模型;大肠杆菌 DH5α诱导脓毒症模型损伤较轻,可用于探索脓毒症免疫抑制期治疗方法的动物模型。     

血必净注射液对大鼠肠缺血再灌注肠壁免疫细胞P53基因表达的实验研究

目的通过研究肠缺血再灌注损伤后血必净注射液对肠道免疫屏障中T淋巴细胞亚群中P53基因表达的影响,探讨在肠缺血再灌注损伤后血必净注射液对肠粘膜免疫屏障的作用机制。方法取方法：将Wistar大鼠60只随机分为2组,模型对照组（CON）和血必净注射液组（XBJ）,再按实验时间分为24h、48h、72h组各10只。采用免疫组化双染色法分别观察造模后24h、48h、72h大鼠小肠粘膜固有层内CD4^＋、CD3^＋、CD8^＋T淋巴细胞数中P53基因表达的情况,比较实验组与对照组P53基因表达的差异。结果实验组与对照组相比较,第48h、72hCD4^＋、CD3^＋T淋巴细胞中P53基因表达对照组高于实验组（P〈0.05,P〈0.01）;CD8^＋T淋巴细胞中P53基因的表达第24h、48h、72h两组均无差异性（P〉0.05）。结论血必净注射液能够通过对肠壁免疫细胞凋亡基因P53表达的调控,实现对肠道免疫屏障的调节作用。     

活血中药对大鼠脓毒症早期循环及活化蛋白C的影响

目的观察血必净注射液对大鼠全身性感染（Sepsis）早期循环及活化蛋白C的影响。方法盲肠结扎穿孔术制备脓毒症大鼠模型。清洁级雄性sD大鼠75只按随机数字表法分为假手术组、手术组和血必净组,每组25只,各组按处死时间分为术后2、4、6、8、12h组,每组5只。所有实验动物应用10％水合氯醛4ml／kg腹腔注射进行麻醉,并维持镇静,同时监测平均动脉压,并持续补液。假手术组和手术组术后即开始静脉补充生理盐水,血必净组术后1h内给予血必净注射液,之后补充生理盐水。实验动物在规定的时间点取血后处死。血浆血活化蛋白c（APC）含量用大鼠酶联免疫吸附法检测。结果假手术组平均动脉压有轻微下降,但在正常范围内。手术组和血必净组平均动脉压均下降,并逐渐进入休克状态,第11小时和12小时平均动脉压与假手术组相比差异有统计学意义[第11小时：（58．7±7．0）rainHgVS（91．0±8．2）mm与（58．7±8．3）mmHgVS（91．0±8．2）mmHg;第12小时：（48．8±12．9）mmHgVS（83．4±5．5）mmHg与（55．4±4．0）mmHg vs（83．4±5．5）mmHg;P〈0．01或P〈0．05]。但血必净组进入休克时间晚于手术组,且MAP略高于手术组（P〉0．05）。假手术组APC含量没有降低。而手术组的血APC含量在术后2h之后逐渐下降,各时间点均显著低于假手术组（P〈0．01）。血必净组的血APC含量在术后早期逐渐升高,并在术后4h和6h显著高于假手术组和手术组,之后迅速下降,术后12h低于假手术组[（1．800±0．499）μg／LVS（3.418±0．440）μg／L,P〈0．01],但仍高于手术组（P〈0．01）。结论血必净注射液在脓毒症早期对循环功能有一定的改善。在脓毒症早期使用该药对大鼠蛋白c系统有一定的上调作用,可能是其发挥抗炎及改善微循环作用的机制之一。     

脓毒血症患者免疫调理治疗研究

目的探讨胸腺肽α1联合血必净对脓毒血症患者免疫功能的影响。方法72例脓毒症患者随即分成治疗组和对照组,对照组参照拯救脓毒症运动中所建议经典治疗方法,治疗组经典治疗基础上加胸腺肽α1联合血必净进行免疫调理治疗,比较两组患者治疗前后APACHEⅡ评分,血浆IL-6水平,T淋巴细胞亚群构成变化,及外周血CD14+单核细胞人类白细胞抗原(HLA-DR)水平变化。结果治疗组患者经免疫调理治疗后APACHEⅡ评分显著降低,其CD14+单核细胞HLA-DR和T细胞亚群CD4+、Th/Ts显著提高,IL-6表达水平明显下降,与对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。结论胸腺肽α1联合血必净治疗脓毒症患者,有助于增强机体的免疫防御作用,并抑制过度炎症反应。     

血必净注射液对重症肺炎病人的疗效及其对细胞免疫及炎性因子的影响

目的 研究血必净注射液对重症肺炎病人的临床疗效,观察其对细胞免疫及炎性因子的影响,为临床治疗提供依据.方法 选取重症肺炎病人110例,按照随机数字表法将病人分为观察组和对照组,每组55例,对照组常规治疗,观察组加用血必净注射液治疗,比较两组临床疗效,比较治疗前后两组白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD4+、CD8+以及自然杀伤细胞(NK).结果 观察组总有效率96.4%显著高于对照组的80.0%(P<0.05);治疗后两组IL-1、IL-6和TNF-α显著低于治疗前(P<0.05),且观察组显著低于对照组(P<0.05);治疗后两组CD4+、NK细胞显著升高,CD8+显著低于治疗前(P<0.05),观察组CD4+、NK显著高于对照组(P<0.05),CD8+显著低于对照组(P<0.05).结论 血必净注射液治疗重症肺炎具有较好的临床疗效,能降低炎性反应,增强细胞免疫.     

血必净对脓毒症大鼠肾脏细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的 探讨早期应用血必净对脓毒症导致急性肾损伤后肾小管细胞凋亡的影响,及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的变化。方法 54只SD大鼠,♂,随机分为假手术组、脓毒症组、血必净组,每组18只;各组再分为3个亚组,每组6只。根据实验要求分别以术后12,24,48 h作为时间观察点,在各时间点检测大鼠的血液生化指标,测定肾脏血流、并留取肾脏组织观察病理学变化,测定肾小管损伤评分,采用原位末端标记法测定肾小管凋亡细胞,并计算积分光密度值（IOD）。采用免疫印迹法测定Bcl-2、Bax的变化。结果 血必净组能明显改善肾功能,稳定血流动力学,减轻组织病理学变化,减少肾小管细胞凋亡,肾小管损伤评分和IOD值与脓毒症组相比有显著差异（P<0.01）。同时,血必净组能升高Bcl-2的表达,抑制Bax的表达,保持Bcl-2/Bax的平衡,与脓毒症组相比有显著差异（P<0.01）。结论 早期应用血必净可以减少肾小管细胞在脓毒症进程中的凋亡,改善脓毒症导致急性肾损伤的病理学改变,保持Bcl-2/Bax的平衡,减轻脓毒症导致的肾损伤。     

血清高迁移率蛋白B1水平与脓毒症病死率的关系及其机制

目的 探讨高迁移率蛋白B1（HMGB1）与脓毒症患者病死率的关系及其可能机制.方法 测定48例脓毒症患者血清HMGB1、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的变化并记录患者转归.结果 发病后,死亡组和存活组患者血清HMGB1水平均逐渐上升,72 h达高峰.死亡组患者血清HMGB1水平明显高于存活组（12和24 h除外）（t=6.07、6.20、24.43,均P＜0.05）.12、24、48和72 h死亡组患者血清SOD活力均明显低于存活组（t=10.24、20.61、11.67、33.33,均P＜0.05）,所测时间点死亡组患者血清MDA水平均明显高于存活组（t=26.06、22.17、23.86、9.49、5.95,均P＜0.05）.HMGB1水平与MDA水平成显著正相关.结论 血清HMGB1水平升高可能是脓毒症患者病死率增加的重要原因,氧化抗氧化系统失衡可能是HMGB1升高的原因之一.     

血必净对重症脓毒症和脓毒症休克时 BNP、TnT 及TnI水平的影响

目的：研究血必净对重症脓毒症和脓毒症休克时BNP、TnT及TnI水平的影响。方法选取收治的78例重症脓毒症和脓毒症休克患者,分为试验组和对照组,每组39例。对照组为常规治疗加0鲻．9％氯化钠溶液100 ml进行治疗,试验组为常规治疗加血必净注射液100 ml进行治疗。比较2组患者治疗前和治疗后7 d脑利钠肽（ BNP）、肌酐蛋白T（ TnT）及肌酐蛋白I（ TnI）水平及炎性因子变化,评价患者不同时间点APACHEⅡ评分。结果治疗后,试验组BNP、TnT及TnI水平明显低于对照组[（484．32±24．03） ng／L、（571．23±29．14） ng／L,（580．65±36．64） ng／L、（657．53±43．24）ng／L,（543．53±41．03）ng／L、（663．46±45．67）ng／L],差异有统计学意义（ P ＜0．05）。试验组治疗后肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）及降钙素原（PCT）炎性因子水平明显低于对照组[（38．43±3．21）pg／ml、（53．54±4．05）pg／ml,（385．24±38．05）pg／ml、（495．24±45．78）pg／ml,（2．56±0．24）ng／ml、（3．86±0．53）ng／ml],差异有统计学意义（ P ＜0．05）。试验组机械通气时间、住院时间明显短于对照组[（7．43±0．87）d、（9．53±1．41）d,（12．35±1．34）d、（18．95±1．87）d]（P＜0．05）。试验组治疗后7 d APACHEⅡ评分明显低于对照组[（14．56±1．32）分、（16．32±1．84）分]（ P ＜0．05）。结论血必净能有效降低重症脓毒症和脓毒症休克时的BNP、TnT、TnI水平,临床疗效良好。