增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的表达及其与预后的关系

目的：探讨增殖细胞核抗原（PCNA）表达与肝细胞癌临床病理参数与预后的关系。方法：采用SABC法检测42例肝细胞癌与癌旁组织中PCNA的表达。结果：PCNA在肝细胞癌中的阳性表达率显著高于癌旁组织（P＜0．05），且PCNA的表达与Edmondson-Steiner分级呈正相关（P＜0．01）。在浸润型（IHCC）有转移组中PCNA分值均显著高于膨胀型（EHCC）无转移组（P＜0．01）。肿瘤直径≤3cm者PCNA分值也明显低于＞3cm者（P＜0．05）。PCNA高增殖组患者生存期明显低于低增殖组（P＜0．05）。结论：PCNA反映癌细胞的增殖程度，可作为判断肝细胞癌恶性程度及其预后的指标。     

肝细胞癌survivin和caspase-3的表达及其与预后的关系

目的研究肝细胞癌（HCC）癌组织及癌旁组织survivin、caspase-3的表达及其与患者术后生存率之间的关系。方法免疫组织化学S-P法检测PCNA、survivin、caspase-3的表达,并以PCNA阳性强度计算增殖指数（PCNA-PI）,原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测凋亡指数（AI）。结果survivin在肝细胞肝癌中表达阳性率高于癌旁组织（P〈0.05）。其阳性表达与肿瘤大小、肿瘤细胞分化程度、门静脉癌栓有关。癌组织中survivin表达阳性组的增殖指数PCNA-PI高于阴性组（P〈0.05）,凋亡指数低于阴性组（P〈0.05）。caspase-3在肝细胞癌中表达阳性率低于癌旁组织（P〈0.05）;其表达与肿瘤细胞分化程度和HBsAg有关。癌组织中caspase-3表达阳性组的增殖指数PCNA-PI低于阴性组（P〈0.05）,凋亡指数高于阴性组（P〈0.05）。在肝癌组织中survivin与caspase-3的表达呈负相关（r=-0.242,P〈0.05）。survivin阳性组患者生存率低于阴性组（P〈0.05）。caspase-3阴性组患者生存率低于阳性组（P〈0.05）。结论肝细胞癌组织survivin和caspase-3的表达影响癌细胞的增殖凋亡,对于判断HCC预后具有一定价值。     

原发性肝细胞癌中TRADD蛋白表达与细胞凋亡的关系

肿瘤发生过程中细胞增多的原因除了细胞过度增殖外 ,还与细胞死亡相对不足有关。近年来 ,ｃａｓｐａｓｅ家族在细胞凋亡中的作用越来越受到重视 ,ＴＮＦ浕与细胞表面的受体结合后 ,受体的胞浆内部分形成三聚体 ,通过其死亡域与ＴＲＡＤＤ结合 ,由后者再与ＦＡＤＤ蛋白结合并进一步激活启动性ｃａｓｐａｓｅ导致细胞凋亡。因此 ,我们检测了ＨＣＣ中ＴＲＡＤＤ的表达并探讨其与细胞凋亡的关系。1　材料与方法1 1　标本选用我院 1 996年～ 1 997年外科手术切除肝细胞癌标本 39例及癌旁非癌肝组织 8例 ,其中男性 34例 ,女性 5例 ;年龄 2 4～ 71…     

增殖细胞核抗原PCNA、bcl-2在肝细胞癌组织中的表达及意义

 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的发生是多种癌基因激活,抑癌基因失活的复杂过程, 应用免疫组织化学方法检测肝细胞癌及正常肝组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和凋亡抑制基因bcl-2的表达及意义。     

黄曲霉毒素相关性p53异常表达与肝细胞癌凋亡的关系

】 ObjectiveTo study the relationship between mutant p53 expression and apoptosis in hepatocellular carcinoma (HCC) from a high aflatoxin B₁ contaminated area. MethodsApoptotic cells and mutant p53 protein were detected by techniques of in situ terminal deoxynucleotide transferase labelling and immunohistochemical S-P method in 56 paraffin-embedded tissues of HCC. ResultsApoptotic index was 3.81‰ in the HCC with positive expression of mutant p53, this was significant higher than that of 1.74‰ in mutant p53 negative cases (P<0.05). ConclusionsThe mutant p53 protein which is associated with aflatoxin B₁ may stimulate malignant cell proliferation,meanwhile a higher apoptotic rate is the associated phenomenon of high proliferation rate, is contributory to selective proliferation of those clone with higher proliferative ability.     

肝细胞癌凋亡、p21和PCNA表达与临床预后关系的研究

目的：研究ＨＣＣ细胞凋亡,ｐ２１和ＰＣＮＡ表达与临床预后的关系。方法;５５例ＨＣＣ标本采用ＤＡＮ末端（Ｔｕｎｅｌ）和免疫化检测并结合计算机图像技术定量分析。结果：小肝癌ＡＩ高于大肝癌,肝内转移,浸润性及低分化ＨＣＣ的ＡＩ分别低于无转移,非浸润性及高分化ＨＣＣ。而ＰＣＮＡ－ＬＩ恰好相反。癌旁组织ｐ２１阳性率及ｐ２１表达值均高于癌组织。并且癌及癌旁组织ｐ２１表达值在浸润性及肝内转移ＨＣＣ分析高于非侵蚀     

肝细胞癌细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达及意义

目的:探讨原发性肝细胞癌(简称肝癌)细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达情况及其意义.方法:采用免疫组化ABC法检测bcl-2和bax蛋白在66例人肝癌组织和24例人正常肝组织,以及3种人肝癌细胞系HCC-9204、SMMC-7721、HHCC和1种人正常肝细胞系QZG的表达情况,并分析肝癌组织的bcl-2和bax蛋白表达阳性率与其病理分级之间的关系.结果:bcl-2蛋白在正常肝组织中表达的阳性率只有4.2 %(1/24),在肝癌组织中的阳性率为25.8 %(17/66),二者具有显著性差异(P＜0.05).bax蛋白在正常肝组织中表达的阳性率为70.8 %(17/24),在肝癌组织中的阳性率为43.9 %(29/66),二者也具有显著性差异(P＜0.05).肝癌组织的bcl-2和bax蛋白表达阳性率与其病理分级之间均未见明显的相关性.在正常肝和肝癌组织中,bcl-2蛋白的阳性率均明显低于bax蛋白(P＜0.01,P＜0.05).在正常肝细胞系QZG中未见明显的bcl-2阳性信号,bax蛋白的阳性细胞计数率为61.0%.肝癌细胞系SMMC-7721和HHCC的bcl-2蛋白阳性细胞计数率分别为14.3%和11.8%,bax蛋白阳性细胞计数率分别为58.3%和47.1%.肝癌细胞系HCC-9204中未见明显的bcl-2阳性信号,bax蛋白阳性细胞计数率为43.2%.结论:与正常肝组织相比,肝癌组织可出现bcl-2蛋白表达低度升高,bax蛋白表达下降.正常肝和肝癌组织的bcl-2蛋白表达水平均低于bax蛋白.肝癌和正常肝细胞系的bcl-2蛋白表达水平很低,可见中等程度的bax蛋白表达.     

肝细胞癌增殖细胞核抗原免疫组化研究

增殖细胞核抗原，又称周期素，系ＤＮＡ聚合酶δ的一种辅助蛋白，主要存在于Ｇ１晚期及Ｓ期的细胞核中，本文应用免疫组化方法检测了８０例手术切除的肝细胞癌组织中ＰＣＮＡ的表达。肝癌组织ＰＣＮＡ标记指数在１．８￣９１．４％之间，平均为３３．９％。结果表明ＰＣＮＡ标记指数与肝癌大小、组织学分级、核分裂相计数和转移密切相关。提示ＰＣＮＡ可能是反映肝癌侵袭能力的一项重要指标，对评估肝癌的转移和预后有着辅助意义。     

肝细胞癌COX-2表达与新生血管生成关系的研究

目的:探讨环氧合酶2(cyclooxygenase2,COX2)表达上调与人肝细胞癌(HCC)新生血管生成的关系。方法:2002～2003年本院病理诊断为HCC的80例手术标本,采用免疫组化方法,检测癌组织中COX2和血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和CD34的表达情况,使用Weidner分析方法来计算CD34标记的肿瘤微血管密度(microvasculardensity,MVD)。结果:COX2和VEGF在HCC中表达率分别为75.00%(60/80)和62.50%(50/80)。VEGF在COX2强阳性组和中弱阳性组的免疫染色积分分别是5.98±1.16和3.30±0.22;VEGF在COX2强阳性组和中弱阳性组的表达率分别是71.43%(25/35)和28.00%(7/25),两组间差异非常显著(P<0.01),COX2与VEGF表达有明显相关性(P<0.01)。MVD在COX2强阳性组和中弱阳性组的评分分别为73.81±12.43和33.42±7.52,两组间差异非常显著(P<0.01),COX2与MVD有明显相关性(P<0.01)。结论:COX2高表达与HCC血管生成密切相关。     

肝细胞癌中GPR124的表达及与预后的关系

目的 研究G-蛋白偶联受体124（G protein-coupled receptor 124,GPR124）在人肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达情况,探讨其与HCC进展及预后的相关性。方法 选择15对连续的新鲜冰冻HCC组织及相应癌旁肝组织标本,采取qRT-PCR检测GPR124 mRNA的表达;Western blot检测GPR124 蛋白的表达;另选择64例有完整随访资料的HCC石蜡标本进行免疫组织化学法检测GPR124的表达。结果 新鲜冰冻HCC组织中GPR124 mRNA、蛋白的表达水平明显高于相应的癌旁肝组织（P＜0.05）;石蜡切片免疫组织化学结果显示HCC组织中GPR124的表达明显高于相应的癌旁肝组织(P<0.05);HCC中GPR124高表达与肿瘤大小、结节数目、TNM分期及微血管侵犯明显正相关（P＜0.05）;HCC患者中GPR124高表达者总生存率、无瘤生存率明显下降（P＜0.05）。结论 GPR124的高表达与HCC的进展密切相关,并导致不良预后,对其研究可用于评估HCC预后及研发新的靶向药物。     

微小RNA-373靶向调控LATS2的表达及其对肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-373（miR-373）靶向调控大肿瘤抑制因子2（LATS2）的表达及其对肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响。方法 采用实时荧光定量PCR（QPCR）法检测HepG2细胞及正常肝细胞LO2中miR-373的表达水平,采用Lipofectamine脂质体法将miR-373抑制剂及阴性对照转染至HepG2细胞并分为抑制剂组和对照组,采用QPCR法检测两组的miR-373水平以评价转染效果,MTT法和流式细胞术分别检测各组细胞的增殖及凋亡情况,Western blotting检测各组凋亡相关基因（Bax和caspase-3）及LATS2的表达情况,采用双荧光素酶报告实验验证miR-373与LATS2间的靶标关系。结果 与LO2细胞相比,HepG2细胞中miR-373的表达水平升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;转染后抑制剂组的miR-373水平低于对照组（P＜0.05）,提示抑制HepG2细胞miR 373表达成功;与对照组比较,抑制组的细胞增殖率降低,凋亡率及Bax、caspase-3和LATS2蛋白水平均升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;双荧光素酶报告基因实验表明miR-373可显著抑制野生型LATS2-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性,而对突变型LATS2-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性并无影响。结论 miR-373可靶向调控LATS2的表达,且抑制miR-373表达可抑制HepG2细胞增殖并诱导凋亡,为肝癌的靶向治疗提供一定参考。     

番茄红素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究番茄红素(Lycopene,LP)对人肝癌HepG2细胞生长的影响并初探其机制。方法取对数生长期HepG2细胞设空白对照组、LP(5 μg/mL)组、LP(10 μg/mL)组、LP(20 μg/mL)组和顺铂(40 μg/mL)组,每组设10个复孔;各组分别给药干预48 h后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡状况,RT-PCR法检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达,Western blot法检测Caspase-3蛋白表达。结果 与空白对照组比较,经LP(10 μg/mL、20 μg/mL)或顺铂40 μg/mL干预48 h能够显著提高HepG2细胞增殖抑制率,延长细胞周期中G₀/G₁期而缩短G₂/M期,提高细胞凋亡率,上调促凋亡Bax mRNA表达并下调抑凋亡Bcl-2 mRNA表达,提高Bax/Bcl-2比值,上调Caspase-3蛋白表达,LP上述作用具有一定的剂量依赖性。结论 LP具有抑制人肝癌HepG2细胞增殖并促进其凋亡的作用,其机制可能与LP干预细胞周期分布和调节凋亡相关基因蛋白表达有关。     

YEATS2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨YEATS2在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的表达及其与预后的关系。方法 收集我院2010年1月至2014年1月112例手术切除的HCC癌组织和癌旁组织石蜡标本，采用Real-time PCR检测HCC癌组织及癌旁组织中YEATS2 mRNA的表达，Western blot和免疫组化染色检测YEATS2蛋白水平，免疫荧光染色检测YEATS2在HCC癌组织中的表达定位，并分析YEATS2与HCC患者临床病理特征和预后的关系，同时采用TCGA数据库数据验证。结果 Real-time PCR结果显示，YEATS2 mRNA在HCC癌组织中的表达较癌旁组织上调（P<0.001）；Western blot检测结果显示，YEATS2在约66.67%（12/18）的HCC癌组织表达升高；免疫组化染色分析发现，约71.43%（80/112）的HCC患者中YEATS2表达上调，其表达与TNM分期明显相关（P<0.001）；YEATS2主要在HCC癌组织细胞核中表达；多因素分析结果显示YEATS2高表达是患者不良预后的独立危险因素（HR=2.204，95%CI：1.388~3.500，P=0.001）。TCGA中HCC队列分析也表明YEATS2高表达的患者OS更差（HR=1.751，95%CI:1.107~2.770，P=0.017）。 结论 YEATS2在HCC组织中高表达，且与患者不良预后相关。     

Tumor-infiltrating lymphocytes and prognosis of hepatocellular carcinoma.

Tumor-infiltrating lymphocytes (TIL) were isolated from 17 human hepatocellular carcinomas (HCC). The proliferation of TIL cultured with recombinant interleukin-2 (rIL-2) was evaluated. We also examined prognosis in relation to TIL. Successful expansion of TIL was achieved in 16 of the 17 lesions. In 10 of the 16, TIL increased more than 100-fold. Cytotoxicity to the allogeneic HCC cell line, HC-4, was demonstrated in all 13 TIL cultures tested. Maximum cytotoxicity was noted two to four weeks after culture. No statistical difference was observed either with respect to prognosis based upon growth rate or the cytotoxicity demonstrated in vitro. The initial number of TIL per unit weight of tumor was, however, significantly greater in the group for which the prognosis was good (19.0 +/- 5.1 x 10(6) vs. 5.6 +/- 1.6 x 10(6), P < 0.05). It would appear that greater lymphocytic tumor infiltration is a prognostic marker.     

PD-1在肝细胞癌肿瘤浸润淋巴细胞中的表达及与预后的相关性

背景与目的:程序性死亡[蛋白]-1(programmed death-1,PD-1)在调节外周免疫耐受中发挥重要作用,PD-1在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)肿瘤浸润淋巴细胞中的表达状态与效应细胞CD8+T淋巴细胞的关系尚不清楚,探讨HCC肿瘤浸润淋巴细胞中PD-1的表达及预后意义...     

组蛋白去乙酰化酶2在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在肝细胞癌组织中的表达及其与预后的关系.方法 采用Western blot法和免疫组化检测肝细胞癌组织及对应癌旁组织中HDAC2蛋白的表达情况,并分析其与患者临床病理学参数及预后的关系.结果 HDAC2蛋白在肝细胞癌组织中的表达明显高...     

TBX15基因启动子甲基化在肝细胞癌中的表达及其功能研究

目的  探讨TBX15基因在肝细胞癌中的表达及其启动子甲基化对细胞生物学行为的影响。方法 分别采用亚硫酸氢盐测序法（bisulfite sequencing PCR,BSP）和实时荧光定量PCR（qPCR）检测3种肝癌细胞系（HepG2、MHCC97H、SNU449）中TBX15基因启动子甲基化状态和表达水平,再将空白质粒、空载质粒pc3.1和TBX15过表达质粒转染肝癌ＳＮＵ499细胞,通过CCK-8实验和流式细胞术检测各组肝癌细胞的增殖和凋亡情况。 结果 3种肝癌细胞系中,TBX15基因在肝癌 SNU449细胞中的启动子甲基化程度最高,甲基化率为89.5%,而TBX15 mRNA表达水平最低。TBX15过表达质粒组培养48 h后,肝癌SNU449细胞的增殖能力高于空载质粒组,差异有统计学意义（0.549±0.080 vs 0.457±0.506,P=0.015）;TBX15过表达质粒组肝癌SNU449细胞的总凋亡比例高于空白质粒组,差异有统计学意义［（5.12±1.42）% vs （2.16±0.41）%,P=0.014］。 结论 启动子区异常甲基化可能是肝癌细胞TBX15基因失活的主要原因,且与肝癌恶性生物学行为密切相关。TBX15可能是预测肝癌发生发展的指标。     

大肠癌组织COX-2的表达及其与肿瘤细胞增生和凋亡的关系

目的 探讨大肠癌中环氧化酶-2（c yclooxygenase-2,COX-2）表达及其与癌细胞增生和凋亡的关系.方法 采用免疫组织化学法检测60例大肠癌、20例大肠腺瘤和20例癌旁正常大肠黏膜中COX-2和PCNA的表达,并采用TUNEL法检测原位细胞凋亡水平.结果 大肠癌组织中COX-2阳性表达、PI及AI均显著高于大肠腺瘤及正常大肠黏膜组织（P＜0.05）;COX-2的高表达与大肠癌肿瘤大小、淋巴结转移和临床分期有关,与肿瘤生长部位、分化程度无关.COX-2阳性大肠癌组中PI高于COX-2阴性大肠癌组,AI低于COX-2阴性大肠癌组（P＜0.05）.结论 COX-2的过度表达可促进大肠癌细胞增生、抑制细胞凋亡,在大肠癌的发生、发展过程中起着重要的作用.