3-硝基丙酸预处理诱导沙土鼠脑缺血耐受与海马星形胶质细胞的激活

目的：探讨海马区星形胶质细胞的激活与3－硝基丙酸（3－NPA）预处理诱导脑缺血耐受的关系。方法：阻断沙土鼠双侧颈总动脉造成前脑缺血模型，通过HE染色和免疫组化观察海马锥体细胞死亡和星形胶质细胞的反应。结果：对照组海马CA1区已失去正常结构，锥体细胞大部分丧失，存活神经元计数显低于假手术组。3－NPA预处理组存活神经元减少，但高于对照组，假手术组海马CA1区仅见少量胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞，染色较弱，突起不明显，对照组海马CA1区GFAP阳性细胞增多，多为弱阳性。3－NPA预处理组海马CA1区GFAP阳性细胞数目明显增多，染色较深，突起增粗。结论：星形胶质细胞形态和机能的改变可能与3－硝基丙酸预处理诱导脑缺血耐受有关。     

川芎嗪对沙鼠前脑缺血-再灌注损伤后学习记忆的影响

目的探讨川芎嗪对沙鼠前脑缺血-再灌注后学习记忆的影响及其机制。方法40只蒙古沙土鼠随机分为4组。假手术组、脑缺血组、对照组、川芎嗪治疗组,每组10只。阻断沙土鼠双侧颈总动脉造成前脑缺血模型,4-FFF（4-pellet taking test）旱路迷宫法对沙鼠前脑缺血-再灌注7d后的学习记忆功能进行评定,HE染色方法观察海马CA1区神经元形态变化,免疫组织化学法观察海马CA1区胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）阳性星形胶质细胞的反应。结果假手术组未见坏死神经元,神经元密度（27．6±4．3）HS,脑缺血组中坏死神经元显著增多,神经元密度明显下将（6．8±1．7）HS（P〈0．05）;与脑缺血组比较,川芎嗪治疗组坏死神经元显著较少,神经元密度增加（16．9±2．6）HS（P〈0．05）。CA1区星形胶质细胞活性在脑缺血组中（7．7±1．8）HS明显高于假手术组（3．9±1．2）HS（P〈0．05）;与脑缺血组比较,川芎嗪治疗组星形胶质细胞活性进一步增强（P〈0．05）。4-PTT旱路迷宫实验显示。脑缺血组中沙鼠参照记忆指标和工作记忆指标与对照组有明显的差异（P〈0．05）;川芎嗪治疗组上述指标显著改善（P〈0．05）。结论川芎嗪能改善前脑缺血沙鼠的学习记忆能力,与其对星形胶质细胞活性调节有关。     

黄芩茎叶黄酮对大鼠缺血性记忆障碍和神经炎症的作用

目的探讨黄芩茎叶黄酮(SSF)对大鼠缺血性记忆障碍和神经炎症的作用。方法雌性SD大鼠双侧颈总动脉永久结扎2个月制备慢性脑缺血记忆障碍模型,脑缺血大鼠造模后于手术第35天ig给予SSF 17.5,35和70 mg.kg-1,连续38 d。通过Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力、免疫组化法测定皮质和海马星形胶质细胞中神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达及酶联免疫吸附(ELISA)法测定皮质中白细胞介素-1β(IL-1β),IL-8,IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果与假手术组相比,脑缺血模型组大鼠的再学习能力和记忆保持能力显著降低,到达平台的潜伏期显著延长(P<0.01),在目标象限的游泳路程显著缩短(P<0.01);皮质和海马内星形胶质细胞GFAP的表达显著增加(P<0.01);皮质中IL-1β,TNF-α和IL-8水平明显增加(P<0.01)I,L-10水平显著降低(P<0.01)。SSF 17.5,35和70 mg.kg-1均能不同程度地改善脑缺血引起大鼠再学习能力和记忆保持能力障碍,明显缩短到达平台的潜伏期(P<0.05),延长大鼠在目标象限的游泳路程(P<0.05);抑制皮质和海马内星形胶质细胞GFAP的表达(P<0.05);明显降低皮质中IL-1β,TNF-α和IL-8含量,提高IL-10的水平。结论 SSF对大鼠脑缺血性记忆障碍和神经炎症具有明显的改善作用,其作用机制可能是抑制星形胶质细胞增生和脑内炎性细胞因子的生成。     

集落刺激因子对慢性脑缺血成年鼠胶质细胞可塑性及记忆改善的影响

目的探讨rhG-CSF对慢性低血流灌注脑缺血成年鼠海马胶质细胞可塑性及记忆改善的影响。方法 3月龄雄性SD大鼠随机分为缺血组、对照组和干预组,每组15只。采用Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆功能,免疫组化及荧光染色后对海马CA1区胶质细胞数量及胞质突起长度进行图像分析。结果缺血组海马CA1区GFAP阳性细胞明显少于对照组（P〈0.01）和干预组（P〈0.05）。缺血组GFAP阳性细胞胞质突起长度明显低于对照组和干预组（P〈0.05）。缺血组逃逸时间明显高于对照组和干预组（P〈0.01）;缺血组大鼠在平台象限的停留时间明显少于对照组和干预组（P〈0.05）;缺血组跨过平台区域的次数明显少于对照组（P〈0.01）和干预组（P〈0.05）。缺血组、对照组及干预组海马CA1区胶质细胞的数量、胞质突起长度与空间记忆改善均呈正相关。结论 rhG-CSF促进海马胶质细胞可塑性改变,是慢性脑缺血成年鼠记忆功能改善的重要病理修复机制。     

免疫荧光法检测L-NNA对脑缺血再灌流后海马区GFAP合成的影响

目的　探讨NG 硝基 L 精氨酸 (L NNA)对沙土鼠海马区胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)合成的影响。方法　钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型 ,应用免疫荧光法染色。结果　脑缺血再灌流后海马区GFAP合成增加 ,GFAP阳性细胞主要分布在放射层及分子层 ,L NNA能抑制海马区GFAP的合成。结论　L NNA是一氧化氮合酶强的抑制剂 ,L NNA可能通过抑制NO的产生抑制了GFAP的合成     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠神经炎症损伤的保护

目的：研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病（AD）大鼠神经炎症损伤的保护。方法：双侧脑室注射Aβ25～35复制AD大鼠模型；放射免疫分析法检测血清及海马组织IL-1β和IL-6的含量；RT-PCR法测定海马IL-6和IL-1β mRNA表达；免疫组织化学(SABC)法检测大鼠海马星形胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性细胞表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠血清及海马组织中IL-1β和IL-6含量明显增加（P＜0.05）；海马星形胶质细胞GFAP和海马IL-6，IL-1β mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，0.72 g?kg-1脑舒胶囊可降低血清、海马组织IL-1β和IL-6含量（P＜0.05）和海马星形胶质细胞GFAP阳性和海马IL-6，IL-1β mRNA的表达（P＜0.05）。结论：脑舒胶囊可通过抑制星形胶质细胞的过度激活，从而抑制中枢慢性炎症级联反应对海马神经元的损伤。     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠神经炎症损伤的保护

目的：研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病（AD）大鼠神经炎症损伤的保护。方法：双侧脑室注射Aβ25～35复制AD大鼠模型；放射免疫分析法检测血清及海马组织IL-1β和IL-6的含量；RT-PCR法测定海马IL-6和IL-1β mRNA表达；免疫组织化学(SABC)法检测大鼠海马星形胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性细胞表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠血清及海马组织中IL-1β和IL-6含量明显增加（P＜0.05）；海马星形胶质细胞GFAP和海马IL-6，IL-1β mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，0.72 g?kg-1脑舒胶囊可降低血清、海马组织IL-1β和IL-6含量（P＜0.05）和海马星形胶质细胞GFAP阳性和海马IL-6，IL-1β mRNA的表达（P＜0.05）。结论：脑舒胶囊可通过抑制星形胶质细胞的过度激活，从而抑制中枢慢性炎症级联反应对海马神经元的损伤。     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠神经炎症损伤的保护

目的：研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病（AD）大鼠神经炎症损伤的保护。方法：双侧脑室注射Aβ25～35复制AD大鼠模型；放射免疫分析法检测血清及海马组织IL-1β和IL-6的含量；RT-PCR法测定海马IL-6和IL-1β mRNA表达；免疫组织化学(SABC)法检测大鼠海马星形胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性细胞表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠血清及海马组织中IL-1β和IL-6含量明显增加（P＜0.05）；海马星形胶质细胞GFAP和海马IL-6，IL-1β mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，0.72 g?kg-1脑舒胶囊可降低血清、海马组织IL-1β和IL-6含量（P＜0.05）和海马星形胶质细胞GFAP阳性和海马IL-6，IL-1β mRNA的表达（P＜0.05）。结论：脑舒胶囊可通过抑制星形胶质细胞的过度激活，从而抑制中枢慢性炎症级联反应对海马神经元的损伤。     

藁本内酯对小鼠海马区损伤的保护作用及其作用机制

目的 研究藁本内酯(Lig)对小鼠海马区损伤的保护作用及其作用机制.方法 将24只小鼠随机均分为假手术组、模型组和Lig组,采用双侧颈总动脉结扎法(2VO)建立全脑缺血再灌注模型;Nissl染色观察小鼠海马CA1、CA2区的神经元计数;免疫组化检测海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、肿瘤坏死因子(TNFα)的表达.结果 与模型组比较,Lig能减轻缺血再灌带来的损伤,减少海马CA1、CA2区神经元的丢失,降低GFAP、TNFα的表达.结论 Lig能明显减轻全脑缺血再灌注所致的小鼠海马区损伤,其机制与抑制星形胶质细胞激活、减轻炎症反应有关.     

黄芩茎叶总黄酮对AD大鼠海马神经元的保护作用及机制研究

目的：探讨黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对大鼠双侧海马注射Aβ25－35引起的大鼠学习记忆功能和海马神经元形态变化的影响及机制。方法：将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、总黄酮组，对照组及模型组灌胃纯化水，qd，d 8对照组海马注射生理盐水，继续灌胃；模型组双侧海马注射Aβ25－35（5 μL），其他同对照组；给药组总黄酮（50 mg?kg-1，ig，qd)，d 8海马注射Aβ，继续灌胃，三组于d 15采用Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力，测5 d，处死，硫堇Nissl染色观察海马神经元的变化，检测血清中丙二醛（MDA）含量。结果：模型组大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长（P<0.05），给药组大鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短（P<0.05）；模型组海马CA1区局部神经细胞带脱失，脱失处胶质细胞增多，给药组细胞损伤较轻；模型组大鼠血清中MDA显著高于对照组（P<0.05），给药组血清中MDA明显低于模型组（P<0.05）。结论：黄芩茎叶总黄酮对海马注射Aβ25－35引起大鼠学习记忆能力降低及海马神经元形态变化具有保护作用，其机制可能是减少Aβ引起的脂质过氧化产物增多引起的氧化应激，并可对抗Aβ引起的胶质细胞增多。     

知母总皂苷对Aβ_(1-42)引起的老年大鼠学习记忆能力及海马炎症反应的影响

目的观察知母总皂苷(SAaB)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)引起的老年大鼠学习记忆能力改善作用及其对海马炎症反应的影响。方法脑室注射Aβ1-42后第2天进行Morris水迷宫训练,连续训练5 d,在第6天进行空间探索实验,训练期间继续给药,记录逃避潜伏期及各象限游泳时间;Nissl染色观察海马CA1区锥体神经元改变及免疫组织化学染色观察胶原纤维酸性蛋白(GFAP)改变;Western blot检测GFAP表达水平改变。结果Aβ1-42组大鼠出现明显的空间学习障碍,表现为逃避潜伏期较对照组明显延长,在原平台象限游泳时间占总游泳时间的百分比明显降低;海马CA1区锥体神经元的排列较对照组不整齐且稀疏;GFAP阳性细胞数明显增多,染色增强,突起增多并延长。GFAP蛋白表达明显增加。SAaB可明显抑制Aβ1-42引起的这些变化,呈明显剂量依赖性。结论 SAaB能够明显的改善Aβ1-42引起的老年大鼠学习记忆能力障碍及海马神经元损伤。     

银丹心脑通软胶囊对VD大鼠学习记忆能力及AchE、NR2B的影响

目的：研究银丹心脑通软胶囊对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区乙酰胆碱酯酶（AchE）、N-甲基D-天（门）冬氨酸受体2B（NR2B）的影响。方法：采用双侧颈总动脉结扎,缺血、再灌注,同时腹腔注射硝普钠方法制备模型,采用Morris水迷宫实验对大鼠的学习记忆能力进行测试,用HE染色观察病理变化,免疫组化染色技术对大鼠海马CA1区AchE及NR2B进行检测。结果：假手术组与正常对照组比较学习记忆能力无差异,海马CA1区AchE及NR2B表达较模型组、治疗组少;模型组与正常对照组比较学习记忆能力明显下降,海马CA1区AchE及NR2B表达增多,差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗各组与模型组比较银丹心脑通软胶囊中剂量组和高剂量组学习记忆能力明显改善,海马CA1区AchE及NR2B表达减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：银丹心脑通软胶囊可改善VD模型大鼠的学习记忆能力,机制可能是由于降低海马CA区AchE及NR2B的表达。     

不同剂量美金刚对慢性脑缺血老龄大鼠认知障碍的改善作用及机制

目的：探讨美金刚（Memantine）对慢性脑缺血老龄大鼠认知障碍及海马区神经的保护作用及机制。方法：采用双侧颈总动脉结扎法（2VO）建立慢性脑缺血动物模型,将造模成功的31只12月龄雄性SD大鼠随机分为缺血组（n=7）和干预组（3.75,7.5,15,30 mg·kg^-1,n=6）,对照组（n=5）只分离血管不做结扎处理。采用水迷宫评估大鼠空间学习记忆功能,免疫荧光染色后对海马齿状回神经细胞增殖及CA1区凋亡细胞进行计数。结果：水迷宫实验显示：缺血组大鼠空间学习和记忆能力明显受损,与对照组和干预组相比有统计学差异（P<0.01）,美金刚干预后大鼠的空间学习和记忆能力得以改善（P<0.05）。免疫荧光染色显示：缺血组大鼠新生神经细胞计数明显多于对照组（P<0.01）,干预组齿状回新生神经细胞数量较对照组进一步增多（P<0.01）;缺血组大鼠凋亡细胞明显多于对照组（P<0.01）,美金刚干预后凋亡细胞数量较缺血组明显减少（P<0.05）。相关性分析表明,CA1区凋亡细胞数量与空间记忆功能呈负相关。结论：美金刚可通过促进海马神经细胞增殖、抑制细胞凋亡,改善认知功能障碍,且不同的药物剂量作用效果存在差异。     

新生鼠脑缺血再灌注后海马CA1区神经胶原纤维酸性蛋白的动态变化及意义

目的 观察新生Wistar鼠脑缺血再灌注后海马CA1区神经胶原纤维酸性蛋白(GFAP)的动态变化,探讨其与缺血性神经元的联系。方法 通过阻断7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉45分钟制备脑缺血模型,设置假手术组、缺血再灌注组。通过免疫组化方法和计算机图像分析技术检测二组新生鼠不同时点(灌注后2小时、6小时、12小时、24小时、3天、7天、14天)海马CA1区脑组织GFAP的动态变化。结果 缺血再灌注组海马CA1区GFAP表达在再灌注后24小时开始增高,3天后达高峰,并持续至再灌注后14天,与假手术组比较有显著性差异(P<0.05)。结论 脑缺血再灌注后海马CA1区星形胶质细胞活化及胶原纤维酸性蛋白表达增强在再灌注后14天仍保持在较高水平,星形胶质细胞的活化、增生可能与脑缺血后神经细胞的保护有关。     

L-3-n-butylphthalide improves cognitive deficits in rats with chronic cerebral ischemia

3-n-Butylphthalide (NBP) has been shown to have protective effects against ischemic stroke. In the present study, we investigated effects of l-3-n-butylphthalide (l-NBP) on the learning and memory impairment induced by chronic cerebral ischemia in rats. Male Wistar rats were administered 20 mg/kg l-NBP by gavage daily for 30 days after the bilateral common carotid artery clamping (two-vessel occlusion, 2-VO). Results showed that daily treatments of 20 mg/kg l-NBP significantly attenuated spatial learning deficits in Morris water maze (MWM) task. Results of long-term potentiation (LTP) indicated that treatment with 20 mg/kg l-NBP attenuated the inhibition of LTP in rat model of 2-VO. Moreover, l-NBP reduced glial fibrillary acidic protein (GFAP)-positive astrocytes induced by chronic cerebral ischemia. The present findings demonstrate the protective effect of l-NBP on chronic cerebral ischemia-induced hippocampus injury, which supports using l-NBP for therapy of cerebral ischemia in the future.     

二苯乙烯苷对慢性脑缺血大鼠学习记忆的影响

目的观察何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力的影响,并探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠双侧颈总动脉永久性结扎制备慢性脑缺血致痴呆模型。术前2周起,分别给TSG30,60及120mg·kg-1·d-1,ig,连续11周。术后8周时,分别用Morris水迷宫实验和避暗实验检测大鼠的空间学习记忆能力和被动回避学习记忆能力。术后9周时,采用生化方法检测海马乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,免疫组化方法检测海马蛋白磷酸酶2A(PP-2A)和微管相关蛋白2(MAP-2)的表达。结果慢性脑缺血模型组大鼠空间和被动回避学习记忆能力明显降低,海马AChE活性显著升高,PP-2A和MAP-2表达明显减少。TSG给药10周可显著改善慢性脑缺血引起的学习记忆能力降低;给药11周明显抑制海马AChE活性增高,并增加PP-2A和MAP-2的表达。结论TSG可改善慢性脑缺血大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制海马AChE活性,增加海马PP-2A和MAP-2的表达有关。     

甘露醇对脑缺血再灌注模型大鼠星形胶质细胞活性的研究

目的 探讨甘露醇干预对大鼠急性缺血性脑卒中大脑不同时期不同部位星形胶质细胞活性的影响.方法 采用改良型线栓法实施左侧大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)2h后再灌注建立脑缺血再灌注模型.随机将大鼠分成空白组、假手术组和缺血再灌注模型组,各12只.每组再随机分成甘露醇组(甘露醇最小有效剂量即10mg/kg大鼠尾静脉缓慢注射,每6h 1次)和非甘露醇组(注射等量的无菌注射用水),各6只,分别于手术后24h和72h处死解剖,取脑组织切片做免疫组化染色,计算缺血周边、海马CA1区的骨架蛋白即胶质纤维酸性蛋白(glial fibrilary acidic protein,GFAP)阳性细胞数,通过观察GFAP阳性数目研究缺血性卒中后缺血周边、海马CA1区星形胶质细胞(astrocyte,AS)的增殖情况.结果 在大鼠空白组、假手术组和缺血再灌注模型组中,缺血再灌注模型组中的甘露醇组比各组的非甘露醇组缺血周边区域、海马CA1区域GFAP阳性细胞数明显增多,具有显著统计学意义(P＜0.01),并随时间的延长而增加(P＜0.05).结论 大鼠缺血再灌注组在甘露醇干预24h和72h后,其缺血周边区域和海马CA1区域GFAP阳性细胞数表达增强,AS活性增加,增生活跃,并随时间的延长而增加,提示甘露醇除脱水降颅压外,还参与了大鼠缺血再灌注模型组缺血周边及海马等区域的AS增殖反应.     

金钗石斛生物总碱对脂多糖诱导大鼠学习记忆功能减退的改善作用

目的探讨金钗石斛生物总碱(DNLA)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠学习记忆功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法成年雄性SD大鼠经Morris水迷宫训练合格后,随机分为模型组和假手术组。模型组大鼠左侧脑室微量注射LPS(10.gL-1)5μL后分为LPS,LPS+布洛芬(Ibu,40 m.gkg-1),LPS+DNLA(20,40和80 mg.kg-1)组,假手术组左侧脑室注射5μL生理盐水。大鼠清醒后ig给予Ibu或DNLA,每天1次,连续14 d。用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力;HE染色观察海马神经元形态改变;免疫组织化学法检测海马淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)含量;实时荧光定量PCR检测海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3/8 mRNA表达水平。结果侧脑室注射LPS后,大鼠水迷宫逃避潜伏期及搜索距离明显延长,海马出现神经元凋亡和坏死改变。Ibu和DNLA均能明显缩短模型大鼠水迷宫逃避潜伏期和搜索距离,减轻神经元凋亡和坏死,降低海马Aβ1-42含量和caspase 3/8 mRNA表达水平。结论DNLA可改善LPS诱导的大鼠学习记忆功能减退,其机制可能与降低海马caspase 3/8 mRNA表达、减少Aβ1-42产生有关。