长链非编码RNA RAB11B-AS1在膀胱癌组织中的表达及与预后的关系

 目的 探讨长链非编码RNA RAB11B-AS1（lncRNA RAB11B-AS1）在膀胱癌组织中的表达及其与临床病理参数和预后的关系。方法 收集2012年10月—2014年2月于云南省第二人民医院泌尿外科手术切除的83例膀胱癌组织及相应癌旁正常组织。采用qRT-PCR检测lncRNA RAB11B-AS1的表达并分析其与患者临床病理特征的关系,采用Cox回归分析lncRNA RAB11B-AS1表达水平与膀胱癌患者预后的关系。结果 lncRNA RAB11B-AS1在膀胱癌组织中的表达水平低于癌旁正常组织（1.17±0.32 vs 2.09±0.74,t=10.396,P<0.001）;膀胱癌癌组织中lncRNA RAB11B-AS1的表达水平与患者TNM分期、组织学分级和淋巴结是否转移有关（P<0.05）。lncRNA RAB11B-AS1高表达患者5年总生存率高于低表达患者（62.22% vs 26.32%,χ²=13.420,P<0.001）;多因素Cox回归分析显示,lncRNA RAB11B-AS1低表达是影响膀胱癌患者预后的独立危险因素（HR=1.126,95%CI：1.058~1.200,P<0.001）。结论 lncRNA RAB11B-AS1在膀胱癌组织中低表达,且低表达患者预后较差。     

肝癌组织中FMNL-2和MMP-2的表达及临床病理分析

目的 探讨肝癌及癌旁组织中FMNL-2和MMP-2的蛋白表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学MaxvisionTM法检测100例肝癌及癌旁组织中FMNL-2和MMP-2的蛋白表达情况,应用图文分析软件Image-Pro Plus6.0测定FMNL-2和MMP-2的蛋白累积吸光度值（IOD）,采用SPSS19.0软件统计分析。结果 肝癌及癌旁组织中FMNL-2蛋白IOD值分别为(90 748.36±46 276.91)和(39 075.46±24 763.12),MMP-2蛋白IOD值分别为（87 969.46±27 131.77）和（59 517.72±20 218.23）,两组差异均有统计学意义（P<0.05）;FMNL-2在伴与不伴肝硬化组中IOD值分别为（47 471.96±40 273.54）和（72 123.41±45 517.93）（P<0.05）;MMP-2在HBsAg阳性或阴性组中IOD值分别为（77 668.34±27 682.79）和（64 585.83±26 173.62）（P<0.05）,在有无转移组中IOD值分别为（63 854.73±21730.42）和（77 218.05±28 930.01）（P<0.05）,差异有统计学意义;并且肝癌及癌旁组织中FMNL-2和MMP-2蛋白表达呈正相关（r=0.240,P=0.016）。结论 在肝癌发生、发展过程中存在FMNL-2和MMP-2蛋白异常表达,联合监测两者蛋白表达可能会有助于肝癌的诊断。     

乳腺癌患者血浆中CCL18的表达水平及其意义

目的探讨乳腺癌患者血浆中CCL18的表达水平及意义。方法  收集广州医学院第一附属医院就诊乳腺肿瘤患者108例,均为女性。病理确诊的良性乳腺病20例,乳腺癌88例,乳腺癌组43例接受了新辅助化疗,均收集新辅助化疗前、后的血液标本,其余入组病例均收集初始干预前血液标本,另取36例健康女性体检者血液标本做为健康对照组。以酶联免疫吸附（ELISA）方法检测血浆中CCL18表达水平。结果   乳腺癌组比健康对照组血浆中CCL18的表达水平明显升高,（P<0.05）,乳腺癌组比良性乳腺病组血浆中CCL18表达水平明显升高（P<0.05）。血浆中CCL18表达水平与乳腺癌的雌激素受体（ER）存在负相关关系（P=0.018）。新辅助化疗效果达到临床缓解的患者化疗前后血浆中CCL18表达水平无明显变化（P=0.431）,新辅助化疗效果未达到临床缓解的乳癌患者在化疗前后血浆中CCL18表达水平无明显变化（P=0.336）。结论  CCL18是乳腺癌的生物学标志物,其表达水平与乳腺癌的雌激素受体的表达相关,但尚不能作为乳腺癌化疗敏感度独立的预测指标。     

靶向CCL2-CCR2轴的肿瘤治疗研究进展

 单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1/CCL2）是CC类趋化因子家族成员之一。CCL2作用广泛，主要结合CC类趋化因子受体2（CCR2）趋化单核细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞。许多研究表明CCL2-CCR2轴参与肿瘤细胞生长存活、血管生成、肿瘤侵袭和转移的调控。本文综述了CCL2-CCR2轴在前列腺癌、乳腺癌、肝癌等肿瘤发生、发展、转移的作用和临床前动物模型实验以及靶向CCL2-CCR2轴的肿瘤治疗临床试验的进展、前景和挑战。     

盐霉素通过靶向调控ALDH影响三阴性乳腺癌细胞MDA-MB- 231增殖和凋亡

目的 探讨盐霉素（salinomycin,Sal）对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 采用流式细胞术筛选ALDH高表达乳腺癌细胞系;采用MTT法检测不同浓度Sal（1~32 μmol/L）对细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测Sal对细胞凋亡以及肿瘤干细胞表面标志物ALDH表达的影响;采用qRT-PCR、Western blot检测凋亡相关分子Caspase-3、Bax、Bcl-2、PARP mRNA和蛋白表达;TCGA（the Cancer Genome Atlas）数据库下载乳腺癌患者数据集（n=1 218）,采用Pearson法分析ALDH与凋亡相关分子表达的相关性。结果 Sal在24 h、48 h、72 h均可以剂量依赖的方式抑制MDA-MB-231细胞增殖（均P<0.001）;Sal作用MDA-MB-231细胞48 h后,与对照组比较,2 μmol/L组、4 μmol/L组、8 μmol/L组的细胞凋亡率均升高（均P<0.05）;Bcl-2、PARP、Caspase-3 mRNA表达下降（均P<0.05）,Bax mRNA表达升高（均P<0.05）;Bcl-2、Caspase-3 蛋白表达下降（均P<0.05）,PARP、Bax 蛋白表达升高（均P<0.05）;MDA-MB-231乳腺癌干细胞表面标志物ALDH表达下降（均P<0.05）。TCGA数据库分析显示,ALDH与抗凋亡分子Bcl-2、Caspase-3的表达呈正相关（r=0.209,P=0.007;r=0.235,P=0.002）,与Bax、PARP的表达呈负相关（r=-0.326,P＜0.001;r=-0.453,P＜0.001）。结论 Sal可抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长,可能通过下调肿瘤干细胞表面标志物ALDH表达实现。     

卵巢上皮癌组织中hMSH2的表达及其与化疗耐药的关系

目的 检测不同化疗敏感程度的卵巢上皮癌组织中hMSH2基因的表达,分析其与化疗耐药及预后的关系。方法 80例新鲜卵巢上皮癌组织均由手术中取得,采用ATP-TCA技术检测卵巢癌组织对八种药物：紫杉醇、卡铂、拓泊替康、多西他赛、吉西他滨、环磷酰胺体内代谢产物、依托泊苷及博来霉素的体外敏感性。采用Real-time PCR及Western blot法分别检测80例卵巢上皮癌组织中hMSH2 基因mRNA和蛋白水平的表达情况。结果 对紫杉醇耐药的卵巢上皮癌组中,hMSH2基因在mRNA及蛋白水平的表达均明显高于敏感组（P<0.01）,在对卡铂、拓泊替康、多西他赛耐药组中hMSH2表达水平也明显高于敏感组（P<0.05）;hMSH2基因的相对表达值与卡铂、拓泊替康、多西他赛的敏感度系数有显著相关性（P≤0.05）。早期卵巢癌患者组织的hMSH2表达水平明显低于晚期卵巢癌组织（P<0.05）。高、中分化卵巢癌组织hMSH2蛋白表达水平明显低于低分化卵巢癌组织（P=0.000）。原发卵巢癌患者组织的hMSH2表达水平明显低于复发卵巢癌患者组织（P<0.01）。结论 hMSH2基因的高表达与卵巢癌化疗耐药及预后相关,化疗可能诱导hMSH2基因的高表达;下调hMSH2基因的表达或许是逆转肿瘤耐药的新途径。     

沉默Toll样受体4表达对肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响

目的 探讨Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）对肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响。方法 体外化学合成针对TLR4的小干扰RNA（TLR4-siRNA）,通过脂质体介导转染人肺腺癌A549细胞。采用Real-time PCR和流式细胞仪检测分析干扰后A549细胞中TLR4 mRNA及蛋白的表达情况。另外,采用流式细胞仪检测分析干扰72 h后细胞凋亡率和细胞周期的变化。结果 与对照组比较,转染TLR4-siRNA后,A549细胞中TLR4 mRNA及蛋白的表达显著下降（P<0.05）,细胞的凋亡率明显增加[（1.73 ± 0.32）% vs.（7.40 ± 0.75）%（P<0.01）],细胞周期出现G0/G1期停滞[（48.21 ± 1.15）%vs.（66.26 ± 2.45）%（P<0.05）],同时S期细胞比例明显减少[（34.25 ± 1.46）% vs.（22.63 ± 3.39）%（P<0.05）]。结论 TLR4-siRNA能有效沉默A549细胞中TLR4的表达,在促进细胞凋亡的同时能够影响细胞周期分布从而抑制肿瘤细胞的生长,特异性干预TLR4基因的表达有望成为治疗肺癌的一种新手段。     

腋窝临床淋巴结阳性超声特征与乳腺癌淋巴结转移负荷及预后的相关性研究

目的 分析腋窝临床淋巴结阳性乳腺癌患者的腋窝淋巴结超声特征,探索超声特征与腋窝淋巴结转移负荷及患者预后的相关性。方法 研究入组2009年1月至2020年12月于本中心接受腋窝淋巴结清扫术的临床淋巴结阳性乳腺癌患者,分析可预测腋窝淋巴结转移负荷的临床病理指标和超声指标。利用多因素Cox回归分析影响患者预后的超声指标。结果 共纳入1 055例乳腺癌患者,其中低淋巴结负荷（1~2枚淋巴结转移）398例（37.7%）,高淋巴结负荷（≥3枚淋巴结转移）657例（62.3%）。多因素分析显示,患者年龄≥55岁（OR=1.56,95%CI：1.20~2.02,P=0.001）,超声肿瘤大小<20.0 mm（OR=1.54,95%CI：1.14~2.09,P=0.005）、超声淋巴结长径<20.0 mm（OR=2.03,95%CI：1.48~2.79,P<0.001）、超声淋巴结短径<8.6 mm（OR=1.41,95%CI：1.06~1.89,P=0.019）和超声可疑淋巴枚数1~2枚（OR=2.74,95%CI：1.63~4.61,P<0.001）与低淋巴结负荷独立相关。孕激素受体和淋巴结长径是DFS（HR=2.06,95%CI：1.21~3.50,P=0.008;HR=1.66,95%CI：1.15~2.40,P=0.007）和OS（HR=4.53,95%CI：2.18~9.59,P<0.001;HR=3.49,95%CI：1.96~6.20,P<0.001）的独立预测因素。结论 超声特征有助于预测腋窝临床淋巴结阳性乳腺癌患者的淋巴结转移负荷及预后,指导后续个体化治疗。     

瘦素和瘦素受体在结肠癌组织中的表达及瘦素对结肠癌细胞株HT-29增殖及凋亡的影响

探讨瘦素和瘦素受体在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌临床病理特征的关系,及外源性瘦素对结肠癌细胞株HT-29细胞增殖、凋亡的影响。方法 采用流式细胞分析仪检测瘦素和瘦素受体在结肠癌组织中的表达情况;MTT法和流式细胞分析仪检测外源性瘦素对结肠癌细胞株HT-29细胞生长、凋亡及细胞周期的影响。结果 瘦素在结肠癌及正常肠黏膜组织中的阳性表达率分别为（80.30±1.83）%和（59.83±1.12）%,差异具有统计学意义（P<0.01）;瘦素受体在结肠癌及正常肠黏膜组织中的阳性表达率分别为（82.14±1.63）%和（65.21±1.45）%,差异具有统计学意义（P<0.05）。结肠癌组织中瘦素和瘦素受体的表达与结肠癌患者的性别、年龄、肿瘤分化程度、淋巴结、远处转移及临床分期无相关性（P＞0.05）。浓度为50、100和200 ng/ml的外源性瘦素可明显促进结肠癌细胞株HT-29细胞的增殖（P<0.05）,细胞在S期累积明显（P<0.05）,但对HT-29细胞的凋亡无明显影响（P＞0.05）。结论 瘦素和瘦素受体可能通过促进细胞增殖的方式在结肠癌发生过程中发挥重要作用。     

RAB22A在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨RAB22A在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR检测60例乳腺癌及其相应癌旁组织中RAB22A mRNA的表达,分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果 RAB22A mRNA在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织 （4.9±1.1 vs 1.1±0.3,P＜0.01）。不同年龄、肿瘤大小以及不同ER、PR、HER-2表达状况乳腺癌患者中RAB22A mRNA的表达差异无统计学意义（P＞0.05）,但不同淋巴结转移数患者RAB22A mRNA表达差异有统计学意义（P＜0.05）,高表达RAB22A患者的总生存期较低表达患者差（P＜0.05）;多因素Cox比例风险回归模型分析结果显示RAB22A和淋巴结转移数是影响预后的独立因素（P＜0.05）。结论 RAB22A在乳腺癌组织中表达升高,可能与乳腺癌转移和不良预后有关。     

RSK4与Ki-67、cyclin D1、CXCR4、E-cadherin在乳腺癌裸鼠移植瘤中的相关性研究

目的 分析乳腺癌裸鼠移植瘤中核糖体 S6蛋白激酶 4（ribosomal protein S6 kinase 4,RSK4） 与Ki-67、cyclin D1、CXCR4、E-cadherin表达的相关性,进一步探讨RSK4在乳腺癌发展中的作用机制。方法 将转染siRNA （RSK4-RNAi-LV）的MCF-7细胞（实验组）、转染siRNA （NC-GFP-LV）的MCF-7细胞（阴性对照组）和未转染的MCF-7细胞（空白对照组）分别接种至裸鼠乳腺脂肪垫下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,剥离裸鼠移植瘤;采用免疫组织化学法检测移植瘤标本中增殖因子RSK4、Ki-67、cyclin D1 及侵袭因子CXCR4、E-cadherin蛋白的表达。结果 实验组RSK4、E-cadherin蛋白的表达水平分别为（3.2±0.5）％、（28.2±0.7）％,明显低于空白对照组的（36.7±3.4）％、（51.7±4.2）％和阴性对照组的（61.1±5.1）％、（49.2±3.8）％,差异有统计学意义（F=56.79,61.89,P＜0.05）。实验组Ki-67、cyclin D1、CXCR4蛋白的表达水平分别为（67.8±5.8）％、（61.7±4.6）％、（56.3±3.9）％,明显高于空白对照组的（34.5±1.4）％、（29.7±2.5）％、（30.7±3.1）％和阴性对照组的（29.8±1.9）％、（35.7±4.6）％、（28.5±3.7）％,差异有统计学意义（F=45.24,52.16,61.24,P＜0.05）。相关性分析显示,RSK4与 Ki-67、cyclin D1、CXCR4表达呈负相关（r=-0.857,-0.826,-0.867,P<0.001）,与E-cadherin表达呈正相关（r=0.879,P<0.001）。 结论 RSK4可能通过调节CXCR4、Ki-67、CyclinD1和E-cadherin肿瘤相关因子的表达,在乳腺癌在乳腺癌生长及转移过程中发挥作用。     

A2M介导Fas信号传导途径提高卵巢癌对铂类化疗的敏感性研究

目的 探讨A2M基因的表达与卵巢癌患者耐药及预后的关系及其对Fas信号传导通路的影响。方法 利用癌症基因图集（The Cancer  Genome Atlas,TCGA）数据库中铂类敏感和耐药的卵巢癌患者的基因表达谱,分析A2M基因在铂类敏感和耐药患者中的表达差异。利用已构建的带有绿色荧光标记的卵巢癌SKOV3敏感细胞（SKOV3-GFP）和顺铂耐药细胞（SKOV3-GFP/DDPⅡ）进行裸鼠皮下种植,成瘤后分次予以顺铂体内干预,以实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,qRT-PCR）技术检测不同次数顺铂干预后的肿瘤组织中A2M mRNA与Fas信号传导通路上重要节点基因的表达水平。用双变量线性回归分析A2M mRNA与所检测基因的表达量的相关性。结果 相对于铂类敏感病例,A2M mRNA在铂类耐药患者中的表达下降（P<0.05）,A2M mRNA的表达与耐药相关（P=0.02）,与卵巢癌患者总生存期、化疗间隔生存期和无疾病进展生存期高度相关（P均<0.001）,其表达量越高,患者生存期越长。A2M mRNA以及细胞凋亡相关的Fas信号传导通路上重要节点基因Fas、FADD、caspase10、caspase9 和caspase3随顺铂注射次数的增加,在耐药的移植瘤组织中相对低表达（P<0.001）;而其下游与DNA修复相关的基因PARP1随顺铂注射次数的增加,在耐药的移植瘤组织中相对高表达（P<0.05）。A2M mRNA的表达与Fas信号传导通路上节点基因的表达存在线性相关（P<0.05）。结论 A2M可能是卵巢癌顺铂耐药的潜在信号分子,它可能维持肿瘤细胞对铂类药物的敏感性。其在耐药细胞中的低表达可能通过某种机制抑制下游的Fas信号传导通路,使其传导失调,最终引起PARP1的表达上调,促进DNA修复,抑制细胞凋亡,诱发卵巢癌细胞对顺铂的耐药。     

白藜芦醇对非小细胞肺癌细胞自噬和凋亡的影响

目的 探讨白藜芦醇（resveratrol,Res）对人非小细胞肺癌A549细胞自噬和凋亡的影响。方法 采用50 μmol/L白藜芦醇作用于非小细胞肺癌A549细胞（Res组）,对照组细胞用2% FBS的DMEM培养,培养24 h后采用倒置显微镜观察两组A549细胞形态的变化,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞自噬小体的形成,Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、活化caspase-3的表达。结果 A549细胞培养24 h后, 倒置显微镜下可见Res组细胞形状较对照组变圆,细胞排列稀疏;激光扫描共聚焦显微镜下可观察到Res组A549细胞胞浆内大量自噬体形成。Western blot检测结果显示,与对照组比较,Res组A549细胞自噬相关蛋白Beclin 1、LC3 Ⅱ/Ⅰ表达升高（0.151±0.032 vs 0.093±0.013,P=0.011;3.644±0.122 vs 1.903±0.054,P＜0.001）,p62蛋白表达下降（0.032±0.002 vs 0.061±0.005,P=0.021）;促凋亡相关蛋白Bax、活化caspase-3表达升高（0.633±0.061 vs 0.423±0.053,P=0.011;0.154±0.004 vs 0.111±0.011,P=0.002）,而抑制凋亡蛋白Bcl-2表达下降（2.437±0.055 vs 3.503±0.138,P＜0.001）。结论 白藜芦醇可通过促进非小细胞肺癌A549细胞过度自噬而诱导细胞凋亡。     

美蓝染色标记法联合Glisson蒂横断式肝切除与非规则性肝切除治疗肝癌的临床疗效

目的 探讨美蓝染色标记法联合Glisson蒂横断式肝切除与非规则性肝切除治疗肝癌的临床疗效。方法 对美蓝染色标记法联合Glisson蒂横断式肝切除25例（联合组）与非规则性肝切除23例（非规则组）治疗肝癌作前瞻性研究,比较两组患者围手术期情况,包括平均手术时间、术中出血量、术后1 d和4 d AST的水平、肿瘤标本切缘阳性率、并发症发生率、术后1年复发率和1年生存率等,并分析其临床疗效。结果 两组患者均无围手术期死亡病例。联合组平均手术时间较非规则组少［（120.16±15.45） min vs（130.26±8.48） min,t=2.77,P<0.05］;联合组术中出血量较非规则组少［（252.40±81.25） ml vs （493.44±100.96） ml,t=8.42,P<0.05］;联合组术后1 d、4 d AST水平上升幅度较非规则组小［（1 d AST：（143.76±49.48）U/L vs （253.82±77.79） U/L,t=5.90,P<0.05;4 d AST：（79.36±24.51） U/L vs（129.57±45.66） U/L,t=4.80,P<0.05］;肿瘤标本切缘阳性率分别为4.0%和8.7%（P>0.05）;围手术期并发症发生率联合组较非规则组低（12.00% vs 39.13%,P<0.05）;术后1年复发率联合组较非规则组低（20.00% vs 47.83%,P<0.05）;术后1年生存率两组差异无统计学意义（80.00% vs 78.26%,P>0.05）。结论 美蓝染色标记法联合Glisson蒂横断式肝切除较非规则性肝切除治疗肝癌的术中出血量和术后并发症少,患者术后恢复快,复发率低,值得临床推广应用。     

不同通气方式对肺叶切除术患者S100A8蛋白表达的影响

目的 探讨血清钙结合蛋白Calgranulin A（S100A8）在不同通气方式下行肺叶切除术的表达。方法 选择行肺叶切除术肺癌患者20例,根据采用不同通气方式,分为单肺通气组和双肺通气组,每组10例。记录两组患者的手术时间、麻醉时间、总输液量、氧合指数、苏醒时间、拔管时间、吸痰次数、有无肺炎、有无肺不张、术后住院时间、有无死亡等情况。采用Western blot分别在手术前（T0）、手术结束时（T1）、术后24 h（T2）和术后48 h（T3）检测两组患者血清中S100A8的表达。结果 单肺通气组和双肺通气组患者手术时间、麻醉时间、总输液量、苏醒时间、拔管时间、吸痰次数、肺炎发生情况、肺不张发生情况、死亡发生情况等比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。单肺通气组氧合指数较双肺通气组低［（296.20±77.64） mmHg vs （319.20±30.23） mmHg,t=2.189,P=0.042）］,术后住院时间增加［（7.80±1.87） d vs  （6.20±1.48） d,t=2.121,P=0.048］。术前单肺通气组和双肺通气组S100A8表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。重复方差分析显示,不同通气方式S100A8表达组间差异有统计学意义（F=310.76,P＜0.001）,随时间变化的趋势不同（F=24.85,P=0.025）,组间与时间点存在交互作用（F=18.85, P=0.001）。结论 行开胸肺叶切除术肺癌患者采用单肺通气较双肺通气的术中氧合指数降低,且S100A8表达升高,可能与其更易发生呼吸机相关性肺损伤有关。     

卵巢癌相关抗原TM4SF1 HLA-A2限制性CTL表位预测及鉴定

目的 预测并筛选免疫反应性较强的四跨膜蛋白超家族成员1（transmembrane 4 L6 family member 1，TM4SF1） 人类白细胞抗原A2（human leukocyte antigen A2，HLA-A2）限制性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte，CTL）表位肽。方法 联合4种软件（BIMAS、SYFPEITHI、IEDB、PROPRED I）对TM4SF1的 HLA-A2限制性CTL表位进行预测，并采用预培养法酶联免疫斑点法（enzyme-linked immunospot assy，ELISOPT）、直接法ELISOPT对所测得表位肽的免疫反应性进行鉴定。结果 4种不同软件共预测出10条表位多肽，对其中4条（P1、P2、P8、P10）进行免疫反应性验证。多肽活化CTL能力结果显示，预培养法ELISPOT产生斑点形成细胞（spvt forming cell，SFC）的净值T明显高于直接法ELISPOT：［（阳性对照肽：322±8 vs 169±22，P<0.05）、（多肽P1：114±10 vs 39±7，P<0.05）、（多肽 P10：156±31 vs 52±8，P<0.05）］。单个活化CTL细胞分泌INF-γ因子的水平检测结果显示，预培养法 ELISPOT 产生斑点的平均大小明显大于直接法 ELISPOT［（阳性对照肽：21.91±2.45 vs 13.80±1.76，P<0.05）、（多肽P1：12.90±0.88  vs 8.31±1.40，P<0.05）、（多肽P10：17.50±3.85 vs 11.96±0.61，P<0.05）］。表位多肽P1、P10均具有免疫原性，P10的免疫活性更高。结论 预培养法ELISPOT检测多肽的免疫反应性较直接法ELISPOT灵敏性更高，多种软件联合ELISPOT预培养法可有效筛选出免疫反应性更强的卵巢癌相关抗原TM4SF1 HLA-A2限制性CTL优势表位，其中P10的免疫活性最高。     

牛磺酸对7，12-二甲基苯蒽诱发大鼠乳腺癌的干预作用及其机制

目的 研究牛磺酸对7,12-二甲基苯蒽（7,12- dimethyl benzene［a］ anthracene,DMBA）诱发大鼠乳腺癌的干预作用及其机制。方法 将30只6周龄雌性SD大鼠随机分为牛磺酸干预组、模型对照组和空白对照组,每组10只。牛磺酸干预组和模型对照组大鼠给予15 mg/100g的DMBA,在牛磺酸干预组的日常饮水中添加3%牛磺酸,一次性灌胃;空白对照组大鼠予1 mL/100 g花生油灌胃。所有大鼠均自由饮水和进食。观察、记录大鼠乳腺肿瘤发生情况,采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测大鼠血清IL-6和TNF-α含量。结果 与模型对照组相比,牛磺酸干预组肿瘤发生的潜伏期延长,致瘤率、荷瘤总数、血清IL-6和TNF-α水平均下降,差异有统计学意义（P<0.05）,肿瘤体积和重量增加,但差异无统计学意义（P>0.05）;与空白对照组相比,模型对照组血清IL-6和TNF-α水平显著升高［（41.41±10.10）pg/mL vs （20.00±10.10） pg/mL,P<0.05;（71.72±25.83） pg/mL vs （42.00±16.69） pg/mL,P<0.05）,而牛磺酸干预组升高不明显［（22.48±10.38） pg/mL vs（20.00±10.10） pg/mL,P>0.05;（42.52±9.15） pg/mL vs （42.00±16.69）pg/mL,P>0.05）。 结论 牛磺酸对DMBA诱发大鼠乳腺癌的发生有较明显的抑制作用,其机制可能通过调节机体免疫反应途径实现。     

TRAIL及其受体在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体（DR4、DR5、DcR1、DcR2）在乳腺癌组织的表达及意义。方法用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测60例乳腺癌及对应的正常乳腺组织中TRAIL及其受体的表达。结果乳腺癌组织中TRAIL、DcR1、DcR2表达均低于正常乳腺组织(P＜0.05),且TRAIL及其受体的表达与乳腺癌的分期、分级等无关(P＞0.05)。结论TRAIL及其受体在乳腺癌凋亡过程中起着重要的作用,TRAIL及其诱骗受体低表达同乳腺癌的发生关系密切。     

Cyclin D1、MMR、FIB与结肠癌预后的相关性分析

目的 分析细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、错配修复蛋白（mis-match repair,MMR）、纤维蛋白原（fibrinogen,FIB）与结肠癌预后的关系。方法 回顾性分析210例结肠癌根治术患者的临床病理资料。采用免疫组化法检测Cyclin D1、MMR的表达,凝固法检测静脉血中FIB的浓度,并分析三者与结肠癌患者术后生存的关系。结果 Cyclin D1低表达的结肠癌患者1年、3年、5年生存率均高于高表达患者（Log-rank χ²=9.878,P=0.002）;错配修复基因缺失（mis-match repair genes deletion,dMMR）的患者1年、3年、5年生存率亦较错配修复基因完整（mis-match repair genes complete,pMMR）患者高（Log-rank χ²=5.138,P=0.023）;术前FIB正常的患者1年、3年、5年生存率高于FIB异常患者（Log-rank χ²=9.490,P=0.002）。Cyclin D1高表达、FIB异常为结肠癌预后的独立危险因素（HR=1.931, 95%CI：1.131~3.296;HR=2.029,95%CI：1.170~3.519）。结论 Cyclin D1高表达、pMMR及术前FIB异常的结肠癌患者预后不良。