lncRNA ZFPM2-AS1在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌T24细胞生物学特性的影响

目的探究lncRNA ZFPM2-AS1在膀胱癌组织中的表达和对膀胱癌T24细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。方法QPCR检测膀胱癌组织和细胞系中lncRNA ZFPM2-AS1的表达;将阴性对照siRNA和lncRNA ZFPM2-AS1 siRNA转染至膀胱癌T24细胞中,qPCR检测转染后细胞中lncRNA ZFPM2-AS1表达,MTT检测细胞增殖,克隆形成检测细胞克隆形成能力,细胞划痕检测细胞迁移,Transwell检测细胞侵袭,Western blot检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。结果膀胱癌组织中lncRNA ZFPM2-AS1的水平高于癌旁组织;与正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1相比,T24、J82、56373种膀胱癌细胞株中lncRNA ZFPM2-AS1表达水平均高于正常膀胱上皮细胞,且差异有统计学意义(P<0.01)。与沉默对照组相比,沉默ZFPM2-AS1组T24细胞中lncRNA ZFPM2-AS1表达显著降低(P<0.01),细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.01),细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin及其下游蛋白c-Myc和Cyclin D1表达显著降低,p-β-catenin蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论LncRNA ZFPM2-AS1在膀胱癌中高表达,沉默LncRNA ZFPM2-AS1能够抑制膀胱癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

lncRNA RP11-297P16.4促进肺腺癌细胞侵袭及迁移的机制探讨

目的:探究长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）RP11-297P16.4对人肺腺癌细胞H1299和A549侵袭及迁移的影响。方法:利用qRT-PCR检测在肺腺癌细胞H1299、A549及人正常支气管上皮细胞HBEC 中RP11-297P16.4的相对表达水平;设计合成针对RP11-297P16.4的特异性shRNA,慢病毒感染建立稳定敲低lncRNA RP11-297P16.4的H1299、A549细胞;将其分为对照/H1299组、实验/H1299组、对照/A549组、实验/A549组,对照组感染shRNA-NC,实验组感染shRNA-RP11-297P16.4;qRT-PCR检测shRNA敲低效率;采用细胞划痕实验和Transwell实验检测RP11-297P16.4对肺腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响;采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-2和-9的mRNA和蛋白质表达水平。结果:与对照组相比,RP11-297P16.4在肺腺癌细胞中高表达,差异有统计学意义（P＜0.001,P＜0.01）;qRT-PCR分析确定,shRNA敲低后RP11-297P16.4的mRNA表达水平显著降低(P＜0.001,P＜0.001);划痕实验表明24 h、48 h实验组细胞伤口愈合率均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01; P＜0.001,P＜0.001);Transwell小室检测结果显示,实验组细胞侵袭数量显著少于对照组,差异有统计学意义（P＜0.001,P＜0.001）;qRT-PCR和蛋白印迹法结果显示,实验组细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白质表达量均低于对照组,差异具有统计学意义（均P＜0.05）。结论:lncRNA RP11-297P16.4 通过促进MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达来增强H1299、A549细胞的侵袭和迁移能力。     

LncRNA HULC降低PTEN甲基化及组蛋白乙酰化促进人胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭

目的:探讨长链非编码RNA肝癌高表达转录本（long non-coding RNA highly up-regulated in liver cancer,LncRNA HULC）降低PTEN启动子甲基化以及组蛋白乙酰化促进胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭的作用。方法:稳转HULC的胶质母细胞瘤细胞株U251,分为LncRNA HULC过表达组（HULC组）及空白对照组（vec组）。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组HULC、PTEN表达水平。亚硫酸氢盐处理后测序（Bisulfite Sequencing PCR,BSP）检测PTEN启动子甲基化水平。蛋白免疫印迹（Western Blotting,WB）检测PTEN、组蛋白H3/H4、乙酰化组蛋白H3/H4表达水平。细胞增殖实验、平板克隆形成实验、划痕-愈合实验和Transwell实验分别检测各组细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果:与vec组相比,HULC组PTEN启动子甲基化水平及组蛋白乙酰化水平较低（P＜0.05）,细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著增高（P＜0.05）。结论:LncRNA HULC降低PTEN启动子甲基化和组蛋白乙酰化水平,促进胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭。     

lncRNA HOXA11-AS对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的:探究长链非编码RNA(long-nocoding RNA,lncRNA) HOXA11-AS在骨肉瘤中的表达及其对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法:采用2012年1月至2015年12月浙江省人民医院骨外科13例骨肉瘤组织及癌旁正常组织,以及骨肉瘤细胞系MG63、U20S和人成骨细胞株hFOB1.19,用实时荧光定量PCR检测骨肉瘤组织和骨肉瘤细胞系MG63和U20S中lncRNA HOXA11-AS的表达水平.用慢病毒载体构建稳定过表达lncRNA HOXA11-AS的骨肉瘤MG63及U20S细胞,用CCK-8和克隆形成实验、Transwell小室法分别检测过表达lncRNA HOXA11-AS对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响.建立过表达lncRNA HOXA11-AS MG63骨肉瘤细胞裸鼠移植瘤模型,以空载体慢病毒Lv-NC转染的细胞作为对照,观察过表达lncRNA HOXA11-AS对裸鼠移植瘤生长的影响.结果:lncRNA在骨肉瘤组织和MG63及U20S细胞中表达水平显著下调(P＜0.01).与hFOB1.19细胞比,过表达lncRNA HOXA11-AS细胞后,(1)显著抑制骨肉瘤MG63及U20S细胞的增殖[(4.03 ±0.98) vs(6.96 ±0.54),(4.68±0.77) vs (8.87±1.23),均P＜0.01]、迁移细胞数[(83.00 ±6.03) vs(168±12.54),(96.00 ±8.77)vs(184.00±14.63)个,均P＜0.01]和侵袭细胞数[(35.00±3.48) vs (97.00±8.32),(38.00±1.73) vs (87.00±6.37)个,均P＜0.01];(2)显著抑制骨肉瘤裸鼠皮下移植瘤的生长(P＜0.01).结论:lncRNA HOXA11-AS在骨肉瘤细胞中低表达,且lncRNA HOXA11-AS过表达对骨肉瘤的发生发展具有抑制作用,可以作为骨肉瘤治疗潜在的分子靶点.     

非小细胞肺癌组织LncRNA RP11-164P12.4表达及其临床意义

目的 近年来研究发现,LncRNA的异常表达与肿瘤的发生、发展、浸润、转移、复发及耐药等相关,但其具体机制尚未完全阐明.本研究探讨LncRNA RP11-164P12.4在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织标本中的表达及临床意义.方法 收集2011-01-01-2015-12-30四川省人民医院就诊临床资料完整的125例NSCLC组织、90例癌旁组织(距癌组织＞2 cm)及35例正常肺组织标本,通过QRT-PCR法检测LncRNA RP11-164P12.4的表达,分析其表达与临床预后的关系.结果 NSCLC组织LncRNA RP11-164P12.4的表达量为6.850±1.370,明显高于癌旁组织(1.225±0.750)和正常肺组织(1.092±0.69),差异有统计学意义,F=95.19,P＜0.001.LncRNA RP11-164P12.4的表达与患者的年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结转移及肿瘤分化无关,差异无统计学意义,均P＞0.05;与疾病分期、远处转移、病理类型及生存状态明显相关,差异有统计学意义,均P＜0.05.LncRNA RP11-164P12.4高表达水平与NSCLC中的腺癌类型相关,P＜0.05;LncRNA RP11-164P12.4高表达组中腺癌的表达水平明显高于鳞癌及其他,P＜0.001;LncRNA RP11-164P12.4低表达组患者总生存时间(overall survival,OS)为(44.89±3.64)个月,较高表达组(21.83±3.74)个月明显延长,差异有统计学意义,x2 =49.210,P＜0.001.LncRNARP11-164P12.4高表达组患者无进展生存时间(progression-free-survival,PFS)为(13.55±2.84)个月,较低表达组(24.00±2.75)个月缩短,差异有统计学意义,x2 =50.18,P＜0.001;Cox多因素回归模型分析提示,LncRNA RP11-164P12.4的表达、淋巴转移远处转移和临床分期是NSCLC独立的预后因素,P＜0.05.结论 LncRNA RP11-164P12.4参与调节NSCLC的发生发展,可作为潜在的NSCLC诊断和预后评估的分子标志物.     

lncRNARP11-259P1.1在食管鳞状细胞癌中的表达及其与临床预后的关系

目的:探讨lncRNA RP 11-259P 1.1在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)中的表达水平及其与患者临床病理特征和预后的关系.方法:收集2012年1月1日至2016年12月31日西南医科大学附属医院行手术切除的130例ESCC原发病灶及对应癌旁组织标本、人ESCC细胞株KYSE510、Eca109及食管上皮细胞株Het-1A,采用实时荧光定量PCR法检测lncRNA RP11-259P 1.1在ESCC组织及细胞中的表达水平,分析其在组织中表达水平与患者临床病理特征及预后的关系.结果:lncRNA RP11-259P1.1在ESCC细胞及组织中表达水平显著高于正常管上皮细胞及癌旁组织(均P＜0.01).lncRNA RP11-259P1.1高表达与肿瘤大小、肿瘤分期、淋巴结转移及术前放化疗(CRT)后肿瘤缓解明显相关(均P＜0.05),与患者年龄、性别、肿瘤部位、吸烟状况等无关(均P＞0.05).在63例术前接受新辅助CRT治疗患者中,低表达lncRNA RP11-259P1.1患者与高表达患者比较:(1)病理完全缓解率明显升高(60.00％ vs 21.21％,P＜0.01);(2)术前CRT的疗效更佳(P＜0.05);(3)中位无进展生存时间和生存时间均明显延长[(28.00±2.47) vs(17.00±1.90)个月,(41.57±2.45) vs (30.00±2.55)个月;均P＜0.01].lncRNA RP11-259P1.1为ESCC患者独立的预后因素(P＜0.05).结论:lncRNA RP11-259P1.1可能是ESCC潜在的预后和术前CRT疗效评价的分子标志物,低表达lncRNA RP 11-259P 1.1的患者术前给予CRT疗效更佳.     

LncRNA OIP5-AS1对膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的：探讨lncRNA OIP5-AS1对膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法：实验选取人正常膀胱细胞系（SV-HUC-1）和膀胱癌细胞系（EJ、T24、BIU87）为研究对象,采用Real-time PCR检测细胞lncRNA OIP5-AS1的表达。选取lncRNA OIP5-AS1表达较高的T24细胞进行后续实验,设置组别为control组、siRNA-NC组、siRNAOIP5-AS1组、Vector组、OIP5-AS1组,通过CCK-8检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Real-time PCR检测细胞lncRNA OIP5-AS1的表达,Western blot检测细胞Vimentin、E-Cadherin蛋白表达。结果：与SV-HUC-1细胞相比,lncRNA OIP5-AS1在膀胱癌细胞中的表达明显升高,T24细胞表达量较高（P <0.05）。与control组相比,siRNA-OIP5-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力明显降低,Vimentin蛋白表达明显降低,E-Cadherin蛋白表达明显升高（P &l...     

miRNA-137在膀胱癌中的表达情况及对膀胱癌细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨miRNA-137在膀胱癌中的相对表达量及其对膀胱癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法选取30例膀胱癌患者的膀胱癌组织和癌旁组织标本。实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测膀胱癌组织和癌旁组织中的miRNA-137的相对表达量,检测不同病理分级膀胱癌患者膀胱癌组织中miRNA-137的表达量及其与膀胱癌病理分级的相关性。将mimic-NC、miRNA-137 mimic、miRNA-137 inhibitor质粒转染至膀胱癌T24细胞,并分别作为空白组、过表达组和低表达组,RT-PCR法检测3组细胞miRNA-137的相对表达量,Transwell小室检测3组细胞的迁移和侵袭能力。结果浸润性膀胱癌组织中miRNA-137的相对表达量明显高于非浸润性膀胱癌组织和癌旁组织(P﹤0.01);病理分级为Ⅳ级的膀胱癌患者膀胱癌组织中miRNA-137的相对表达量明显高于病理分级为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的患者(P﹤0.01)。过表达组迁移和侵袭细胞数目均高于空白组细胞(P﹤0.05);低表达组迁移和侵袭细胞数目均低于空白组细胞(P﹤0.05)。结论浸润性膀胱癌组织和病理分级为Ⅳ级的膀胱癌组织中miRNA-137的相对表达量较高,上调miRNA-137的表达可以促进膀胱癌细胞侵袭和迁移,抑制其表达可以抑制膀胱癌细胞的迁移和侵袭。     

蒲公英萜醇调控ABHD11-AS1介导上皮间质转化对膀胱癌细胞侵袭转移的作用

摘 要：［目的］ 探究蒲公英萜醇通过调控α/β水解酶域11反义RNA1（ABHD11-AS1）对膀胱癌细胞侵袭转移的作用,并分析相关机制。［方法］ 将对数生长期的人膀胱癌细胞系EJ细胞分为空白对照组（细胞不做特殊处理）、蒲公英萜醇组（给予蒲公英萜醇100 μmol/L处理24 h）、蒲公英萜醇-pcDNA组（转染pcDNA 24 h给予细胞蒲公英萜醇100 μmol/L处理24 h）、蒲公英萜醇-pcDNA-ABHD11-AS1组（转染pcDNA-ABHD11-AS1 24 h后细胞给予蒲公英萜醇100 μmol/L药物处理24 h）。实时荧光定量PCR法检测细胞ABHD11-AS1水平;细胞增殖-毒性8检测试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖;划痕实验、Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力;蛋白免疫印迹法检测上皮间质转化标志蛋白E-钙黏附蛋白（E-cadherin）、N-钙黏附蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达变化。［结果］ 与空白对照组比较,蒲公英萜醇组EJ细胞ABHD11-AS1水平、侵袭细胞数、细胞迁移率、N-Cadherin、Vimentin蛋白水平均降低（P＜0.05）,EJ细胞增殖抑制率、E-cadherin蛋白水平升高（P＜0.05）。与蒲公英萜醇组、蒲公英萜醇-pcDNA组比较,蒲公英萜醇-pcDNA-ABHD11-AS1组EJ细胞ABHD11-AS1水平、侵袭细胞数、细胞迁移率、N-Cadherin、Vimentin蛋白水平均升高（P＜0.05）,EJ细胞增殖抑制率、E-cadherin蛋白水平降低（P＜0.05）。［结论］ 蒲公英萜醇能够抑制膀胱癌细胞侵袭及迁移,可能是通过抑制ABHD11-AS1介导的上皮间质转化发生实现的。     

过表达lncRNA LINC00886 抑制食管鳞状细胞癌Eca109 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的: 检测lncRNA LINC00886 在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织及细胞系中的表达及其对Eca109 细胞体外增殖、迁移及侵袭的影响。方法: 收集2014 年6 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库69 例ESCC手术患者的癌及对应的癌旁组织标本,以及ESCC细胞系Eca109、TE13、TE1、Kyse150、Yes-2 和Kyse170,用qPCR 法检测LINC00886 在ESCC组织及细胞系中的表达情况。分别用pIRES2-LINC00886、pIRES2-NC转染Eca109 细胞,用qPCR法检测pIRES2-LINC00886 转染Eca109细胞后LINC00886 的过表达效率;用MTS、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell 侵袭实验分别检测过表达LINC00886 对Eca109 细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果: 在ESCC组织中LINC00886 表达水平明显低于癌旁组织（P<0.01）,其表达水平与肿瘤TNM分期和淋巴结转移相关（均P<0.05）。LINC00886 在ESCC 细胞中的表达水平也低于对照组（均P<0.01）。转染pIRES2-LINC00886 后,Eca109 细胞中LINC00886 的表达水平显著高于对照组（均P<0.05）。与对照组相比,过表达LINC00886 明显抑制Eca109 细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。结论: lncRNA LINC00886 低表达可能与ESCC的发生发展相关,过表达LINC00886可抑制ESCC细胞的增殖、迁移与侵袭能力。     

lncRNA TPTEP1通过抑制miR-129-5p影响膀胱癌T24细胞的增殖和侵袭

目的:分析长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lncRNA) TPTEPl在膀胱癌组织和细胞的表达,观察其对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制.方法:收集2017年8月至2019年10月在武汉市东西湖人民医院泌尿外科接受手术治疗的43例膀胱癌患者的癌与癌旁组织标本,采用实时荧光定量...     

上调LncRNA RP11-173C1.1对甲状腺癌B-CPAP细胞增殖和侵袭能力的影响

目的检测长链非编码RNA RP11-173C1.1在分化型甲状腺癌组织中的表达,并研究RP11-173C1.1对甲状腺乳头状癌细胞系B-CPAP增殖和侵袭的作用和分子机制。方法qRT-PCR检测分化型甲状腺癌组织、甲状腺癌细胞株中RP11-173C1.1的表达。以表达水平最低的B-CPAP细胞为研究对象,转染RP11-173C1.1过表达质粒和阴性对照质粒,分别命名为实验组和对照组。CCK-8法、Transwell侵袭实验分别检测上调RP11-173C1.1对B-CPAP细胞增殖和侵袭能力的影响。生物信息学方法预测RP11-173C1.1的作用机制。qRT-PCR和Western blot检测上调RP11-173C1.1对下游基因表达的影响。结果甲状腺癌组织中RP11-173C1.1的表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。甲状腺癌细胞株中RP11-173C1.1的表达显著低于正常甲状腺滤泡上皮细胞(P<0.01)。上调RP11-173C1.1可抑制B-CPAP细胞的增殖和侵袭能力(均P<0.05)。RP11-173C1.1互补结合miR-376c-3p,miR-376c-3p互补结合OPCML。上调RP11-173C1.1可降低B-CPAP细胞中miR-376c-3p的表达,促进OPCML mRNA和蛋白的表达(均P<0.01)。结论RP11-173C1.1在分化型甲状腺癌组织和细胞系中呈低表达,上调RP11-173C1.1可抑制甲状腺乳头状癌细胞系B-CPAP的增殖和侵袭能力,其可能的机制是通过下调miR-376c-3p的表达、上调OPCML基因的表达来实现。     

lncRNA HULC在膀胱癌组织中的表达及其对5637细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HULC在膀胱癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系,以及沉默HULC对膀胱癌5637细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响.方法:选取2014年6月至2017年12月郑州人民医院手术切除的102例膀胱癌患者的癌及癌旁组织标本,以及人膀胱癌细胞株5637和人正常膀胱上皮细胞株SV...     

ppGalNAc T1 as a Potential Novel Marker for Human Bladder Cancer

Objectives: To investigate the effect of glycopeptide-preferring polypeptide GalNAc transferase 1 (ppGalNAcT1 ) targeted RNA interference (RNAi) on the growth and migration of human bladder carcinoma EJ cells invitro and in vivo. Methods: DNA microarray assays were performed to determine ppGalNAc Ts(ppGalNAc T1-9)expression in human bladder cancer and normal bladder tissues. We transfected the EJ bladder cancer cell linewith well-designed ppGalNAc T1 siRNA. Boyden chamber and Wound healing assays were used to investigatechanges of shppGalNAc T1-EJ cell migration. Proliferation of shppGalNAc T1-EJ cells in vitro was assessedusing [3H]-thymidine incorporation assay and soft agar colony formation assays. Subcutaneous bladder tumorsin BALB/c nude mice were induced by inoculation of shppGalNAc T1-EJ cells and after inoculation diametersof tumors were measured every 5 days to determine gross tumor volumes. Results: ppGalNAc T1 mRNA inbladder cancer tissues was 11.2-fold higher than in normal bladder tissues. When ppGalNAc T1 expressionin EJ cells was knocked down through transfection by pSUPER-shppGalNAc T1 vector, markedly reducedincorporation of [3H]-thymidine into DNA of EJ cells was observed at all time points compared with the emptyvector transfected control cells. However, ppGalNAc T1 knockdown did not significantly inhibited cell migration(only 12.3%). Silenced ppGalNAc T1 expression significantly inhibited subcutaneous tumor growth comparedwith the control groups injected with empty vector transfected control cells. At the end of observation course (40days), the inhibitory rate of cancerous growth for ppGalNAc T1 knockdown was 52.5%. Conclusion: ppGalNAcT1 might be a potential novel marker for human bladder cancer. Although ppGalNAc T1 knockdown caused noremarkable change in cell migration, silenced expression significantly inhibited proliferation and tumor growthof the bladder cancer EJ cell line.     

Long non‐coding RNA RP11‐552M11.4 promotes cells proliferation,migration and invasion by targeting BRCA2 in ovarian cancer

The present study aimed to investigate the effect of long non‐coding RNA (lncRNA) RP11‐552M11.4 on cell proliferation, apoptosis, migration and invasion as well as its targeting genes in epithelial ovarian cancer (EOC) cells. LncRNA RP11‐552M11.4 expression was detected in 67 tumor tissues and paired adjacent tissues obtained from EOC patients. lncRNA RP11‐552M11.4 mimic/inhibitor plasmids were transferred into ovarian cancer cells (SKOV3, A‐2780) and normal ovarian epithelial cells (IOSE80 cells). In addition, rescue experiment was carried out by transferring BRCA2 inhibitor&lncRNA RP11‐552M11.4 inhibitor plasmids into SKOV3 and A‐2780 cells. qPCR, western blot, CKK‐8, Annexin V/propidium iodide (AV/PI), wound‐healing and Matrigel invasion assays were carried out to detect RNA expression, protein expression, cell proliferation, apoptosis, migration, and invasion, respectively. LncRNA RP11‐552M11.4 expression was elevated in tumor tissues compared with paired adjacent tissues and correlated with higher pathological grade, International Federation of Gynecology and Obstetrics stage and worse overall survival in EOC patients. LncRNA RP11‐552M11.4 promoted SKOV3 cell proliferation, migration and invasion whereas it inhibited apoptosis. Rescue experiment and luciferase reporter assay showed that lncRNA RP11‐552M11.4 regulated SKOV3 cells functions through binding BRCA2. Further experiments in A‐2780 cells also validated that lncRNA RP11‐552M11.4 induced A‐2780 cell proliferation while repressing apoptosis by targeting BRCA2. In addition, upregulation of lncRNA RP11‐552M11.4 increased IOSE80 cell proliferation, migration and invasion while decreasing apoptosis. In conclusion, lncRNA RP11‐552M11.4 correlates with worse prognosis, and promotes cell proliferation, migration, invasion, and inhibits cell apoptosis by down‐regulating BRCA2 in EOC.     

lncRNA NONHSAT113026在肾透明细胞癌中的表达及功能

目的:本研究旨在探讨lncRNA NONHSAT113026（lncRNA 026）在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）组织中的表达及对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）分别在83例肾透明细胞癌和对应癌旁组织、肾癌细胞株786-O及ACHN中检测lncRNA 026的表达水平,并分析其表达水平与患者临床病理参数的相关性。通过慢病毒载体技术构建稳定过表达lncRNA 026的肾癌细胞786-O及ACHN,采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）检测细胞增殖活性,Transwell小室检测细胞转移能力,蛋白印迹法（Western blot）分析PI3K/Akt信号通路中相关蛋白的表达情况。结果:与癌旁组织相比,lncRNA 026在ccRCC组织中的表达水平显著下调（P＜0.000 1）;在肾癌细胞786-O和ACHN中过表达lncRNA 026能显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭（P＜0.01）;Western blot结果显示,过表达lncRNA 026可下调PI3K/Akt信号通路中p-PI3K、p-Akt、GSK-3β的表达（P＜0.01）。结论:lncRNA 026在肾透明细胞癌组织中低表达,并且过表达lncRNA 026能显著降低肾癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。提示lncRNA 026在肾癌中发挥了重要作用,有望成为治疗肾癌的潜在药物作用靶点。     

长链非编码RNA RP11-385J1.2通过靶向微小RNA-370-3p调控甲状腺癌细胞增殖、侵袭及凋亡的作用机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-385J1.2对甲状腺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测人甲状腺癌细胞株SW579、FTC-133、TPC-1、K1和正常甲状腺细胞Nthyori 3-1中RP11-385J1.2和微小RNA(miRNA)-370-3p的表达情况。采用抑制剂si-RP11-385J1.2和(或)anti-miRNA-370-3p转染SW579细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印记法(Western blot)检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bax的表达情况,双荧光素酶报告系统验证RP11-385J1.2和miRNA-370-3p的靶向关系。结果人甲状腺癌细胞株SW579、FTC-133、TPC-1、K1中RP11-385J1.2的表达水平均高于正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,miRNA-370-3p的表达水平均低于正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。敲减RP11-385J1.2可抑制SW579细胞增殖和侵袭并促进细胞凋亡,RP11-385J1.2能够靶向负调控miRNA-370-3p的表达,下调miRNA-370-3p的表达可逆转敲减RP11-385J1.2对SW579细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。结论lncRNA RP11-385J1.2通过靶向下调miRNA-370-3p的表达促进甲状腺癌SW579细胞增殖和侵袭并抑制细胞凋亡。RP11-385J1.2和miRNA-370-3p是甲状腺癌的潜在分子靶点。     

LncRNA RP11-436H11.5, functioning as a competitive endogenous RNA,upregulates BCL-W expression by sponging miR-335-5p and promotes proliferation and invasion in renal cell carcinoma

Background

Accumulating evidence indicates that long non-coding RNAs (lncRNAs) play a crucial role in tumorigenesis. Here, we report a novel lncRNA, RP11-436H11.5, that regulates renal cell carcinoma (RCC) cell proliferation and invasion by sponging miR-335-5p.

Methods

Expression of lncRNA RP11-436H11.5 was determined by a qRT-PCR assay in RCC tissues. RCC cell proliferation and invasion were measured by a cell proliferation assay and a transwell invasion assay. Expression of BCL-W was detected by a western blot assay. Interactions between lncRNA RP11-436H11.5 and miR-335-5p were measured by a luciferase reporter assay and a RNA-pull down assay. In vivo experiments were used to detect tumor formation.

Results

In this study, the qRT-PCR results illustrated that lncRNA RP11-436H11.5 was more highly expressed in RCC tissues than in adjacent normal renal tissues. The results of survival analysis indicated that patients in the high lncRNA RP11-436H11.5 group presented significantly worse outcomes compared with those in the low lncRNA RP11-436H11.5 group. Downregulation of lncRNA RP11-436H11.5 suppressed RCC cell proliferation and invasion in vitro and in vivo. Luciferase reporter assay results demonstrated that lncRNA RP11-436H11.5 enhanced BCL-W expression by regulating miR-335-5p expression. LncRNA RP11-436H11.5 could function as a miR-335-5p decoy to derepress expression of BCL-W.

Conclusions

LncRNA RP11-436H11.5 could function as a competing endogenous RNA to promote RCC cell proliferation and invasion, which might serve as a therapeutic application to suppress RCC progression.