Herceptin联合顺铂对高表达HER-2／neu卵巢癌移植瘤鼠的治疗作用

目的：建立高表达HER-2／neu的人卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠腹腔移植瘤模型，探讨Herceptin联合顺铂（cisplantin，cDDP）的治疗作用及其机制。方法：将人卵巢癌细胞株SKOV3接种于裸鼠腹腔，96h后随机分为4组进行腹腔内注射治疗：对照A组生理盐水，B组cDDP3mg／kg，C组Herceptin 1mg／kg，D组cDDP3mg／kg加Herceptin 1mg／kg，观察各组裸鼠成瘤率、生存期、生存延长率；采用流式细胞术检测不同治疗后肿瘤细胞中Fas、FasL的表达情况；分别取A、D组肿瘤组织予病理学检查及免疫组化染色，观察组织学变化。结果：SKOV3裸鼠腹腔移植瘤HER-2／neu免疫组化染色为＋＋，联合用药后HER-2／neu染色减弱，且凋亡现象明显。Herceptin与cDDP联合用药可明显延长荷瘤鼠的生存期，与单药相比有显著性差异（P〈0．05）。Herceptin、cDDP及联合用药后，Fas表达率均明显升高（P〈0．01），但以联合用药组表达率最高；而FasL表达率各治疗组较对照组无显著性差异。结论：Herceptin、cDDP能有效抑制高表达HER-2／neu SKOV3裸鼠腹腔移植瘤的生长，延长荷瘤裸鼠的生存期，联合用药组疗效最为显著，其机制与CD95调节有关。     

间皮素siRNA慢病毒对卵巢癌裸鼠移植瘤的治疗效果

目的： 探讨间皮素（mesothelin,MSLN）siRNA慢病毒对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的治疗作用。 方法： 利用人卵巢癌SKOV3细胞建立卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。实验分为3组：治疗组、阴性对照组和空白对照组。治疗组应用携间皮素siRNA慢病毒液(LV-MSLN-shRNA)对裸鼠模型进行治疗,阴性对照组采用空载体(LV-MSLN-neg)慢病毒液进行治疗,空白对照组注射PBS治疗。从裸鼠生长一般情况、成瘤率、体质量差、瘤体质量和肿瘤转移部位数等方面观察治疗效果, Western blotting法检测移植瘤组织中间皮素蛋白的表达情况。 结果： 用间皮素siRNA慢病毒液对荷瘤裸鼠进行注射的治疗组裸鼠的成瘤率、体质量差、瘤体质量及肿瘤形成部位数均明显低于空白对照组和空载体LV-MSLN-neg治疗组（P<0.01）。注射慢病毒液后瘤体组织中间皮素蛋白表达明显降低（P<0.05）。 结论： 间皮素siRNA慢病毒液对卵巢癌腹腔移植瘤的生长有显著抑制作用。     

白桦酯醇对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中MMP-2和MMP-9表达的影响及意义

目的 探讨白桦酯醇对卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响和意义。方法 建立卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤模型,将30只裸鼠随机分为白桦酯醇高剂量组（80mg／kg）、中剂量组（40mg／kg）、低剂量组（20mg／kg）以及对照组（生理盐水）和紫杉醇组（135mg／m2）,每组6只,腹腔给药02ml/只,隔日1次,连续21d。停药后第2d处死裸鼠,测量其移植瘤体积和瘤重;用免疫组织化学法检测移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达并计算表达率。结果 白桦酯醇处理组和紫杉醇组的移植瘤体积和瘤重均小于对照组（P＜0.05）;白桦酯醇中、高剂量组的抑瘤率分别为44.5％和51.4％,均高于其低剂量组的17.5%（P＜0.05）。与对照组比较,白桦酯醇处理组和紫杉醇组移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均减弱;白桦酯醇低、中、高剂量组移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达率（％）分别为47.13±8.67和53.82±7.41、38.29±4.37和48.79±4.63、26.88±5.12和38.93±2.82,均低于对照组的56.78±6.42和69.35±5.03,且白桦酯醇3组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 白桦酯醇对卵巢癌SKOV3细胞皮下移植瘤的生长有抑制作用,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

TAT-OSBP-MKK6（E）抑制卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤恶性生物学行为的研究

目的 探讨TAT-OSBP-MKK6（E）对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤生长、侵袭及转移等恶性生物学行为的影响。方法 18只裸鼠随机分为实验组［TAT-OSBP-MKK6（E）］、阴性对照组［TAT-OSBP-MKK6（E）+SB202190］和空白对照组（生理盐水）,每组6只,细胞接种法建立人卵巢癌腹腔移植瘤模型,每2天测量腹围。4周后解剖裸鼠,观察裸鼠成瘤情况,测定腹水量,统计肿瘤播散器官数及瘤结节数,称量瘤体重量并计算抑瘤率。采用HE染色分析移植瘤的病理形态学特点;采用TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡指数（AI）;免疫组化SP法检测各组移植瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达;Western blotting检测各组移植瘤组织中p38蛋白表达。结果 与阴性对照组和空白对照组比较,实验组裸鼠腹围增长明显滞后（P＜0.05）,腹水量明显减少（P＜0.05）,肿瘤播散器官数、瘤结节数及瘤体重量均明显减少（P均＜0.05）,抑瘤率达70.99％。实验组的AI为（20.44±1.20）％,显著高于阴性对照组的 （4.94±0.24）％和空白对照组的（4.00±0.79）％,差异均有统计学意义（P＜0.05）;实验组VEGF蛋白的阳性表达率为21.2％,显著低于阴性对照组的81.4％和空白对照组的85.7％,差异均有统计学意义（P＜0.05）;实验组p38蛋白的相对表达量为0.40±0.01,显著高于阴性对照组的0.22±0.01和空白对照组的0.20±0.01,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 TAT-OSBP-MKK6（E）能显著抑制人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的生长、侵袭及转移。     

紫杉醇治疗卵巢癌裸鼠移植瘤过程中WT1的表达及意义

研究紫杉醇治疗卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤过程中WT1基因的表达和意义。方法:建立卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤模型,随机进行紫杉醇化疗（紫杉醇组）及生理盐水（对照组）处理,测量移植瘤体积并对移植瘤标本进行苏木精-伊红染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期改变、免疫组化检测Bcl-2及WT1蛋白表达、RT-PCR检测WT1 mRNA的表达。结果:紫杉醇化疗对裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用,与对照组相比,紫杉醇组细胞凋亡率增加（P<0.05）;同时,移植瘤组织中Bcl-2、WT1蛋白及WT1 mRNA的表达均显著下降（P<0.05）。结论:WT1基因在卵巢癌凋亡过程中可能发挥着一定的作用,其作用机制或许与抗凋亡基因Bcl-2有关。      

通路抑制剂LY294002对子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察磷脂酰肌醇3激酶通路抑制剂LY294002对子宫内膜癌裸鼠移植瘤细胞增殖、凋亡及p-AKT表达的影响.方法:体外培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞,12只裸鼠皮下接种Ishikawa细胞后建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,随机分为2组,每组6只,分别给予腹腔注射生理盐水和LY294002干预,观察2组移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算移植瘤体积、抑瘤率等,观察药物对移植瘤的抑制作用,移植瘤组织标本进行HE染色镜下观察移植瘤的坏死程度、范围及细胞凋亡情况,并用免疫组织化学方法检测移植瘤组织内p-AKT的表达.结果:1)用药组裸鼠移植瘤体积增长相对缓慢(2 027.30±251.16)mm3,对照组肿瘤体积增长明显(3 110.60±599.66)mm3,差异有统计学意义(t=4.082,P=0.005),且抑瘤率为(32.49±16.39)%.2)HE染色见用药组较对照组移植瘤细胞凋亡及坏死面积显著增加;免疫组化结果显示用药组p-AKT的表达低于对照组(χ2=6.133,P<0.05).结论:PI3K通路抑制剂LY294002能够抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长,促进其凋亡.     

Nucleostemin基因特异性短发夹状干扰RNA在裸鼠移植瘤模型体内的抗白血病作用

目的探讨核干细胞因子（NS）特异性短发夹状干扰RNA（NS-shRNA）在裸鼠移植瘤模型体内的抗白血病作用。方法对数生长期HL-60细胞接种于裸鼠皮下使其致瘤并洗脱,体外传至第5代再次接种裸鼠,Transwell法验证HL-60细胞体外侵袭力,建立高致瘤性HL-60白血病细胞异种移植瘤裸鼠模型。腹腔注射体外合成的NS-shRNA脂质包裹体,观察治疗前后瘤体体积、重量的变化,组织切片、HE染色观察肿瘤细胞学改变,免疫组织化学检测瘤体细胞内NS蛋白含量,TdT介导的dUTP缺口末端标记技术（Tunel）检测细胞凋亡情况。结果制备的高致瘤性HL-60细胞使30只裸鼠均形成异种移植瘤,成瘤率为100%,瘤体大小均一。腹腔注射NS-shRNA脂质包裹体13天后,治疗组裸鼠移植瘤体积增长率为207.1%,阴性和空白对照组分别为497.1%和5696%。治疗组瘤体重量为（1.18±0.27）g,阴性和空白对照组为（2.04±0.73）g和（2.35±0.41）g。切片观察治疗组有大量斑片状组织结构破坏,并出现“凋亡特征”样细胞改变。免疫组织化学检测治疗组移植瘤细胞NS蛋白阳性率和积分值分别为（71.59±1.80）%和（110.26±13.46）,阴性对照组为（90.72±1.47）%和（195.11±9.71）,空白对照组为（97.33±1.76）%和（220.93±16.54）,与阴性和空白对照组相比,NS蛋白表达抑制率分别为435%和501%。Tunel法检测治疗组移植瘤内出现较多凋亡细胞。结论NS-shRNA在裸鼠移植瘤模型体内具有抗白血病作用,其作用机制之一可能是通过下调NS表达诱发白血病细胞凋亡增加。     

白桦脂酸对人宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用及机制

目的 探讨白桦脂酸（BA）对人宫颈癌HeLa细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其机制。方法 将4×10⁶个HeLa细胞接种于裸鼠右肩背部皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,24只荷瘤裸鼠随机分为BA高剂量（80mg／kg）、中剂量（40mg／kg）、低剂量（20mg／kg）组及空白对照组（含溶剂）,每组6只,隔日腹腔注射连续给药21d,停药24 h后处死裸鼠,测量裸鼠体重、移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察移植瘤组织形态学变化;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数;免疫组化法检测瘤组织内caspase-3、CytoC蛋白表达。结果 裸鼠处死后,BA处理组的移植瘤体积均明显小于空白对照组（P＜0.01）,其中高、中、低剂量组抑瘤率分别为56.2％、40.4％和24.6％ （P＜0.01）;HE染色法显示BA处理组小鼠的移植瘤组织出现明显凋亡及坏死改变;TUNEL检测对照组和BA低、中、高剂量组的凋亡指数分别为（8.36±2.78）％、（20.98±3.01）％、（28.74±4.77）％和（39.34±6.15）％（P＜0.05）;免疫组化法示BA处理组的肿瘤组织caspase-3、CytoC蛋白表达水平较空白对照组明显升高（P＜0.01）。结论 BA对人宫颈癌HeLa细胞移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与上调caspase-3、CytoC蛋白的表达及诱导细胞凋亡有关。     

放射性125I粒子联合GDC-0941抑制卵巢透明细胞癌生长、提高机体免疫力的实验研究

目的:探究放射性125I粒子联合Pictilisib（GDC-0941）对卵巢透明细胞癌的杀伤及抗肿瘤免疫效应的影响。方法:将人卵巢透明细胞癌细胞株ES-2分为对照组、125I粒子组（细胞接受125I粒子照射处理）、GDC-0941组（1 μmol/L GDC-0941培养细胞24 h ）及125I+GDC-0941组（细胞接受125I粒子照射处理,并以1 μmol/L GDC-0941培养24 h）,按照分组进行处理后,MTT法测定细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态;皮下接种ES-2建立卵巢透明细胞癌裸鼠移植瘤模型,并随机分为对照组、125I粒子组（将125I粒子植入肿瘤组织中心）、GDC-0941组（灌胃125 mg/kg的GDC-0941）及125I+GDC-0941组（将125I粒子植入肿瘤组织中心并灌胃125 mg/kg的GDC-0941）,给药开始后,每隔2 d测量并计算肿瘤体积,21 d后处死裸鼠并取其肿瘤组织,电子天平称重,HE染色观察肿瘤组织内细胞生长情况,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内凋亡蛋白Cleaved-caspase-3与增殖标记物Ki-67的表达,流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群。结果:相较于125I粒子照射和GDC-0941单独处理,125I与GDC-0941联合作用下,细胞存活率下降（P<0.05）,细胞凋亡率增加（P<0.05）,且细胞核浓缩明显,浓染颗粒较多,碎裂现象严重。与125I粒子植入和GDC-0941灌胃的两组裸鼠比较,125I粒子植入联合GDC-0941灌胃的裸鼠,肿瘤生长较为缓慢,肿瘤块变小、质量也减小（P<0.05）,肿瘤组织内细胞排列稀疏,Cleaved-caspase-3阳性表达率升高（P<0.05）,Ki-67阳性表达率降低（P<0.05）,此外,外周血中CD3+CD8+T细胞比例增加。结论:放射性125I粒子联合GDC-0941作用能够显著提高对卵巢透明细胞癌的杀伤作用,且抑制肿瘤生长并改善移植瘤裸鼠的抗肿瘤免疫功能,两者联合作用效果要优于单独作用。     

The combination of the tyrosine kinase receptor inhibitor SU6668 with paclitaxel affects ascites formation and tumor spread in ovarian carcinoma xenografts growing orthotopically.

PURPOSE: The purpose of this study was to investigate the antitumor activity of SU6668, tyrosine kinase inhibitor of vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2), fibroblast growth factor receptor 1 (FGFR1), and platelet-derived growth factor receptor beta (PDGFRbeta), as single-agent therapy and in combination with paclitaxel on ovarian carcinoma xenograft models transplanted in the peritoneal cavity of nude mice. EXPERIMENTAL DESIGN: HOC22 and HOC79 ascites-producing human ovarian carcinoma xenografts were transplanted i.p. into nude mice. SU6668 was given p.o. (200 mg/kg, daily) as a single agent or in combination with paclitaxel i.v. (6 mg/kg/dose every other day or 20 mg/kg/dose weekly). Tumor burden was evaluated at the end of the treatment period as ascites volume and tumor cells, VEGF, FGF-2, and PDGF levels in ascites, and involvement of the organ of the peritoneal cavity. Response was evaluated as percentage increment of life span (%ILS). RESULTS: SU6668 affected ascites formation and tumor burden in the peritoneal cavity of nude mice bearing HOC22 and HOC79 xenografts. Decreased levels of VEGF and PDGF in ascites paralleled this effect. The overall survival of the mice bearing HOC xenograft (HOC79 less response than HOC22) was significantly increased by the treatment with SU6668. The magnitude of the effects depended on the length of treatment and tumor burden at the beginning of treatment. The combination of SU6668 with paclitaxel significantly prolonged the survival of mice bearing HOC79, compared with single therapies. SU6668-based combination therapy was more effective with paclitaxel given at the optimal dose and schedule (20 mg/kg every 7 days for 3 doses) than at the same total dose but split (6 mg/kg every 2 days for 10 doses). However, a similar outcome was observed when giving high-dose paclitaxel (20 mg/kg every 7 days for 3 doses) in monotherapy or split low-dose paclitaxel (6 mg/kg every 2 days for 10 doses) but in combination with SU6668. The addition of paclitaxel, by either schedule, to SU6668 treatment inhibited tumor spread in the peritoneal organs (omentum, pancreas, and diaphragm) even at low doses of paclitaxel. A greater effect was observed with prolonged treatments. CONCLUSIONS: This study shows that SU6668 in combination with paclitaxel inhibits ovarian carcinoma progression in the peritoneal cavity, by blocking ascites formation and tumor spread. Because an adequate schedule and dose of the combination might be as effective as conventional chemotherapy, this should be considered as a therapeutic alternative. These findings provide a rationale for the clinical evaluation of combination therapies affecting multiple biological targets in this tumor type.     

沉默Nanog联合SNX-2112对人食管癌干细胞样细胞的抑制作用

目的:通过沉默Nanog探讨其对Hsp90抑制剂SNX-2112诱导食管癌干细胞样细胞的裸鼠移植瘤抑制效果。方法:CCK-8分析细胞受到药物作用活性，Ki-67检测细胞增殖情况，Western blotting检测凋亡蛋白Bcl2、Bax、Bcl-xL表达情况。建立BALB/c裸鼠移植瘤模型，裸鼠分为四组，包括DMSO组、shNanog组、SNX-2112组、shNanog与SNX-2112联合用药组，每组3只。隔天给药，总共给药7次，脱颈处死小鼠，测量小鼠体重，瘤组织经HE染色，免疫组化分析Caspase3的表达情况与Hsp90客户蛋白pErk表达情况。结果:联合用药组细胞活性显著受到抑制（P<0.05），Ki-67实验显示联合用药组细胞增殖受到抑制（P<0.05），Bcl2与Bcl-xL蛋白表达下调（P<0.05），Bax表达水平上调（P<0.05）。联合用药组小鼠瘤重明显低于SNX-2112组以及shNanog组（P<0.05），HE染色结果显示沉默Nanog与SNX-2112联合用药显著性诱导肿瘤细胞凋亡，免疫组化研究显示Caspase3在两者联合用药组表达水平较高（P<0.05），Hsp90客户蛋白pErk表达有下调的趋势（P<0.05）。结论:沉默Nanog有助于提高SNX-2112诱导食管癌干细胞样细胞的裸鼠移植瘤细胞凋亡作用。     

JNJ-26481585对人肺腺癌培美曲塞耐药裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制探讨

目的:探讨JNJ-26481585对人肺腺癌培美曲塞耐药裸鼠移植瘤的抑制作用及其抗癌机制。方法:构建人肺腺癌A549/培美曲塞耐药细胞(A549/PEM)的移植瘤裸鼠模型,随机分为模型组、培美曲塞组、JNJ组、联合组(培美曲塞+JNJ),第28天治疗观察结束时处死裸鼠,剥离肿瘤组织标本待测。测定4组裸鼠肿瘤体积与体质量,计算抑瘤率,观察各治疗组药物对荷瘤裸鼠的毒副反应,TUNEL方法检测4组移植瘤细胞凋亡情况的差异,qRT-PCR检测4组移植瘤细胞FAM96A、Bax、Bcl-2基因mRNA表达水平差异,Western blot检测4组移植瘤细胞FAM96A、Bax、Bcl-2蛋白表达的差异。结果:联合组的肿瘤体积、体质量低于JNJ组,JNJ组的肿瘤体积、体质量低于培美曲塞组,联合组的抑瘤率高于JNJ组,JNJ组抑瘤率高于培美曲塞组(均P<0.05)。联合组的细胞凋亡率高于JNJ组,JNJ组细胞凋亡率高于培美曲塞组(均P<0.05)。联合组肿瘤细胞的FAM96A、Bax表达水平高于JNJ组,JNJ组FAM96A、Bax表达水平高于培美曲塞组,联合组Bcl-2表达水平低于JN...     

α-奈黄酮对人类卵巢癌紫杉醇耐药细胞裸鼠移植瘤CYP1B1基因表达的影响

目的研究黄酮类化合物α-奈黄酮（α-NF）对人类卵巢癌耐药细胞株A2780TS裸鼠移植瘤CYP1B1基因的影响。方法采用A2780TS细胞移植成功的24只裸鼠分为对照组、ANF组、紫杉醇组及联合用药组（α-NF＋紫杉醇）。RT—PCR及Western blotting方法测定CYP1B1 mRNA及蛋白表达水平。结果CYP1B1 mRNA表达水平α-NF组及联合用药组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）,但CYP1B1蛋白表达水平α-NF组及联合用药组较对照组明显降低（P〈0．01）。结论α-NF在mRNA水平对CYP1B1基因无调节作用,在蛋白水平可下调A2780TS裸鼠移植瘤细胞CYP1B1的表达,发挥逆转A2780TS细胞紫杉醇耐药的作用。     

沉默UHRF1对人食管癌细胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用及其机制探讨

目的:探讨沉默食管癌细胞泛素样含PHD和环指域1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,UHRF1)基因对裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及可能机制。方法:将 20只雌性裸鼠随机分为 4组:空载组(NC)、空载+照射组(NC+IR)、沉默UHRF1组(shUHRF1)、沉默UHRF1+照射组(shUHRF1+IR),每组5只,于裸鼠皮下接种Eca109食管癌细胞,构建裸鼠移植瘤模型。成瘤22天(肿瘤直径8 mm左右)开始给予放射线照射,1次2 Gy,共5次,每3 d测量1次移植瘤的最大径(a)和最短径(b),计算肿瘤体积(ab2/2),2周后处死裸鼠称量瘤体质量;采用TUNEL法检测各组移植瘤组织中细胞凋亡情况;Western blot检测各组移植瘤组织中UHRF1蛋白的表达情况;免疫组化方法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白的表达。结果:shUHRF1组、NC+IR 组以及shUHRF1+IR组中肿瘤体积的增加率均小于NC组(P＜0.05),其中shUHRF1+IR组较shUHRF1组、NC+IR组更能抑制移植瘤的生长;shUHRF1组、NC+IR组、shUHRF1+IR组UHRF1蛋白的表达均较NC组下降,其中shUHRF+IR组 UHRF1蛋白表达量下降水平高于其余两组(P＜0.05);shUHRF1组、NC+IR组、shUHRF1+IR 组肿瘤组织内均可观察到肿瘤细胞的凋亡,其中shUHRF1+IR 组肿瘤细胞凋亡率明显高于其余两组（P＜0.05）;与NC组相比,shUHRF1组、NC+IR组、shUHRF1+IR 组PTEN蛋白表达水平上调,p-AKT、p-mTOR的蛋白表达下降,其中shUHRF1+IR 组PTEN提高水平,p-AKT、p-mTOR的下降水平明显高于shUHRF1组及NC+IR组(P＜0.05)。结论:沉默UHRF1基因可以增加人食管癌细胞裸鼠移植瘤的放射敏感性,该作用可能与促进肿瘤细胞凋亡和抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路活性有关。     

毛萼乙素通过Wnt/β-catenin通路抑制结直肠癌细胞增殖的机制探讨

目的:探讨毛萼乙素（Eriocalyxin B,EriB）通过Wnt/β-catenin通路抑制结直肠癌（colorectal cancer,CRC）细胞增殖的机制。方法:CCK-8、软琼脂克隆形成实验检测EriB对结直肠癌细胞增殖活力的影响,流式细胞术检测EriB对结直肠癌细胞周期和凋亡的影响,无血清悬浮培养实验检测EriB对结直肠癌细胞干性的影响,Western blot 检测周期、凋亡以及分子机制相关蛋白的表达变化,裸鼠皮下瘤实验体内检测EriB对结肠癌细胞生长增殖的影响,免疫组织化学染色检测小鼠皮下瘤组织Ki67的表达,SynergyFinder用于分析EriB对5-FU抗结直肠癌的协同作用。结果:与对照组相比,EriB处理显著抑制了结直肠癌细胞的存活（P＜0.05或P＜0.001）,抑制干细胞球体数量（P＜0.001）。流式细胞术检测结果表明,与对照组相比,EriB处理组S期和G2期细胞百分比增加（P＜0.001）,细胞凋亡增加（P＜0.001）。Western blot结果显示,EriB处理细胞后,干性相关分子CD44、Sox2、Klf4表达下调,细胞周期相关蛋白CyclinA、Cdk2表达下调,凋亡相关蛋白Cl-PARP、Cl-caspase-3表达上调,Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、TCF4、CyclinD1、c-myc表达下调。EriB与5-FU联合应用,经SynergyFinder分析,ZIP synergy得分大于＋10,有协同作用。裸鼠异种移植瘤模型结果表明,与对照组相比,EriB处理显著抑制肿瘤生长,并减小裸鼠皮下异种移植瘤的体积（P＜0.05）。免疫组织化学分析显示,EriB处理组显著降低了肿瘤组织中Ki67的表达。结论:EriB可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制结直肠癌细胞增殖。     

基于ROS/HIF-1通路探讨白花蛇舌草多糖对鼻咽癌裸小鼠肿瘤的抑制作用及机制

目的:基于活性氧（ROS）/缺氧诱导因子-1（HIF-1）通路探讨白花蛇舌草多糖对鼻咽癌裸小鼠肿瘤的抑制作用及其可能作用机制。方法:56只BALB/c裸小鼠于右侧腋下接种CNE-2细胞悬液诱导鼻咽癌成瘤,成瘤后的裸小鼠随机分为:模型组、顺铂组（DDP,5 mg/kg）、白花蛇舌草多糖低剂量组（50 mg/kg）、白花蛇舌草多糖中剂量组（100 mg/kg）、白花蛇舌草多糖高剂量组（200 mg/kg）、阴性对照组（NC-siRNA）、si-HIF-1α组、si-HIF-1α+白花蛇舌草多糖组,每组6只,剩余6只裸小鼠作为空白组。各组按相应剂量分别腹腔注射给药,连续14天。测定裸小鼠瘤重及肿瘤体积［苏木素-伊红（HE）染色观察肿瘤组织病理学变化［流式细胞术检测肿瘤组织Treg细胞数量［免疫组化染色检测肿瘤组织Foxp3表达［荧光TUNEL染色检测肿瘤组织细胞凋亡［酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肿瘤组织中ROS含量［实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测肿瘤组织HIF-1α、GLUT1、HK2 mRNA及蛋白表达。结果:与模型组比较,白花蛇舌草多糖高剂量组可明显降低肿瘤重量,降低Foxp3、HIF-1α、GLUT1、HK2表达,明显缩小瘤体积,降低Treg细胞数量,明显增加细胞凋亡及ROS含量（P＜0.01）。与si-HIF-1α组比较,si-HIF-1α+白花蛇舌草多糖组HIF-1α、GLUT1、HK2表达明显降低（P＜0.05）。与模型组比较,si-HIF-1α+白花蛇舌草多糖组ROS含量明显升高,瘤重及肿瘤体积明显减小（P＜0.05）。结论:白花蛇舌草多糖对鼻咽癌裸小鼠肿瘤具有抑制作用,其作用机制可能与降低HIF-1α、GLUT1、HK2表达有关。