转基因CTL的构建及其生物学特性的研究

目的：构建TNF—α基因转染的CTL，并对其生物学特性进行研究。方法：用重组逆转录病毒载体介导将TNF—α基因导入CTL，构建转基因CTL。检测其增殖能力，TNF—α分泌量、细胞表型，观察其对BEL7404的体内、外抗肿瘤活性。结果：转基因CTL的形态、增殖活性及细胞表型与CTL相似。但具有高效表达TNF—α的能力，72h表达量为410pg／mL。转基因CTL对BEL7404具有较高的体外杀伤作用，其杀伤活性与作用时间及效靶细胞比正向相关。转基因CTL对荷瘤裸鼠过继免疫后，移植瘤的生成延迟、生长减慢，成瘤率降低。结论：转基因CTL的构建为肿瘤过继免疫治疗提供新型的效应细胞，具有进一步研究的价值。     

不同浓度IL-2对体外诱导肽特异性细胞毒性T淋巴细胞培养体系的影响

背景与目的：细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)介导的特异性细胞免疫在抗肿瘤免疫过程中发挥着主要作用。该研究探讨不同浓度IL-2(50、200和1000 U/mL)对体外诱导表位肽特异性CTL培养体系培养的细胞亚群比例和功能的影响,以及高剂量IL-2是否会诱导该体系中的调节性T细胞(regulatory cell,Treg)的富集。方法：选取HLA-A2超型的肿瘤患者和健康供者各10例,取外周血分离外周血单核细胞,使用环氧合酶-2(Cox-2)来源的CTL表位肽P321(ILIGETIKI)与不同浓度IL-2体外诱导肽特异性CTL。运用流式细胞仪检测细胞的增殖能力、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞亚群的比例、Treg细胞亚群的比例,以及CD8+T淋巴细胞分泌穿孔素(perforin)、颗粒酶B(granzyme-B)、干扰素IFN-γ的能力。使用Elispot实验检测实验组细胞分泌IFN-γ的能力。结果：高浓度的IL-2有利于细胞的增殖。肿瘤患者组的CD4+T淋巴细胞比例高于健康供者组,而CD8+T淋巴细胞比例较健康供者组低;不同浓度IL-2对CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞和Treg细胞亚群比例以及CD8+T淋巴细胞分泌穿孔素、颗粒酶B、IFN-γ的能力没有影响。随着IL-2浓度的增高,Elispot实验出现的阳性斑点数越多。结论：不同浓度IL-2条件对体外诱导表位肽特异性CTL培养体系培养出的细胞亚群比例和功能没有影响,在50~1000 U/mL IL-2浓度范围内,高剂量的IL-2不会诱导该体系中的Treg的富集。但高浓度的IL-2可以提高细胞的增殖能力,并且促进细胞分泌IFN-γ,而高浓度的IL-2可以使培养体系中存在的NK细胞或NKT细胞能够非特异性产生IFN-γ,从而对Elispot实验产生干扰。因此,在体外诱导肽特异性CTL时选用50 U/mL的IL-2浓度可以很好地维持T细胞的增殖和存活,并且最大程度地降低对Elispot实验的干扰。     

负载HER-2/neu多肽的树突状细胞激发特异性CTL反应

目的:探讨以HER-2/neu为靶抗原、树突状细胞(dendritic cell,DC)为抗原载体激发特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)反应的能力及研制治疗型乳腺癌疫苗的可行性。方法:采集17例HLA-A201+HER-2/neu+乳腺癌患者外周血,分离单个核细胞与外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL),并诱导为成熟DC(mature dendriticcell,mDC);人工合成HER-2/neu多肽[E75(KIFGSLAFL)和GP2(IISAVVGIL)2条]负载mDC后体外反复致敏PBL(3次,每周1次),检测其激发HER-2/neu特异性CTL的能力与CTL的杀伤活性。同时于患者腹股沟淋巴结富集区皮内注射负载HER-2/neu多肽的DC,每周1次,共接种4次,检测接种前后患者外周血细胞因子和特异性的CTL水平变化,并进行DTH试验。结果:患者外周PBL经过负载HER-2/neu多肽DC共3轮致敏后,HER-2/neu多肽特异的CTL平均比例比对照组(未负载HER-2/neu多肽DC组)明显增高[(5.41±1.44)%vs(0.41±0.12)%,P<0.05];致敏后PBL对负载HER-2/neu多肽T2靶细胞的杀伤率明显高于对照组(未负载DC诱导的CTL)[效靶比为30∶1时,(35.5±4.7)%vs(11.2±1.4)%,P<0.05]。接种负载HER-2/neu多肽的DC后,患者体内血清中细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ水平较治疗前显著升高[(409.09±89.39)vs(148.79±28.32)ng/ml,(56.23±14.08)vs(24.49±56.23)ng/ml,(146.57±25.97)vs(67.77±39.35)ng/ml;均P<0.05],TNF-α和IL-10水平较治疗前变化不大(P>0.05)。患者DTH试验阳性率为47%(8/17),DTH阳性患者外周血中特异性CTL比例明显上升。结论:负载HER-2/neu多肽的DC体内、外均具有激发特异性CTL反应能力,可诱导Th1型细胞因子的分泌,未发生临床不良反应。     

转基因CTL的构建及其生物学特性的研究

目的 :构建TNF α基因转染的CTL ,并对其生物学特性进行研究。方法 :用重组逆转录病毒载体介导将TNF α基因导入CTL ,构建转基因CTL。检测其增殖能力 ,TNF α分泌量、细胞表型 ,观察其对BEL74 0 4的体内、外抗肿瘤活性。结果 :转基因CTL的形态、增殖活性及细胞表型与CTL相似。但具有高效表达TNF α的能力 ,72h表达量为 4 10pg mL。转基因CTL对BEL74 0 4具有较高的体外杀伤作用 ,其杀伤活性与作用时间及效靶细胞比正向相关。转基因CTL对荷瘤裸鼠过继免疫后 ,移植瘤的生成延迟、生长减慢 ,成瘤率降低。结论 :转基因CTL的构建为肿瘤过继免疫治疗提供新型的效应细胞 ,具有进一步研究的价值     

干扰肿瘤微环境对细胞毒性T淋巴细胞瘤体内归巢和杀伤活性的影响

目的 探讨应用低剂量环磷酰胺（cyclophosphamide, CYC）干扰荷瘤小鼠体内微环境对改善过继回输的细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte, CTL）瘤体内归巢和杀伤活性的作用。方法 建立C57BL/6荷瘤小鼠模型并分为对照组、CYC注入（CYCI）组、0.9%NaCl溶液注入（NSI）+CTL组和CYCI+CTL组,每组40只,分别给CYCI组、CYCI+CTL组每只小鼠腹腔注入CYC （20mg/kg）,NSI+CTL组小鼠注入等量0.9%NaCl溶液。检测注射前后不同时间小鼠瘤体内调节性T细胞（Treg）、白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）水平变化。于注射后第4天回输CFSE-CTL,每只0.2 ml,含5×l0⁶个细胞。流式检测对比NSI+CTL组和CYCI+CTL组瘤体内CFSE-CTL比例。结果 NSI+CTL组小鼠Treg、IL-10、TGF-β水平随着瘤体增长而逐渐增高;CYCI+CTL组比NSI+CTL组回输的CFSE-CTL在肿瘤内归巢明显增加和持久（P<0.05）。各组肿瘤体积除对照组和CYCI组外,其余各组间差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 提前应用低剂量CYC干预荷瘤小鼠体内微环境,可降低瘤体内Treg、IL-10和TGF-β水平,使过继回输的CTL在肿瘤中的归巢聚集明显增强,杀伤肿瘤效率提高。     

应用IL-2基因转染的小鼠肿瘤特异性T淋巴细胞进行过继免疫治疗的研究

尽管过继免疫基因疗法是一种非常有希望的肿瘤基因治疗方法，但开展的研究并不多。因为遇到的一个主要困难是很难有效地向T淋巴细胞内进行基因转染。本研究应用新近发展起来的重组腺病毒载体，成功地将IL-2基因转染至肿瘤特异性CTL中，并证明IL-2基因转染的并能分泌IL-2的CTL能有效提高体内抗肿瘤免疫功能。     

联合应用IL-2和IL-7对增强T细胞体外增殖及功能的作用

应用体外诱导扩增的抗原特异性T细胞治疗恶性肿瘤及某些病毒性疾病已成为一种有效的临床免疫治疗方法，这一方法常规需要用特异性抗原(灭活的肿瘤细胞或提纯抗原)以及抗原递呈细胞作周期性刺激诱导，并在含特定细胞因子，如IL-2的培养系统中扩增以获得具有足够治疗剂量的功能性T细胞。     

NY-ESO-1致敏树突状细胞诱导的CTL对肝癌细胞株的特异性杀伤作用

目的:探讨肿瘤睾丸抗原NY-ESO-1(New York-esophageal-1)致敏树突状细胞体外诱导特异性CTL对肝癌细胞株的杀伤作用.方法:重组质粒pGEX-ESO1经原核诱导表达并纯化GST-ESO1融合蛋白肽.重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和白细胞介素4(rhIL-4)诱导培养人外周血来源的树突状细胞(dendritic cells, DCs),经GST-ESO1融合蛋白肽致敏后诱导特异性CTL增殖.以此CTL为效应细胞,分别以NY-ESO-1阳性表达的肝癌细胞株HepG2和不表达NY-ESO-1的肝癌细胞株H2P为靶细胞,MTT法检测CTL对肝癌细胞株的杀伤作用.结果:重组质粒pGEX-ESO1经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达相对分子质量约36 000的GST-ESO1融合蛋白肽,纯化后的质量浓度为50 μg/ml;经rhGM-CSF和rhIL-4联合诱导成功培养人外周血DCs,其表型分子HLA-DR为91.4%、CD86为70.5%、CD83为71.2%、CD80为55.3%.NY-ESO-1致敏的DCs能明显诱导CTL增殖,此CTL对肝癌细胞株HepG2的杀伤率显著高于GST刺激组、未致敏DC组和无DC刺激组(均P<0.05),效靶比为50 ∶1时杀伤效应达到最高峰[(53.23±3.78)%,P<0.01];相同条件下CTL对H2P细胞无特异性杀伤作用.结论: NY-ESO-1抗原致敏的DCs在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对NY-ESO-1阳性肝癌细胞株具有特异性杀伤效应,该方法为肝癌免疫治疗提供了一条新思路.     

EBV-LMP2A肽诱导的特异性CTL对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用

目的:探讨HLA限制性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)表位肽EBV-潜伏膜蛋白2A (EBV-latent membrane protein 2A,EBV-LMP2A)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用.方法:选用南京大学医学院附属肿瘤医院肿瘤中心HLA-A2阳性胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)、人胃腺癌细胞株(AGS)和人EBV阳性胃腺癌细胞株(AGS-EBV),通过改良的体外细胞培养技术用HLA-A2限制性的EBV-LMP2A抗原肽从人PBMC中诱导扩增出特异性CTL,采用四聚体技术和流式细胞术检测抗原肽诱导产生的特异性CTL的含量,通过FITC-PI标记流式术检测EBV-CTL对EBV阳性和EBV阴性的胃癌细胞的体外杀伤作用.结果:经改良的细胞培养技术和抗原肽双重刺激后EBV-LMP2A抗原肽可以诱导产生出高比例的抗原特异性CTL[EBV-LMP2A-356特异性T细胞占CD8+T细胞的(47.1±5.2)％];EBV-CTL对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用较EBV阴性的胃癌细胞明显增强[(45.1±9.3)％s(19.4±2.5)％,P＜0.05].结论:通过改良的细胞培养技术使用EBV-LMP2A抗原肽能诱导产生高比例的EBV特异性CTL,其对EBV阳性胃癌细胞有较强的特异性杀伤作用.     

LAK细胞和rIL-2治疗小鼠脑胶质瘤及IL-7对LAK细胞活性的调节作用

作者在应用LAK细胞和IL—2过继治疗颅内接种203—glioma脑胶质瘤的C_(57)BL/6小鼠的研究中,对LAK细胞和IL—2的输入剂量和途径等进行了系统分析。表明LAK细胞即可延长带瘤鼠的生存时间,但要求较高的LAK细胞浓度;颅内输入LAK细胞的疗效明显高于静脉输入;输入入IL—2能明显增加LAK细胞的疗效;颅内输入IL—2对LAK细胞疗效的增强作用明显优于静脉输入。在IF—7对LAK细胞活性调节作用的研究中,发现IF—7能诱导LAK细胞产生,并与IL—2有协同作用;IL—7诱导的LAK细胞活性不能被抗IL—2抗体所抑制。认为,脑胶质瘤术后颅内应用LAK细胞和IL—2是一种有前途的免疫疗法。IF—7有增强LAK细胞活性及降低IL—2副作用的功能。     

IL-15对树突状细胞激活的T淋巴细胞免疫反应的作用观察

  目的  观察IL-15和IL-2对树突状细胞疫苗(dendritic cells, DC)激活的淋巴细胞免疫反应的作用。  方法  取健康小鼠的脾淋巴细胞, 在体外采用肿瘤抗原负载的DC疫苗与脾淋巴细胞混合后, 分别加入IL-15或IL-2培养7d。采用流式细胞术检测淋巴细胞免疫表型的变化; 使用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测分泌干扰素(interferon, IFN)-γ的细胞数量; 利用51Cr释放法检测淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。  结果  IL-15联合DC疫苗增强了T细胞反应, 包括淋巴细胞免疫表型和功能的改变。  结论  与IL-2相比, IL-15能更好的增强DC疫苗诱发的免疫反应, 为IL-15与DC疫苗的联合应用提供了一定的依据。      

Establishment of interleukin 2 dependent cytotoxic T lymphocyte cell line specific for autologous brain tumor and its intracranial administration for therapy of the tumor

Autologous brain tumor specific CTLs were induced from the patient's PBL by a mixed lymphocyte-tumor culture, and were maintained for more than 2 months in a medium containing exogenous ILr2. The autologous T cell line containing specific CTL was administered into the tumor-bed for the treatment of malignant glioma. In 2 cases out of 5, tumors regressed more than 50% in diameter. One of these patients is still alive now with full of his social activities, and it is 104 weeks after the initiation of the immunotherapy. Autologous T cell lines were safely administered in all cases without any complications nor toxicities.     

Clinical efficacy of adoptive immunotherapy by IL-4 activated tumor-infiltrating lymphocytes in patients with advanced cancer

Background Adoptive immunotherapy using tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) has been used to treat malignant melanoma and renal cell carcinoma, although the clinical efficacy of this method has not yet been proved. To improve clinical efficacy, it is important to induce sufficient amounts of tumor-infiltrating lymphocytes to fight the tumor. In this study, we investigated the clinical efficacy of adoptive immunotherapy using interleukin (IL)-2 activated tumor-infiltrating lymphocytes combined with IL-4. Methods Tumor-infiltrating lymphocytes from patients with non-malignant melanoma and non-renal cell carcinoma were cultured with IL-2 monotherapy (n=10) and combination therapy with IL-4+IL-2 (n=20). Comparing the 2 groups, we investigated the clinical benefits of adoptive immunotherapy, considering safety, clinical efficacy, survival periods, and quality of life. Results By using the IL-4+IL-2 combination, we successfully transferred 6.5 times more activated tumor-infiltrating lymphocytes, as compared to cell counts using IL-2 monotherapy. The response rate achieved was 58.8% (2 complete and 8 partial responses) without any side effects in the IL-4+IL-2 group. Furthermore, the IL-4+IL-2 group had longer survival periods and improved quality of life, compared to the IL-2 monotherapy group. Conclusion The IL-4+IL-2 combination improved the clinical efficacy of adoptive immunotherapy, and improved quality of life in patients with non-malignant melanoma and non-renal cell carcinoma.     

Ex vivo expansion of tumor specific lymphocytes with IL-15 and IL-21 for adoptive immunotherapy in melanoma

Although T Central Memory cells have been described as the most effective T-cell subtype against tumor growth, little is known about the requirements needed for their optimal ex vivo generation. Hence, our goal is to establish a protocol that will lead to consistent ex vivo generation of lymphocytes skewed toward a Central Memory phenotype. Antigen-specific T-cell lines were generated by ex vivo stimulation with Class-I and Class-II melanoma peptide pulsed Dendritic Cells in the presence of either IL-2 or IL-15 plus IL-21. Tumor specific lymphocytes of both Central Memory and effector characteristics were consistently generated from healthy donors and melanoma patients. IL15/IL21 cultures result in a cell population with a lower proportion of CD4⁺CD25^highFoxP3⁺ regulatory cells and higher number of CD8⁺ and CD56⁺ cells, and consequently render a higher yield of cells with a greater cytolytic activity and IFN-γ production against melanoma cell lines.     

小鼠红白血病细胞来源的树突状细胞对特异性CTL的体内外诱导作用

目的 探讨白细胞介素-12(IL-12)诱导小鼠红白血病细胞产生的树突状细胞,对白血病特异性CTL细胞的诱导作用,及体内免疫后对抗肿瘤免疫应答的诱导效果.方法:采用4/小时~(51)Cr释放法,检测CTL杀伤活性;观察小鼠红白血病细胞来源的树突状细胞体内免疫冶疗后对肿瘤的抑制作用,采用了HE染色和电镜等技术,分析肿瘤组织的病理学变化.结果:IL-12诱导FBL-3细胞产生的DC,在体外可诱导出FBL-3细胞特异性的CTL.采用IL-12诱导FBL-3细胞产生的DC免疫C57 BL/6小鼠.体内诱导出的CTL杀伤活性明显高于对照组.实验组小鼠能够有效的抵抗野生型FBL-3细胞的再攻击;肿瘤生长受到明显的抑制,组织学观察显示,肿瘤局部有较多炎性细胞浸润和细胞坏死;透射电镜可观察到典型的凋亡征象,结论:IL-12诱导小鼠FBL-3红白血病细胞产生的树突状细胞,在体内外可诱导出FBL-3细胞特异性的CTL,体内免疫后可增强抗肿瘤免疫应答,该结果为白血病的免疫治疗提供了新的途径.     

过继性免疫细胞输注联合免疫剥夺治疗去势抵抗性前列腺癌的疗效

目的：观察过继性免疫细胞输注联合免疫剥夺治疗去势抵抗性前列腺癌的临床效果。方法:收集贵州医科大学附属贵州省肿瘤医院2011—2018年35例去势抵抗性前列腺癌患者相关信息,根据不同治疗分为生物治疗组（18例）和非生物治疗组（17例）。非生物治疗组患者采用阿比特龙或多西他赛进行治疗;生物治疗组采用细胞毒T淋巴细胞（CTL）联合环磷酰胺（CTX）进行治疗,通过对比治疗前后两组患者的前列腺癌特异性抗原（PSA）变化情况、主观指标（骨痛、睡眠、体力等）改善情况及临床疗效,评价生物治疗组和非生物治疗组的疗效。结果（: 1）PSA水平：治疗后,两组患者的PSA水平都有降低,生物治疗组患者PSA水平显著降低（P<0.01）,且生物治疗组患者的PSA下降程度明显强于非生物治疗组（P<0.05）;（2）临床疗效：患者接受CTL治疗后的临床疗效较非生物治疗组有显著改善（P<0.01）;（3）主观指标：生物治疗组患者在治疗后骨痛、睡眠及体力得到明显改善,与非生物治疗组相比改善显著（P<0.01）;（4）生存期：患者接受生物治疗后中位生存期延长4个月,两组相比无统计学意义（P=0.3935）。结论:CTL联合CTX治疗去势抵抗性前列腺癌,可明显降低PSA并提高疗效和患者生存质量。     

In vivo expansion of LMP 1- and 2-specific T-cells in a patient who received donor-derived EBV-specific T-cells after allogeneic stem cell transplantation

Immunotherapy approaches with antigen-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) have provided safe and effective prophylaxis and treatment of Epstein-Barr virus (EBV)-associated lymphomas arising after bone marrow transplantation. EBV is also associated with other malignancies including ∼40% of cases of Hodgkin's disease, making this tumor another potential target for EBV-targeted immunotherapy. This study describes a patient with multiple relapsed EBV positive Hodgkin's Disease who received both autologous and allogeneic EBV CTL lines. After multiple chemotherapeutic and radiotherapy regimens including two autologous stem cell transplants, he received two doses of gene-marked autologous EBV-specific CTL which resulted in disease stabilization for 6 months. The gene-marked EBV-CTL persisted for 12 months in the peripheral blood after which he proceeded to unrelated donor stem cell transplant followed by immunotherapy with donor-derived EBV-specific CTL. Despite low levels of donor chimerism, the patient remains in complete remission 5 years post-allogeneic SCT. Comparison of the autologous and the donor-derived CTL lines showed that the donor line had specificity for two tumor-associated EBV antigens, latent membrane protein (LMP)1 and 2 compared to the autologous line, which only had specificity for LMP2 epitopes. Following infusion of the donor-derived CTL, functional analyses showed that T-cells reactive with both LMP1 and LMP2 epitopes expanded in the peripheral blood, suggesting that strategies to increase their frequency may result in a broader cytotoxic response against EBV+ Hodgkin tumors.     

Exercise-induced engagement of the IL-15/IL-15Rα axis promotes anti-tumor immunity in pancreatic cancer

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血清IL-9、IL-17及IL-23水平对多发性骨髓瘤患者肾损伤的诊断价值

目的:探讨血清白细胞介素-9（IL-9）、白细胞介素-17（IL-17）及白细胞介素-23（IL-23）水平对多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）患者肾损伤的诊断价值。方法:选取2015年01月至2019年12月我院收治的82例MM患者,依据国际分期系统（ISS）分为I期（n=16）、Ⅱ期（n=25）和Ⅲ期（n=41）,根据肾功能情况,将其分为肾损伤组（n=27）和无肾损伤组（n=55）。另选取同期55例正常者作为对照组。检测各组血清IL-9、IL-17及IL-23水平。应用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清IL-9、IL-17及IL-23水平诊断MM患者肾损伤的价值。采用Pearson相关分析MM患者血清IL-9、IL-17及IL-23水平之间的相关性。结果:MM组血清IL-9（66.72±18.50 vs 21.95±6.84,pg/mL）、IL-17（52.70±12.16 vs 24.36±5.73,pg/mL）及IL-23（81.60±22.75 vs 36.25±8.46,pg/mL）水平均明显高于对照组（P＜0.001）。随着ISS分期的增加,MM患者血清IL-9、IL-17及IL-23水平增加,Ⅲ期＞Ⅱ期＞Ⅰ期,差异有统计学意义（P＜0.001）。肾损伤组血清IL-9（93.60±24.65 vs 48.20±12.73,pg/mL）、IL-17（74.80±19.42 vs 35.26±8.50,pg/mL）及IL-23（116.48±40.25 vs 62.70±15.24,pg/mL）水平均明显高于无肾损伤组（P＜0.001）。ROC曲线分析显示,IL-9、IL-17及IL-23三项联合诊断MM患者发生肾损伤的曲线下面积（0.927,95%CI:0.865～0.983）最大,其灵敏度最高。相关分析显示,MM患者血清IL-9、IL-17及IL-23水平之间均呈正相关（P＜0.001）。结论:血清IL-9、IL-17、IL-23水平在MM中明显升高,且与MM患者的病情分期及肾损伤有关,三项联合诊断肾损伤的价值较高。     

PD-1/PD-L1抑制剂联合治疗在癌症免疫治疗中的研究进展

程序性死亡蛋白-1(programmed cell death-1,PD-1)是一种免疫检查点的负性调控因子,通过与其配体PD-L1/PD-L2结合,抑制T细胞的免疫功能,而PD-1抑制剂则可恢复免疫系统的抗肿瘤作用。较其他治疗手段而言,PD-1抑制剂有显著的临床疗效,然而其仍然存在不足,即目前仍有很大一部分癌症患者对PD-1抑制剂治疗是无效的。研究表明联合治疗可改善PD-1抑制剂单药治疗的有效率。联合治疗包括联合免疫检查点抑制剂、放疗、化疗、癌症疫苗和其他癌症治疗方法。FDA已批准了PD-1抑制剂联合CTLA-4阻断剂治疗,其抗肿瘤效率与肿瘤微环境以及免疫相关因子有关,但关于免疫系统,特别是T细胞对肿瘤阳性响应率的潜在作用机制研究甚少。本文将综述免疫检查点PD-1抑制剂的临床疗效以及其影响因素、作用机制以及PD-1抑制剂联合其他治疗的研究现状。