γδT 细胞亚群在慢性HCV 感染中的特征

目的:探讨γδT 细胞及其亚群γδ和γδT 细胞在慢性HCV 感染中的作用。方法:采用流式细胞术检测人外周血γδT 细胞及其亚群γδ和γδT 细胞比例变化。结果:慢性HCV 感染病人外周血中酌啄T 细胞及其亚群γδ和γδT细胞比例与健康对照者相比无显著差异。相关性分析显示HCV 感染患者γδT 细胞数目与肝脏损伤成正相关而与病毒滴度不相关。慢性HCV 感染病人γδT 细胞处于活化状态,CD107a 表达高于对照组。结论: γδT 细胞亚群参与慢性HCV 感染所致肝损伤。     

急性HIV 感染者γδT 细胞及其细胞亚群的表型分析

目的:分析急性HIV 感染者外周血γδT 细胞的表型,诠释γδT 细胞在急性HIV 感染中的作用。方法:流式细胞术检测γδT 细胞表面CD38、程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)、CD160、CD95 和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-死亡受体5(TRAIL-DR5)的表达。结果:与健康对照组相比,急性HIV 感染者Vδ1 T 细胞的比例显著增加,Vδ2 T 细胞的比例显著降低,但总γδT 细胞的比例无显著变化。CD38+ γδT 细胞、CD38+ Vδ1 T 细胞和CD38+ Vδ2 T 细胞的比例较健康对照显著增加。此外,PD-1+ γδT 细胞和DR5+ γδT 细胞的比例较健康对照组显著增加,而Vδ1、Vδ2 T 细胞亚群PD-1 和DR5 的表达与健康对照相比差异无显著性。但在急性HIV 感染者中,CD38+ Vδ1 T 细胞、CD160+ Vδ1 T 细胞、PD-1+ Vδ1 T 细胞、CD95+ Vδ1 T 细胞和DR5+ Vδ1 T 细胞的比例均较Vδ2 T 细胞显著增加。结论:急性HIV 感染者γδT 细胞,尤其是Vδ1 T 细胞表面活化、抑制和凋亡分子的表达显著增加,提示Vδ1 T 细胞在急性HIV 感染及疾病进展中发挥更重要的作用。     

鼠γδT 细胞亚群在不同组织器官的分布特性及在感染后的变化

目的:关注不同γδT 细胞亚群在各组织器官的分布特点及在鼠伤寒沙门氏菌肠道感染中的变化,为探讨γδT 细胞组织学分布的生理学意义和在感染性疾病中的作用提供依据和新的思路。方法:采用流式细胞术与PCR 技术检测胸腺、脾脏、淋巴结、肝脏、皮肤以及小肠上皮内淋巴细胞中γδT 细胞及其不同亚群的比例;通过PMA 与离子霉素体外刺激,流式细胞术检测不同组织酌啄T 细胞分泌细胞因子IFN鄄酌与IL-17a 的差异;通过灌胃建立鼠伤寒沙门氏菌肠道感染模型,流式细胞术检测肝脏与小肠上皮内淋巴细胞中不同酌啄T 细胞亚群比例的变化。结果: γδT 细胞富含于小肠上皮内、皮肤与肝脏中,而在胸腺、脾脏与淋巴结中比例较低。不同亚群在各组织器官中的分布存在较大差异,皮肤主要存在V 5+ γδT 细胞亚群,小肠中主要存在V 1+ 、V 4+与V 7+ γδT 细胞亚群。肝脏γδT 细胞主要分泌IL-17a,而小肠上皮内γδT 细胞主要分泌IFN。在鼠伤寒沙门氏菌肠道感染时,小肠上皮内酌啄T 细胞的比例明显升高,其中V酌1+ 酌啄T 细胞比例升高更为显著;肝脏总γδT细胞比例无显著变化,但V 1+ T 细胞比例降低,V酌4+ 酌啄T 细胞比例明显升高。结论: γδT 细胞富含于小肠、皮肤与肝脏中,且其不同亚群具有组织分布特异性。不同组织的酌啄T 细胞产生细胞因子的能力存在较大差异。鼠伤寒沙门氏菌感染时,小肠与肝脏γδT 细胞亚群的分布变化也存在较大差异。     

通过抑制STAT3磷酸化促进γδT细胞CCR5的表达

目的： 研究糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)促进γδT细胞趋化因子受体CCR5表达的分子机制。方法：用TWS119诱导从健康人外周血中分离培养获得γδT细胞48 h后,用流式细胞仪检测γδT细胞CCR5的表达;Western blot检测GAPDH和pSTAT3的表达。结果：培养10 d后的γδT细胞纯度达到85.79%±5.01%。TWS119浓度在0~8.0 μmol/L范围内能显著促进趋化因子受体CCR5的表达,且剂量依赖性抑制STAT3的磷酸化。同时,用STAT3磷酸化抑制剂Stattic (0.5 μmol/L)预处理γδT细胞也可以促进CCR5的表达,并能协同增强TWS119促进趋化因子受体CCR5的表达。结论： TWS119通过抑制STAT3磷酸化促进γδT细胞CCR5的表达。     

蛋白激酶C抑制剂对T细胞表达IL-2及IFN-γ的影响

目的:研究蛋白激酶C(PKC)抑制剂H7和棉酚对体外活化T细胞表达白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(INF-γ)的影响。方法:在莫能菌素(monensin)存在时,以佛波醇酯(PDB)+离子霉素(I)体外活化人外周血单个核细胞(PBMC),以流式细胞术胞内细胞因子检测法分析H7和棉酚对CD3⁺T细胞表达IL-2和IFN-γ水平的影响。结果:PDB+I处理PBMC4h后,表达IL-2和IFN-γ的CD3⁺T细胞百分率分别为16.64±2.04和25.81±3.53(x±s),而对照组二者的比率为1.06±0.22及3.12±0.77(P＜0.05)。棉酚(50μmol/L)可明显抑制IL-2及IFN-γ的表达,抑制后表达率分别为2.08±0.12及9.01±1.90。H7作用比棉酚强,50μmol/L的H7抑制后的IL-2及IFN-γ阳性T细胞比率分别为0.43±0.06和2.40±0.27。结论:PKC在CD3⁺T细胞表达IL-2及IFN-γ中发挥重要作用;PKC抑制剂H7及棉酚明显抑制IL-2及IFN-γ的表达,提示H7和棉酚可通过抑制PKC活性,对依赖于T细胞功能的特异性免疫应答有调节作用。     

IL-32γ对大鼠血管平滑肌细胞增殖与细胞周期的影响

目的: 观察白细胞介素-32γ(IL-32γ)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖与细胞周期的影响及机制。方法: 采用组织贴块法体外培养大鼠VSMCs并以IL-32γ处理。应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;免疫印迹方法检测cyclin D1和核内NF-κB p65蛋白含量;免疫细胞化学染色法检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达的变化。结果: 不同浓度(10~50 μg/L)的IL-32γ在24~48 h范围内,浓度和时间依赖性促进VSMCs增殖;50 μg/L的IL-32γ作用VSMCs 24 h后促进了细胞周期由G₁期向S期,进而G₂/M期转化,同时上调NF-κB p65、cyclin D1和PCNA蛋白的表达水平;应用NF-κB抑制剂PDTC能逆转上述效应。结论: IL-32γ能促进大鼠VSMCs增殖和加速细胞周期转化。上调NF-κB p65和cyclin D1的表达可能是其作用机制之一。     

产生IL-17的γδT细胞概述

IL-17是一类重要的促炎症因子,近年由于Th17细胞这种以产生IL-17为主的CD4+αβT亚群的发现而备受关注。然而大量研究发现γδT细胞也是IL-17的重要来源。在多种疾病的小鼠模型中,γδT细胞的某些亚群能通过早期产生大量IL-17,在感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等的发生发展中扮演重要角色。有趣的是,γδT细胞经历了异于Th17细胞的胸腺内发育发育过程,未经胸腺内抗原致敏的γδT细胞即能分化为产生IL-17的功能亚群。最近有研究证实人类的γδT细胞也能产生的IL-17。下面就产生IL-17的γδT细胞的特征,发育及生物学作用等方面作一简短综述。     

树突状细胞在银屑病中的作用研究进展

银屑病是一种由于免疫系统异常活化导致的慢性皮肤炎症,其发病机制仍未完全阐明。树突状细胞、巨噬细胞、Th17 细胞、γδT 细胞、3 型固有淋巴细胞等多种类型的免疫细胞在银屑病中发挥重要作用,而树突状细胞作为炎症和免疫应答的始动环节,在其中起到关键的调控作用。不同亚群的树突状细胞具有不同的功能,本文旨在总结树突状细胞及其不同的亚群在银屑病发生发展过程中发挥的作用及其机制的研究进展。     

IL-17+ γδT细胞

IL-17是一种重要的炎症介质,最近研究显示,除了Th17细胞,γδT细胞也能够产生IL-17,并且比αβT细胞产生得更为迅速.与Th17细胞一样,γδT细胞产生IL-17的能力受多种因素影响,并和某些与IL-17相关的疾病有着密切联系,这对相关疾病的致病机制有了新认识,也为这些疾病的治疗提供了新思路.现就近年来对γδTT细胞产生IL-17能力的研究,以及这群细胞和疾病的关系进行简要综述.     

转录因子 ROR-γt 与 Th17 介导的中性粒细胞性哮喘

目的：探讨ROR-γt对Th17介导的中性粒细胞性哮喘信号通路的影响。方法：将24只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组与地塞米松组,每组8只。用鼻腔滴入脂多糖、腹腔注射卵白蛋白及第15天起雾化吸入卵白蛋白引喘共14次的方法制作中性粒哮喘模型。地塞米松组于实验开始后第15天起,按05 mg/kg予以腹腔注射地塞米松,每日一次,共14次。统计各组肺组织病理形态学变化（HE染色）、BALF液白细胞总计数与分类计数、流式细胞术测脾及外周血Th17含量、酶〖JP2〗联免疫法测BALF中的TGF-β、IL-6、IL-17含量,免疫组化法及免疫印迹法测ROR γt〖JP〗蛋白表达,逆转录聚合酶链反应测ROR-γt mRNA的表达。结果：模型组与正常组比较,气道有大量炎性细胞浸润,以中性粒细胞为主（P＜0.01）。BALF液中TGF-β、IL-6、IL-17含量显著增高（P＜0.01）;脾与外周血中Th17含量显著增多（P＜0.01）;肺组织中ROR-γt蛋白与mRNA的表达亦显著升高（P＜0.01）,而地塞米松组与模型组比较,上述指标皆显著降低（P＜0.01）。结论：中性粒细胞性哮喘可能以Th17的增多为主,IL-17是主要的炎性因子,而ROR γt是促进Th0向Th17分化的关键转录因子;而地塞米松可以抑制ROR-γt,降低IL-17的含量,从而减轻中性粒细胞性哮喘的发作。     

川楝素与γδ T细胞协同抗结直肠癌的作用及机制研究

目的:探讨γδT细胞对结直肠癌细胞的杀伤活性,并研究川楝素对γδT细胞的协同效应。方法:体外培养人γδT细胞并用流式细胞术进行鉴定。乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测γδT细胞和川楝素对人结直肠癌SW480细胞的杀伤活性。Western blot实验检测川楝素对SW480细胞中Bcl-2、Bcl-x L和MCL-1表达水平的影响。ELISA实验检测川楝素是否影响γδT细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和Fas配体(Fas L)的分泌。流式细胞术检测川楝素和γδT细胞处理后SW480细胞的线粒体膜电位和凋亡情况。Western blot实验检测川楝素和γδT细胞处理后SW480细胞caspase-9和caspase-3的活化。结果:体外培养的γδT细胞高表达CD3和γδT细胞受体(TCR)。川楝素处理能显著增强γδT细胞对SW480的杀伤活性。川楝素不影响γδT细胞TRAIL和Fas L的表达。川楝素不影响SW480细胞中Bcl-2和Bcl-x L的蛋白水平但显著抑制MCL-1的表达。转染MCL-1质粒能显著抑制川楝素对γδT细胞的协同效应。川楝素通过抑制MCL-1的表达促进γδT细胞对SW480细胞线粒体膜电位的损伤和凋亡的诱导。川楝素通过抑制SW480细胞MCL-1的表达促进γδT细胞对SW480细胞caspase-9和caspase-3的活化。结论:川楝素通过抑制MCL-1的表达发挥对γδT细胞的协同抗结直肠癌作用。     

钙调蛋白激酶Ⅱ的结构及其在神经系统中的作用

钙离子（Ca²⁺ ）是通过局部信号获得特异性刺激的关键细胞内信使分子。Ca²⁺ 结合蛋白,如钙调蛋白（CaM）及其靶蛋白是Ca²⁺ 依赖性反应信号传导的关键靶点。钙/钙调蛋白依赖性蛋白酶Ⅱ（CaMKⅡ）是一种多聚体酶,它是哺乳动物前脑总蛋白的重要组成部分,并且是形成突触后致密部的主要成分。近年来国内外研究显示,CaMKⅡ包含α、β、γ 和 δ 4种亚型,其中α 和 β 主要在神经组织中表达,而 γ 和 δ 则在全身多种组织均有表达,它们参与特定的突触可塑性和记忆巩固过程,对神经系统的兴奋性及一些神经系统疾病的发生起重要作用。前期也有研究表明CaMKⅡδ在促进神经元存活中起重要作用。本文就CaMKⅡ的结构及其在神经系统中的作用和与相关神经系统疾病的关系作一综述。     

Interleukin-17 and its expanding biological functions

Interleukin-17 (IL-17) and IL-17-producing cells have been shown to play important roles in inflammation and the immune response. IL-17 is believed to be mainly produced by T helper 17 (Th17) cells, a unique helper T-cell subset different from Th1 and Th2 cells. Other subsets of T cells such as γδT and natural killer T (NKT) cells have also been found to produce IL-17 in response to innate stimuli. IL-17 acts as a proinflammatory cytokine that can induce the release of certain chemokines, cytokines, matrix metalloproteinases (MMPs) and antimicrobial peptides from mesenchymal and myeloid cells. This leads to the expansion and accumulation of neutrophils in the innate immune system and links innate and adaptive immunity in vivo. Furthermore, increasing evidence indicates that IL-17 and IL-17-producing cells are involved in the pathogenesis of various diseases such as allergies, autoimmune diseases, allograft transplantation and even malignancy. They may also play protective roles in host defense against infectious diseases and promote induction of cytotoxic T lymphocyte (CTL) responses against cancer. Targeting of the IL-17 axis is under investigation for the treatment of inflammatory disorders.     

Th17细胞介导肿瘤免疫的双向性及其意义

Th17细胞作为众多CD4+辅助性T细胞的一种,其标志性特点是能分泌炎性因子白细胞介素(IL-17)参与炎症反应.随着人们对炎症的深入了解,发现Th17细胞不只是发挥炎性效应,其在肿瘤的发生、发展及抗肿瘤方面也有重要的作用.研究发现,在多种肿瘤中存在Th17细胞及其相关的细胞因子,Th17细胞分泌炎性因子IL-17主动增强相关的抗肿瘤信号通路,调控抗肿瘤免疫应答.另外,固有免疫细胞IL-17+γδT细胞以及IL-17+ Foxp3T细胞不仅分泌IL-17发挥促肿瘤效应,还能协同Th17细胞参与到抗肿瘤免疫反应中,共同调控机体的抗肿瘤免疫反应.因而研究Th17细胞参与肿瘤应答的机制以及与IL-17+γδT细胞和IL-17+ Foxp3T细胞在肿瘤免疫中的相互作用关系具有重要意义.     

IL-17A-producing neutrophil-regulatory Tn lymphocytes

The proinflammatory cytokine IL-17A, mainly produced by specialized T cells, plays an important homeostatic role in regulating neutrophil production and blood neutrophil counts. This review will assemble and discuss the evidence for this function of IL-17A-producing cells, which are collectively called neutrophil-regulatory T cells or Tn cells. IL-17A-producing lymphocytes are most abundant in the mesenteric lymph node, where they account for 0.15% of all lymphocytes. About 60% of the Tn cells are γδ T cells, about 25% NKT-like cells, and less than 15% are CD4 T cells. These latter cells are also known as T-17 or Th_IL-17 cells, a subset of Tn cells that also plays an important role in autoimmune diseases. IL-17A produced by Tn cells regulates the production of G-CSF, which in turn promotes the proliferation of promyelocytes and maturation of neutrophils. This homeostatic mechanism plays an important role in normal physiology and in host defense against bacterial infections. This review is aimed at highlighting the important role of IL-17A-producing T cells at the interface between the adaptive and innate immune system.