Caspase抑制剂F1013对大鼠肝CYPs含量及其主要亚型mRNA表达的影响

目的:探讨Caspase抑制剂F1013对大鼠肝CYPs含量及其主要亚型CYP1A2,CYP2D1,CYP2E1,CYP2C11,CYP3A1 mRNA相对表达水平的影响。方法:Wistar大鼠40只,随机分成空白组、诱导剂组、F1013低、中、高剂量组。空白组和诱导剂组分别灌胃给予0.9%氯化钠溶液和地塞米松50 mg·kg-1.d-1,F1013低、中、高组分别肌内注射F1013 1.25,2.5,5.0 mg·kg-1.d-1,每日1次,连续6 d。取大鼠肝组织制备肝微粒体,测定微粒体蛋白浓度及CYP总酶含量。并采用实时定量荧光RT-PCR法分析大鼠CYP各主要亚型mRNA的相对表达水平。结果:F1013低、中、高组肝微粒体CYP总酶含量与空白组比有显著增高(P<0.05),提示该药对CYP总酶有诱导作用。低剂量组CYP2D1酶活性显著升高(为空白组2.54倍,P<0.05);中剂量组CYP1A2及CYP2E1酶活性显著升高,分别为空白组4.24和2.46倍(P<0.05);3个剂量的F1013对CYP2C11均无显著诱导作用。结论:F1013在1.25,2.5,5.0 mg.kg-1剂量范围内,可显著诱导CYP总酶活性。F1013 1.25 mg·kg-1可诱导CYP 2D1 mRNA表达,2.5 mg·kg-1剂量可诱导CYP1A2及CYP2E1 mRNA的表达,其诱导机制可能与升高各主要亚酶mRNA相对表达水平有关。     

药物过量时激活核受体孕烷X受体促进毒物消除的解毒机制

目的考察喹硫平(QTP)在正常剂量与中毒剂量下对大鼠脑与肝内孕烷X受体(PXR)、细胞色素P4503A4(CYP3A4)、P-糖蛋白(P-gp)的mRNA表达的影响,并考察QTP中毒情况下给予PXR激活剂(地塞米松)对大鼠上述指标的影响,探索药物过量时激活PXR信号通路促进毒物消除的分子机制。方法正常组大鼠腹腔注射正常剂量QTP 10 mg·kg^-1。模型组大鼠腹腔注射中毒剂量QTP 100 mg·kg^-1诱导QTP中毒模型。实验组大鼠连续4 d腹腔注射地塞米松(DEX)2.5 mg·kg^-1·d^-1诱导PXR激活模型后,腹腔注射中毒剂量QTP 100 mg·kg^-1。按体重将SD大鼠随机分为4组,每组18只:空白组、正常组、模型组和实验组。空白组大鼠连续4 d腹腔注射大豆油,第4天腹腔注射甘油-水溶液;正常组大鼠连续4 d腹腔注射大豆油,第4天腹腔注射正常剂量喹硫平10 mg·kg^-1;模型组大鼠连续4 d腹腔注射大豆油,第4天腹腔中毒剂量注射喹硫平100 mg·kg^-1;实验组连续4 d腹腔注射地塞米松2.5 mg·kg^-1,第4天腹腔注射中毒剂量喹硫平100 mg·kg^-1。于第4天处置12,24,48 h后麻醉,采集大鼠的肝、海马及前额叶皮质。用实时定量荧光PCR技术测定各组大鼠肝、海马及前额叶皮质中PXR、CYP3A4、P-gp的mRNA表达。结果给药24h后,空白组、正常组、模型组和实验组大鼠肝PXR mRNA的表达分别为(15.8±0.8)×10^-3,(27.8±2.4)×,(33.3±1.4)×10^-3,(49.2±2.0)×10^-3,正常组与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验组与10^-3模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。这4组在肝CYP3A4及P-gp的结果与在肝PXR的结果一致。各组在海马及前额叶皮质的结果与在肝的结果一致。QTP可诱导大鼠脑与肝内PXR、CYP3A4和P-gp的mRNA表达并呈剂量依赖性;合用DEX可加速中毒剂量QTP对PXR、CYP3A4和P-gp的诱导作用。结论QTP可自我诱导PXR-CYP3A4/P-gp这一信号通路,当QTP过量时这种诱导效应更明显,合用PXR激动剂可加速该诱导过程。药物过量时。激活PXR信号通路可快速有效激活解毒系统,从而可能达到快速解毒以及保护器官的目的。     

补骨脂素对大小鼠肝CYP450酶4种亚型表达的影响

目的研究补骨脂素对大鼠、小鼠肝CYP1A2,CYP2A6,CYP2D6和CYP2E1酶表达的影响。方法 SD大鼠、ICR小鼠分别随机分为空白组和补骨脂素给药组,大鼠灌胃给予60 mg·kg~(-1)补骨脂素,小鼠灌胃给予60 mg·kg~(-1)补骨脂素,连续灌胃给药14 d后处死,取肝组织,采用实时荧光定量PCR技术和Western印迹法检测大鼠、小鼠肝中CYP1A2,CYP2A6,CYP2D1及CYP2E1的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照相比,补骨脂素给药14天后,雌、雄大鼠CYP1A2 mRNA表达分别升高了412.85%和655.90%,同时蛋白表达分别升高了4081.50%和686.76%;雌性大鼠CYP2D6和CYP2E1 mRNA表达分别降低了50.79%和61.93%,雌性大鼠CYP2E1蛋白表达降低了53.35%。ICR小鼠给药14 d后,雌性小鼠CYP1A2mRNA表达显著降低(P<0.01),而CYP1A2蛋白表达显著升高(P<0.05);雌性小鼠CYP2A6 mRNA表达显著升高(P<0.05),其他未见显著差异。结论补骨脂素给药影响肝脏CYP1A2,CYP2A6,CYP2D1及CYP2E1的表达,并且这种影响存在性别和种属差异。     

西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性的影响

目的考察西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性的影响。方法将大鼠随机分为空白对照组(空白组)、西洋参总皂苷低剂量组[低剂量组,50 mg/(kg·d)]、西洋参总皂苷中剂量组[中剂量组,100 mg/(kg·d)]、西洋参总皂苷高剂量组[高剂量组,200 mg/(kg·d)]和β-萘黄酮阳性药对照组[阳性药组,80 mg/(kg·d)],预处理11 d后,观察大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性、CYP1A2 mRNA表达和CYP1A2酶蛋白表达情况,研究CYP1A2特异性探针底物非那西丁在预处理大鼠体内的药动学变化。结果预处理后,大鼠肝微粒体CYP1A2活性、mRNA和蛋白表达随西洋参总皂苷剂量升高有增加趋势,非那西丁在预处理大鼠体内代谢速率加快。结论西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性有一定诱导作用。     

淫羊藿苷对不同月龄大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的 揭示淫羊藿苷(Ica)对大鼠肝微粒体细胞色素P450的含量及部分亚型的影响,并比较月龄的差异.方法 ig给予6月龄和18月龄的♂SD大鼠Ica( 60 mg· kg -1),4周后取肝脏,用钙沉淀法提取肝微粒体,BCA法测定微粒体蛋白浓度;用一氧化碳还原差示光谱法测定CYP450的含量;用ELISA法测定CYP1 A1、CYPb5的含量;用比色法测定苯胺羟化酶(反映CYP2E1活性)和红霉素-N-脱甲基酶(反映CYP3A活性)的活性;用real - time RT - PCR检测CYP1 A1、CYP2A3、CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2和CYP4B1 mRNA的表达.结果 60 mg· kg-1 Ica明显增加了CYP450的总酶和CYP1 A1的含量、CYP3A的活性及CYP1 A1、CYP3A1、CYP3A2 mRNA的表达,降低了CYP2E1的活性及其mRNA的表达;但Ica对上述各指标的诱导或抑制作用在大鼠月龄方面差异不明显;Ica对CYPb5的含量及CYP2A3、CYP4B1 mRNA的表达未见明显影响.结论 Ica对大鼠肝微粒体CYP450总酶、CYPI A1和CYP3A具有诱导作用,对CYP2E1具有抑制作用,该作用未见明显月龄差异.     

四物汤及其有效成分对大鼠肝脏主要药物代谢酶的影响

目的研究四物汤及其有效成分对大鼠肝脏P450酶的影响,从药物代谢酶角度为四物汤的配伍规律提供实验依据。方法大鼠口服灌胃四物汤10 g·kg-1·d-1及其有效成分果糖0.334 g·kg-1·d-1,阿魏酸0.002 g·kg-1·d-1,川芎嗪0.011 g·kg-1·d-1,芍药苷0.022 g·kg-1·d-1,连续给药1周后处死,用生理盐水灌流肝脏,制备肝微粒体,采用混合探针与肝微粒体体外孵育法考察四物汤及其有效成分对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响。利用实时定量聚合酶链式反应(Q-PCR)检测四物汤及其有效成分对大鼠肝脏P450 mRNA表达的影响,利用Western blot法检测四物汤及其有效成分对大鼠肝脏CYP2B1蛋白表达的影响。结果肝微粒体孵育结果显示,果糖对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP2D6酶活性具有抑制作用,阿魏酸对CYP2C9、CYP2B6酶活性具有抑制作用,川芎嗪对CYP1A2、CYP2C9、CYP2B6的酶活性具有抑制作用,芍药苷对CYP2D6、CYP2B6酶活性具有抑制作用。阿魏酸、果糖、芍药苷组对CYP2B1mRNA的表达具有抑制作用,与酶活性水平一致。4种单体成分对CYP2B1蛋白表达具有抑制作用。结论阿魏酸、果糖、芍药苷组在CYP450酶活性、mRNA基因转录水平及蛋白表达水平对CYP2B1均有抑制作用。     

雷公藤多苷片对大鼠药物代谢酶CYP2E1和CYP3A4活性的影响

目的:研究雷公藤多苷片对大鼠CYP450亚型酶CYP2E1和CYP3A4活性的影响方法:16只Wistar大鼠随机分成2组,每组8只,实验组给予雷公藤多苷片(1 mg·kg^-1·d^-1,ig,qd),对照组给予同体积的纤维素钠空白溶剂,连续给药10d后同时静脉给予探针药物氯唑沙宗(5 mg·kg^-1)和咪达唑仑(2 mg·kg^-1)。HPLC法测定两个探针药物的血药浓度,计算其药物动力学参数,评价CYP450亚型酶CYP2E1和CYP3A4的活性。结果:与对照组比较,实验组的氯唑沙宗主要药物动力学参数无明显变化（P>0.05）,而咪达唑仑的CL和AUC较对照组差异有统计学意义（P<0.05）。结论:雷公藤多苷片对大鼠的CYP2E1酶活性无明显影响,对CYP3A4酶活性有一定的抑制作用。     

心血管药物速效救心丸和通心络胶囊对大鼠细胞色素P450酶的影响

目的:观察速效救心丸和通心络胶囊对大鼠药物代谢酶细胞色素P450(CYP450)的影响。方法:给予大鼠试验药物后制备肝及小肠微粒体,CO还原差示光谱法测定肝微粒体CYP450含量,蛋白免疫印迹法检测肝微粒体中CYP1A2、CYP2C11、CYP2E1、CYP3A和肠微粒体中CYP3A蛋白的表达量。结果:速效救心丸组和通心络胶囊组与空白对照组比较,大鼠肝脏CYP450含量无显著变化(P>0.05);但是West-ern blotting实验对肝脏和肠道中多种CYP450酶表达量测定的结果显示,速效救心丸可诱导肝脏CYP1A2表达,但抑制肝脏CYP2C11和肠道CYP3A表达(P<0.05);通心络胶囊可诱导大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白表达(P<0.05)。结论:速效救心丸和通心络胶囊对大鼠肝脏CYP450酶总量无影响,但是,在蛋白质水平对特定亚型蛋白的表达量有影响,由此可能引发的药物相互作用不容忽视。     

地塞米松对大鼠肝脏微粒体细胞色素P-450的诱导效应

目的:观察地塞米松(dexamethasone,DEX)对细胞色素P-450(cytochrome P450,CYP450)的诱导效应,并探讨其诱导机制.方法:雄性Wistar大鼠分别以DEX 0,25,50和100mg·kg-1·d-1诱导处理(ip)4d后,测定大鼠肝脏总CYP450含量,CYP3A1,CYP3A2和CYP2B 1/2的mRNA及蛋白的表达水平,肝脏ERD(CYP3A活性),PROD(CYP2B活性)和BROD(总CYP450活性).结果:CYP450含量、ERD、PROD和BROD活性在DEX多次诱导后都有升高.CYP3A1 mRNA表达水平、蛋白含量和酶活性有明显的升高,剂量效应关系明显;CYP3A2蛋白明显升高,但mRNA表达水平却无明显变化.PROD和CYP2B1/2的mRNA表达水平以及总CYP450含量均在50mg·kg-1·d-1剂量组达到最高值.结论:DEX对雄性大鼠主要诱导CYP3A1和CYP3A2两个CYP450成员表达上调,对CYP2B1/2也有一定的诱导作用,其诱导作用主要表现在酶活性、酶蛋白含量和mRNA表达水平的升高.CYP3A1和CYP3A2的诱导方式可能不同.     

烟雾暴露对孕大鼠肝脏和胎盘细胞色素P450同工酶表达的影响

目的研究烟雾暴露对孕大鼠肝脏和胎盘细胞色素P450(CYP)同工酶表达的影响,探讨孕期烟雾暴露的毒理学意义。方法7只Wistar雌大鼠和14只孕大鼠分为正常未孕组、正常受孕组和吸烟受孕组。从妊娠d9起,吸烟组孕大鼠在特制的半封闭动物饲养箱中熏烟,每日3次(8:00am,12:00am,4:00pm),每次持续15~20min。孕d21剖腹取母体肝脏和胎盘,提取RNA,RT-PCR技术测定CYP同工酶表达的变化。结果与正常未孕组相比,正常受孕大鼠肝脏CYP1A1,1B1,2B1/2,2E1,3A1mRNA的表达分别为75.1%(P<0.05),117.2%(P<0.01),131.6%,130.5%和85.1%(P<0.05);与正常受孕组相比,吸烟孕大鼠肝脏CYP1A1,1B1,2B1/2,2E1,3A1mRNA表达分别为128.9%(P<0.05),96.4%,127.7%,101.8%及175.5%(P<0.05);同时胎盘CYP1A1,1B1,2B1/2及2E1mRNA表达分别为127.1%(P<0.05),116.5%,90.1%及150.2%(P<0.01)。结论孕期烟雾暴露可影响孕大鼠肝脏和胎盘中一些与外源物代谢密切相关的CYP同工酶表达。     

制首乌含药血清对L02肝细胞增殖和凋亡的影响

目的: 研究制首乌含药血清对L02肝细胞增殖和凋亡的影响。方法: 采用皮下注射氢化可的松,建立大鼠肾阴虚模型,分为空白对照组、制首乌低、中、高剂量组(10.8,21.6,43.2 g·kg^-1)。连续给药7 d后处死大鼠,制备含药血清。分别采用MTT法测定L02肝细胞线粒体功能、流式细胞术检测肝细胞凋亡率及显微镜观察肝细胞形态结构。结果: 15%的肾阴虚高剂量组含药血清作用48 h后对L02肝细胞增殖具有明显抑制作用,抑制率为16.83%(P<0.05)。肾阴虚中、高剂量组的细胞凋亡率显著性升高,分别为19.6%(P<0.05)和27.8%(P<0.01)。结论: 制首乌对证治疗肾阴虚证侯,当给药剂量超过21.6 g·kg^-1时,对肝细胞的毒性明显增强。     

三七姜挥发油诱导(CNE-2)细胞周期G1期阻滞及相关基因表达的影响

目的:研究三七姜挥发油对人鼻咽癌 (CNE-2) 细胞周期的调控作用,并探讨其可能的机制。方法:体外培养人鼻咽癌细胞株(CNE-2),采用MTT法观察三七姜挥发油对CNE-2细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析三七姜挥发油处理CNE-2细胞后对细胞周期分布的影响;实时荧光定量PCR检测细胞周期调控相关基因的表达水平。结果:不同浓度的三七姜挥发油作用CNE-2细胞24,48,72,96 h后,均能明显抑制细胞增殖(P<0.05),且呈浓度与时间依赖性,其IC₅₀分别为71.12,60.034,53.167,34.75 μg·ml^-1;三七姜挥发油诱导CNE-2细胞发生G₁期阻滞,与阴性对照相组比,200 μg·ml^-1加药处理CNE-2细胞72 h后G₁期细胞增加了13.94%(P<0.01);伴随ATM,CCND1/E1,CDK6,CDC25A,E2F1等mRNA表达水平下调,而Tp53基因表达显著增强(P<0.01)。结论:三七姜挥发油诱导人鼻咽癌CNE-2细胞G₁期阻滞、抑制细胞增殖,其作用可能与抑制了介导DNA损伤修复的ATM-Chk2-Cdc25A通路,以及激活p53通路有关,从而抑制CDC25A,cyclinD1/E1、CDK6、E2F1等基因的表达而实现的。     

三白草总黄酮对高脂血症大鼠血流变学及血管内皮功能的影响

目的：探讨三白草总黄酮对高脂血症大鼠血流变学及血管内皮功能的影响。方法：雄性SD大鼠70只,随机分为正常组、模型组、阳性组（血脂康胶囊,100 mg·kg^-1）和三白草总黄酮高（6.3 g·kg^-1）、中（3.15 g·kg^-1）、低剂量组（1.57 g·kg^-1）,正常组给予基础饲料喂养,其余各组喂养高脂饲料复制高脂血症大鼠模型,模型复制成功后开始药物干预治疗,治疗6周后测定各组大鼠血脂指标[胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）]、血流变学指标及血管内皮细胞因子的表达水平。结果：给药6周后,与模型组相比,三白草总黄酮各剂量组对大鼠TC、TG、LDL-C、TXB₂、ET-1的表达水平有不同程度的降低,对HDL-C、6-keto-PGFla、NO表达水平有不同程度的升高,其中以三白草总黄酮的高剂量组作用效果最为明显,组间比较差异均有显著性（P<0.05）;与模型组相比,三白草总黄酮各剂量组大鼠血浆黏度、血小板黏附率、全血黏度（高、中、低切）指标明显降低,组间比较差异显著性（P<0.05）。结论：三白草总黄酮能明显改善高脂血症模型大鼠的血脂水平,改善血流变学指标,使血液处于低浓、低黏、低聚、低凝状态,调节血管内皮功能,从而缓解血液流动阻力,增大血流量,促进机体的脂质代谢恢复正常。     

南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛细胞的作用

目的：观察南苜蓿总皂苷（TSMP）对2型糖尿病（T2DM）大鼠血糖、血脂、氧化应激的影响。方法：采用高糖高脂饲料喂养4周加小剂量的链脲佐菌素（30mg·kg^-1）的方法建立2型糖尿病大鼠模型,将50只模型大鼠随机分为模型组,二甲双胍组（0.2g·kg^-1）,南苜蓿总皂苷高剂量组（2.8g·kg^-1）、中剂量组（1.4g·kg^-1）、低剂量组（0.7g·kg^-1）,连续灌胃4周,末次给药后测定空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TCH）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、空腹胰岛素（FINS）、糖化血红蛋白（HbA1c）、丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）,免疫组化法观察胰岛素和胰高血糖素的表达。结果：与模型组比较,南苜蓿总皂苷2.8,1.4g·kg^-1能显著降低实验性2型糖尿病大鼠给药后7,8周的FBG水平（P<0.01或P<0.05）;降低TCH、TG、LDL-C的水平（P<0.01或P<0.05）,升高HDL-C的水平含量（P<0.05）;降低FINS和HbA1c水平（P<0.01或P<0.05）;降低MDA含量（P<0.01）;升高SOD含量（P<0.01）;增加胰岛素阳性表达,减少胰高血糖素阳性表达。结论：南苜蓿总皂苷对2型糖尿病模型大鼠具有降低血糖,调节血脂,抗氧化,保护胰腺功能的作用。     

异型南五味子醇提物对D-半乳糖胺/脂多糖致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：研究异型南五味子对D-半乳糖胺/脂多糖诱导小鼠肝损伤的保护作用。方法：ICR小鼠按体质量随机分为 6组,即正常组、模型组、联苯双酯（200 mg·kg^-1）组,异型南五味子醇提物低、中、高剂量（200、400、800 mg·kg^-1）组。每天给药一次,连续给药14 d,末次给药1 h后,除正常组外其余各组用600 mg·kg^-1 D-半乳糖胺和40 μg·kg^-1脂多糖腹腔注射以复制小鼠急性肝损伤模型,末次给药12 h后,摘眼球取血,取材。用生化法测定血清中ALT、AST水平,用酶联免疫法测定各组小鼠肝匀浆中SOD、MDA、MPO及GPx-2含量,测定血清及肝组织中 TNF-α、IL-6、IL-10炎性因子表达水平,并于光镜下检查肝组织病理变化。结果：与模型组比较,异型南五味子200、400、800 mg·kg^-1剂量均能显著降低血清中ALT、AST水平（P<0.05或P<0.01）,明显降低肝匀浆中MDA、MPO含量,显著升高SOD、GPx-2水平（P<0.05或P<0.01）,并能降低肝脏及血清中TNF-α、IL-6含量,升高IL-10的表达水平（P<0.05或P<0.01）。病理观察显示异型南五味子组能明显减轻肝脏灶性坏死、水肿,减少肝脏炎性细胞浸润。结论：异型南五味子对腹腔注射600 mg·kg^-1D-半乳糖胺和40 μg·kg^-1脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤具有较好的保护作用。     

十二味穿甲片原料抗大鼠高脂性脂肪肝的作用

目的：探讨十二味穿甲片对高脂性大鼠脂肪肝模型的防治作用。方法：将SD鼠随机分为空白对照组、模型对照组、十二味穿甲片原料2.8,1.4,0.7 g·kg^-1剂量组和阳性对照组。除空白对照组灌胃（ig）生理盐水外,其余各组大鼠灌胃脂肪乳剂,每日早上9：00给予1次、连续5周,建立高脂性脂肪肝大鼠模型。造模同时灌胃给药（供试药采用十二味穿甲片的原料浸膏粉）,每日下午16：00给予1次,5周后称取体质量、肝湿重,计算肝指数,检测大鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）含量,镜下观察各组大鼠肝组织形态学变化。结果：与空白对照组比较,模型对照组大鼠血清TC、TG和肝湿重显著增加,肝指数上升,差异具有统计学意义（P<0.05或0.01）;血清ALT、AST明显升高,但无统计学意义（P>0.05）;镜下观肝小叶细胞内弥漫性密集细小的脂滴空泡。与模型对照组比较,十二味穿甲片原料2.8,1.4,0.7 g·kg^-1剂量组肝湿重、肝指数,以及血清TC、TG、ALT均有下降,其中十二味穿甲片原料0.7 g·kg^-1剂量组肝指数差异显著（P<0.05）、十二味穿甲片原料各剂量组血清TC,以及1.4,0.7 g·kg^-1剂量组血清TG差异显著（P<0.05或0.01）;镜下观十二味穿甲片原料2.8,1.4 g·kg^-1剂量组大鼠肝细胞索排列整齐,肝窦清晰可见,细胞质内脂滴消失,肝细胞结构正常,较模型对照组显著改善,十二味穿甲片原料0.7 g·kg^-1剂量组肝脂肪变性与模型对照组比无明显改善。结论：十二味穿甲片原料具有良好的抗高脂性脂肪肝作用,并呈现一定的量效关系。     

十二味穿甲片原料抗CCl4所致大鼠肝纤维化的实验研究

目的:探讨十二味穿甲片原料对四氯化碳(CCl₄)所致大鼠肝纤维化的保护作用。方法:将雄性SPF级SD 大鼠98只随机分为空白对照组,模型对照组,阳性对照组,中药十二味穿甲片原料4.2,2.8,1.4,0.7 g·kg^-1剂量组。除空白对照组腹腔注射同体积的注射用大豆油外,其余各组均腹腔注射40%的CCl₄大豆油溶液2 mL·kg^-1,每周2次并连续8周建立大鼠肝纤维化模型,造模同时给药进行抗肝纤维化干预,共59 d。通过测定体质量,检测肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB),比色法测定肝脏羟脯氨酸(Hyp)含量并进行肝内胶原定量分析,HE染色以观察肝组织病理变化,评价药物的抗纤维化作用。结果:与模型对照组比较,十二味穿甲片原料药粉4.2,2.8 g·kg^-1剂量组大鼠肝脏Hyp和胶原含量显著降低(P<0.05),2.8,0.7 g·kg^-1剂量组大鼠血清ALT、AST含量及1.4 g·kg^-1剂量组血清ALT均显著下降,差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01),而4.2 g·kg^-1剂量组血清ALT、AST和1.4 g·kg^-1剂量组AST含量亦呈下降趋势,但无显著性差异(P>0.05)。2.8 g·kg^-1剂量组大鼠血清ALB和TP呈明显升高趋势,但较模型对照组统计学意义不显著(P>0.05),病理结果显示2.8 g·kg^-1剂量组大鼠肝纤维化改善显著。结论:本实验条件下,十二味穿甲片原料具有抗CCl₄所致大鼠肝纤维化的作用,以2.8 g·kg^-1剂量抗肝纤维化作用最为明显。     

水飞蓟素胶囊对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用

目的：研究水飞蓟素胶囊促进大鼠胫骨骨折愈合的效果。方法：选取健康雌性SD大鼠72只,采用开放式截骨骨折模型,造模成功后随机分3组,对照组（CK组）每日灌服蒸馏水,观察组（SIL组）给予水飞蓟素100 mg·kg^-1·d^-1灌胃,阳性对照组（JTG组）给予金天格0.48 g·kg^-1·d^-1灌胃,在术后2,4,6周各组分别处死8只大鼠,行血清生化检测碱性磷酸酶（ALP）,行离体胫骨骨矿物质密度（BMD）测定。组织行HE染色观察骨折愈合的病理变化,同时拍X线行影像学评估。结果：（1）血清ALP水平：在术后2周,表现出JTG组高于SIL组,并高于CK组（JTG vs. SIL,P<0.05;SIL vs. CK,P<0.05;JTG vs. CK,P<0.01）。但在第4、第6周,3组ALP含量无明显统计学差异（P>0.05）。（2）BMD值在3个时段均显示JTG组高于CK组（P<0.05）,SIL组高于CK组（P<0.05）,但JTG组与SIL组无统计学差异。（3）影像学评分：术后2周和4周,JTG组、SIL组高于CK组（P<0.05）,但两组间无差异,而术后6周各组之间没有显著的统计学差异。（4）HE染色：在第2,4周,骨折愈合评分JTG组高于SIL组,并高于CK组（JTG vs. SIL,P<0.05;SIL vs. CK,P<0.05;JTG vs. CK,P<0.01）,而术后6周3组间无明显统计学差异。SIL组早期即出现肉芽组织纤维化过程,并在相同的时间点其软骨细胞数量多于对照组。结论：水飞蓟素在早期具有明显的促进大鼠胫骨骨折愈合作用。     

胆石六号汤剂对豚鼠胆囊炎治疗作用的观察

目的:研究胆石六号汤剂对盐酸林可霉素致豚鼠胆囊炎的治疗作用.方法:将60只豚鼠按随机数字表法分为6组,即空白对照组,模型组,消炎利胆片组(0.35 g·kg^-1),胆石六号汤剂低剂量组(3.9 g·kg^-1)、中剂量组(7.7 g·kg^-1)、高剂量组(15.4 g·kg^-1),每组10只.除空白组以外,其余各组连续7 d皮下注射盐酸林可霉素建立豚鼠胆囊炎模型,然后灌胃给药30 d.观察豚鼠体质量、胆囊及肝脏质量、胆汁容积、肝脏和胆囊病理组织学改变以及血浆白细胞数量、肝功能变化.结果:胆石六号汤剂组比模型组体质量增加(P <0.01,P <0.05);胆石六号汤剂组能明显减轻模型动物肝湿重和胆囊湿重,改善病理变化,促进胆汁排泄,缓解胆汁淤积(P <0.01,P <0.05);显著降低模型动物血浆白细胞数目(P <0.01);改善肝功能,降低模型动物AST、 ALT、ALP、GGT、TBIL、TBA(P <0.01,P <0.05),且具有一定的剂量依赖性.结论:胆石六号汤剂可以减轻盐酸林可霉素致豚鼠胆囊炎的炎症反应,同时有利胆和保护肝脏的作用.     

糖肝煎浓缩丸对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠肝组织PI3K/AKT通路的影响

目的：利用2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝模型探讨糖肝煎浓缩丸通过调控胰岛素受体-α（InsR-α）/IRS （胰岛素受体）/PI3K （磷脂酰肌醇3激酶）信号通路,改善2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的机制。方法：选择健康雄性Wistar大鼠进行研究,分为正常组和模型组。采用高脂高糖饲料喂养加腹腔注射30 mg·kg^-1STZ缓冲液的方法建立2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的动物模型。模型符合糖耐量异常的标准后,随机分为模型组,吡格列酮组（1 g·kg^-1·d^-1）,糖肝煎浓缩丸中剂量组（5.6 g·kg^-1·d^-1）和糖肝煎浓缩丸低剂量组（2.8 g·kg^-1·d^-1）。药物干预8周后,生化法检测大鼠空腹血糖、肝糖原含量,ELISA法检测大鼠空腹胰岛素、肝脏GK、G-6-Pase含量,Western-Blot法检测肝脏组织InsR-α、IRS和PI3K的蛋白表达水平,采用HE染色法观察各组大鼠肝脏组织病理切片。结果：与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、GK含量显著性升高,肝糖原、G-6-Pase含量显著性降低,肝脏InsR-α、IRS和PI3-K 3种蛋白的表达含量均显著减低（P<0.01）;与模型组比较,吡格列酮组和糖肝煎浓缩丸组均能显著降低大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、GK含量,提高肝糖原、G-6-Pase含量,增加肝脏InsR-α、IRS和PI3-K 3种蛋白的表达含量（P<0.01）;与吡格列酮组相比,糖肝煎浓缩丸中剂量组效果与之无显著差异（P>0.05）。结论：糖肝煎浓缩丸可能是通过调节InsR-α/IRS/PI3K信号通路改善2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠的糖代谢紊乱及肝脏损伤。