RSUME和HIF-1α/VEGF通路与垂体腺瘤侵袭之间的关系

目的 :探讨RSUME(RWD containing sumoylation enhancer)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路与垂体腺瘤侵袭之间的关系。方法:应用实时荧光定量PCR法检测垂体腺瘤组织中RSUME、HIF-1α和VEGF-A mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测垂体腺瘤组织中小泛素相关修饰因子-1(small ubiquitin-related modifi ers-1,SUMO-1)、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平。将靶向RSUME基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染至小鼠垂体腺瘤AtT-20细胞后,实时荧光定量PCR法检测细胞中RSUME、HIF-1α和VEGF-A mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测细胞中SUMO-1、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平,Transwell法检测细胞侵袭能力的改变。结果:侵袭性垂体腺瘤组织中RSUME、HIF-1α、VEGF-A mRNA的表达水平和SUMO-1、HIF-1α、VEGF-A蛋白的表达水平明显高于非侵袭性垂体腺瘤组织和正常垂体组织(P均<0.05)。并且,侵袭性垂体腺瘤组织中SUMO-1与HIF-1α的表达呈正相关(r=0.687,P<0.05),HIF-1α与VEGF-A的表达呈正相关(r=0.773,P<0.05)。RSUME siRNA转染组AtT-20细胞中RSUME和VEGF-A mRNA以及SUMO-1、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平均明显低于转染阴性对照siRNA组和未转染的空白对照组(P均<0.05)。RSUME siRNA转染组AtT-20细胞的侵袭能力被明显抑制(P<0.05)。结论:RSUME可能通过增强HIF-1α/VEGF通路的作用而促进垂体腺瘤的侵袭。沉默RSUME基因可抑制垂体腺瘤细胞的侵袭。     

HIF-1α在直肠癌中的表达和血管生成的关系

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在直肠癌中的表达和血管生成的关系及其临床意义.方法分别采用免疫组化SP法检测88例直肠癌患者肿瘤组织中HIF-1α、VEGF和CD34的表达和使用蛋白印迹法(Western blot)半定量检测21例直肠癌患者新鲜肿瘤组织和12例正常直肠黏膜组织中HIF-1α的表达;并回顾性分析临床病理学资料.结果免疫组化检测结果显示直肠癌组中HIF-1α、VEGF的阳性表达率分别为65.9%(58/88),63.6%(56/88)显著高于正常对照组的16.7%(2/12)和0%(P<0.01);直肠癌组中MVD平均为29.6±6.1(16～51),正常对照组为15±4.8(7～22),2组比较差异有显著性意义(P<0.01).HIF-1α、VEGF与CD34的表达呈显著正相关(P<0.01).HIF-1α、VEGF和CD34的表达与肿瘤Dukes分期、淋巴结转移、远处转移显著相关(P<0.05),而与肿瘤的病理类型、细胞分化程度无显著相关性.本组病例5年生存率为63.6%,其中HIF-1α、VEGF表达阳性组和阴性组的5年生存率分别为41.38% vs 80%和37.93% vs 86.67%,2者比较差异具有非常显著性意义(P<0.01);Cox模型多因素分析表明,HIF-1α、VEGF可能作为临床判断预后的指标.结论本研究结果提示在肿瘤的发生、发展中的缺氧过程诱导了HIF-1α的形成,从而促进靶基因VEGF的转录,导致血管生成增多,进而促进肿瘤生长、浸润和转移;HIF-1α,VEGF可作为判断直肠癌预后的参考指标.     

肺癌中HIF-1α、VEGF表达及其与放射治疗关系的研究进展

为解决非小细胞肺癌放射治疗后期肿瘤乏氧而产生放射耐受,各国学者尝试使用乏氧细胞放疗增敏剂、高压氧疗、中子疗法以及放疗前辅助化疗等方法,但疗效无明显提高。靶向药物的出现看似能解决一定的问题,但往往对自身机体有一定的损伤,并且有同时耐受的现象发生,如何解决这些问题,是肿瘤放化疗研究热点。研究发现,肺癌患者HIF-1α及VEGF蛋白表达情况对于放射治疗中应用增敏剂及治疗方案的制定有一定的意义。文章主要对此综述。     

HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞系MG-63 HIF-1α和VEGF表达的影响

目的：观察缺氧诱导因子HIF—1α反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides，ASODN）在缺氧环境下对骨肉瘤细胞系MG-63 HIF—1α和血管内皮生长因子VEGF表达的影响。方法：设计针对HIF—1α RNA亚基模板序列的反义、正义寡核苷酸（sense oligodeoxynucleotides，SODN），并建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型，观察缺氧培养不同时相HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞系MG-63 HIF-1α和VEGF的表达的影响。RT-PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA水平，免疫组化和免疫印迹方法检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。结果：与常氧组比较。单纯缺氧组及SODN缺氧组的HIF-1α转录水平未见明显改变。蛋白表达水平却随缺氧时间延长明显升高：而VEGF mRNA以及蛋白的表达水平较常氧组均显著增强。然而在ASODN缺氧组。HIF-1α、VEGFmRNA活性以及蛋白的表达水平明显减弱，且HIF-1α蛋白水平与VEGF转录活性有明显的相关性。结论：在缺氧环境下，转染HIF-1α反义寡核苷酸能够抑制HIF-1α活性。从而使VEGF mRNA和蛋白的表达水平明显下降。     

HIF-1α和VEGF在大肠癌组织中的表达及其与血管生成的关系

目的　探讨HIF 1α、VEGF、CD3 4在大肠癌组织中的表达及与血管生成的关系。方法　采用免疫组织化学S P法检测 68例大肠癌组织 ,常规石蜡包埋进行HIF 1α、VEGF、CD3 4免疫组织化学染色。结果　HIF 1α在大肠癌组中的平均表达阳性率为 67.6% ( 4 6/68) ,与正常黏膜比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ;HIF 1α表达随Dukes分期而增强 ;大肠癌组VEGF阳性表达率显著高于正常对照组 ( 72 .1%VS 0 ,P <0 .0 1) ,大肠癌组织中HIF 1α表达与VEGF表达有一致性 (P <0 .0 5 )。结论　HIF 1α可通过诱导VEGF生成而刺激大肠癌血管生成 ,可能在大肠癌发生发展中起重要作用     

HIF-1α和VEGF在大肠癌中的表达及其相关性研究

[目的]探讨HIF-1α和VEGF在大肠癌浸润、转移过程中的表达及其相互作用机制。[方法]采用免疫组化SP法检测90例大肠癌组织及其相应癌旁组织中HIF-1α和VEGF的表达。[结果]癌旁组织中HIF-1α的表达均为阴性,大肠癌组织中的阳性表达率为73.33%（66/90）,显著高于癌旁组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。HIF-1α在大肠癌中阳性表达率与临床分期、浸润深度和淋巴结转移有关（P〈0.05）,与大肠癌分化程度无关（P〉0.05）。癌旁组织中VEGF的表达均为阴性,在大肠癌组织中的阳性表达率为70.00%（63/90）,显著高于癌旁组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。VEGF在大肠癌中阳性表达率与临床分期、浸润深度和淋巴结转移有关（P〈0.05）,与大肠癌分化程度无关（P〉0.05）。大肠癌组织中HIF-1α和VEGF蛋白表达具有正相关性（r=0.592,P〈0.05）。[结论]HIF-1α与VEGF的表达率均随着大肠癌浸润深度、淋巴结转移和临床分期的发展而增高,共同参与了大肠癌的发生、发展,可作为大肠癌浸润和转移的重要判定指标。HIF-1α可能通过上调VEGF的蛋白表达,促进大肠癌血管生成而促进大肠癌的转移,抑制HIF-1α的表达可能是治疗大肠癌的新手段。     

大肠锯齿状腺瘤和腺癌组织HIF-1α表达及其与VEGF和血管密度相关性的探讨

目的:探讨大肠锯齿状腺瘤和腺癌组织HIF-1α的表达及其与VEGF和血管密度的关系。方法:采用免疫组化法检测HIF-1α和VEGF蛋白的表达。用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞并计数。结果:锯齿状腺瘤HIF-1α蛋白阳性率(62.5%)显著高于正常大肠黏膜组(13.3%),χ2=15.78,P<0.01;显著低于大肠癌组(85.0%),χ2=4.8,P=0.028。锯齿状腺瘤VEGF蛋白阳性率(53.1%)显著高于正常大肠黏膜组(10.0%),χ2=13.17,P<0.01;而与大肠癌组(72.5%)比较差异无统计学意义,χ2=2.89,P=0.089。HIF-1α表达与VEGF正相关(r=0.317,P=0.041);与MVD正相关,r=0.468,P=0.02。结论:HIF-1α促进肿瘤血管生成,参与大肠锯齿状腺瘤癌变。     

子宫内膜癌组织HIF-1α和VEGF及其受体表达与微血管密度相关性的探讨

目的:研究HIF-1α、VEGF及其受体KDR和微血管密度(MVD)在子宫内膜癌组织中的表达及相互关系.方法:采用免疫组化法检测HIF-1α、VEGF、KDR在39例子宫内膜癌、18例子宫内膜不典型增生及17例正常子宫内膜组织中的表达状况,应用CD34标记MVD.结果:HIF-1α、VEGF、KDR、MVD在子宫内膜癌组织中呈高表达,显著高于子宫内膜不典型增生组织及正常子宫内膜组织,P值均<0.05,在子宫内膜癌组织中HIF-1α、VEGF、KDR的阳性表达率随肿瘤手术-病理分期期别的升高而增高,其中I期与Ⅱ～Ⅳ期比较差异有统计学意义,P=0.014 9.结论:HIF-1α、VEGF、KDR和MVD在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生及子宫内膜癌组织中的表达依次增高,提示HIF-1α、VEGF、KDR和MVD在子宫内膜癌发生发展中有重要作用,可将它们视为子宫内膜癌潜在侵袭性的肿瘤标志.     

HIF-1α及VEGF在食管癌组织中的表达及其与放疗疗效之间的关系

目的 研究HIF-1α与VEGF在食管癌组织中的表达及与放射治疗疗效之间的关系.方法采用PCR和Western Blot法分析放疗前食管癌患者癌组织中HIF-1α与VEGF的mRNA和蛋白表达水平.采用6 MV-X线,常规分割放疗.分割剂量为2Gy/次,1次/d,5次/周.总剂量DT 60～70 Gy.结果36例食管癌...     

HIF-1α、VEGF在食管鳞癌组织中的表达及与放疗疗效的关系

目的：探讨食管鳞状细胞癌患者缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）表达相关性及与放疗疗效的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测50例食管鳞状细胞癌组织标本中HIF-1α、VEGF蛋白的表达．结合临床病理特征和随访资料进行分析。结果：HIF-1α主要表达于细胞核；VEGF主要表达于细胞质，阳性表达率分别为68．0％和74．0％．两者存在显著正相关性。HIF-1α表达与临床分期、放疗近期疗效和预后有关，与病理类型、病变长度无明显关系。HIF-1α阳性组。VEGF表达强度及放疗后局部未控率均高于HIF-1α阴性组；HIF-1α阳性和阴性表达组1、2、3年生存率分别为38．2％、6．0％、0．0％和81-3％、54．2％、7．9％；HIF-1α表达阳性和阴性组食管癌患者放疗后近期完全缓解率、中位生存时间及95％的可信区间分别为18．8％、10个月（7．9，12．1）和81．3％、25个月（15．6．34．4）。结论：食管鳞状细胞癌组织中存在HIF-1α蛋白表达，HIF-1α蛋白阳性表达是食管鳞癌患者预后不良的标志．其高表达与食管鳞癌放射抗拒性有密切关系。     

HIF-1α基因干扰对大鼠CBRH-7919肝癌细胞HIF-1α与VEGF表达影响的研究

目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对肝癌细胞在缺氧状态下表达HIF-1α及血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法:选用大鼠CBRH-7919肝癌细胞株作为研究对象,利用氯化钴(CoCl2)模拟缺氧状态,构建3组特异性较强的HIF-1α siRNA表达载体,采用小分子RNA干扰技术沉默细胞HIF-1α的基因表达,分别利用real time RT-PCR和蛋白质印迹法检测肝癌细胞HIF-1α和VEGF在mRNA及蛋白水平的表达变化.结果:在不同浓度CoCl2模拟缺氧条件下,随着CoCl2浓度的增高及时间的推移,肝癌细胞HIF-1α和VEGF的表达(mRNA及蛋白水平)较常氧对照组(0 μmol/L CoCl2)显著增多,差异均有统计学意义,P＜0.05.应用3组不同HIF-1α和siRNA表达载体转染缺氧条件下的肝癌细胞后,细胞的HIF-1α和VEGF的基因(mRNA)表达量与未转染HIF-1α siRNA表达载体对照组相比较明显减少,同步检测两者的蛋白表达亦明显减少,与对照组差异均有统计学意义,P＜0.05.结论:缺氧可以诱导肝癌细胞HIF-1α和VEGF的表达,siRNA沉默HIF-1α能显著抑制缺氧状态下诱导的VEGF表达.     

子宫内膜样腺癌组织HIF-1α和VEGF及ERα的表达

目的:研究HIF-1α、VEGF和ERα在子宫内膜样腺癌组织中的表达.方法:免疫组化SP法检测子宫内膜样腺癌、不典型增生和正常子宫内膜组织中HIF-1α、VEGF和ERα的表达.结果:HIF-1α在子宫内膜样腺癌组织中的阳性率Ⅰ期为69.4%,Ⅱ期为84.6%,Ⅲ～Ⅳ期为95.2%,Ⅲ～Ⅳ期与Ⅰ期比较差异有统计学意义,P=0.049 1.VEGF表达阳性率Ⅰ期为63.9%,Ⅱ期为76.9%,Ⅲ～Ⅳ期为90.5%,Ⅲ～Ⅳ期与Ⅰ期比较差异有统计学意义,P=0.027 9;HIF-1α和VEGF的表达与月经状况、组织学分级无关.ERα表达与组织学分级有关,G1为91.7%,G2为67.7%,G3为26.7%,差异有统计学意义,P<0.05;与月经状况、手术病理分期无关.HIF-1α和VEGF的表达呈正相关,P=0.000 0,和ERα的表达呈负相关(P=0.048 6).结论:子宫内膜样腺癌中HIF-1α和VEGF呈过表达,ERα表达下降,3者在子宫内膜样腺癌的发生、发展中起重要作用.     

胃癌中缺氧诱导因子-1α表达及其与VEGF的关系

[目的]探讨胃癌组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达及其与血管内皮生长因子（VEGF）的关系。[方法]用免疫组织化学SP法检测80例胃癌中HIF-1α、VEGF的表达，并与30例胃癌旁不典型增生组织、30例胃正常组织作为对照：分析HIF-1α、VEGF与胃癌临床病理因素及预后的关系。[结果]HIF—1α和VEGF在胃癌中的阳性表达分别为47．5％（38／80）和71.3％（57／80），明显高于胃癌旁不典型组织及胃正常组织（P〈0．05）。HIF-1α、VEGF与胃癌的TNM分期以及肿瘤浸润深度、淋巴结转移等相关（P〈0．05），与组织学分级无关。胃癌中HIF—1α与VEGF的表达呈显著性正相关（r=-0．328，P〈0．01）。[结论]HIF—1α、VEGF均在胃癌中过表达并且与胃癌的侵袭、转移及预后密切相关，HIF-1α可能通过上调VEGF的表达，在胃癌的发生、发展中发挥重要作用。     

HIF-1α、VEGF的表达及微血管密度与乳腺癌生物学行为的关系

目的检测缺氧诱导因子_1α(HIF_1α)及VEGF、CD34在乳腺癌的表达,探讨其与缺氧情况下乳腺癌血管生成及其与生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学S_P法检测68例乳腺癌组织中HIF_1α及VEGF的表达,并用CD34抗体标记血管内皮细胞,计数乳腺癌组织中MVD。结果68例乳腺癌标本中有37例(54%)表达HIF_1α;HIF_1α表达组VEGF及CD34表达强度均高于HIF_1α阴性表达组;HIF_1α表达与肿瘤的分化程度及淋巴结转移密切相关(P<0.01)。HIF_1α表达与VEGF、CD34表达之间存在显著相关性。结论HIF_1α在乳腺癌组织中存在着过表达,部分的参与了乳腺癌的演进;HIF_1α通过调节VEGF的表达,在乳腺癌血管生成中发挥重要作用;HIF_1α、VEGF的过表达及高微血管密度(MVD)与乳腺癌的不良发展有关,可能成为预测乳腺癌侵袭、转移及预后的重要指标。     

人食管癌细胞缺氧培养条件下HIF-1α和VEGF表达的研究*

探讨人低分化食管鳞癌细胞系EC- 109、CaEs-17在缺氧条件下,缺氧诱导因子-1 α 及血管内皮生长因子随缺氧时间不同,在基因水平和蛋白水平上的表达。方法:1）体外培养人低分化食管鳞癌细胞系EC- 109、CaEs-17,利用免疫荧光染色方法观察细胞在缺氧培养条件下HIF-1 α 和VEGF蛋白表达情况。2）提取总RNA,逆转录为cDNA ,并进行实时PCR ,观察细胞在不同缺氧时间,hif- 1 α 及vegf 基因表达峰度及相互关系。结果:1）EC- 109、CaEs-17细胞在缺氧培养条件下HIF-1 α 、VEGF蛋白表达增加。2）EC- 109、CaEs-17细胞在缺氧培养条件下hif- 1 α 、vegf 基因表达上调。3）EC- 109、CaEs-17细胞在缺氧条件下vegf 表达峰度上调滞后于hif- 1 α 表达,自缺氧培养8h 起,hif- 1 α 基因表达峰度持续高于vegf 基因表达。结论:缺氧环境是诱导人食管癌细胞缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达上调的因素之一,vegf 基因表达滞后于hif- 1α基因表达。      

大肠腺瘤和腺癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达及其与VEGF、微血管密度的关系

背景与目的:缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1 alpha,HIF-1α)是肿瘤细胞适应缺氧而产生的一种核转录因子,在促进肿瘤新生血管生成中起重要作用。本研究旨在探讨大肠腺瘤和腺癌组织中HIF-1α的表达及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、微血管密度(microvessel density,MVD)的关系。方法:采用原位杂交技术检测HIF-1α mRNA,应用免疫组织化学方法检测VEGF蛋白的表达,用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞并计数MVD。结果:大肠腺癌组织HIF-1α mRNA阳性表达率为67.8％(42/62),腺瘤组织为44.4％(8/18)。腺癌组织从Dukes’A期到Dukes’C+D期HIF-lα mRNA表达阳性率不断增加(P<0.05)。HIF-1α mRNA表达平均阳性率为:腺瘤44.4％;腺癌Dukes’A期41.2％,Dukes’B期72.2％,Dukes’C+D期81.5％。腺癌组VEGF阳性表达率高于腺瘤组(59.7％ vs 33.3％,P<0.005).HIF-1α表达与VEGF呈正相关(r_s=0.768,P<0.01),与MVD呈正相关(r_s=0.683,P<0.05)。结论:HIF-1α及其靶基因 VEGF的过度表达与肿瘤新生血管形成呈正相关,这在大肠腺瘤癌变及大肠腺癌发展过程中可能起重要作用。     

雷帕霉素对人宫颈癌HeLa细胞增殖和HIF-1α及VEGF表达的影响

目的 探讨不同浓度雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用及对HIF-1α、VEGF表达的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测分别以不同浓度雷帕霉素处理的体外培养人宫颈癌HeLa细胞的抑制率,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测各组细胞HIF-1 α、VEGF mRNA和蛋白的表达.结果 不同浓度雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞的生长有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性;随雷帕霉素浓度增加细胞内HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达均呈下调趋势.结论 雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞的生长有抑制作用并呈剂量依赖性,雷帕霉素具有明显下调HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表达的作用.     

缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子表达及其与肺癌生物学行为的相关性研究

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达及其与肺癌生物学行为的相关性。方法采用免疫组织化学方法对68例肺癌组织和50例正常肺组织的HIF-1α及VEGF进行检测。结果肺癌组织中HIF-1α阳性率为69.1%,显著高于正常肺组织(P<0.01);肺癌组织与正常肺组织中VEGF阳性率分别为70.6%和4.0%,差异有统计学意义(P<0.01);HIF-1α和VEGF表达与肺癌组织的临床分期、组织分化及淋巴转移密切相关(P<0.05);肺癌组织HIF-1α和VEGF的表达显著相关(P<0.05)。结论 HIF-1α和VEGF参与了肺癌的发生发展,与肿瘤组织分化、侵袭转移等生物学行为密切相关,可作为反映肺癌预后的重要指标。     

缺氧诱导因子-1α、VEGF表达与胃癌肝转移及肿瘤血管生成的关系

[目的]探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）在胃癌组织中的表达及其意义。[方法]采用免疫组化法检测91例胃癌组织（其中32例伴有肝转移）和20例非肿瘤胃黏膜组织中HIF-1α与VEGF的表达。[结果]HIF-1α在伴有和不伴有肝转移胃癌组织中阳性表达率分别为84.4%和50.8%（P=0.002）;VEGF在伴有和不伴有肝转移胃癌组织中阳性表达率分别为81.3%和54.2%（P=0.01）。HIF-1α阳性组微血管密度（MVD）显著高于HIF-1α阴性组（P=0.0001）;VEGF阳性表达与HIF-1α阳性表达呈正相关（P=0.001）。[结论]在伴有肝转移胃癌组织HIF-1α高表达,其可能通过调节其下游基因VEGF表达参与胃癌的血管形成、浸润和肝脏等远处转移。