Salubrinal通过 eIF2α信号通路治疗非酒精性脂肪肝 #br#

摘要：目的 探讨 Salubrinal对肥胖诱导的非酒精性脂肪肝的疗效。方法 选用 30只雌性 C57BL/6小鼠，随机分 为对照（SCD）组、高脂饮食（HF）组和高脂饮食治疗（HF+S）组。HF组和 HF+S组小鼠给予含脂量为 60%的高脂饮食， 4周肥胖诱导后，HF+S组接受 Salubrinal皮下注射 4周。实验过程中每周测量动物体成分变化，采取静脉血检测血脂 指标，收集皮下、内脏脂肪和肝脏进行湿质量测定。为探索 Salubrinal对肝脏的影响及作用机制，通过 HE、油红 O染 色观察肝脏病理改变，Western blot检测肝组织 eIF2α信号通路相关蛋白 Bip、p-eIF2α、eIF2α、ATF4和 CHOP的表达。 结果 与 SCD组比较，HF组小鼠的血脂水平和脂肪堆积明显增加，Salubrinal治疗后，脂质紊乱情况减轻。同时，肝 脏组织学检查显示，Salubrinal可以明显缓解肝脂肪变性严重程度并抑制异常脂质沉积。此外，Western blot分析表 明，Salubrinal 通过增加 Bip、p-eIF2α/eIF2α 和 ATF4 的表达量，降低 CHOP 的表达水平抑制内质网应激。结论 Salubrinal能够有效缓解肥胖和肝脂肪变性，并通过 eIF2α信号通路调控内质网应激而影响脂质代谢。     

机械加载改善高脂饮食诱导的肥胖相关骨丢失

目的 探究脉冲式关节机械加载对高脂饮食诱导的肥胖小鼠骨丢失的改善作用。方法 将 45只雌性C57BL/6小鼠随机分为普通饮食对照组（Sham组）、高脂饮食模型组（HF组）和高脂加载治疗组（HF+L组）,每组 15只。HF组和 HF+L组高脂饮食喂养 4周后,HF+L组进行 4周的机械加载治疗（加载条件为 1 N,10 Hz,3 min/d,每周连续加载 5 d）。治疗结束后测量 3组小鼠体质量指数（BMI）、全身体脂含量和双侧股骨的骨密度。使用 HE染色和MacNeal’s染色分析观察股骨的组织病理改变,使用 Western blot检测成骨生成相关蛋白［碱性磷酸酶（ALP）、Runt相关转录因子 2（RUNX2）］和脂肪生成相关蛋白［过氧化物酶体增殖物激活受体 γ（PPARγ）、CCAAT/增强子结合蛋白 α（C/EBPα）］的表达。结果 与 Sham组相比,HF组小鼠的体脂含量和 BMI升高,骨密度变化率和骨量变化率显著下降,骨小梁面积明显减少,骨髓脂肪细胞增多。机械加载治疗后,HF+L组的骨密度、骨小梁面积比 HF组明显升高,脂肪细胞的数目和面积比 HF 组显著降低（P＜0.05）。Western blot 分析结果表明,HF+L 组与 HF 组相比,ALP 和RUNX2的表达显著升高,C/EBPα和 PPARγ的表达明显降低（均P＜0.05）。结论 机械加载能够有效缓解由肥胖引起的低骨密度和低骨量,其治疗作用可能通过促进成骨分化和抑制脂肪生成来改善骨丢失。     

阿托伐他汀对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝炎的影响

目的观察阿托伐他汀对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的影响。方法将23只SD大鼠随机分为三组:正常对照组(NC组,8只)、高脂饲养模型组(HF组,7只)和高脂饲养+阿托伐他汀组(HF+AT组,8只)。观察大鼠血清及肝脏各指标的变化,RT-PCR分别检测肝组织核转录因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)mRNA表达。结果与HF组相比,HF+AT组大鼠血清相关指标明显改善,肝组织脂肪变性及炎症活动得以减轻,肝脏NF-κB及TNF-αmRNA表达降低,PPARγmRNA表达增加(P<0.05或P<0.01)。结论阿托伐他汀能减轻高脂诱导的模型大鼠NASH。     

肥胖大鼠非酒精性脂肪肝与血清脂联素和肿瘤坏死因子α的关系及吡格列酮干预

目的观察营养性肥胖大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)与血清脂联素和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系,以及吡格列酮干预后的变化。方法45只SD♂大鼠随机分为3组:吡格列酮组(P)、高脂对照组(HF)和普通饮食组(NC),各15只。P、HF组给予高脂饮食,NC组给予普通饲料;12wk后,P组行吡格列酮10mg·kg-1.d-1灌胃,HF组和NC组用相应溶剂灌胃,均灌胃4wk。检测血清脂联素、TNF-α、游离脂肪酸(FFA)水平和其他生化指标等,计算Lee′s指数、HOMA-IR指数和肝脏指数,行肝脏病理切片和HE染色。结果与NC组相比,HF组大鼠体重、肝脏指数、FPG、FINS、ALT、HOMA-IR和血清TNF-α水平均明显增高,血清脂联素水平降低(P<0.05),肝细胞出现脂肪变性。与HF组比较,P组大鼠肝脏指数、HOMA-IR、FFA、TNF-α均降低,脂联素水平升高(P<0.05),肝细胞脂肪变性明显改善。HF组大鼠血清FFA、TNF-α与HOMA-IR、肝脏指数正相关,脂联素与之负相关(P<0.05)。结论高脂饮食可引起大鼠营养性肥胖、胰岛素抵抗和NAFLD;吡格列酮能提高胰岛素敏感性,改善脂肪细胞变性,可能与降低TNF-α、升高脂联素有关。     

壳聚糖合并中药对实验性大鼠脂肪肝的治疗作用

目的；研究壳聚糖合并中药对脂肪肝的治疗作用。方法：采用小剂量四氯化碳合并高脂饮食建立大鼠脂肪肝模型。给予壳聚糖合并中药治疗，以肝脏的脂质含量及组织形态学变化为衡量标准。观察其治疗效果。结果：四氯化碳合并高脂饮食可引起大鼠肝脏明显的脂肪变性，表现为肝组织甘油三酯（TG），总胆固醇（TC），游离脂肪酸（FFA）含量显著增加，病理检查显示；肝细胞肿胀，内部充满大小不等的脂滴；壳聚糖加中药治疗组大鼠肝脏TG，TC，FFA含量显著降低。肝细胞脂变程度明显减轻。结论：壳聚糖合并中药可明显降低肝脂肪含量，对脂肪肝有明显的治疗作用。     

Egr-1在大鼠酒精性脂肪肝中的表达及水飞蓟素对其干预作用

目的研究Egr-1在大鼠酒精性脂肪肝中的表达,观察水飞蓟素对酒精性脂肪肝肝组织中Egr-1表达的影响。方法 55只大鼠随机分为4组：正常组、模型组、水飞蓟素低剂量组（100 mg.kg-1）、水飞蓟素高剂量组（200 mg.kg-1）,采用高脂饮食联合酒精灌胃6周建立大鼠酒精性脂肪肝模型。全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的活性;HE染色观察肝脏病理学变化;免疫组织化学法检测肝脏Egr-1,TNF-α的表达;蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测肝脏Egr-1的表达情况。结果与正常组比较,模型组肝细胞可见明显脂肪变性,肝细胞肿胀明显（P〈0.01）,血清中ALT、AST活性明显升高（P〈0.01,P〈0.05）,与模型组比较,水飞蓟素高剂量组肝组织病理变化程度明显减轻（P〈0.01）,血清ALT、AST活性明显降低（P〈0.05）;免疫组化结果显示,Egr-1、TNF-α在模型组表达较正常组明显升高（P〈0.01）,而在水飞蓟素高剂量组（200 mg.kg-1）明显减少（P〈0.01,P〈0.05）;Western Blot结果显示,模型组肝组织中Egr-1的表达量明显高于正常组（P〈0.05）,而水飞蓟素高剂量组较模型组Egr-1的表达明显减少（P〈0.05）。结论 Egr-1在酒精性脂肪肝大鼠肝组织中表达明显升高,可能参与了酒精性脂肪肝的发病机制。水飞蓟素对酒精性脂肪肝具有一定的保护作用,其保护机制可能部分地与抑制Egr-1的活化,进而减少TNF-α的形成有关。     

高脂饲料诱发非酒精性脂肪肝实验研究

目的探讨正常饮食和高脂肪饮食对小鼠体重、血糖、葡萄糖耐受、血脂、脂肪肝的影响。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为MD10%和MD45%脂肪含量饲料组,喂养3个月,检测动物体重、血糖、葡萄糖耐受、血脂,以及主要脏器重量及肝脏脂质含量。结果与正常组（MD10%脂肪含量）相比,高脂组（MD45%脂肪含量）动物体重显著增加,出现明显的糖耐量异常和血脂水平升高,同时伴有肝脏脂质含量增加。结论高脂饮食对非酒精性脂肪肝有较强的诱导作用。     

垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及PERK/eIF2α信号通路的影响

摘要：目的:研究垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）/真核翻译起始因子2α（eIF2α）信号通路的影响。方法:60只SD大鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、阳性对照组(异甘草酸镁,15 ml·kg-1)、垂盆草苷低(15 ml·kg-1)、高(60 ml·kg-1)剂量组,每组12只。除正常对照组外,其余各组建立胆道梗阻模型。各给药组灌胃给药,正常对照组和模型组给与等量蒸馏水,1次/d,连续1周。采用HE染色法观察肝脏组织病理形态;PCR检测PERK、eIF2α基因表达水平;黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）;TBA法检测丙二醛（MDA）;四唑盐比色法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）;比色法检测谷胱甘肽（GSH）;TUNEL检测肝细胞凋亡;Western Blot检测肝组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl2关联X蛋白（Bax）、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白表达水平。结果:正常对照组肝脏细胞结构完整;模型组肝细胞结构模糊,有局灶性坏死及炎性细胞浸润;阳性对照组和垂盆草苷低、高剂量组以上情况均有所改善,以垂盆草苷高剂量组效果更佳。与正常对照组相比,模型组PERK和eIF2α基因水平、XOD、MDA、肝细胞凋亡率、Bax、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白水平显著升高（P＜0.05）,SOD、GSH、Bcl-2水平显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,阳性对照组和垂盆草苷低、高剂量组PERK和eIF2α基因水平、XOD、MDA、肝细胞凋亡率、Bax、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白水平显著降低（P＜0.05）,SOD、GSH、Bcl-2水平显著升高（P＜0.05）。垂盆草苷低、高剂量组与阳性对照组相比,各指标差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论:垂盆草苷可改善肝组织病理形态及氧化应激水平,降低肝细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PERK/eIF2α通路的激活有关。     

保肝汤对酒精性脂肪肝预防和治疗作用的实验研究

目的探讨保肝汤对酒精性脂肪肝模型大鼠的预防和治疗作用。方法以酒精灌胃加高脂饮食的方法建立酒精性脂肪肝大鼠模型。分设空白对照组、模型组、阳性药（硫普罗宁片）治疗组、保肝汤预防组和治疗组（设3．30、7．50、15．00g生药／kg三个剂量）。观察指标为：（1）动物一般情况（饮食、活动等）;（2）肝脏系数;（3）肝组织脂肪变性程度;（4）血清ALT和AST水平。结果（1）模型组动物一般情况较空白对照组差,各药物组较模型组均有不同程度改善;（2）模型组与空白对照组比较肝脏系数显著升高（P〈0．01）;药物组与模型组比较：保肝汤预防组和治疗组肝脏系数均不同程度下降（P〈0．05,P〈0．01）;（3）模型组肝组织脂肪变性程度（积分）较空白对照组严重（P〈0．01）,预防组和治疗组脂肪变性程度均较模型组明显减轻（P〈0．05,P〈0．01）;（4）与空白对照组比较,模型组血清AST（P〈0．05）和A坍（P〈0．01）含量显著升高;药物组血清AST和ALT均较模型组明显降低（P〈0．05）。结论保肝汤有预防和治疗酒精性脂肪肝作用。     

红花黄色素改善肥胖小鼠脂肪肝及胰岛素抵抗的研究

摘 要 目的：探讨红花黄色素对饮食诱导肥胖小鼠的体脂、脂肪肝及胰岛素抵抗的影响。 方法: 4周龄雄性C57BL/6小鼠喂以高脂饮食8周,建立肥胖模型,随后进行6周的腹腔注射红花黄色素（100 mg·kg^-1·d^-1）干预。实验终点行腹腔葡萄糖耐量试验（IPGTT）及胰岛素糖耐量（ITT）试验,小鼠处死后,检测体脂、血脂等代谢参数,并采集附睾脂肪及肝脏组织,行HE染色,定量脂肪细胞面积、观察肝脏脂肪变性程度。结果: 红花黄色素可显著降低肥胖小鼠的体质量、体脂含量、脂肪细胞面积、肝脏重量及血脂水平（P<0.05）,并且明显减轻肥胖小鼠肝脏脂肪变性程度,同时,IPGTT及ITT实验显示红花黄色素可显著改善肥胖小鼠的糖耐量异常,增强胰岛素的敏感性（P<0.05）。结论:红花黄色素可显著降低饮食诱导肥胖小鼠的体脂含量,减轻脂肪肝,改善糖耐量异常及胰岛素抵抗。     

高脂诱导性肥胖大鼠的胰岛素敏感性与TNF-α及FFAs水平

目的观察正常大鼠在高脂饮食诱导下形成肥胖后的胰岛素敏感性及其TNF-α、FFAs的变化。方法9周龄健康雄性Wistar大鼠16只,随机分为正常饲养组(NC熏n=8)和高脂饲养组(HF熏n=8)。喂养10周,比较两组大鼠体重、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、以及TNF-α、FFAs等的变化。结果经10周高脂喂养,HF组与NC组比较,体重和内脏脂肪组织显著增加(HF组大鼠体重较NC组增加了11.4%,P<0.05;HF组大鼠内脏脂肪组织较NC组增加了20.7%,P<0.01),并出现胰岛素抵抗(HOMA-IR:HF组为8.88±4.25,NC组为3.92±2.26熏P<0.05),空腹FFAs和TNF-α水平显著上升,较NC组分别增加了80.8%(P<0.05)和58.4%(P<0.05),但两组空腹血糖差异无显著性(HF组为7.89±1.46mmol/L,NC组为8.70±1.59mmol/L熏P>0.05)。结论高脂饮食可诱导大鼠肥胖伴胰岛素抵抗,其胰岛素抵抗的形成可能与TNFα、FFAs水平的升高有关。     

Comparative evaluation of the hypolipidemic effects of hydroxyethyl methylcellulose (HEMC) and hydroxypropyl methylcellulose (HPMC) in high fat-fed mice

The effect of hydroxyethyl methylcellulose (HEMC), in comparison with hydroxypropyl methylcellulose (HPMC), on the body weight and lipid metabolism in mice fed with high fat diet was investigated. The animals were given normal control diet (NC group), high fat diet (HF group), or high fat diet supplemented with either HEMC (HF+HEMC group) or HPMC (HF+HPMC group) for 6weeks. At the end of the experimental period, both HF+HEMC and HF+HPMC groups showed reduced body weight, body fat, plasma triglyceride and total cholesterol contents, atherogenic index and free fatty acid level, and increased HDL-cholesterol concentration relative to the HF group. The hypolipidemic effect was partly due to the inhibition of lipogenesis and regulation of adipokine production. These findings demonstrate that compared with HPMC, HEMC was similarly effective in improving the lipid metabolism under high fat diet condition and may be useful in the prevention and treatment of high fat diet-induced hyperlipidemia.     

基于PPARs信号通路探索CB1对脂质代谢的调节作用

目的 研究CB1对PPARs信号通路在高脂饮食诱导肥胖小鼠脂质代谢的调节作用.方法 构建小鼠肥胖模型,观察给予CB1抑制剂利莫那班后小鼠体重、肝脏重量及血清生化指标的变化,并检测CB1、PPARα、PPAR β和PPARγ基因在各组织mRNA水平的表达情况.结果 利莫那班降低了小鼠的体重和肝脏重量(P＜ 0.05);改善了血清生化指标(P＜0.05);各组织中CB1基因mRNA水平的表达降低(P＜ 0.05);PPARα、PPARγ基因在皮下脂肪、内脏脂肪、肝脏组织mRNA水平的表达显著增高(P＜ 0.05);PPAR 3基因在各组织mRNA水平表达情况差异无统计学意义.结论 CB1通过作用于PPARα、PPARγ调节脂质代谢,为临床上脂质代谢紊乱的治疗提供了另一个可靠的理论依据.     

1-Deoxynojirimycin isolated from Bacillus subtilis improves hepatic lipid metabolism and mitochondrial function in high-fat–fed mice

The aim of this study was to determine whether 1-deoxynojirimycin (DNJ) isolated from Bacillus subtilis MORI beneficially influences lipid metabolism and mitochondrial function in the liver of mice fed a high-fat diet in addition to the anti-obesity properties of DNJ. Male C57BL/6 mice (n = 29; 5 weeks old) were randomly assigned to three groups: normal control diet (CTL, n = 10), high-fat diet (HF, n = 10), and high-fat diet supplemented with DNJ (DNJ, n = 9). After 12 weeks, the HF group exhibited higher overall weight gain, of the liver, and of various fat pads than the CTL and DNJ groups did. The HF group also showed greater expression of C/EBPα and CD36 mRNA in the liver than that in the CTL and/or DNJ groups. In addition, mRNA expressions of AAC and FAS were lower, while mRNA expression of PGC-1β was higher in the liver of the DNJ group than that of the HF group. The hepatic expression of p-AMPK/AMPK was higher in the DNJ group than in the HF group. This study provides novel insight into the protective effect of DNJ supplementation against obesity-induced hepatic lipid abnormalities and mitochondrial dysfunction.     

Hypoglycemic and antioxidative effects of hydroxyethyl methylcellulose in mice fed with high fat diet

The effect of hydroxyethyl methylcellulose (HEMC) with different viscosities on the glucose metabolism and antioxidative defense system in high fat-fed mice was investigated. The mice were randomly divided into five dietary groups: normal control diet (NC), high fat diet (HF), and high fat diet supplemented with high viscosity (HF-HV), moderate viscosity (HF-MV), and low viscosity (HF-LV) HEMC fibers. After 6 weeks, the HF group showed a marked increase in body weight gain, body fat, blood glucose concentration, insulin level, and erythrocyte lipid peroxidation rate relative to the NC group. However, supplementation of HEMC in the diet suppressed these high fat-induced hyperglycemia and oxidative stress through enhancement of the activities of hepatic glucokinase and antioxidant enzymes. The hypoglycemic and antioxidative effects increased with increased viscosity of the HEMC consumed. These results illustrate that HEMC with high viscosity may be useful in the management of high fat diet-induced hyperglycemia and oxidative stress.     

二氢杨梅素经激活SIRT1-AMPK通路抑制高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂质沉积

目的探究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂质蓄积的作用及其机制。方法C57BL/6J小鼠60只,随机分为6组(n=10):①ND组:正常饲料;②ND+L-DHM组:正常饲料+低剂量DHM(125 mg·kg^-1·d^-1);③ND+H-DHM组:正常饲料+高剂量DHM(250 mg·kg^-1·d^-1);④HFD组:高脂饲料;⑤HFD+L-DHM组:高脂饲料+低剂量DHM;⑥HFD+H-DHM组:高脂饲料+高剂量DHM。记录小鼠体重;16周后,测空腹血脂;计算体脂重量;肝脏HE和油红O染色;荧光定量PCR和Western blot检测肝脏SIRT1、AMPK、ACC、FAS、SREBP-1和PPARα、CPT1的表达。结果与ND组相比,HFD组小鼠体重、体脂、血清TG、TC、HDL水平明显增加;肝脏内脂肪蓄积增加,肝脏SREBP-1c、FAS、ACC1表达增加,而PPARα、CPT1、SIRT1和AMPK表达下降。经DHM处理后,HFD小鼠上述指标发生逆转;但ND小鼠上述指标无明显改变。结论DHM可能通过激活SIRT1-AMPK通路抑制脂质合成,促进脂质分解,改善高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂质沉积。     

人参茎叶皂苷对小鼠脂肪肝的作用及机制研究

目的探讨人参茎叶皂苷对小鼠脂肪肝的作用及机制。方法小鼠分为正常对照组(NC)和模型组。喂高脂饲料复制脂肪肝模型,12 wk后证实造模成功后,模型组小鼠随机分为高脂组(HF);正常饮食治疗组(NT);人参茎叶皂苷小剂量组(GSL1);人参茎叶皂苷大剂量组(GSL2)。除HF组饲高脂饲料外,其余各组饲基础饲料。GSL1组给予GSL50 mg.kg-1.d-1灌胃,GSL2组给予GSL 100 mg.kg-1.d-1灌胃,其余各组以同等容积蒸馏水灌胃。灌胃2wk后处死所有动物,检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT含量;并观察肝指数和肝组织TC、TG、SOD、MDA含量,肝脏病理形态学改变及氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、细胞色素P450 2E1(CYP2E1)的表达。结果GSL2组可以明显降低肝指数、血脂、肝脂和MDA含量,增加SOD活性,改善小鼠肝脏病理形态学改变,增加肝组织PPARαmRNA水平、降低CYP2E1 mRNA水平。NT组脂肪肝有一定的改善作用,但效果不理想;GSL1组各项指标与NT组相比差异无显著性。结论人参茎叶皂苷可能通过增加肝组织PPARαmRNA表达,降低血脂和肝脂水平;并且通过降低CYP2E1 mRNA表达,抑制脂质过氧化反应,发挥治疗脂肪肝的作用。