应用多重PCR方法快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌

目的 探讨应用多重PCR技术快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌的可靠性.方法 根据结核分枝杆菌种的MTP40基因序列(396bp),分枝杆菌属的32kD基因序列(506bp),结核分枝杆菌复合体群的IS6110序列(984bp),采用3对特异性引物(PT1,T2;MT1,T2;IS5,S6)在同一反应体系和条件下对92株结核杆菌临床分离株和5株非结核分枝杆菌临床分离株进行扩增,并与标准菌株进行比较.结果 92株结核分枝杆菌临床分离株中,0株扩增出与结核分枝杆菌H37RV标准株相同的396bp、506bp、984bp 3条DNA片段,敏感性达97.8%,特异性为100%;5株非结核分枝杆菌临床分离株均扩增出506bp DNA片段,敏感性达100%,特异性为100%.结论 应用多重PCR方法,对结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌进行鉴定,结果快速、准确、可靠,为临床结核病与非结核分枝杆菌病的快速诊断提供了有效的手段,具有很好的临床应用价值.     

胰腺结核1例诊治分析

<正>1 临床资料患者男性,36岁,因纳差、乏力伴皮肤、巩膜黄染、尿黄5 d入院。发病以来,上腹部饱胀不适、恶心,无腹痛、发热、盗汗、咳嗽。既往无结核病史。查体:皮肤、巩膜中度黄染,浅表淋巴结未及,腹平软,无压痛、反跳痛,未触及包块,移动性浊音阴性,肠鸣音正常。化验:丙氨酸转氨酶253.0 U/L,谷草转氨酶171.0 U/L,总胆红素115.1 μmol/L,直接胆红素82.4 μmol/L;肝炎血型学阴性;肿瘤标志物均在正常范围,结核     

结核分枝杆菌耐药机制研究进展

结核病是严重危害人民身体健康的传染性疾病。耐药结核杆菌尤其是耐多药结核杆菌（MDR—TB）的出现和传播是导致结核病发病率升高的重要原因。结核杆菌无法通过质粒的介导从其他细菌获得耐药性，因此染色体介导的耐药是结核杆菌产生耐药的分子基础。目前对结核杆菌耐药机制的研究主要集中在药物作用靶位及相关基因的突变上。     

结核分枝杆菌潜伏感染现状及防控对策

结核潜伏感染(LTBI)是结核病发病的蓄水池,也是持续不断的新发患者的来源。5%～10%的LTBI者一生中会发展为活动性结核病,在LTBI高危人群中发病风险更高。LTBI是结核病疫情难以控制的主要原因之一。2018年,第一次联合国大会结核病高级别会议呼吁重点关注LTBI的管理,控制和减少LTBI者由于重新激活而导致结核病的发病。本文就LTBI的疾病负担、流行现状、发病风险、患者管理及防治策略等进行系统论述,为制定我国LTBI的防治策略提供参考。     

匡氏琼脂PNB培养基用于分枝杆菌直接鉴定效果调查

 目的 调查匡氏琼脂PNB培养基用于痰分枝杆菌直接鉴定的效果.方法 采用匡氏琼脂PNB培养基直接鉴定痰标本中的结核菌和非结核分枝杆菌;并采用琼脂PNB培养基和多重PCR技术对分离物重鉴定.结果 281例痰标本,110例培养阳性,经匡氏PNB培养基直接鉴定,非结核分枝杆菌感染3例(3/110,2.7%),结核菌和非结核分枝杆菌混合感染7例(7/110,6.4%),结核菌感染100例(100/110,90.9%).匡氏琼脂PNB培养基痰菌直接鉴定法对结核菌和非结核菌感染病例的灵敏度和特异性达100%.结论 匡氏琼脂PNB培养基痰菌直接鉴定法,能快速准确鉴定非结核菌感染和混合感染,操作简易,适合推广应用.     

食管结核1例报告

食管结核不多见，常继发于其他部位的结核病，尤以继发于肺结核或颈淋巴结结核为多见，现将我们遇到的一例报告如下。     

结核分枝杆菌耐药基因快速检测研究进展

耐药结核是重大的公共卫生问题并且成为控制结核病的一大障碍［1］。2015年10月28日,WHO 2015年全球结核病报告［2］中指出,2014年全球新发的结核病病例约960万,其中新发耐多药结核（multidrug-resisi-tant tuberculosis MDR-TB）病例48万,新发的MDR-TB中不到13万病例得到检测和报告,而开始接受MDR-TB治疗的病例约为11万。中国每年耐多药结核病患者达到近10万人,其中初治患者耐多药结核为5.7%,复治患者高达25.6%［3］。在很多地区,因为传统的结核药敏实验受生物安全、培养时间长等因素影响,不能常规进行耐药结核检测,甚至最基本的结核菌培养都不能开展,这表明大多数的耐多药结核病例仍然不能确诊,导致临床上的治疗无针对性。目前,具有生物安全要求级别低、检测时间短、敏感性较高等特点的耐药结核分子生物学诊断方法日益受到重视,现就结核分枝杆菌的基因快速检测研究进展综述如下。     

结核分枝杆菌对异烟肼和利福平耐药的研究进展

结核病（Tuberculosis,TB）是由结核分枝杆菌（Mycobac-terium Tuberculosis）引起的世界性传染病,尽管药物等抗结核的有效治疗已经有50多年,结核病仍然是单一致病菌感染导致死亡率最高的感染性疾病。据WHO统计,全世界约每3个人中就有1个人感染了结核分枝杆菌,在某些发展中国家成人中结核分枝杆菌携带率高达80%,其中约5%～10%携带者可发展为活动性结核病。     

结核分枝杆菌异烟肼依赖性的初步调查

目的 调查临床结核菌分离株对异烟肼的依赖状况.方法 采用匡氏琼脂培养基分离痰结核菌并进行结核菌药敏试验,采用匡氏双向琼脂培养基检测结核菌药物依赖性.结果 184例临床分离结核菌株异烟肼依赖包括4种类型.A型:含药管结核菌的生长较对照管明显粗大旺盛,且高浓度管菌落生长优于低浓度管者占6.52%(12/184);B型:含药管结核菌的生长较对照管明显粗大旺盛,且低浓度管菌落生长优于高浓度管者占5.43%(10/184);C型:低浓度管结核菌的生长较对照管明显粗大旺盛,而高浓度管菌落生长劣于对照管者占8.15%(15/184);D型:高浓度管结核菌的生长较对照管明显粗大旺盛,而低浓度管菌落生长劣于对照管者占2.17%(4/184).统计结果显示具有异烟肼依赖特征的临床分离株占全部菌株的22.28%(41/184).结论 结核菌临床分离株中存在异烟肼依赖株,并显示出不同的依赖特征.     

胞内分枝杆菌肺病的CT表现

目的 探讨胞内分枝杆菌肺病的CT特点.方法 收集在本院经临床确诊的37例胞内分枝杆菌肺病患者,回顾性分析其影像学表现.结果 胞内分枝杆菌肺病主要的CT征象为小叶中心结节(97.3%)、支气管扩张(73.0%)和肺斑片状病灶(54.1%),其次为纤维条索灶(43.2%)、≥1 cm结节灶(35.1%)、薄壁空洞(29.7%),而厚壁空洞和胸腔积液却不常见.较为特征性的CT征象为发生于右中叶和(或)左舌叶支气管扩张伴周围小叶中心结节.结论 胞内分枝杆菌肺病的CT表现具有一定的特征性,CT检查对该病的诊断具有重要价值.     

目前结核分枝杆菌感染中重要免疫细胞和细胞因子作用的研究进展

清楚认识结核分枝杆菌感染引起的免疫反应机制十分重要,因此近年来有关这方面的研究较多。本文主要对参与结核分枝杆菌感染自然免疫的巨噬细胞、自然杀伤细胞、中性粒细胞;获得性免疫反应的T淋巴细胞(CD4,CD8);以及-γ干扰素、白介素4,12,10,12,肿瘤坏死因子等细胞因子进行了介绍。     

鼻咽部结核1例

患者,女,39岁.因发热伴左颈部淋巴结肿痛3月余住院.缘于3月前因受凉出现畏寒、发热,咳少许白色泡沫痰,无胸痛及咯血,每于午后及晚间发热,体温波动于37.0℃～40.0℃,盗汗,伴左侧颈部淋巴结肿大,疼痛,先后在两家医院给予抗生素等治疗无效.我院以发热待查收治.体检:T 39.0℃,P 94/min,R 20/min,BP 15/11 kPa,余无特殊.     

重组结核分枝杆菌多表位肽的免疫原性研究

目的探讨纯化的重组结核分枝杆菌多表位肽激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型结核疫苗的设计打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的重组表达多表位肽刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多表位肽的免疫原性。结果以刺激系数(SI)>3为界,多表位肽(10μmol)能刺激全部10例HLA-A*0201阳性(A2+)结核菌素阳性(PPD+)健康个体的PBMC发生增殖,SI为46.2±5.6;增殖反应明显高于单肽(平均SI为10.2±2.3)以及PPD(平均SI为15.6±3.6)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在多表位肽诱导的CTL细胞毒活性分析中以负载抗原肽(10μmol)的T2细胞作为靶细胞,多表位肽诱导的CTL作为效应细胞,多表位肽能诱导全部的10例A2+PPD+健康个体中CTL杀伤活性,平均活性分别为(86.2±9.6%),显著高于单肽[平均为(25.4±3.6)%]和PPD[平均为(22.6±2.8)%](P<0.01)。结论重组优化多表位肽在细胞水平具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性。     

链霉素对结核分枝杆菌sRNA表达影响的研究

目的：研究链霉素对结核分枝杆菌非编码sRNA表达量的影响,探讨sRNA是否参与细菌与药物的相互作用。方法基于结核分枝杆菌标准菌株H37Rv的高通量测序结果,选出表达量估计值较高的4个sRNA作为研究对象,根据链霉素的最小抑菌浓度（MIC）对标准菌株H37Rv进行不同浓度和不同时间的链霉素诱导,提取各组菌液的总RNA,通过实时定量逆转录聚合酶链反应（ qRT－PCR）检测4种sRNA在各组中的表达量,比较不同抑菌浓度和不同时间的链霉素作用下sRNA的表达量差异。结果当链霉素浓度在1／2MIC时对结核分枝杆菌的生长产生明显抑制作用;在4种sRNA中,MTS2823表达量最高,F6表达量相对较低;MTS1338在4MIC浓度的链霉素处理18 h即出现表达上调;在4MIC浓度链霉素作用6 d后,MTS1338和mcr11表达量分别出现（4．80±1．14）倍和（2．91±0．86）倍上调,而MTS2823表达下调。在各组药物处理组中F6表达量的变化均不明显。结论链霉素对结核分枝杆菌sRNA的表达可产生促进或抑制作用,提示sRNA可对某些基因进行转录后调控,促进或拮抗链霉素对结核分枝杆菌的作用。     

非结核分枝杆菌肺病的 MSCT 表现及诊断

目的：探讨非结核分枝杆菌（NTM）肺病的CT表现特点。方法回顾性分析在本院经MSCT扫描,并经双相培养基菌群鉴定明确诊断为NTM肺病的患者42例（NTM肺病组）,与随机抽取的同期结核菌培养阳性并经菌群鉴定为肺结核的初治患者60例（肺结核组）的资料进行对照,并对9种C T征象检出及病灶分布特点进行分析、总结。对结果进行统计学分析,P＜0．05为差异有统计学意义。结果 NTM肺病组女性多见（χ2＝5．500,P＝0．019）,平均年龄高于肺结核组,差异有统计学意义（ t＝3．456, P＝0．001）。NTM肺病组在中叶、舌段检出率明显高于肺结核组（χ2＝8．361,P＝0．004）。 Logistic回归分析结果显示支气管扩张和支气管狭窄或闭塞是NTM肺病的独立危险因素,是与肺结核区分的重要征象。结论 NTM 肺病CT表现有一定的特点,对临床诊断有提示作用。     

颈脊髓内结核误诊1例报告

病例　男性 ,2 8岁 ,藏族 ,进行性四肢无力 ,大小便障碍 3个月入院。查体 :双侧肩胛岗及第 2前肋以下皮肤感觉消失 ,双上臂、前臂的外侧、前侧及各手指感觉减退 ,双侧三角肌肌力为 3级 ,肱三头肌 2级 ,肱二头肌 4级 ,各手指屈、伸、展、收及拇指对掌肌力为 0级 ,双下肢肌力为 0级 ,腹壁反射消失 ,肛门无主动收缩 ,双侧巴彬斯基征阳性。血沉 8mn/h ,抗结核抗体阴性。脑脊液检查 :蛋白质2 4 5g/L ,糖 2 6 3mmol/L ,氯化物 14 3 2mmol/L ,细胞数正常。颈椎、胸椎X光片及CT检查均末见异常。椎管造影CT检查示 :颈 6水平椎管阻塞 ,造影剂呈…     

结核分枝杆菌特异PE/PPE蛋白家族研究进展

结核分枝杆菌（Mycobacterium. tuberculosis,MTB）是结核病的病原菌。富含甘氨酸的独特蛋白质家族——PE/PPE蛋白家族编码基因约占整个MTB菌基因组的10%,该蛋白家族可能是细菌毒力和抗原变异的主要来源,对其结构和生物学功能的研究将对结核感染的血清学诊断和结核菌苗的开发具有重要意义。     

两种染色法在分枝杆菌检测中的临床应用价值

目前,临床上结核病细菌学的诊断主要采用抗酸染色法,即萋-尼染色法,但其检出率偏低,尤其是在标本含菌量较少时。本研究采用快速荧光染色液检测420例痰液标本,并与萋-尼染色法进行对比,以探寻分枝杆菌的最佳检测方法。1材料与方法收集2010年10-12月解放军309医院收治的初