长链非编码RNA HOTAIR抑制膀胱尿路上皮癌对阿霉素的敏感性

目的:研究长链非编码RNA HOTAIR在膀胱尿路上皮癌中的表达,明确其对膀胱尿路上皮癌对阿霉素敏感性的调控作用.方法:HOTAIR基因在膀胱尿路上皮癌及癌旁组织中的表达由实时定量PCR法检测.将HOTAIR基因的表达载体和沉默载体分别转染膀胱尿路上皮癌J82细胞,实时定量PCR验证转染效果.应用MTT法检测HOTAIR基因表达改变对于J82细胞的增殖能力及对阿霉素敏感性的调控作用.结果:HO-TAIR基因在膀胱尿路上皮癌表达显著上调.HOTAIR基因的表达载体和沉默载体能够显著上调或沉默HO-TAIR基因的表达.HOTAIR高表达能够促进J82细胞增殖,抑制J82细胞对阿霉素的敏感性;而HOTAIR表达沉默的J82细胞增殖能力下调明显,对阿霉素的敏感性明显增加.结论:长链非编码RNA HOTAIR在膀胱尿路上皮癌中高表达,HOTAIR能够作为癌基因促进膀胱尿路上皮癌的细胞增殖能力并抑制膀胱尿路上皮癌对阿霉素敏感性.     

长链非编码RNA GAS5对膀胱尿路上皮癌细胞的多柔比星耐药性研究

目的:研究长链非编码RNA-Growth arrest-specific 5(GAS5)对膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)细胞的多柔比星耐药性的调控作用.方法:实时定量PCR法检测GAS5基因在BUC组织及细胞中的表达.将GAS5基因的表达载体转染多柔比星耐药的BUC细胞T24/DOX,实时定量PCR验证转染效果.MTT 法检测T24/DOX细胞对多柔比星的耐药性.应用0.5 μg/ml多柔比星处理T24/DOX细胞,流式细胞仪检测T24/DOX细胞的凋亡率,Western blot法检测T24/DOX细胞中Bcl2蛋白的表达.结果:与CCC-HB-2细胞相比,GAS5基因在J82和T24细胞中的表达显著下调,而其在T24/DOX细胞中表达下调更为显著.GAS5基因的表达载体能够显著上调T24/DOX细胞中GAS5基因的表达.GAS5高表达能够抑制T24/DOX细胞对多柔比星的耐药性.GAS5高表达能够显著促进多柔比星诱导的T24/DOX细胞的凋亡,并抑制抗凋亡蛋白Bcl2的表达.结论:长链非编码RNA GAS5在BUC中低表达,且与BUC的化疗耐药相关,其过表达能够抑制BUC细胞的多柔比星耐药性.     

沉默TUG1对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭的影响

目的:研究长非编码RNA牛磺酸上调基因1(Taurine-upregulated gene 1,TUG1)对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭的影响.方法:通过RNA干涉技术沉默Hela细胞中TUG1的表达,通过荧光实时定量PCR(RT-QPCR)检测Hela细胞中TUG1的沉默效果;MTT法检测沉默TUG1对Hela细胞增殖的影响,流式细胞术检测TUG1对Hela细胞凋亡的影响,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化.结果:TUG1-siRNA可有效沉默TUG1在Hela细胞的表达,沉默Hela细胞中TUG1的表达可以明显抑制Hela细胞的增殖及侵袭能力,而促进Hela细胞的凋亡能力.结论:TUG1在宫颈癌的进展及转移中发挥着重要作用.     

LncRNA TUG1靶向miR-138-5p调控胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1（TUG1）和微小RNA 138-5p（miR-138-5p）在胰腺癌组织中的表达及其对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:应用RT-qPCR法检测胰腺癌组织及其细胞系中TUG1和miR-138-5p表达水平。通过小干扰RNA下调PANC-1细胞中TUG1水平或转染miR-138-5p mimics至PANC-1细胞，MTT、Transwell法检测细胞活力、迁移和侵袭。starBase v2.0在线预测和双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA TUG1和miR-138-5p的靶向关系。共转染TUG1-siRNA和miR-138-5p mimics至PANC-1细胞，MTT、Transwell法检测细胞活力、迁移和侵袭。结果:在胰腺癌组织及其细胞系中，TUG1表达上调（P<0.05）而miR-138-5p表达下调（P<0.05）。在PANC-1细胞中敲减TUG1或过表达miR-138-5p，细胞活力、迁移和侵袭能力下降（P<0.05）。starBase v2.0在线预测和双荧光素酶报告基因实验结果表明，TUG1可靶向调控miR-138-5p表达。MTT、Transwell实验结果显示，降低miR-138-5p的表达可逆转TUG1-siRNA对PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:敲减TUG1能够通过上调miR-138-5p水平抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

长链非编码RNA TUG1通过吸附miR-145对XB1702细胞放射敏感性影响

目的 研究长链非编码RNA TUG1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法 运用qRT-PCR法检测宫颈癌细胞XB1702及正常子宫内膜基质细胞ESC中TUG1和miR-145表达。实验分为转染si-NC组、转染si-TUG1、转染si-NC并照射、转染si-TUG1并照射、共转染si-TUG1和anti-miR-NC和共转染si-TUG1和anti-miR-145组。用脂质体法转染至XB1702细胞。克隆形成实验检测各组细胞存活分数,流式细胞术检测各组细胞凋亡。双荧光素酶报告基因检测各组细胞荧光活性。结果 与ESC细胞相比,XB1702细胞中TUG1表达升高,miR-145表达降低;沉默TUG1可显著提高XB1702细胞存活分数、促进凋亡,增强放射敏感性。TUG1可靶向调控miR-145表达,抑制miR-145可逆转沉默TUG1对XB1702细胞的增殖抑制、凋亡促进及增敏作用。结论 沉默长链非编码RNA TUG1可增强宫颈癌细胞放射敏感性,其机制可能与靶向miR-145有关,将可为宫颈癌放疗提供靶点。     

长链非编码RNA TUG1通过吸附miR-145对XB1702细胞放射敏感性影响

目的 研究长链非编码RNA TUG1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法 运用qRT-PCR法检测宫颈癌细胞XB1702及正常子宫内膜基质细胞ESC中TUG1和miR-145表达。实验分为转染si-NC组、转染si-TUG1、转染si-NC并照射、转染si-TUG1并照射、共转染si-TUG1和anti-miR-NC和共转染si-TUG1和anti-miR-145组。用脂质体法转染至XB1702细胞。克隆形成实验检测各组细胞存活分数,流式细胞术检测各组细胞凋亡。双荧光素酶报告基因检测各组细胞荧光活性。结果 与ESC细胞相比,XB1702细胞中TUG1表达升高,miR-145表达降低;沉默TUG1可显著提高XB1702细胞存活分数、促进凋亡,增强放射敏感性。TUG1可靶向调控miR-145表达,抑制miR-145可逆转沉默TUG1对XB1702细胞的增殖抑制、凋亡促进及增敏作用。结论 沉默长链非编码RNA TUG1可增强宫颈癌细胞放射敏感性,其机制可能与靶向miR-145有关,将可为宫颈癌放疗提供靶点。     

长链非编码RNATUG1对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响

目的: 探究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1（long non-coding RNA taurine up-regulated gene 1,lncRNA TUG1）在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法: 收集2016 年3 月至2017 年12 月在江西省赣州市人民医院行胃部手术的病理检查确诊胃癌患者40 例,取患者胃部肿瘤组织及其相应癌旁组织（距肿瘤边缘>2 cm处）,用qPCR检测胃癌组织标本和胃癌AGS细胞中lncRNA TUG1 表达水平。向AGS细胞中转染lncRNA TUG1 过表达质粒和TUG siRNA,借助CCK-8、qPCR 和流式细胞术检测lncRNA TUG1 对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。结果: 胃癌组织中lncRNA TUG1 表达水平显著高于癌旁组织,其与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤浸润程度、淋巴转移、肿瘤分化程度和TNM分期等因素均不相关。过表达lncRNA TUG1 显著抑制AGS胃癌细胞中CDKN1A、BAX和Caspase-3 表达、减少G1 期细胞比例和增加S期细胞比例、提高细胞增殖活力、降低细胞凋亡率;而干扰敲减lncRNA则显著促进细胞中CDKN1A、BAX和Caspase-3 表达、增加G1 期细胞比例和减少S期细胞比例、降低细胞增殖活力、升高细胞凋亡率。结论：胃癌组织中高表达的lncRNA TUG1 促进胃癌细胞增殖而抑制细胞凋亡。     

沉默长链非编码RNA HULC增加脑胶质瘤对替莫唑胺的敏感性

目的:研究HULC在脑胶质瘤中的表达,探讨HULC对脑胶质瘤对替莫唑胺敏感性的影响.方法:Real-time PCR检测HULC基因在脑胶质瘤组织中的表达.构建HULC基因表达沉默载体sh-HULC并转染U251细胞,Real-time PCR检测转染效果.MTT法检测HULC基因表达沉默对于U251细胞的增殖能力及对替莫唑胺敏感性的影响.结果:HULC基因在脑胶质瘤表达显著上调,HULC的高表达与脑胶质瘤的低分化及高分期相关.HULC基因的表达沉默载体能够显著沉默HULC基因的表达.HULC表达沉默的U251细胞的增殖活力下调明显,对替莫唑胺的敏感性明显增加.结论:长链非编码RNA HULC在脑胶质瘤中高表达,沉默其表达能够抑制脑胶质瘤细胞的增殖活力并提高脑胶质瘤细胞对替莫唑胺敏感性.     

沉默lncRNA TUG1对肾透明细胞癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的:探究沉默lncRNA TUG1对肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法:选用37例ccRCC组织及癌旁组织样本,通过提取样本总RNA并行逆转录及转染,利用qRT-PCR检测lncRNA TUG1在ccRCC组织、细胞系及癌旁组织中的表达,并通过CCK-8法、流式细胞检测法及划痕实验检测沉默lncRNA TUG1对ccRCC细胞A704、A498增殖、凋亡及迁移的影响,采用统计软件进行数据处理,探究lncRNA TUG1在ccRCC中的表达及临床意义。结果:qRT-PCR检测lncRNA TUG1表达情况,结果显示:lncRNA TUG1在ccRCC组织中的表达显著高于癌旁组织,在肾细胞癌细胞系A704和A498中的表达明显高于正常细胞系HK2,差异有统计学意义（P＜0.05）;CCK-8检测细胞增殖情况,结果显示:A704和A498细胞经转染干扰后细胞增殖活性较对照组显著降低（P＜0.05）,沉默lncRNA TUG1可抑制细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况,结果显示:A704和A498细胞凋亡比例较空白对照组明显增多（P＜0.05）,沉默lncRNA TUG1可促进细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移能力,结果显示:A704和A498细胞迁移能力较空白对照组降低（P＜0.05）,沉默lncRNA TUG1可抑制细胞迁移。结论:沉默lncRNA TUG1可诱导ccRCC细胞凋亡,抑制其增殖、迁移,可作为临床研究的新靶点。     

lncRNA TUG1对肝癌细胞增殖及自噬水平的影响

目的:检测长链非编码RNA牛磺酸上调基因（taurine upregulated gene 1,TUG1）在肝癌组织中的表达情况,证实TUG1对肝癌细胞增殖和自噬能力的影响。方法:实时定量PCR检测50例肝癌组织标本以及相应癌旁组织中TUG1的表达水平以及在肝癌细胞系中的表达情况。通过将构建的TUG1过表达质粒转染肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2,验证转染效率并采用CCK-8法检测肝癌细胞增殖情况;Western blot检测自噬标志蛋白（LC3-Ⅱ/Ⅰ）表达变化;通过实时定量PCR筛选表达差异最显著的自噬相关基因并采用Western blot验证。结果:肝癌组织中TUG1的表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。TUG1能够显著促进肝癌细胞增殖能力（P<0.05）;并且过表达TUG1后增加了LC3-I向LC3-Ⅱ的转化,促进自噬水平的发生（P<0.05）;TUG1能够显著上调ATG7的基因和蛋白的表达。结论:在肝癌组织中TUG1表达高于癌旁组织;在体外细胞实验中发现,TUG1能够促进肝癌细胞增殖能力,并通过上调ATG7的表达诱导自噬的发生。     

PRR11在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨富含脯氨酸蛋白11(PRR11)在膀胱癌组织中的表达及其基因沉默对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用免疫组织化学法检测57例膀胱尿路上皮癌组织及其癌旁组织中PRR11蛋白的表达,并分析PRR11蛋白表达水平与患者临床病理特征的关系.qRT-PCR和Western blot检测人永生化膀胱上皮细胞株S...     

lncRNA TPTEP1通过抑制miR-129-5p影响膀胱癌T24细胞的增殖和侵袭

目的:分析长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lncRNA) TPTEPl在膀胱癌组织和细胞的表达,观察其对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制.方法:收集2017年8月至2019年10月在武汉市东西湖人民医院泌尿外科接受手术治疗的43例膀胱癌患者的癌与癌旁组织标本,采用实时荧光定量...     

lncRNA CTD-2196E14.5通过海绵吸附miR-744-5p抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭

目的:探讨CTD-2196E14.5通过调控miR-744-5p表达对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:通过检索TCGA数据库分析膀胱癌组织及癌旁组织中CTD-2196E14.5的表达水平及其与膀胱癌患者总生存期的关系。采用荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction, qPCR)检测膀胱癌细胞株MGH-U3、T24、253J、J82和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中CTD-2196E14.5的表达水平。采用脂质体介导技术将pcDNA-CTD-2196E14.5质粒、pcDNA空载质粒分别转染253J细胞,即CTD-2196E14.5组和NC组。采用MTT法、流式细胞术和Transwell实验检测CTD-2196E14.5对膀胱癌253J细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响。应用lncRNA2function软件预测和双荧光素酶报告基因实验验证CTD-2196E14.5与miR-744-5p的靶向关系。qPCR检测miR-744-5p的表达。Western blotting检测AMPK信号通路蛋白和细胞周期...     

微小RNA-106a在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌T24细胞增殖、侵袭作用的影响

目的:观察微小RNA-106a（miR-106a）在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌T24细胞增殖、侵袭作用的影响。方法:提取35例膀胱癌组织及正常膀胱组织中的总RNA，实时定量RT-PCR法检测miR-106a在膀胱癌组织及正常膀胱组织中的表达量；培养膀胱癌T24细胞，分成实验组及对照组，实验组转染miR-106a mimics，对照组转染空白脂质体，噻唑蓝(MTT)法检测转染miR-106a mimics后对T24细胞增殖的影响，流式细胞仪检测T24细胞周期变化，Transwell侵袭小室检测T24细胞侵袭能力。结果:膀胱癌组织中miR-106a的表达量显著低于正常膀胱组织。膀胱癌T24细胞转染miR-106a mimics后，T24细胞增殖能力降低，细胞周期停滞于G1期，Transwell侵袭小室检测提示T24细胞侵袭能力降低。结论:miR-106a的表达量在膀胱癌组织中减少，miR-106a过表达抑制膀胱癌T24细胞的增殖及侵袭能力。     

敲低BTF3基因表达对膀胱癌细胞T24生物学功能的影响

目的:探究BTF3基因对人膀胱癌细胞株T24生物学功能的影响。方法:通过慢病毒感染的方法,构建BTF3基因低表达的T24细胞株。通过体外平板克隆实验检测克隆形成,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:RT-PCR和Western blotting证实BTF3低表达的T24细胞株构建成功。与对照组的细胞相比,敲低BTF3的表达能够抑制T24细胞克隆形成和细胞增殖,促进细胞凋亡。结论:我们的研究结果证明了BTF3在人膀胱癌细胞株T24中的重要性,提示BTF3不仅可能与膀胱癌的发生有关,而且可能成为膀胱癌潜在的治疗靶点和生物标记物。