胃肠安联合替加氟对结肠癌HT29细胞体内外抑制作用的研究

目的研究胃肠安联合替加氟对结肠癌HT29细胞的体内外抑制作用。方法采用MTT法测定胃肠安联合替加氟对结肠癌HT29细胞的抑制作用,并采用流式细胞仪检测结肠癌HT29细胞中CD133+的表达情况。建立结肠癌HT29细胞裸鼠模型,对照组尾静脉注射生理盐水,0.2 mL/次,2次/周。替加氟组尾iv替加氟注射液,36 mg/kg,1次/周;胃肠安丸组,用纯净水将按胃肠安丸配成4 mg/kg,ig 0.2 mL/d;胃肠安+替加氟组尾iv替加氟注射液,36 mg/kg,1次/周;同时,用纯净水将按胃肠安丸配成4 mg/kg,ig 0.2 mL/d。观察胃肠安联合替加氟对荷瘤裸鼠生存状况和结肠癌HT-29细胞的影响。结果与对照组比较,替加氟组、胃肠安组、胃肠安+替加氟组抑制结肠癌HT-29细胞的增殖能力明升高,差异有统计学意义(P0.05);胃肠安+替加氟组明显高于单独使用替加氟组、胃肠安组,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,替加氟组、胃肠安组、胃肠安+替加氟组的CD133+细胞比例明显降低,差异有统计学意义(P0.05);胃肠安+替加氟组明显低于单独使用替加氟组、胃肠安组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,胃肠安组、替加氟组、胃肠安+替加氟组的实体瘤质量明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);胃肠安+替加氟组的实体瘤质量明显低于胃肠安组和替加氟组,差异有统计学意义(P0.05)。结论胃肠安联合替加氟对结肠癌HT29细胞及其干细胞的增殖有抑制作用。     

大蒜素联合替加氟对人HepG2肝癌细胞增殖的影响

目的观察大蒜素联合替加氟对人HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法体外培养人HepG2肝癌细胞,细胞分为4组:对照组、大蒜素组、替加氟组和联合组,于培养24和48 h后,MTT法检测大蒜素、替加氟及两药联合对人HepG2肝癌细胞增殖的影响。结果大蒜素组和替加氟组的细胞增殖抑制率均明显高于对照组(P<0.05),联合组细胞增殖抑制率明显强于单独用药组(P<0.05)。结论大蒜素联合替加氟能够显著抑制人HepG2肝癌细胞的增殖。     

替加氟衍生物M1的合成及其体内外抗肿瘤活性研究

<正>化疗是治疗癌症的重要手段之一,替加氟为常用的一线化疗药物,但其不良反应严重,如何使其在发挥抗肿瘤作用的同时,减少毒副作用成为众多学者关注的焦点。本研究以替加氟为母体,分子中引入1,3,4-噻二唑类杂环和酰氨基团,设计合成新型化合物M1,使其抗肿瘤活性叠加,毒性降低,并对其体内外抗肿瘤活性进行了研究,以期为合成高效低毒的抗肿瘤药物提供实验依据。     

消癌平胶囊联合顺铂和替加氟治疗晚期食管癌的临床研究

目的探讨消癌平胶囊联合顺铂和替加氟注射液治疗食管癌的临床疗效。方法选取2016年4月—2018年4月在重庆市开州区人民医院治疗的食管癌患者86例,根据用药方案的差别分为对照组(43例)和治疗组(43例)。对照组静脉滴注顺铂注射液,80 mg/m~2,1次/d,连续3周,休息1周,每4周为1个周期,同时静脉滴注替加氟注射液,15～20 mg/kg溶于生理盐水500 mL中,1次/d。治疗组在对照组基础上口服消癌平胶囊,4粒/次,3次/d。两组患者均治疗3个周期。观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)、细胞角蛋白19的可溶性片段(CYFRA21-1)、糖抗原199(CA199)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、骨桥蛋白(OPN)、可溶性白细胞介素-2受体(s IL-2R)及QLQ-C30和KPS评分。结果治疗后,对照组客观缓解率和临床获益率分别为41.86%、72.09%,均分别显著低于治疗组的69.77%、86.05%,两组比较差异均具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者血清CEA、SCC-Ag、CYFRA21-1、CA199、VEGF、MMP-9、OPN、sIL-2R水平均显著降低(P0.05),且治疗组患者这些因子水平明显低于对照组(P0.05)。治疗后,两组QLQ-C30量表和KPS评分均明显升高(P0.05),且治疗组患者QLQ-C30和KPS评分明显高于对照组(P0.05)。结论消癌平胶囊联合顺铂与替加氟治疗食管癌可有效改善患者症状,降低机体肿瘤标志物水平和侵袭细胞因子水平,有利于提高患者生活质量。     

恩度联合放疗对鼻咽癌裸鼠成瘤的抑制作用及机制

目的:观察恩度联合放疗对鼻咽癌裸鼠成瘤的抑制作用及对血管内皮生长因子(VEGF)和生存素SurvivinmRNA表达的影响.方法:建立鼻咽癌裸鼠成瘤模型,成瘤后随机分为对照组、恩度组、放疗组和恩度+放疗联合组(联合组),观察各组移植瘤的生长速度和瘤体大小的变化.4周后处死裸鼠摘取瘤体,电镜观察各组肿瘤凋亡情况,应用实时荧光定量PCR检测各组瘤体组织中的VEGF和Survivin mRNA的表达水平.结果:联合组肿瘤体积增长受到明显抑制,对照组生长迅速,恩度组与放疗组居中.恩度组、放疗组和联合组的VEGF表达水平均低于对照组,联合组低于放疗组,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01),放疗组和联合组的Survivin表达水平均低于对照组,联合组低于放疗组,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).成瘤组织中VECF与Survivin的表达呈正相关(r=0.679,P＜0.01).结论:恩度联合放疗能明显抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长,这种作用可能与VEGF和Survivin表达下调有关.     

扶正解毒祛瘀方联合奥沙利铂对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

目的:研究扶正解毒祛瘀方(简称"扶正方")联合奥沙利铂(L-OHP)对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:将HT-29细胞分为空白对照组(不加药物)、扶正方组(1 000 mg/L)、L-OHP组(31.25 mg/L)和联合用药组(1 000 mg/L扶正方+31.25 mg/L L-OHP)。加入相应药物作用48 h后,采用MTT法检测细胞增殖情况,倒置显微镜下观察细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)法检测细胞中促凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bcl-2 m RNA的表达,Western blot法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,L-OHP组和联合用药组细胞增殖均受到抑制、S期和G_2/M期细胞比例升高、G_0/G_1期细胞比例降低(P<0.05),L-OHP组、扶正方组和联合用药组细胞凋亡率升高、细胞中Bax m RNA及蛋白的表达上调、细胞中Bcl-2 m RNA的表达下调(P<0.05),且联合用组变化较两药单用组更明显(P<0.05)。结论:扶正方与L-OHP联合应用可抑制HT-29细胞的增殖、促进细胞凋亡,且作用优于两药单用;其机制可能与上调细胞中Bax基因与蛋白表达、下调细胞中Bcl-2基因表达有关。     

山药提取物联合树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠的治疗作用研究

目的 研究山药Dioscorea opposita提取物联合树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞（DC-CIK）对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠的治疗效果。方法 制备荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞Balb/c裸鼠模型,随机分为4组,每组8只：对照组裸鼠尾iv生理盐水,0.2 mL/次,2次/周;DC-CIK组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后尾iv 1×10⁶个DC-CIK细胞,2次/周,给药3周;山药提取物组裸鼠ig山药提取物125 mg/kg,0.2 mL/d,给药3周;山药提取物联合DC-CIK组裸鼠ig山药提取物125 mg/kg,0.2 mL/d,同时尾iv 1×10⁶个DC-CIK细胞,2次/周,给药3周。各组裸鼠在治疗3周期间每2天测量瘤体大小及裸鼠体质量,治疗结束后处死裸鼠,取出瘤体称质量;qRT-PCR法检测瘤组织中Akt信号通路中关键原癌基因c-Myc表达水平。结果 治疗结束后,各组裸鼠瘤体生长速率为山药提取物联合DC-CIK组结论 对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠治疗效果中,各给药组裸鼠肿瘤生长均受到明显抑制,其中以山药提取物联合DC-CIK组效果最佳。     

贝伐珠单抗对吉非替尼耐药非小细胞肺癌H1975的治疗作用

目的 探究贝伐珠单抗治疗吉非替尼耐药非小细胞肺癌(NSCLC)H1975荷瘤小鼠的效果及分子机制.方法 体外诱导吉非替尼耐药H1975细胞系,构建荷瘤小鼠模型,将小鼠随机分为对照组、吉非替尼组、贝伐珠单抗组和联合组(吉非替尼+贝伐珠单抗).吉非替尼组给予吉非替尼50 mg/kg灌胃,1/d;贝伐珠单抗组给予贝伐珠单抗5...     

p-JNK在结肠癌组织中的表达及抑制JNK通路后HT-29细胞增殖和凋亡变化

目的研究p-JNK在结肠癌组织中的表达以及抑制JNK信号通路后人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的变化。方法使用免疫组织化学方法检测50例结肠癌组织标本和50例正常结肠组织标本中p-JNK的表达情况并和临床资料进行比较分析;在人结肠癌细胞株HT-29中使用SP600125抑制JNK信号通路后,MTT法检测细胞增殖,TUNEL法检测凋亡。结果 p-JNK在结肠癌组织中的表达水平明显高于正常对照组织(P<0.05);并和淋巴结转移、肿瘤分化程度、肿瘤的侵犯深度相关(P<0.05);而与肿瘤部位无关。抑制JNK信号通路后,HT-29细胞中的p-JNK表达降低(P<0.05);增殖减少,凋亡增加(P<0.05)。结论在结肠癌组织中存在p-JNK的高表达,抑制JNK信号通路能降低人结肠癌细胞株HT-29细胞的增殖,并促进凋亡;JNK信号通路和结肠癌的发生发展有关。     

姜黄素与5-氟尿嘧啶联用对人结肠癌HT-29细胞增殖的影响

目的　体外观察 5 氟尿嘧啶与姜黄素联用对人结肠癌HT 2 9细胞增殖的相互作用。方法　采用MTT法观察不同浓度姜黄素、5 氟尿嘧啶单独或联合应用对HT 2 9细胞生长的抑制作用 ,并利用中效原理判定两药合用的效果。结果　两种药物单独应用时 ,对HT 2 9细胞的抑制作用呈明显的剂量效应关系 ;对于HT 2 9细胞 ,姜黄素的中位抑制浓度为(32± 11) μmol·L- 1,5 氟尿嘧啶的中位抑制浓度为(10 4 0± 4 5 6 ) μmol·L- 1。应用中效原理分析显示 ,两药在联合应用时为协同效应 ,并且在不同的药物浓度配比下呈相同的趋势。增大姜黄素的用量可在更宽的效应范围内获得两种药物的协同效应。结论姜黄素与 5 氟尿嘧啶在联合应用时的相互作用为协同效应 ,本结果对于结肠癌的治疗具有一定的临床意义。     

化合物209对人结直肠癌细胞HT-29的体内和体外作用(英文)

化合物209是一个新合成的氨基二硫代甲酸酯类化合物,它在体外水平可以抑制肿瘤细胞的增殖,但是化合物209的体内抗肿瘤作用及其抗肿瘤机制并不明确。本文探究了化合物209对人结直肠癌细胞HT-29的作用并初步探讨了相关机制。体外研究表明,化合物209可以显著抑制HT-29细胞的增殖;体内研究结果表明,化合物209可以显著抑制裸鼠HT-29移植瘤的生长,但是对裸鼠体重和白细胞无影响。流式细胞分析实验结果表明,化合物209可将HT-29细胞阻滞于细胞周期的G1期。同时,化合物209能上调体外培养HT-29细胞中p27,cyclin E,CDK2,cyclin D1和CDK4的表达。在体内瘤组织中上述蛋白表达情况与体外实验结果一致。这些结果说明,化合物209具有较好的抗肿瘤活性,其抗肿瘤作用与细胞周期阻滞及其相关蛋白的表达变化有关。     

Anti-cancer effect and apoptosis induction of cordycepin through DR3 pathway in the human colonic cancer cell HT-29

Cordycepin is known to have many pharmacological effects such as anti-tumorigenic, anti-inflammatory and anti-angiogenic activity. However, cordycepin induced apoptosis through the DR3 pathway in human colon cancer cells has not been studied. The effect of cordycepin on anti-proliferation was investigated in this study. Cordycepin significantly inhibited cell viability in a dose and time-dependent manner. Cordycepin increased sub G1 and G2/M phase arrest on HT-29 cells at the concentration of 100 μM, whereas cordycepin at 200 μM and 400 μM increased G1 phase arrest. Cordycepin induced apoptosis in HT-29 cells in a dose-dependent manner as detected by Hoechst and Annexin V-FITC staining. Intracellular ROS levels were higher in cordycepin treated cells as compared to control cells. The protein related to apoptosis was determined by antibody array. p53 and Bax expression increased treatment with cordycepin for 18 h. DR3, caspase-8, caspase-1, cleaved caspase-3 and cleaved PARP expression increased. These finding suggest that the cordycepin induces apoptosis through the DR3 pathway in human colon cancer HT-29. These findings suggest that cordycepin should be evaluated further as a therapeutic agent in human colon cancer.     

Evaluation of isoindole derivatives: Antioxidant potential and cytotoxicity in the HT-29 colon cancer cells

Norcantharimides have an isoindole skeleton structure, and some isoindoline derivatives have positive effects on inflammatory pathologies, including cancers. The present study aims to evaluate the antioxidant and cytotoxic potential of four synthesized isoindoline derivatives (NCTD1–4). HT-29 cells exposed to 10, 50, 100, and 200 µM doses of each derivative were incubated for 24 and 48 h, respectively. The cytotoxicity of the new derivatives was analyzed using the cell growth inhibition assay and the cell membrane damage test. In vitro antioxidant activity studies showed that the derivatives have free radical-scavenging effects in a dose-dependent manner. NCTD3 and NCTD4 apparently have antioxidant effects when compared with the control group treated with dimethyl sulfoxide. Furthermore, NCTD4 inhibited the growth of the HT-29 cells due to membrane damage and exhibited a dose-dependent cytotoxic effect on colon adenocarcinoma cells. The findings suggest that NDTD4 has the highest potential for colon cancer treatment and may be interpreted as a candidate anticancer agent.     

丁酸钠诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的信号通路及对AQP3基因表达影响的研究

目的：探讨丁酸钠诱导结肠癌HT-29细胞凋亡过程的分子机理及其对水通道蛋白AQP3基因表达的影响。方法：MTT法检测不同浓度的丁酸钠对结肠癌HT-29细胞生长的影响;RT-PCR检测不同浓度的丁酸钠对细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK4、p16和AQP3的基因表达水平,同时使用流式细胞仪检测细胞周期。结果：加入浓度超过2.5mmol/L的丁酸钠后,结肠癌HT-29细胞生长受到抑制,Cyclin D1、CDK4和AQP3的表达水平下降,p16的表达水平上调,细胞阻滞于G1/S期。结论：浓度超过2.5mmol/L的丁酸钠可以诱导结肠癌HT-29细胞凋亡,使其细胞周期阻滞于G1/S期,且这种诱导作用是剂量依赖型的,其分子通路可能是通过p16-Cyclin D1/CDK4这条信号途径,在此过程中,伴随着AQP3的基因表达水平降低。     

洛拉曲克在体内外对SRS-82细胞株的抗增殖作用

目的 :研究全合成新型胸苷合成酶抑制药洛拉曲克 (nolatrexed)在体内、外对SRS 82细胞株及正常人胚肾HEK2 93细胞的抗增殖作用。方法 :四氮唑盐 (MTT)法测定抑制率 ;以提高荷腹水瘤小鼠存活时间及荷实体瘤瘤重减轻情况为指标考察洛拉曲克对SRS 82所致肿瘤的治疗作用。结果 :在体外洛拉曲克对SRS 82肿瘤细胞株有较强的细胞毒作用 ,对正常细胞HEK2 93抑制作用较弱 (P <0 .0 1) ;体内实验显示洛拉曲克可明显提高荷腹水瘤小鼠的存活时间 ,减轻荷实体瘤小鼠的瘤重 ,洛拉曲克松低剂量组与氟尿嘧啶 (10mg·kg- 1)相当 (P >0 .0 5 )高剂量组 (P <0 .0 1)。结论 :洛拉曲克在体内外对SRS 82肿瘤细胞有显著的抗增殖作用 ,在体外对肿瘤细胞具有选择性的抗增殖作用。     

新的蛋白酶体抑制剂YSY-01A对HT-29细胞的周期阻滞作用(英文)

化合物YSY-01A是一种新合成的蛋白酶体抑制剂,前期研究已经证实其具有良好的抑制肿瘤增殖作用。但是其作用机制尤其是对细胞周期的阻滞作用仍不清楚。本实验旨在评价YSY-01A的抗肿瘤作用与细胞周期阻滞的关系,并探讨可能的分子机制。实验结果证实,YSY-01A能够显著抑制大肠腺癌细胞HT-29的增殖(P<0.05),且具有浓度和时间依赖性。进一步实验表明,YSY-01A能够把HT-29细胞阻滞在G2/M转换点上,显著地上调cyclinB1,Wee1,p-cdc2(Tyr15)及p53,p21,p27蛋白的表达(P<0.05)。当YSY-01A浓度高于0.5μM时,HT-29会显示出典型的细胞毒症状,差异具有显著性(P<0.05);而本文用于机制研究的药物浓度均低于此值。总之,YSY-01A对HT-29细胞具有显著的增殖抑制作用,其分子机制与G2/M转换点阻滞有关。     

酪酸梭菌对HT-29细胞水通道蛋白3表达的影响及JNK和p38信号通路对其调控作用

目的明确酪酸梭菌对人结肠腺癌细胞HT-29细胞水通道蛋白3(AQP3)m RNA和蛋白表达的影响以及c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38信号转导通路对其表达的调控作用。方法用酪酸梭菌上清液作用于HT-29细胞后,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹方法检测AQP3 m RNA和蛋白表达水平。AQP3表达水平有差异后测定总JNK、p38以及磷酸化的JNK(P-JNK)和磷酸化的p38(P-p38)蛋白表达水平。后分别加用JNK抑制剂SP600125和p38抑制剂SB203580后测定AQP3蛋白表达量,观察JNK和p38对AQP3表达的调控作用。统计学处理采用单因素方差分析。结果实时定量RT-PCR和蛋白印迹法结果显示酪酸梭菌上清液不同浓度(1∶4和1∶8组)作用HT-29细胞12 h以及同一浓度1∶4作用不同时间(24、12、6 h组)的AQP3 m RNA和蛋白表达水平均较无酪酸梭菌上清液作用组明显上调(P均<0.05)。蛋白印迹法结果显示酪酸梭菌上清液组的Pp38/p38和P-JNK/JNK蛋白相对量较空白对照组表达水平明显上调(F=26.065和65.034,P<0.05)。蛋白印迹法结果显示加入p38抑制剂SB203580 10μg/ml组和20μg/ml的AQP3蛋白表达相对量为(0.7±0.4)和(0.6±0.6)、加入JNK抑制剂SP600125 10μg/ml组和20μg/ml的AQP3蛋白表达相对量为(0.7±0.4)和(0.5±0.4)均较未加入抑制剂组(1.1±0.7)AQP3蛋白表达水平明显下调(F=36.225,P<0.05)。结论酪酸梭菌上清液能够上调HT-29细胞的AQP3表达进而调节肠道的水代谢。JNK和p38信号转导通路可能参与调控AQP3的表达。