高效液相色谱法测定不同产地苦参中生物碱的含量

①目的 比较测定不同产地苦参中生物碱的含量。②方法 采用高效液相色谱法测定苦参中生物碱的含量。色谱条件：氨基键合相柱，乙睛-磷酸水溶液(pH=2)-无水乙醇(8：1：1)为流动相，检测波长220nm。③结果 苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱回收率分别为98．90％、98．94％、100．6％。RSD分别为1．83％、1.85％、1．24％。④结论 采用氨基键合相柱测定苦参中苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱，方法简便易行，准确度高。     

HPLC法测定苦参中苦参碱的含量

目的:建立苦参中苦参碱含量的测定方法.方法:采用HPLC法,色谱柱为Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-二乙胺(55:45:0.02),检测波长208 nm,柱温40℃;流速1.0ml·min-1;进样量:10μl.结果:苦参碱在0.05～1.25μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率97.62%,RSD为1.15%(n=6).结论:本方法灵敏、准确、简便快速,可用于苦参药材的质量控制.     

苦参方有效部位成分分析及配伍机制研究

目的对苦参方有效部位成分进行定性定量分析,研究方剂配伍对有效成分的影响。方法采用LC-MS、GC-MS联用技术确定苦参方的有效成分;采用HPLC色谱法对苦参方生物碱进行定量分析,考察方剂配伍后的成分变化。结果苦参方挥发油中的主要成分有胡薄荷酮、薄荷酮等,苦参方所含苦参生物碱主要有苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱;苦参方的方剂配伍后有效成分发生了转化,氧化苦参碱部分转化成苦参碱,氧化槐果碱部位转化为槐果碱,挥发油在配伍后成分及量也有所变化。结论确定了苦参方的有效成分及各成分的量,明确了该方剂配伍后的成分改变。     

HPLC法测定苦参汤有效部位中4种黄酮类成分含量

目的建立苦参汤有效部位中4种黄酮类成分黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的HPLC含量测定方法.方法采用Phenomenex Luna C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇-磷酸水溶液[磷酸-水(2:530)](45:55)为流动相,流速1 mL/min,检测波长280 nm.结果黄芩苷平均回收率为99.28%,RSD=1.92%(n=5),汉黄芩苷平均回收率为98.48%,RSD=1.53%(n=5),黄芩素平均回收率为99.51%,RSD=1.81%(n=5),汉黄芩素平均回收率为97.43%,RSD=2.14%(n=5).结论3批样品测定结果表明,该法简便、准确,可用于苦参汤有效部位中黄芩苷等4种黄酮类成分含量测定.     

HPLC法测定苦参及苦参汤有效部位中三叶豆紫檀苷含量

目的建立测定苦参及苦参汤有效部位中三叶豆紫檀苷含量的高效液相色谱方法。方法Phe-nomenexLunaC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-磷酸水溶液[磷酸-水(2∶530)](26∶74),流速为1.0mL/min,检测波长为310nm。结果三叶豆紫檀苷在0.1616~0.8080μg范围内线性良好,相关系数r=0.9994。3组样品三叶豆紫檀苷平均回收率为98.97%、99.93%、97.94%,RSD为1·80%、1.84%、1.67%(n=3)。结论本方法操作简便,分离效果好,灵敏度高,重复性好,可用于控制苦参及苦参汤有效部位质量。     

HPLC法测定苦参浸膏中苦参碱和氧化苦参碱的含量

目的考察苦参不同时间水煎后苦参碱和氧化苦参碱的含量变化,为苦参在复方中的应用提供参考。方法采用HypersiL NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸(85∶7.5∶7.5),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为210 nm,进样量为10μL。结果苦参随着煎煮时间的延长,苦参碱的含量增加,氧化苦参碱的含量变化不大。结论在苦参提取过程中,水煎时间不是影响氧化苦参碱转化为苦参碱的主要因素。     

苦参中3种生物碱成分在Caco-2细胞中的吸收特性及在大鼠肝微粒体中的代谢速率

目的：研究苦参中3个生物碱成分苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱通过Caco-2细胞的吸收特性及在大鼠肝微粒中的代谢速率。方法：采用Caco-2细胞吸收模型分析3个生物碱的吸收特性,采用体外大鼠肝微粒体模型研究3个生物碱的代谢速率,运用HPLC-MS法测定3个生物碱类成分的含量,计算其渗透速率和代谢速率;液相条件采用Agilent Zorbax SB-C₁₈色谱柱(3.0 mm×100mm,3.5μm),乙腈：水(60：40)等度洗脱,进样量5μL,流速0.8 mL/min,柱温：30℃,运行时间30 min。质谱条件,选择正离子模式监测,干燥器温度350℃,毛细管电压4000V,干燥器流速 9.0 L/min,碎片电压 90eV。结果：Caco-2细胞吸收模型中,苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱分别在0.0505～10.01μM的线性范围内,线性关系良好(r>0.999 5),通过Caco-2细胞吸收模型的渗透速率常数分别为：苦参碱1.251、氧化苦参碱0.9375、槐果碱1.424;大鼠肝微粒体模型中,苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱分别在0.0501～1.001μM的线性范围内,线性关系良好(r>0.999 8),3个生物碱类成分代谢的半衰期分别为：苦参碱4.331 h、氧化苦参碱1.084 h、槐果碱2.478 h,方法学考察结果表明,日内日间精密度RSD%< 4 %,基质效应> 80 %,提取回收率> 88 %,结论：苦参中三个生物碱类成分易通过Caco-2细胞吸收模型,主动转运为其主要的吸收方式,在大鼠肝微粒体中不易发生代谢。     

妇洁灵洗剂中苦参生物碱含量变化机制研究

目的 考察苦参及含苦参的妇洁灵洗剂中苦参碱与氧化苦参碱含量变化情况,为临床单用及其在复方中应用苦参提供参考.方法 对妇洁灵洗剂及苦参中的苦参碱及氧化苦参碱采用HPLC进行含量测定,并将处方中共存主要药材与苦参拆方组合,研究其苦参碱与氧化苦参碱的含量变化.结果 所测苦参三氯甲烷提取液氧化苦参碱含量明显高于苦参碱,而苦参水煮后苦参碱含量高于氧化苦参碱;处方中三白草对苦参中苦参碱及氧化苦参碱含量的影响大于蛇床子、火炭母.结论 苦参在单用与在妇洁灵洗剂复方中苦参碱与氧化苦参碱的含量明显不同.妇洁灵洗剂复方煎煮过程中,随着氧化苦参碱的减少,苦参碱的含量逐渐增加.     

苦参地上部分生物碱的分布及含量测定

对河北苍岩山苦参地上部分生物碱的分布状况进行了薄层层析比较,并用薄层光密度法进行了总生物碱和含量最高的槐定碱的含量测定,总生物碱含量在0.75～0.96％范围,其中槐定碱占总碱的50～70％。     

HPLC法测定苦参药材中苦参酮、降苦参酮的含量

目的 建立测定苦参药材中 2种黄酮类成分苦参酮和降苦参酮含量的高效液相色谱方法.方法 采用 Phenomenex Gemini C18色谱柱 ( 250 mm×4.6 mm,5 μm ),以乙腈-水 ( 50∶ 50 )为流动相,流速 1.0 mL /min,检测波长 290 nm.结果 苦参酮和降苦参酮的线性范围分别为 0.318 6～1.593 0 μg (r=0.999 8),0.112 8～0.564 0 μg (r=0.999 9 );苦参药材平均加样回收率 (n=6) 分别为100.56% (RSD=0.93%),96.66%(RSD=0.85%).结论 3批样品测定结果表明,该方法简便、准确、重现性良好,可用于苦参药材苦参酮和降苦参酮 2种黄酮类成分的含量测定.     

微波辐射对苦参碱提取的影响及其动力学和热力学机理研究

目的 研究微波辐射功率、时间等因素对苦参碱提取的影响以及提取机理.方法 利用微波辐射后再用溶剂回流法提取苦参中的苦参碱,并与溶剂回流提取法作比较,从动力学和热力学角度探讨了微波辐射对苦参碱提取过程的影响及其作用机理.结果 微波辐射可强化苦参碱的提取过程,使其表观提取速率常数增大,提取活化能降低,从而利于苦参碱的提取;苦...     

苦参水提物对低氧模型小鼠的保护作用

目的观察苦参水提物对低氧模型小鼠的保护作用。方法分别采用腹腔注射异丙肾上腺素、亚硝酸钠、小鼠断头和失血性休克等方法制备低氧模型,观察苦参水提物对低氧小鼠耗氧量、存活时间、心脏搏动时间和张口呼吸时间的影响。结果灌胃苦参水提物10和20 g.kg-1能明显延长异丙肾上腺素致心肌耗氧增加小鼠的耐缺氧存活时间,降低耗氧量;能明显延长亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间、断头鼠头的张口呼吸时间和失血性休克小鼠的心脏搏动时间。结论苦参水提物对缺氧心肌、缺氧脑组织及组织缺氧模型均有保护作用。     

苦参对免疫功能的作用

目的：研究苦参在体内对免疫功能的作用。方法：小鼠口喂苦参溶液２周后检测脾细胞和胸腺细胞对ＣｏｎＡ和ＬＰＳ刺激的增殖反应，脾细胞产生白细胞介素２（ＩＬ－２），以及腹腔巨噬细胞产生白细胞介素１（ＩＬ－１）等指标。结果：口服苦参组上述三项指标均明显低于饮用自来水的对照组。结论：苦参在体内对免疫功能具有很明显的抑制作用。     

苦参生物碱和黄酮体外抑菌活性比较

目的 探讨苦参生物碱、黄酮及其单体(苦参碱、氧化苦参碱、苦参酮、槐属二氢黄酮G、5-methyl-Kushenol C、三叶豆紫檀苷和高丽槐素)对不同菌株的体外抑菌作用.方法 采用96孔板微量稀释法测定药物的最小抑菌浓度(MIC);薄层色谱-直接生物自显影法测定药物的抑菌检测限(LOD);纸片扩散法测定苦参黄酮单体的抑菌圈直径大小.结果 苦参总生物碱、总黄酮对金黄色葡萄球菌的MIC值范围分别为4.95～31.64 mg/mL和7.50～31.64 mg/mL,对大肠埃希菌的MIC值范围分别为1～4 mg/mL和1～4 mg/mL.苦参生物碱单体对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的LOD值均大于10 μg;黄酮单体对金黄色葡萄球菌的LOD值为1.3～2.5 μg,对大肠埃希菌的LOD值小于1.3 μg.各黄酮单体中,槐属二氢黄酮G抑菌作用最强,其次是苦参酮和高丽槐素,三叶豆紫檀苷无抑制作用.结论 对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌,苦参总黄酮及单体的抑菌效果均优于苦参总生物碱及其单体.     

苦参药材生物碱成分的HPLC指纹图谱

目的:采用高效液相色谱法研究并建立苦参药材生物碱成分的HPLC指纹图谱,同时进行定性和定量相似度评价。方法:采用Lichrospher ODS-2色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇-乙腈(1∶1)为有机相,0.1%氨水为水相,梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长210nm,测定苦参药材的HPLC指纹图谱,统计分析确定共有模式;以最接近共有模式的苦参药材为特征对照,采用夹角余弦法(Cosθ)和相对欧氏距离法(RED)对不同产地苦参药材的HPLC指纹图谱进行定性与定量相似度评价。结果:苦参高效液相色谱指纹图谱中,以氧化苦参碱为参照峰,确定了10个特征峰。相似度比较结果显示,不同产地药材样品夹角余弦都大于0.9,表明各产地苦参药材化学组成一致性较好,相对欧氏距离由0.1至0.4不等,可见药材中特征成分含量上存在差异。结论:该方法重复性好,可为科学评价及有效控制苦参药材的质量提供参考。     

产地和植株年龄对苦参干燥根中氧化苦参碱含量的影响

目的 考察不同产地和植株年龄对苦参干燥根中氧化苦参碱含量的影响，为选择合适的大规模人工种植场地、合理的管理及物种保护提供可考的依据。方法 采用HPLC法测定苦参干燥根中氧化苦参碱的含量并采用SPSS9．0及Microsoft Excel软件进行数据统计和分析。结果 从17个省、自治区采集的苦参根样品中氧化苦参碱的含量差异很大(0．494％～4．127％)，其中以黑龙江省采集的样品中氧化苦参碱的平均含量最高(3．493％)。方差分析表明采自北方寒冷干燥的高纬度地区的样品中氧化苦碱的含量明显高于采自南方温暖潮湿的低纬度地区的样品。而且，植株年龄与苦参干燥根中氧化苦参碱含量呈相关。结论 不同产地和植株年龄均会明显影响苦参根中氧化苦参碱的含量；生长在寒冷干燥的高纬度地区的苦参根中氧化苦参碱含量较高。     

实时荧光定量PCR法分析苦参对大鼠胃肠道大肠杆菌数量的影响

目的:应用实时荧光定量PCR技术分析口服苦参对大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠部位以及粪便内大肠杆菌数量的影响,探索苦参对胃肠道中大肠杆菌菌群调节作用。方法:常规饲养大鼠150只,苦参水煎液分高、中、低剂量灌胃,另设空白对照组与抗生素组各10只。分别在第一、二、三周时采集大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠各段(含内容物)以及粪便,提取细菌基因组DNA,采用实时荧光定量PCR法(绝对定量方法)检测各样本不同给药时间点大肠杆菌的数量。结果:(1)与空白对照组相比较:各给药组十二指肠部位在第一、二、三周时,大肠杆菌数量显著降低(P0.01);在不同剂量组不同给药时间点,胃部、空肠、回肠部位以及粪便中大肠杆菌数量均有不同程度降低(P0.05)。(2)与抗生素组比较:低、中、高剂量组给药二周后,十二指肠、空肠、回肠部位大肠杆菌数量明显偏低(P0.05),而结肠及粪便部位在给药一周后高剂量组大肠杆菌数量明显偏高(P0.01)。结论:苦参水煎液灌胃可造成大鼠十二指肠、空肠、回肠部位大肠杆菌菌群数量降低,其中对十二指肠部位大肠杆菌数量的影响随时间推移呈递减趋势,与抗生素的作用基本一致。     

苦参的成分及质量分析研究进展

目前已经从苦参中分离鉴定的化学成分有生物碱类、黄酮类、脂肪酸类、氨基酸类、挥发油类等化合物,对其化学成分的质量分析方法主要有：薄层色谱扫描法、酸碱滴定法、酸性染料比色法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用以及毛细管电泳法等。本文对这些质量分析方法进行综述。     

HPLC法测定不同市售荷叶药材中4种生物碱类成分的含量

目的 建立测定荷叶药材中4种生物碱类成分2-羟基-1-甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱含量的高效液相色谱方法,并测定不同市售荷叶药材中4种成分的含量.方法 采用HypersilC18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1%三乙胺水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35 ℃,检测波长270 nm.结果 2-羟基-1-甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱的线性范围分别为0.109 6～0.657 6μg(r=0.999 5),0.021 0～0.126 0μg(r=0.999 5),0.103 0～0.618 0μg(r=0.999 8),0.085 6～0.513 μg(r=0.999 5),平均加样回收率(n=6)分别为99.5%,100.5%,97.5%和100.1%.30批市售品中4种生物碱类成分的含量分别为:2-羟基-1-甲氧基阿朴啡0.010%～0.076%,原荷叶碱0.002%～0.120%,荷叶碱0.008%～0.249%,莲碱0.008%～0.067%.结论 30批市售荷叶药材中4种生物碱类成分含量变化较大,其中原荷叶碱和荷叶碱的含量变化更为明显,应将4种生物碱同时纳入荷叶药材的质量控制.