免疫相关基因HCST对肾透明细胞癌预后的影响及其机制

目的:分析造血细胞信号转导因子(hematopoietic cell signal transducer,HCST)在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中的表达及与ccRCC预后、免疫浸润的关系,探讨HCST对ccRCC细胞生长侵袭的影响及其作用机制。方法:利用TCGA数据库分析HCST基因在ccRCC组织中的表达水平。Cox比例风险模型分析HCST表达水平及临床特征与ccRCC患者预后的关系。肿瘤免疫评分数据库（tumor immune estimation resource,TIMER）分析ccRCC组织中HCST表达水平与免疫细胞浸润程度的相关性。体外培养ACHN细胞,分为对照组、siRNA阴性对照组和HCST siRNA组。MTT法、流式细胞实验和Transwell实验分别检测各组ACHN细胞增殖、凋亡和侵袭活性。蛋白质印迹法检测caspase-3、Bax、Bcl-2、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达。结果:与正常肾脏组织比较,HCST mRNA在ccRCC组织中的表达显著上调,且与肿瘤的分期、淋巴转移及远处转移正相关(P＜0.01)。HCST高表达、肿瘤T分期及M分期是影响 ccRCC患者预后的独立危险因素(P＜0.05)。ccRCC中HCST表达与CD8+T细胞、树突状细胞、NK细胞及Treg细胞的浸润程度正相关(P＜0.001)。与对照组比较,HCST siRNA组ACHN细胞的增殖活性、侵袭能力、Bcl-2、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),ACHN细胞凋亡活性、caspase-3、Bax和E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P＜0.05)。siRNA阴性对照组与对照组比较上述各指标,差异无统计学意义(P＜0.05)。结论:HCST在ccRCC中表达上调,且与ccRCC患者的免疫浸润和预后相关。沉默HCST的表达可抑制ccRCC细胞的增殖与侵袭、促进其凋亡。     

肾透明细胞癌预后相关蛋白标志物的研究进展

肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是人类最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一,其最常见的病理类型为肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）。近年来,国内外诸多研究报道多种蛋白的表达与ccRCC的预后密切相关。本文就这些蛋白标志物在判断ccRCC患者预后方面的重要作用做一综述。     

基于生物信息学数据分析ELTD1在肾透明细胞癌组织中的表达、甲基化水平及其临床意义

目的：探讨表皮生长因子蛛毒素受体7穿膜结构域蛋白1(ELTD1)在肾透明细胞癌（ccRCC）组织中的表达、甲基化水平及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法：通过公共数据库分析ccRCC组织中ELTD1表达和甲基化的差异水平,探讨ELTD1表达水平与患者临床病理特征和预后的相关性。通过TIMER2.0数据库评估ccRCC免疫细胞浸润,筛选ELTD1相关免疫检查点基因,进行GO功能和KEGG通路富集分析,通过基因共表达分析、筛选与ELTD1相关的基因。结果：与癌旁组织比较,ELTD1在ccRCC组织中呈高表达（P<0.05）。TCGA-KIRC队列中,ELTD1的甲基化水平与其表达呈负相关（R=-0.37,P<0.01）。ELTD1转录表达在ccRCC患者年龄、T分期、M分期、临床分期及病理分级组间存在显著差异（均P<0.01）,且高表达ELTD1与较长的OS和PFS密切相关（HR=0.55、0.63,均P<0.01）,ELTD1高表达是ccRCC的独立保护因素。ELTD1表达与B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、巨噬细胞和嗜中性粒细胞的免疫浸润呈显著负相关...     

VHL基因在肾透明细胞癌中的表达及其预后价值

目的明确Von Hippel-1indau(VHL)基因表达与肾透明细胞癌(CCRCC)分级、分期和预后的关系.方法采用免疫组化技术检测58例CCRCC标本中VHL的表达,比较其与Fuhrman分级、病理分期和预后的关系.结果VHL表达阳性率为56.9%(33/58).与分级和患者生存率均显著相关(P＜0.001),而与病理分期无关(P＞0.05).结论VHL的表达情况为判断预后提供了有用的信息.     

lncRNA NONHSAT113026在肾透明细胞癌中的表达及功能

目的:本研究旨在探讨lncRNA NONHSAT113026（lncRNA 026）在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）组织中的表达及对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）分别在83例肾透明细胞癌和对应癌旁组织、肾癌细胞株786-O及ACHN中检测lncRNA 026的表达水平,并分析其表达水平与患者临床病理参数的相关性。通过慢病毒载体技术构建稳定过表达lncRNA 026的肾癌细胞786-O及ACHN,采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）检测细胞增殖活性,Transwell小室检测细胞转移能力,蛋白印迹法（Western blot）分析PI3K/Akt信号通路中相关蛋白的表达情况。结果:与癌旁组织相比,lncRNA 026在ccRCC组织中的表达水平显著下调（P＜0.000 1）;在肾癌细胞786-O和ACHN中过表达lncRNA 026能显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭（P＜0.01）;Western blot结果显示,过表达lncRNA 026可下调PI3K/Akt信号通路中p-PI3K、p-Akt、GSK-3β的表达（P＜0.01）。结论:lncRNA 026在肾透明细胞癌组织中低表达,并且过表达lncRNA 026能显著降低肾癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。提示lncRNA 026在肾癌中发挥了重要作用,有望成为治疗肾癌的潜在药物作用靶点。     

血清IL-22在肾透明细胞癌患者预后分析中的应用价值

目的:研究IL-22在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）患者血清中的表达情况、临床意义及其在患者预后分析中的应用价值。方法:收集168例ccRCC患者的血清,同时以30例健康志愿者血清作为对照。采用ELISA法检测两组对象血清IL-22的表达水平。生存分析探讨IL-22表达水平与患者预后情况的关系。Cox比例风险模型分析影响患者生存时间的危险因素。结果:ccRCC患者血清中的IL-22水平明显高于健康志愿者。对ccRCC患者随访5~63个月,平均（45±12.4）个月,IL-22高水平组的无进展生存率及总体生存率明显低于低水平组。多因素分析结果表明,血清IL-22表达水平、肿瘤直径、肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期是影响ccRCC患者生存期的独立危险因素。结论:ccRCC患者血清IL-22表达水平偏高,且IL-22高水平表达患者预后较差。血清IL-22表达水平在ccRCC患者的预后判断中具有较好的应用价值。     

PPARα在肾透明细胞癌组织中的表达及其与预后的关系

目的:探讨肾癌组织中过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的表达及其与临床病理特征和生存率的关系。方法:纳入75例于2014至2019年间在我院接受了根治性肾切除术并经组织学证实的肾透明细胞癌患者,运用免疫组织化学方法检测这些患者的癌组织和癌旁组织中PPARα的表达,并结合临床病理资料分析PPARα表达水平与患者TNM分期和Fuhrman分级的关系。通过Kaplan-Meier生存分析及多因素 COX 回归分析表达与预后的关系。结果:42.67%(32/75)的患者癌组织中PPARα表达为高水平,而在癌旁组织中有85.33%(64/75)患者PPARα表达均为高水平,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05) 。PPARα的表达水平与TNM分期(P=0.01),Fuhrman分级(P＜0.025),BMI(P=0.000 1),术前血清胱抑素C(P=0.000 1),抽烟史(P=0.035),术前碱性磷酸酶(P=0.012)有关联,但与性别(P=0.127)、年龄( P=0.815)、肿瘤大小(P=0.484),民族(P=0.621),肿瘤左右侧别发生差异(P=0.270),诊断本病前有无出现相关临床症状(P=0.210),有无淋巴结转移(P=0.06),糖尿病史(P=0.233),高血压史(P=0.561)无相关。截至2020年03月,有75例患者完成随访。Kaplan-Meier分析显示,PPARα低表达患者总生存时间和无瘤生存时间均低于PPARα高表达患者,差异有统计学意义(P＜0.05) 。多因素 COX 回归分析显示,患者总生存时间及无瘤生存时间与PPARα的表达水平有关(P＜0.05)。结论:PPARα在肾透明细胞癌组织中呈低表达,表达水平与临床分期、分级、体质量指数、碱性磷酸酶、血清胱抑素C、抽烟史以及患者预后密切相关。     

Tenascin-C在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的:分析Tenascin-C（TN-C）在肾透明细胞癌中的表达及其与临床病理因素间的关系。方法:应用免疫组化方法检测肾透明细胞癌中TN-C蛋白表达情况。结果:免疫组化结果显示40.63%（39/96）的病例存在肿瘤间质TN-C蛋白的过表达,且过表达与肿瘤组织核分级负相关（P=0.022）;18.75%（18/96）的病例存在肿瘤细胞胞质TN-C蛋白的过表达,且过表达与肿瘤组织核分级、p-TNM分期正相关,分别为（P＜0.001;P=0.038）。肿瘤间质及肿瘤细胞胞质的过表达与RCCC患者的年龄、性别、肿瘤大小均无明显相关性。结论:肾透明细胞癌中存在TN-C蛋白肿瘤间质及肿瘤细胞的过表达,并与肿瘤分化和p-TNM分期相关。     

透明细胞肾细胞癌组织中PBRM1和BAP1表达缺失对患者预后的影响

目的:检测透明细胞肾细胞癌(clear cell renal carcinomas, cc-RCC)组织中PBRM1和BAP1的表达情况,探讨两者临床病理特征及对肾癌患者预后的影响。方法:采用免疫组化Elivision检测60例cc-RCC组织和16例正常肾组织中PBRM1和BAP1的表达。结果:60例cc-RCC组织中PBRM1和BAP1的高表达阳性率分别为46.7%和35%,对照组16例正常肾组织中PBRM1和BAP1均强阳性表达。PBRM1和BAP1表达缺失与cc-RCC高核级、肿瘤晚期及肿瘤组织坏死密切相关(P<0.05)。PBRM1表达缺失患者的PFS(P=0.002)和OS(P=0.036)低于PBRM1高表达患者。结论:PBRM1在cc-RCC缺失表达可能促使肿瘤侵袭与转移,是预后不良的标志。     

Landscape of immune cell infiltration in clear cell renal cell carcinoma to aid immunotherapy

The tumor microenvironment, comprised of tumor cells and tumor-infiltrating immune cells, is closely associated with the clinical outcome of clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) patients. However, the landscape of immune infiltration in ccRCC has not been fully elucidated. Herein, we applied multiple computational methods and various datasets to reveal the immune infiltrative landscape of ccRCC patients. The tumor immune infiltration (TII) levels of 525 ccRCC patients using a single-sample gene were examined and further categorized into immune infiltration subgroups. The TII score was characterized by distinct clinical traits and showed a significant divergence based on gender, grade, and stage. A high TII score was associated with the ERBB signaling pathway, the TGF-β signaling pathway, and the MTOR signaling pathway, as well as a better prognosis. Furthermore, patients with high TII scores exhibited greater sensitivity to pazopanib. The low TII score was characterized by a high immune infiltration level of CD8⁺ T cells, T follicular helper cells, and regulatory T cells (Tregs). Moreover, the immune check point genes, including CTLA-4, LAG3, PD-1, and IDO1, presented a high expression level in the low TII score group. Patients in the high TII score group demonstrated significant therapeutic advantages and clinical benefits. The findings in this study have the potential to assist in the strategic design of immunotherapeutic treatments for ccRCC.     

Hepcidin as a prognostic biomarker in clear cell renal cell carcinoma

Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) is a common malignancy of urologic neoplasms. Hepcidin is a pivotal modulator of iron metabolism involved in human cancers; however, the biological significance of hepcidin in ccRCC remains to be fully understood. Therefore, in this study, we evaluated the expression profiles of hepcidin in ccRCC from several public databases and found that hepcidin expression was upregulated in ccRCC, which was further validated in ccRCC cell lines, clinical samples, and tissue microarray (TMA) quantitative real-time PCR and immunohistochemistry. In addition, we found that the expression level of hepcidin was correlated with the age, T stage and pathologic stage of patients. Furthermore, hepcidin promoter methylation was significantly associated with the worse poor clinical parameters of ccRCC patients, and hepcidin was an independent prognostic factor. Mechanistically, enrichment analysis revealed that hepcidin participated in the immune-related and metabolism-related pathways. Hepcidin was positively correlated with not only immune infiltration and immune checkpoints but also tumor mutation burden and cytotoxic T lymphocyte. Finally, we validated the positive correlation of hepcidin with the marker of macrophage (CD68) in the TMA. Our findings provide insights into understanding the function and its underlying mechanism of hepcidin in ccRCC and suggest that hepcidin might serve as a potential predictive biomarker of response to immunotherapy and the prognosis of patients with ccRCC.     

基于Keap1基因多态性的肾透明细胞癌分子标志物的研究

目的:探讨KeapJ基因单核苷酸多态性与肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的相关性,为临床诊疗提供有效的分子靶点.方法:采集ccRCC组织108例与正常对照肾组织86例,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)和基因测序技术检测KeapJ基因单核苷酸多态性,判读两组样本基因型,实时荧光定量PCR法检测Keap1基因在两组中的表达情况.结果:Keap1基因rs1048289的不同基因型与等位基因频率在肿瘤组和对照组之间的分布不同,差异均有统计学意义(P＜0.05).AA基因型及A等位基因携带者患肾透明细胞癌的风险明显升高,AA基因型(OR=2.292,95％ CI:1.159～4.533,P＜0.05)及A等位基因(OR =2.067,95％ CI:1.280 ～3.342,P=0.001)为肾透明细胞癌患病的危险因素.肿瘤组Keap1基因表达量比对照组明显降低(P＜0.05),但不同基因型样本间Keap1基因表达量无明显差异(P＞0.05).结论:Keap1基因rs1048289与肾透明细胞癌患病显著相关,有望成为肾透明细胞癌早期诊断与基因治疗的有效分子靶点.     

基于TCGA 数据库分析DTX2 在肾透明细胞癌组织中表达的临床意义及其对肾癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的：基于TCGA数据库分析Deltex E3泛素连接酶2(DTX2)在肾透明细胞癌（ccRCC）组织中的表达水平及临床意义,探讨DTX2对ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：利用TIMER数据库分析DTX2在泛癌组织中的表达水平,通过UALCAN数据库进一步验证ccRCC组织和癌旁组织中DTX2 mRNA和蛋白表达差异。使用UALCAN数据库中的TCGAccRCC队列数据集,分析ccRCC中DTX2表达与患者临床病理特征的相关性。通过K-M plot数据库分析DTX2表达与cc RCC患者预后的相关性。利用DAVID数据库对DTX2相关基因进行GO和KEGG通路富集分析。通过qPCR法检测DTX2基因在人胚肾293(HEK293)细胞和ccRCC细胞A498、Caki-1中的表达水平。利用siRNA技术分别将DTX2 siRNA及其阴性对照质粒转入A498、Caki-1细胞,采用CCK-8法、平板克隆实验、划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测敲低DTX2对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果：TCGA数据库分析结果表明,与癌旁组织相比,ccRCC组织中DTX2 mRNA和...     

RNA结合蛋白QKI-5在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:比较QKI-5在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）及癌旁组织中的表达水平,并分析其表达水平与临床病理特征及预后之间的关系。方法:收集68例经手术切除的肾透明细胞癌及相应的癌旁组织标本,提取标本的总RNA,经反转录获得cDNA,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测QKI-5的表达水平,利用统计学方法分析其表达量与患者临床病理特征及预后之间的关系。结果:68例组织标本中有49例（72.06%）癌组织的QKI-5表达水平降低,统计学分析表明QKI-5表达水平的降低和肿瘤的T分期及病理G分级升高相关。Kaplan-Meier生存分析显示,QKI-5高表达的肾癌患者总生存期优于低表达者（P=0.009）。Cox多因素分析显示QKI-5表达水平降低是影响患者预后的独立不良因子。结论:QKI-5在肾透明细胞癌组织中低表达,QKI-5低表达和肿瘤的T分期及病理G分级升高相关,与肾透明细胞癌不良预后有关。     

肾透明细胞癌组织中RSK4的表达及临床意义

目的:检测核糖体S6蛋白激酶4（RSK4）在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中的表达,探讨其高表达与预后及对肾癌细胞系增殖的影响。方法:采用免疫组织化学EnVision法检测48例ccRCC标本及20例肾盂积水标本中RSK4蛋白的表达,用统计学方法分析RSK4的表达与患者临床病理特征及预后的关系;建立过表达RSK4的肾癌细胞系,检测RSK4过表达对肾癌细胞周期及增殖的影响。结果:48例ccRCC肿瘤组织标本中,RSK4的阳性率为75%（36/48）;在20例肾盂积水患者中,RSK4的阳性率为25%（5/20）,二者具有统计学差异（P＜0.05）;经统计学分析,RSK4的表达与ccRCC患者的年龄、性别之间未见明确相关性（P＞0.05）,但与肾透明细胞癌的WHO/ISUP分级显著相关（P=0.019）;单因素及多因素生存分析发现,RSK4的表达及WHO/ISUP分级与患者预后相关（P＜0.05）;过表达RSK4的肾癌细胞系增殖能力显著增强,对细胞周期也有明显的影响（P＜0.05）。结论:RSK4在ccRCC中的表达显著升高,与预后相关;RSK4过表达对肾癌细胞系的周期、增殖均有显著影响,提示RSK4在肾透明细胞癌中高表达,可能通过促进细胞增殖导致预后不良,而其具体作用机制尚有待进一步研究。     

RhoB在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨RhoB在肾透明细胞癌中的表达及临床意义.方法:采用实时定量PCR、Western blot和免疫组化方法检测RhoB在肾透明细胞癌组织中的表达情况.选取60例肾透明细胞癌组织标本,详细收集病人临床病理资料,通过免疫组化方法检测RhoB在肾透明细胞癌组织中的蛋白表达水平,并分析RhoB的蛋白水平与临床病理资料的关系.结果:与对应瘤旁肾组织相比,RhoB的mRNA及蛋白表达水平在肾透明细胞癌组织标本中明显降低;RhoB的蛋白表达水平在不同年龄、性别组间差异无统计学意义(P>0.05),而在肿瘤直径大小、T分期、临床分期和组织分级间差异有显著统计学差异(P<0.05).结论:RhoB的表达降低可能在肾透明细胞癌的肿瘤发生中发挥作用,且其表达下降可能与肾透明细胞癌的恶性进展有关.