慢性脑血流灌注不足认知功能障碍与环胞素A治疗作用的实验研究

目的 探讨慢性脑血流灌注不足认知功能障碍和环胞素Ａ治疗作用。方法 持久性双侧颈总动脉结扎所致慢性脑血流灌注不足的大鼠模型;用电脑控制穿梭箱记录大鼠学习记忆能力;用免疫组化研究脑内血源性白细胞和Ｔ细胞浸润的规律、分布和可能作用及免疫抑制剂环胞素Ａ（ＣｓＡ）的治疗效果。结果 慢性脑血流灌注不足２～４个月大鼠的学习记忆能力明显下降;缺血１个月后皮层、海马和白质有白细胞和Ｔ细胞的浸润,２～４月浸润的白细胞     

大鼠慢性脑灌注不足脑内小胶质细胞活化和脑的病理改变

目的：探讨慢性脑灌注不足脑内小胶质细胞活化规律与脑病理改变的关系。方法：利用大鼠双侧颈总动脉持久性结扎所致慢性脑灌注不足的动物模型,用OX18抗MHC I类抗原和OX6抗MHC Ⅱ类抗原的免疫组化染色,观察不同脑区小胶质细胞变化规律;用光镜观察脑的病理改变。结果：慢性脑灌注不足可引起脑内小胶质细胞的活化,随着缺血时间的延长,小胶质细胞在皮层和白质的活化有所增加;缺血后脑的病理改变以神经细胞变性、固缩和退变,皮层下白质的神经纤维和髓鞘溃变为主,普遍存在胶质细胞增生,形成胶质小结。经环孢素A治疗后以上变化明显减轻。结论：慢性脑灌注不足所致脑内小胶质细胞的活化与脑内病理改变有关,免疫抑制剂环孢素A对此有一定的治疗作用。     

血管性痴呆大鼠的记忆行为改变与突触结构参数的关系

目的：研究大鼠在慢性脑灌注不足状态下的记忆行为改变以及大脑皮层和海马的突触结构参数改变，探讨记忆行为改变和突触结构参数的关系。方法：采用老年大鼠持久双侧颈总动脉结扎造成慢性脑缺血动物模型，分为正常对照组，缺血2月组，缺血4月组，电脑控制穿梭箱系统观察大鼠记忆行为改变，电镜下观察突触超微结构改变，应用体视学方法和图像分析，对突触结构参数（突触数密度，突触活性带长度，圆盘面积、表面密度）进行分析，并分析两者关系，结果：电脑控制穿梭箱系统观察大鼠主动回避反应（AAR）及被动回避反应（PAR）在缺血2月及4月组均下降，皮层及海马在缺血2月组，缺血4月组突触数密度（Nv)均明显下降，海马在缺血2月组，缺血4月组突触活性带长度（L），突触连接带圆面积（S）及突触表面密度（Sv)均下降，皮层在缺血2月组，缺血4月组未见明显改变。结论：在慢性脑灌注不足状态下的突触数密度下降，突触活性长度减小与记忆行为改变有关。     

血管性痴呆大鼠模型中海马的组织病理学和超微结构变化

目的：通过光镜和电镜观察并探讨慢性脑血流灌注不足大鼠海马的组织病理学和超微结构的动态变化。方法：将60只SD大鼠随机分为模型组和假手术组,其中模型组50只,假手术组10只。模型组采用永久性双侧颈总动脉结扎术方法建立血管性痴呆大鼠模型后,再随机分为术后1、7、14、21 d组和28 d组,每组10只;假手术组麻醉后只分离双侧颈总动脉而不结扎。不同时间点断颈处死大鼠,取大脑,切片,分别在光镜和电镜下观察海马神经元的动态变化。结果：与假手术组相比,各模型组大鼠海马CA1区神经元数量均显著减少（P=0.000）,其中术后14 d组海马CA1区神经元最少,超微结构显示神经元变性,核固缩,而后随着脑血流的恢复,海马神经元数量逐渐增加,神经元损伤有所改善。结论：在慢性脑血流灌注不足早期,海马神经元损伤是可逆的,为临床对慢性脑血流灌注不足患者进行早期治疗以预防血管性痴呆提供理论依据。     

大鼠局灶性脑缺血模型制备及取脑方法实验研究

目的：研究Wistar大鼠大脑中动脉脑缺血动物模型的规范制备方法和不同灌注方法灌注取脑的对照研究,总结关键环节和注意事项。方法：结扎颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）,不结扎翼腭动脉。用适当粗细的鱼线从CCA盲插入颈内动脉（ICA）直到阻断大脑中动脉,拔出再灌注;规定时间4％多聚甲醛缓冲液心脏灌注取脑。结果：造模成功率高,造模动物临床表现典型;非灌注固定取脑,脑组织结构保留差;短期灌注固定取脑较好保留皮层和海马结构,但深部白质及核团结构保留差;长期灌注固定保留结构都好,但耗时长,固定液用量大,进行脑深部白质及核团结构研究效果好。结论：本模型制备方法易操作,注意事项详细,可信度高;研究皮层和海马缺血再灌注损伤选择短期灌注固定取脑尚可满足需要,如需研究深部白质及核团结构尚需长期灌注固定取脑。     

血管性痴呆大鼠模型中海马的组织病理学和超微结构变化

目的:通过光镜和电镜观察并探讨慢性脑血流灌注不足大鼠海马的组织病理学和超微结构的动态变化。方法:将60只SD大鼠随机分为模型组和假手术组,其中模型组50只,假手术组10只。模型组采用永久性双侧颈总动脉结扎术方法建立血管性痴呆大鼠模型后,再随机分为术后1、7、14、21 d组和28 d组,每组10只;假手术组麻醉后只分离双侧颈总动脉而不结扎。不同时间点断颈处死大鼠,取大脑,切片,分别在光镜和电镜下观察海马神经元的动态变化。结果:与假手术组相比,各模型组大鼠海马CA1区神经元数量均显著减少(P=0.000),其中术后14 d组海马CA1区神经元最少,超微结构显示神经元变性,核固缩,而后随着脑血流的恢复,海马神经元数量逐渐增加,神经元损伤有所改善。结论:在慢性脑血流灌注不足早期,海马神经元损伤是可逆的,为临床对慢性脑血流灌注不足患者进行早期治疗以预防血管性痴呆提供理论依据。     

尼美舒利对大鼠慢性脑缺血后白质损伤的改善作用

目的：探讨诱导型环氧和酶（COX-2）抑制剂尼美舒利对大鼠慢性脑缺血后白质损伤的改善作用.方法：36只SD大鼠随机分为对照组、缺血组和治疗组,后2组大鼠采用持久双侧颈总动脉结扎术造成慢性脑缺血及白质损伤模型.治疗组于术后24 h以尼美舒利（6 mg/kg）每d灌胃,对照组和缺血组以同等量的0.5 g/L羧甲基纤维素钠灌胃,连续30 d.各组于30 d后做病理染色和免疫组化染色,观察脑组织病理学改变,胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞表达情况及β-淀粉样前体蛋白（β-APP）阳性轴突表达情况.结果：与对照组相比,缺血组皮层下白质有神经纤维和髓鞘溃变,GFAP阳性细胞明显增多,β-APP免疫阳性轴突明显增多;治疗组以上变化明显减轻,且差异有统计学意义.结论：尼美舒利对慢性脑缺血后白质的损伤有改善作用.     

脑血流低灌注老龄大鼠中脑皮质血流的改变与血清总胆固醇和高密度脂蛋白的动态变化

目的：通过建立脑血流低灌注模型,观察老龄大鼠脑血流的变化以及在脑血流低灌注下血清中总胆固醇（Total cholesterol,TC）和高密度脂蛋白（High density lipoprotein,HDL）的动态变化。方法：采用持久性双侧颈总动脉结扎法（2VO）致老龄大鼠脑血流灌注不足,测定术后7、14、21、28 d大鼠脑皮质血流;检测、比较术后不同时间段大鼠血清中 TC 和 HDL 浓度差异。结果：术后第14天大鼠脑颞区血流出现明显减少;术后 21、28 d大鼠脑局部皮质血管有再生侧支形成,大鼠脑颞区血流仍未恢复;术后第 14天血清中 HDL、TC 含量明显高于假手术组（P＜0.05）,随着缺血时间延长,又逐渐降低。结论：血清 TC 和 HDL 浓度在脑缺血灌注不足的不同时间段经历了先增强后减弱的动态变化,提示脑血流低灌注老龄大鼠因大脑血流灌注不足可出现体内胆固醇代谢失衡并出现应激调节现象。     

Effect of Curcumin on ABCA1, serum high density lipoprotein and total cholesterol in chronic cerebral hypoperfusion aging rats

目的:探讨姜黄素(Curcumin)对脑血流灌注不足老龄鼠海马组织CA1区三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)的表达及血清中总胆固醇(Total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL)的影响.方法:采用双侧颈总动脉永久性结扎模型制备慢性脑缺血模型,老龄鼠随机分为正常对照组、药物治疗组、单纯缺血组、假手术组,药物治疗组又分为高剂量组(姜黄素100mg/kg)和低剂量组(姜黄素50mg/kg),治疗组于术后24h开始用姜黄素每日腹腔注射,给药连续30d.采用苏木素-伊红染色观察大鼠海马CA1区锥体细胞形态学改变,采用生化方法检测血清HDL和TC水平,采用免疫组织化学染色方法分析大鼠海马组织ABCA1蛋白表达情况.结果:苏木素-伊红染色显示,与假手术组和正常对照组相比,单纯缺血组的海马CA1区的锥体细胞发生变性,部分神经元溶解消失.而药物治疗组CA1区未见明显缺血性改变,与正常对照组和假手术组相比,单纯缺血组的血清HDL和TC明显降低(P＜0.05).与单纯缺血组相比,药物治疗组脑血流灌注不足老龄鼠血清HDL、TC水平明显升高(P＜0.05).免疫组化结果表明:与单纯缺血组相比,药物治疗组海马CA1区锥体细胞ABCA1的表达水平明显升高(P＜0.05).结论:姜黄素可以通过提高ABCA1的表达从而改善慢性脑血流灌注不足导致的海马CA1区损伤,并提高药物治疗组血清HDL和TC水平.这为血管性痴呆的治疗提供新的实验依据.     

慢性脑供血不足患者局部脑血流与认知功能障碍的关系研究

目的探讨慢性脑供血不足患者局部脑血流量减少与认知功能障碍的关系。方法收集69例慢性脑供血不足患者作为研究对象,根据简明精神状态量表(MMSE)评分将患者分为单纯慢性脑供血不足组和慢性脑供血不足伴认知功能障碍组;另选35名健康体检者作为对照组。所有研究对象均接受蒙特利尔认知评估量表(Mo CA)评分和影像脑血流检查。结果慢性脑供血不足伴认知功能障碍组患者的局部脑血流量明显低于单纯慢性脑供血不足组和对照组,单纯慢性脑供血不足组低于对照组,差异均有统计学意义(均<0.05),其中以颞叶、额叶和顶叶及深部白质部位变化尤为明显。对照组的Mo CA总分高于单纯慢性脑供血不足组和慢性脑供血不足伴认知功能障碍组(均<0.05)。结论慢性脑供血不足患者认知功能障碍与局部脑血流异常变化有关。对健康人群和单纯慢性脑供血不足患者可开展健康教育,改善生活行为习惯,缓解临床症状。     

老年性脑神经疾病SPECT血流灌注显像应用研究

用两种灌注显像剂，对84例老年中枢神经系统疾病患者行单光子断层显像（SPEC）研究。其中脑血管疾病53例，痴呆25例（AD17例，MID8例），帕金森氏病6例。79例进行了CT检查并作了比较，结果表明，SPECT脑显像对脑血管疾病有较高的诊断价值。93．3％脑梗塞患者SPECT显像有阳性发现，图像特征为病灶处血流灌注减少所致的放射性减低区，与CT相符，但范围较CT为大。在TIA、脑供血不足及脑动脉硬化中均见到有局部血流减少的表现，较CT为灵敏，但脑出血阳性率略逊于CT。痴呆症的SPECT改变在AD和MID中各有其特征性改变。大多数帕金森氏病患者的大脑和基底节可见到血流减低区，其CT改变不明显。     

Chronic hypoperfusion due to intracranial large artery stenosis is not associated with cerebral β-amyloid deposition and brain atrophy

Background:Insufficient cerebral perfusion is suggested to play a role in the development of Alzheimer disease (AD). However, there is a lack of direct evidence indicating whether hypoperfusion causes or aggravates AD pathology. We investigated the effect of chronic cerebral hypoperfusion on AD-related pathology in humans.Methods:We enrolled a group of cognitively normal patients (median age: 64 years) with unilateral chronic cerebral hypoperfusion. Regions of interest with the most pronounced hypoperfusion changes were chosen in the hypoperfused region and were then mirrored in the contralateral hemisphere to create a control region with normal perfusion. ¹¹C-Pittsburgh compound-positron emission tomography standard uptake ratios and brain atrophy indices were calculated from the computed tomography images of each patient.Results:The median age of the 10 participants, consisting of 4 males and 6 females, was 64 years (47–76 years). We found that there were no differences in standard uptake ratios of the cortex (volume of interest [VOI]: P = 0.721, region of interest [ROI]: P = 0.241) and grey/white ratio (VOI: P = 0.333, ROI: P = 0.445) and brain atrophy indices (Bicaudate, Bifrontal, Evans, Cella, Cella media, and Ventricular index, P > 0.05) between the hypoperfused regions and contralateral normally perfused regions in patients with unilateral chronic cerebral hypoperfusion.Conclusion:Our findings suggest that chronic hypoperfusion due to large vessel stenosis may not directly induce cerebral β-amyloid deposition and neurodegeneration in humans.     

血管性痴呆的动物模型及其胆碱能机制研究

目的 建立血管性痴呆（ＶＤ）的运行模型,并探讨血管性痴呆认知障碍的发病机制。方法 采用持久性双侧颈总动脉法致老龄大鼠慢必离血流灌注不足,建立老大鼠血管要模型,进行数字减影血管造影（ＤＳＡ）检查、穿梭箱试验和胆碱乙酰酶（Ｃｈｏｌｉｎｅ ａｃｅｔｙｉｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ,ＣｈＡＴ）免疫组化测定。结果 慢性脑血流灌注不足２月后出现明显的认知功能障碍,缺血４月后更明显;海马ＣＡ１区ＣｈＡＴ免疫反应阳性神     

Ultrastructural features of cultured rat cortical astrocytes with stretch-induced injury]

OBJECTIVE: To investigate the changes of ultrastructural features of cultured rat cortical astrocytes after stretch-induced injury. METHODS: Rat cortical astrocytes isolated from 1- to 2-day-old rats were cultured till confluency, and then plated in tissue culture wells with flexible silastic bottom after purification. A computer-controlled device was used to produce stretch-induced injury in the astrocytes with the imposed pressure of 50, 150, and 250 kPa respectively, followed by observation of the ultrastructural changes in the astrocytes with light and electron microscopy. RESULTS: Obvious ultrastructural destruction of the astrocytes occurred when the imposed stretch pressure was 50 kPa, and scanning electron microscopy demonstrated increased intercellular space and laceration of the cell body and its processes. Transmission electron microscopy revealed mitochondria swelling 1 h after stretch-induced injury and 6 h after the injury, vacuolar degeneration of the mitochondria occurred. Increased stretch pressure caused further decrease in the amount of glial filaments and densification of astrocytes. CONCLUSIONS: Stress, even at a relatively small scale, can cause disruption of intercellular juncture and ultrastructural change of the cultured astrocyte, which may be related with extensive brain edema after traumatic brain injury.     

培养大鼠星形胶质细胞牵张损伤后超微结构的变化

目的研究体外培养星形细胞牵张损伤后超微结构的变化。方法取新生1~2 d大鼠的皮层细胞原代培养,经纯化后传代培养于乳胶膜培养皿中。采用计算机控制的牵张损伤装置,分别以50、150、250 kPa压力牵张损伤培养于乳胶膜上的大鼠皮层星形胶质细胞。用3%戊二醛固定后,行扫描电镜和透射电镜观察。结果当用50 kPa驱动压力进行牵张损伤时,细胞结构即有明显破坏,表现为细胞间隙增宽,部分胞体和突起被撕裂;以50 kPa牵张损伤后1 h,透射电镜下可见线粒体肿胀、嵴减少;损伤后6 h可见线粒体致密、细胞器减少等。当牵张应力增大,星形细胞损伤程度加重,细胞器明显减少,线粒体空泡化,微丝、微管明显减少,直至水样胞质或致密胞体。结论较小的应力即可致星形细胞紧密连接的破坏和超微结构的改变,可能与脑外伤后产生广泛的脑水肿有关。     

慢性脑血流低灌注大鼠血和脑内β-淀粉样肽的变化

目的研究慢性脑血流低灌注对大鼠血和脑内β-淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)含量的影响。方法老年(10月龄)雄性SD大鼠双侧颈总动脉结扎,分别于手术后10d、30d、90d和180d进行Morris水迷宫实验;用放射免疫分析法检测血清、大脑皮质及海马的Aβ含量;用Western blot方法检测大脑皮质和海马的β-淀粉样肽前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)的含量。结果Morris水迷宫实验显示,大鼠在术后30d、90d、180d均出现学习记忆功能下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);血清Aβ水平在术后10d显著增高(P<0.01),30d、90d、180d血清Aβ水平仍高于对照组(P<0.05);术后90d和180d海马的Aβ和APP增高(P<0.05),180d皮质的Aβ和APP增高(P<0.05)。结论慢性脑血流低灌注引发大鼠脑及血中Aβ的升高,可能在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)早期发病过程中有重要意义。     

Cyclosporin treatment of IgA nephropathy: a short term controlled trial

Cyclosporin's known regulatory effects on the immune system suggest that it may be useful in treating patients with IgA nephropathy. A randomised prospective single blind study of 19 patients with IgA nephropathy and proteinuria (greater than 1.5 g/day) was conducted to determine the therapeutic value of cyclosporin. The patients were divided into two groups: nine patients were given oral cyclosporin (5 mg/kg/day) for 12 weeks and 10 patients a placebo. The two groups were comparable in age of presentation, ratio of men to women, plasma creatinine and serum IgA concentrations, creatinine clearance, daily urinary protein excretion, severity of renal histopathological changes, and prevalence of hypertension. A significant reduction of proteinuria and an increase of plasma albumin concentration was observed with treatment with cyclosporin. Nevertheless, a significant rise of plasma creatinine concentration and a fall in creatinine clearance was found in patients after six weeks' treatment with cyclosporin, although the plasma cyclosporin concentrations were maintained within a narrow therapeutic range. Serum IgA concentrations were reduced in seven patients. Renal function improved within eight weeks after treatment was stopped. Three months after treatment was stopped proteinuria remained less than half of the pretreatment values in three patients. No similar biochemical changes were observed in the controls. Short term cyclosporin therapy may be beneficial in reducing proteinuria in some patients with IgA nephropathy. As transient renal impairment was seen, despite cyclosporin concentrations being maintained within a narrow therapeutic range, indiscriminate use of cyclosporin in glomerulonephritis should be discouraged.     

海洛因成瘾大鼠脑血脑屏障超微结构的变化

目的：建立海洛因成瘾大鼠模型,电镜下观察其脑组织中血脑屏障及其周围胶质细胞的超微结构变化。方法：采用递增法给大鼠皮下注射海洛因人为建立海洛因成瘾动物模型,设对照组和模型组,取两组大鼠多部位脑组织作电镜观察。结果：海洛因成瘾大鼠脑内各取材部位在电镜下都能观察到血脑屏障(BBB)通透性增加的一系列超微结构变化,如毛细血管内皮细胞变薄、内皮细胞内吞饮小泡明显增多、内皮细胞间紧密连接破坏等。BBB毛细血管基膜外星形胶质细胞足板水肿,毛细血管周围星形胶质细胞也水肿。结论：海洛因成瘾大鼠脑组织广泛性出现BBB通透性增加的超微结构变化,BBB周围星形胶质细胞水肿,这些改变影响脑细胞与外周之间的物质交换和信息交流,最后引起脑细胞损害,此作用应是海洛因致脑损害的病理机制之一。