_αB-晶状体蛋白在缺血预适应中的作用初探

αＢ－晶状体蛋白在缺血预适应中的作用初探湖南医科大学病理生理教研室（长沙４１００７８）黄勤肖卫民钟林尢家马录本实验观察小分子热休克蛋白αＢ－晶状体蛋白（αＢ－ｃｒｙｓｔａｌｉｎ）在大鼠离体Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ心脏缺血预适应中的变化。Ｗｉｓｔａｒ雄性大...     

大鼠心肌缺血再灌注损伤时细胞色素P-450含量变化

本实验复制大鼠缺血再灌注损伤及缺血预处置模型 ,通过观察心肌组织中细胞色素Ｐ450 (ＣＰ450 )含量及室性心律失常严重程度 ,探讨ＣＰ450在心肌缺血再灌注损伤及缺血预处置中的作用。方法 :采用结扎冠状动脉左前降支 60ｍｉｎ和完全放松 30ｍｉｎ的方法复制心肌缺血再灌注损伤模型 :采用缺血 5ｍｉｎ/再灌注 5ｍｉｎ两次造成缺血预处置。雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,随机分为 5组 :( 1 )假手术对照组 (ｃｏｎｔｒｏｌ,ｎ =6) ;( 2 )缺血再灌注组 (Ｉ/Ｒ ,ｎ =6) ;( 3)ＣＰ450抑制后缺血再灌注组 (ＣＬＯ ,ｎ =6) ;给予细胞色素Ｐ450单氧化酶抑制…     

丹参滴丸对缺血/再灌注损伤心肌高能磷酸化合物的影响

目的 :进一步探讨丹参滴丸对缺血 /再灌注损伤心肌的保护作用及其机制。方法 :采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离体心脏灌流技术 ,制备心肌缺血 /再灌注损伤模型 ,利用高效液相色谱仪 (ＨＰＬＣ)测定离体大鼠心肌组织中的高能磷酸化合物的含量变化。本实验共分 6组 :正常对照组 :大鼠心脏离体后 ,接在灌流装置上持续灌流 75ｍｉｎ。单纯缺血再灌组 :先预灌 1 5ｍｉｎ ,然后停止灌流 ,保持心脏温度恒定在 37℃ ,在无氧 ,无灌流液的条件下旷置 40ｍｉｎ ,再恢复灌流 2 0ｍｉｎ。丹参滴丸前保护组 :预灌时加丹参滴丸 ,后处理同单纯缺血再灌组。丹参…     

潘生丁对缺血预适应的心肌保护作用的影响

潘生丁对缺血预适应的心肌保护作用的影响同济医科大学附属同济医院心内科（武汉４３００３０）马礼坤，余枢心肌缺血预适应（ｉｓｃｈｅｍｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ）是指实质性心肌缺血前经一次或多次短暂的缺血－再灌而产生的一种自身的心肌缺血保护效应。其...     

严重烧伤后大脑皮质、心肌和腓肠肌立早基因编码蛋白的表达及其意义

严重烧伤、创伤、休克、缺血 再灌注等多种病理条件下机体主要脏器如心、肝、肺、肾、肠等在早期均可发生一系列损伤[1,2 ] 。资料显示 ,同一机体的不同组织器官、同一组织器官的不同区域、同一组织的不同细胞即使在相同的病理条件下其损伤发生的时间及损伤程度不同 ,即损伤存在差异性 ,但其发生机制尚待阐明[3] 。我们应用免疫组织化学ＳＰ法检测了大鼠 3 0 %体表面积 (ｔｏｔａｌｂｏｄｙｓｕｒｆａｃｅａｒｅａ,ＴＢＳＡ)Ⅲ度烧伤后大脑皮质、心室肌及腓肠肌组织ｃ ｆｏｓ、诱生型一氧化氮合酶 (ｉＮＯＳ)、ｂｃｌ 2、热休克蛋白 (ＨＳ…     

热休克基因表达对抗过氧化氢所致肺内皮细胞损伤的保护作用

本研究探讨热休克反应（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｒｅｓｐｏｎｓｅ，ＨｓＲ）对抗过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）所致牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣｓ）损伤的保护作用及机制。实验发现，预先热休克处理（４２℃，２ｈ）可使ＢＰＡＥＣｓ中热休克蛋白７０ｋＤａ（ＨＳＰ７０）及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ明显增多，同时显著减轻Ｈ２Ｏ２所致的ＢＰＡＥＣｓ中乳酸脱氢酶释放和硫代巴比妥酸反应物含量增加及过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性的降低等变化。进一步实验证明放线菌酮和放线菌素Ｄ能分别抑制热休克诱导的Ｈ８Ｐ７０和ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的增多，同时均能取消ＨＳＲ对抗Ｈ２Ｏ２所致ＢＰＡＥＣｓ损伤的保护作用。结果提示，ＨＳＲ具有对抗Ｈ２Ｏ２所致ＢＰＡＥＣｓ损伤的保护作用；此种保护作用与细胞经热休克处理后细胞中热休克基因在转录和翻译两个水平的表达增强及抗氧化能力增加有关。     

缺血预处理诱导大鼠海马CA_1区神经元HSP_(70)提前表达

目的前脑缺血再灌注可引起大鼠海马迟发性神经元死亡。但若在致死性缺血前，预先给于短暂的非致死性缺血刺激，即缺血坝处理（ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ，ＩＰＣ），则可对其后的长时间致死性缺血产生耐受，此现象称为缺血耐受。ＨＳＰ_７０基因的转录被认为是细胞应激反应的基因标志。其基因产物ＨＳＰ_７０。具有细胞保护作用。本研究旨在探讨缺血预处理引起的缺血耐受中 ＨＳＰ_７０表达的变化。方法（１）建立动物模型：选用健康成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，参照Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ的四血管阻断法建立前脑缺血模型。动物分三组：单纯缺血再灌注组（ＩＲ组），给予假手术３ｄ后行８ｍｉｎ致死性缺血；缺血预处理组（ＩＰＣ组），先给予３ｍｉｎ非致死性缺血．３ｄ后再给予８ｍｉｎ缺血：对照组，只给于假手术，不给予缺血刺激，（２）免疫投化检测；十缺血再灌注２ｈ，取脑制备冰冻切片，用ＳＡＢＣ 法检测各组海马ＣＡ_１区神经元ＨＳＰ_７０的表达。（３）流氏细胞术检测：于缺血再灌庄２４ｈ，迅速取而背侧新鲜海马组织，用流氏细胞仪检测海马ＣＡ_１区神经元ＨＳＰ_７０的阳性表达率。（４）病理学检查：再灌注７ｄ时取脑制备石蜡切片，行尼氏染色，光镜下观察海马ＣＡ     

黑色素瘤B16细胞热休克蛋白-抗原肽复合物(HAC)的提纯及其抑瘤作用

热休克蛋白 (Ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ ,ＨＳＰ)是一类在生物进化中高度保守、广泛存在于原核真核生物中的蛋白质 ,具有携带特异性抗原的作用[1] 。从肿瘤组织中提取的ＨＡＣ(ＨＳＰ -ａｎｔｉｇｅｎｐｅｐｔｉｄｅｃｏｍｐｌｅｘ)具有肿瘤疫苗的作用 ,能特异性地抑制     

一氧化氮在实验性缺血再灌注心肌顿抑中的作用及左旋精氨酸干预

目的 :为了探讨一氧化氮 (ＮＯ)在实验性缺血再灌注心肌顿抑中的作用及左旋精氨酸 (Ｌ -Ａｒｇ)对其的影响。方法 :选用 2 0只家兔 ,制备心肌缺血再灌注模型 ,随机均分为对照组和Ｌ -Ａｒｇ组 ,分别于缺血前、缺血 40ｍｉｎ及再灌注 2 0ｍｉｎ取血检测ＮＯ水平 ,相应时点监测心功能。结果 :心肌缺血再灌注期间 ,一氧化氮代谢产物含量 (ＮＯＰ)显著下降 (缺血前 2 6 9± 4 6μｍｏｌ/Ｌ ,缺血 40ｍｉｎ 1 4 8± 3 8μｍｏｌ/Ｌ ,再灌注 2 0ｍｉｎ 1 2 7± 5 3μｍｏｌ/Ｌ ,Ｐ均 <0 0 0 1 ) ;心肌舒缩功能指标 (ＭＡＰ、ＬＶＳＰ、 ｄｐ/ｄ…     

热休克预处理抗过氧化氢所致心肌细胞损伤保护作用的细胞分子机理

体外培养的鸡胚心肌细胞分别置于３７℃．３９℃．４２℃下进行预处理，ＳＤＳ－ＰＡＧＦ、Ｎｏｒｔｈｅｍｂｌｏｔ及Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ显示４２℃预处理２ｈ导致心肌细胞中热休克蛋白（ＨＳＰｓ）特别是ＨＳＰ７０基因表达明显增加，并明显减轻了随后Ｈ２Ｏ２所致的心肌细胞损伤，表现为较高的细胞存活率、较高的ＳＯＤ及过氧化氢酶活性及较低的ＴＢＡＲＳ水平，而３９℃２ｈ的热休克预处理未能获得上述结果。在转录抑制剂放线菌素Ｄ或翻译抑制剂放线菌酮存在下，热休克预处理所诱导的ＨＳＰ基因表达被完全阻断，上述心肌细胞保护作用亦被完全取消。本研究为热休克蛋白的心肌保护作用提供了进一步证据     

实验性汉坦病毒感染乳鼠诱导脑神经细胞表达热休克蛋白70

热休克反应 (ｈｅａｔｓｈｏｃｋｒｅｓｐｏｎｓｅ ,ＨＳＲ)是细胞在受到缺氧、氧化损伤、病毒感染和免疫紊乱等各种应激因素损伤时 ,为适应周围微环境的改变而作出的一种自身保护性反应。该过程以暂时性下调许多细胞本身产物和有选择性地上调热休克蛋白 (ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ ,ＨＳＰ)的表达为特点[1] 。ＨＳＰ的诱导表达具有保护细胞免受微环境中各种有害因素的损伤 ,减小组织的梗死面积 ,减轻脏器损伤 ,以及降低致死性应激状态下动物死亡率的作用[2 ] 。目前发现 ,有很多病毒可以诱导细胞热休克反应。我们在以往研究中发现 …     

大鼠失血性休克对内毒素诱导TNFα产生的影响及其分子机制

笔者观察了大鼠失血性休克（ＨＳ）对内毒素诱导肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）产生的影响及其细胞来源，并结合休克后组织内脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）ｍＲＮＡ的表达变化，对其分子机制进行了初步分析。研究结果显示，静脉注射ＬＰＳ后９０ｍｉｎ，ＨＳ＋ＬＰＳ组血浆ＴＮＦα水平分别较ＨＳ组高２０倍（Ｐ＜０．０１），ＬＰＳ组高２．７倍（Ｐ＜０．０５）；休克和复苏后，外周血白细胞产生ＴＮＦα的能力明显受抑，而肝Ｋｕｐｆｅｒ＇ｓ细胞产生ＴＮＦα的能力却明显增强；休克后不仅肝组织内ＬＢＰｍＲＮＡ表达增多，肺、肾组织内ＬＢＰｍＲＮＡ也相继表达增加。研究结果提示，失血性休克能显著增敏内毒素诱导ＴＮＦα的产生作用，其机制可能与休克后组织内ＬＢＰ表达上调有关，组织巨噬细胞群（如Ｋｕｐｆｅｒ细胞）可能是休克后细胞因子产生的主要来源。     

硫酸镁对大鼠心肌缺血再灌注时黏附分子变化的作用

内皮细胞损伤、白细胞激活可能是心肌缺血再灌注损伤的病理生理机制之一 ,细胞黏附分子 (如Ｐｓ、ＣＤ11ｂ) ,以及单核细胞趋化蛋白 1(ＭＣＰ 1)在其中发挥重要作用。我们的研究旨在探讨硫酸镁对缺血再灌注时上述细胞功能的影响及作用 ,寻求减少心肌缺血再灌注损伤的治疗途径。一、材料和方法1.大鼠心肌缺血再灌注模型 :选 2 4 0～ 2 80ｇ雄性ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ(ＳＤ)大鼠 ,随机分成 4组 :Ａ组 (术前对照组 ,6只 ) ,不对动物作任何处理 ;Ｂ组 (ｓｈａｍ组 ,30只 ) ,术中仅在冠状动脉前降支下穿线而不结扎 ,余操作同Ｃ组 ;Ｃ组 (Ｉ…     

11，12-EET的类IP样心肌保护作用

目的 :观察外源性低浓度 1 1 ,1 2 -环氧 -二十碳三烯酸 ( 1 1 ,1 2 -ＥＥＴ)是否具有类似缺血预处理 (ＩＰ)样的心肌保护作用。方法 :健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,戊巴比妥钠 ( 4 5ｍｇ/ｋｇ)腹腔注射麻醉。开胸 ,结扎和松开冠状动脉左前降支 ,复制心肌缺血 /再灌注模型 (包括缺血 1 0ｍｉｎ/再灌注 1 0ｍｉｎ和缺血 60ｍｉｎ/再灌注30ｍｉｎ二种 )。颈静脉插管用于给药。应用ＲＭ - 62 0 0Ｃ型四道生理记录仪持续监测Ⅱ导联心电图并输入计算机。实验结束后 ,取下左心室 ,分别进行心肌曲利本兰及ＴＴＣ染色以观察心肌缺血和梗塞范围 ,利用Ｑ…     

不同家族热休克蛋白的生理功能及病理意义

当细胞处于高温（４０～４３℃）、严重缺氧、缺血、内毒素作用及紫外线照射等应激刺激时，可以激活“应激蛋白”（ｓｔｒｅｓｐｒｏｔｅｉｎ，ＳＰ）或“热休克蛋白”（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＳＰ）的合成。它能够快速、短暂调整应激过程中细胞存活机...     

珠子参总皂甙、三七总皂甙及绞股兰总皂甙对心肌缺血再灌损伤的保护作用

采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离体心脏灌流方法，以停灌３０分钟，再灌注２０分钟制备大鼠心肌缺血再灌损伤模型。三七总皂甙（ＰＮＳ３０ｍｇ／Ｌ）和绞股兰总皂甙（ＧＰ，３０ｍｇ／Ｌ和５０ｍｇ／Ｌ）显著降低不可逆室颤发生率，５０ｍｇ／Ｌ的ＧＰ显著抑制心肌ＬＤＨ释放，ＰＮＳ和ＧＰ显著提高缺血再灌心肌ＳＯＤ活性，ＧＰ明显降低其ＭＤＡ水平，ＰＮＳ明显降低心肌钙含量。在结扎家兔冠状动脉左室支２小时，再灌注３０分钟所造成的心肌缺血再灌损伤模型中，珠子参总皂甙ＰＪＳ，２５０ｍｇ／ｋｇ）和ＰＮＳ（２００ｍｇ／ｋｇ）轻度改善缺血再灌后的左室功能，显著降低再灌后血浆ＬＤＨ和ＣＰＫ水平，明显减轻心肌钙聚积。以上结果表明：ＰＪＳ，ＰＮＳ和ＧＰ对心肌缺血再灌损伤具有保护作用，ＰＪＳ和ＰＮＳ的作用机理可能与拮抗钙有关，ＧＰ的作用机理可能与抗脂质过氧化有关。     

缺血预处理模型大鼠心肌组织小分子热休克蛋白的表达

背景：小分子热休克蛋白,尤其是热休克蛋白27和α-B晶体蛋白高表达量对于心肌组织缺血再灌注的保护作用已比较明确。但是在老龄大鼠中小分子热休克蛋白是否仍具有这种保护作用迄今仍无报道。 目的：观察热休克蛋白27和α-B晶体蛋白在青年及老年大鼠心肌缺血预处理时表达的变化。 方法：24月龄老龄大鼠及两三月龄青年大鼠在体心脏经缺血5 min、再灌注5 min(反复3次)预处理后,于0,5,15,45,60 min取左心室缺血的前壁与非缺血的后壁心肌组织分别匀浆,分离上清及沉淀蛋白,用Western Blot检测热休克蛋白27和α-B晶体蛋白在预处理不同时间可溶性蛋白及不溶性蛋白含量的改变;采用RT-PCR方法观察缺血预处理对青年及老龄大鼠热休克蛋白27和α-B晶体蛋白mRNA在不同时间点表达的改变情况,采用免疫荧光观察缺血预处理后不同时间点热休克蛋白27和α-B晶体蛋白的移位情况。 结果与结论：老龄大鼠在缺血预处理后热休克蛋白27和α-B 晶体蛋白表达量增加,表明老龄大鼠仍具有正常的基因转录及蛋白合成的能力;与青年大鼠比较,老龄大鼠缺血预处理后小分子热休克蛋白移位能力降低,从而减弱了与各相应蛋白结合的能力,限制其保护作用的发挥。提示老年大鼠心肌组织中小分子热休克蛋白丧失移位能力,可能是老年大鼠缺血预处理保护作用减弱的重要原因之一。     

热休克反应对大鼠感染性脑水肿细胞因子和一氧化氮的 …

为研究ＩＬ－１β－、ＴＮＦ－α及ＮＯ在感染性脑水肿时的变化和热休克反应对它们的影响，探讨热休克反应对大鼠感染性脑水中的保护作用是否与其有关，本实验采用ＥＬＩＳＡ法和Ｇｒｉｅｓｓ法分别检测各组大鼠脑组织均浆中ＩＬ－１β－、ＴＮＦ－α及ＮＯ的含量，大鼠分３组：①正常对照组（ＮＳ）；②感染性脑水肿组（ＰＢ）；③热休克处理组（ＨＳ＋ＰＢ）。每组又分为４ｈ、８ｈ、２４ｈ三个时间点。结果显示：与ＮＳ组比较，４     

热休克蛋白60KD与动脉粥样硬化

热休克蛋白（ＨｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎＨＳＰ）是一种应激蛋白。原核细胞和真核细胞在各种应激刺激和许多其它损伤因素包括物理因素、化学因子、缺血、缺氧、氧自由基、中毒及创伤作用下均可产生ＨＳＰ。科学家们迄今对许多进化程度不同的物种的ＨＳＰ家族成员进行了基因和序列分析，发现ＨＳＰ属生物界分布最广泛、结构最保守的蛋白质之列．从大肠杆菌到人的ＨＳＰ氨基酸序列有５０％以上同源性。ＨＳＰ广泛存在于各种病原微生物中，而且是优势免疫原。这对免疫系统无疑是一种挑战。下面将对与免疫反应有关的热休克蛋白及其动脉粥…     

熊胆注射液对失血性休克大鼠肠系膜微循环的影响

目的 :观察了 0 .0 5 %浓度的熊胆注射液对失血性休克大鼠平均动脉血压 (ＭＢＰ)和存活时间的影响及肠系膜微循环动态变化 ,并与等量的生理盐水组进行比较。方法 :将Ｗｉｓｔａｒ系大鼠随机分 2组 (ｎ =8) :实验组 (ＢＢＩ组 )静脉滴注 0 .0 5 %熊胆注射液 1.8ｍｇ/ 10 0 ｇ ;对照组 (ＮＳ)给予等容量的生理盐水。用 2 0 %乌拉坦皮下麻醉 ,股动脉放血造成失血性休克 6 0ｍｉｎ后开始给药进行抢救。分别记录放血前、放血 6 0ｍｉｎ、给药抢救 30ｍｉｎ、6 0ｍｉｎ时ＭＢＰ和各微循环指标的动态变化以及存活时间。结果 :(1)休克时各组ＭＢＰ显…