中医药调控TGF-β1/Smads信号通路干预肝纤维化的研究现状

肝纤维化(HF)是慢性肝损伤的病理生理结果,其特征是细胞外基质蛋白的过度积累。现有多项研究证实转化生长因子-β1(TGF-β1)及其下游Smad家族形成的信号通路在HF发生发展中具有重要意义,以此通路为靶点的中医药研究是目前逆转HF的热点。因此,本文以TGF-β1/Smads信号通路为切入点,综述近几年中药复方及单味药提取物干预TGF-β1/Smads通路及通路上下游相关因子逆转HF的作用机制,揭示中医药的靶向治疗作用,为阐明中医药的作用机制提供新策略。     

熊果酸调控TGF-β1/Smads信号通路对肾纤维化的干预作用

目的 观察熊果酸对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)小鼠肾纤维化和肾小管上皮-间质转分化(epithelial-mesenchymal transdifferentiation,EMT)的影响,探索TGF-β1/Smads信号通路在其中的作用机制.方法 将50只IC...     

大血藤煎剂对慢性盆腔炎大鼠子宫TGF-β/Smads通路的影响研究

目的：探讨分析大血藤煎剂对慢性盆腔炎大鼠子宫TGF-β/Smads通路的影响。方法：选择SD雌性大鼠70只,随机分为7个组,分别为对照组、假手术组、模型组、大血藤高剂量组、中剂量组、低剂量组以及阳性药物组。造模给药21d进行检测,检测致炎侧子宫肿胀程度、血清炎症因子表达,并采用RT-qPCR法及Western blot法检测子宫组织TGF-β1、TGF-β3、Smad3、Smad7 mRNA及蛋白表达。结果：大血藤各剂量组及阳性药物组子宫肿胀程度低于模型组(P<0.05),且随着大血藤药物浓度的增加,大鼠右侧子宫肿胀度减轻(P<0.05)。大血藤高、中、低剂量组及阳性药物组大鼠血清IL-6、TNF-α以及子宫TGF-β1、TGF-β3、Smad3、Smad7蛋白和mRNA相对表达量较模型组降低(P<0.05),且随着大血藤药物浓度的增加,各指标降低程度越明显(P<0.05)。结论：大血藤煎剂可有效降低慢性盆腔炎大鼠子宫肿胀,其作用机制可能包括抑制大鼠及炎症反应以及抑制TGF-β/Smads信号通路。     

大蒜素通过TGF-β1/Smads通路抑制2型糖尿病大鼠肝纤维化的研究

目的:探讨大蒜素对2型糖尿病大鼠肝脏纤维化和转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的影响.方法:60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、二甲双胍组(阳性对照,200 mg·kg-1)和大蒜素低、中、高剂量组(5,10,20 mg·kg-1).正常对照组大鼠常规饲养,其余各组通过高糖高脂饲料喂养加腹腔注...     

基于TGF-β1/Smads通路研究化纤中药颗粒干预纳米氧化镍所致肺纤维化的作用

目的 探讨化纤中药颗粒(HXF)对纳米氧化镍(NiO)所致的肺纤维化的干预效果和作用机制。方法 将28只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组、纳米NiO组、纳米NiO+500 mg/kg HXF干预组和纳米NiO+1 000 mg/kg HXF干预组。Mssson染色和羟脯氨酸(Hyp)含量检测确定大鼠肺组织胶原蛋白沉积情况,Western blot检测大鼠肺组织Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、TGF-β1和Smad3蛋白的表达水平。结果 与对照组相比,纳米NiO组大鼠肺组织大量胶原纤维沉积,Hyp含量和Col-Ⅰ蛋白表达升高,TGF-β1/Smads通路中TGF-β1和Smad3蛋白的表达均明显升高(F=10.568,F=4.593,F=28.354,F=31.533,F=17.236,P<0.05);与纳米NiO组相比,Masson染色结果显示HXF干预组大鼠肺组织胶原沉积减少,肺组织Hyp含量降低,Col-Ⅰ、TGF-β1和Smad3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 HXF可通过抑制TGF-β1/Smads信号通路干预纳米NiO所致的肺纤维化。     

黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、糖尿病组(DM组)、APS低、高剂量组。一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)制备DM大鼠模型。APS低、高剂量组分别给予200、400 mg·kg~(-1)·d~(-1)APS干预8周。检测大鼠空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、血肌酐、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肾损伤标志物尿肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)、尿骨桥蛋白(osteopontin,OPN)浓度。检测大鼠肾脏TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad7、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2、MMP-9、组织金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases 1,TIMP-1)、TIMP-2水平。结果与正常组比较,DM组大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮、尿KIM-1、OPN浓度明显升高;肾脏TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、TIMP-1、TIMP-2水平明显升高,而肾脏Smad7、MMP-2、MMP-9明显降低。APS明显降低了DM大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮、尿KIM-1、尿OPN浓度,并抑制了肾脏TGF-β1/Smads信号通路的活性。结论 APS对DM大鼠有肾脏保护作用,其机制可能与抑制DM大鼠肾脏TGF-β1/Smad信号通路有关。     

丹蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smads信号通路的调控作用

目的探讨丹蛭降糖胶囊(DZJT)对大鼠糖尿病肾病的防治作用及可能机制。方法 100只♂SD大鼠随机选取12只作为正常组,其余大鼠给予高脂饲料+链脲佐菌素(34 mg·kg~(-1),ip)造模。成模大鼠65只,随机分为模型组、DZJT高、中、低剂量组、吡格列酮组,连续8周灌胃给药。取血清、尿液及肾组织,检测大鼠血糖、肾功能指标;观察肾脏组织的病理变化;检测肾组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、CTGF蛋白表达。结果相较于正常组,模型组大鼠血糖升高,肾功能损伤,病理染色出现明显损伤,纤维组织增生明显,肾脏病理评分明显升高;免疫组化及Western blot均显示,肾组织中TGF-β1、Smad3、CTGF表达增加,Smad2、Smad7表达下降。相较于模型组,各给药组大鼠血糖、肾功能指标不同程度降低,肾脏病理形态学明显改善,TGF-β1、Smad3、CTGF下降,Smad2、Smad7水平上升。结论丹蛭降糖胶囊能有效改善大鼠的糖尿病症状,减轻肾脏损害,其机制可能与调节TGF-β1/Smads信号通路及其下游CTGF表达有关。     

ZLY18通过抑制TGF-β1/Smads通路改善血管紧张素Ⅱ诱导的心肌纤维化

目的 探究化合物ZLY18对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌纤维化的作用及机制。方法 采用Ang II在细胞水平和动物水平上建立心肌纤维化模型。体外实验：将心肌成纤维细胞分为对照组、模型组、ZLY18(L)组、ZLY18(M)组和ZLY18(H)组,分别给予ZLY18 1、2、5μmol·L^-1;体内实验：将小鼠随机分为对照组、模型组、ZLY18(L)组、ZLY18(M)组和ZLY18(H)组,分别给予ZLY18 10、20和50 mg·kg^-1,模型组和药物组同时给予AngⅡ诱导心肌纤维化模型。通过免疫印迹和免疫荧光检测蛋白水平的变化;通过超声心动检测小鼠心功能指标;通过HE染色等方法观察心肌细胞形态、细胞排列和胶原纤维沉积等。结果 体内、外成功建立了AngⅡ诱导的心肌纤维化模型,给予ZLY18处理后均能改善由AngⅡ引起的纤维化相关蛋白升高,小鼠心功能异常等。此外,ZLY18能够抑制由AngⅡ引起的TGF-β1、Smad3的磷酸化水平升高,Smad2/3入核增加,提示ZLY18抗纤维化作用可能与TGF-β1/S...     

川芎嗪调节TGF-β/Smad信号通路对哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响

目的探讨川芎嗪调节TGF-β/Smad信号通路对哮喘小鼠的气道炎症和气道重塑的影响及其作用机制。方法选取40只健康雌性BALB/c小鼠,随机分为对照、模型、川芎嗪、地塞米松组,每组各10只。采用卵清白蛋白(OVA)+氢氧化铝混合液腹腔注射致敏、OVA滴鼻激发构建小鼠慢性哮喘模型,在激发同时川芎嗪、地塞米松组小鼠分别于每日滴鼻激发前30 min ip川芎嗪注射液80 mg/kg或地塞米松注射液2 mg/kg,模型组小鼠ip等量生理盐水。小鼠处死后取肺组织行HE染色观察评估肺组织病理变化,Masson染色观察评估小鼠肺组织气道重塑,ELISA法检测血清中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-5(IL-5)、转录因子GATA-3及转化生长因子-β(TGF-β)表达水平,免疫印迹法检测小鼠肺组织中TGF-β1和Smad2、Smad7表达水平。结果与模型组比较,川芎嗪组小鼠气道改变明显减轻,气管壁炎性细胞浸润减少,气道壁、平滑肌层和基底膜层增厚减轻。川芎嗪组气道周围炎症和肺泡炎症评分显著降低(P0.05)。川芎嗪组基底膜层、平滑肌层厚度明显降低,气道壁内外径比值明显升高(P0.05)。川芎嗪组小鼠血清中IgE、IL-5、GATA-3和TGF-β1水平明显降低(P0.05)。川芎嗪组小鼠肺组织中TGF-β1、Smad2表达均降低,而Smad7表达增加(P0.05)。结论川芎嗪可改善哮喘小鼠气道重塑,其机制是通过调节TGF-β/Smad信号通路来实现的。     

熊果酸对大鼠肾小球系膜细胞凋亡及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的： 观察熊果酸（ursolic acid,UA）对活化的大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells,MCs）凋亡与TGF-β₁/smads信号通路的影响,探讨UA抗肾纤维化的作用机制。方法： 原代培养并分离、纯化大鼠肾小球系膜细胞,转化生长因子β₁（TGF-β₁）刺激活化后,熊果酸按低剂量（2.5 μmol·L^-1）、中剂量（5 μmol·L^-1）、高剂量（10 μmol·L^-1）进行干预。Cell counting kit-8（CCK-8）及流式细胞仪分别检测系膜细胞活力及凋亡率,免疫印迹法测定系膜细胞TGF-β₁受体（TβRI、TβRII）、磷酸化蛋白P-smad信号分子表达的变化。结果： 5 μg·L^-1 TGF-β₁明显激活系膜细胞增殖,上调TGF-β₁受体表达及Smad2的磷酸化,抑制系膜细胞凋亡。低、中、高剂量熊果酸均能抑制系膜细胞增殖,促进凋亡,并下调系膜细胞TGF-β₁受体表达,抑制Smad2的磷酸化。结论： 熊果酸可通过影响TGF-β₁/Smads信号通路,诱导系膜细胞凋亡,拮抗细胞增殖,这可能是熊果酸抗肾脏纤维化的部分细胞学机制。     

吡格列酮通过抑制炎症反应和TGF-β1/Smad3信号通路抗2型糖尿病大鼠心肌纤维化的研究

目的 观察吡格列酮对2型糖尿病（T2DM）模型大鼠心肌纤维化的影响。方法 清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,对照组喂饲正常食物,模型组喂饲高脂饲料,2周后模型组大鼠一次性尾iv链脲佐菌素（STZ）50 mg/kg。造模成功大鼠又随机分为模型组和吡格列酮低、高剂量（5、10 mg/kg）组,除对照组,其余大鼠继续给予高脂饲料,每天ig给药1次至12周。心室彩色超声检测心输出量（CO）、左心室舒张末期（LVIDd）和收缩末期内径（LVIDs）;眼眶采血,应用葡萄糖氧化酶法检测试剂盒测血糖;天狼猩红染色计算胶原容积分数;ELISA法检测外周血肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）水平;Western blotting检测心肌组织转化生长因子β1（TGF-β1）和Smad3蛋白表达。结果 与模型组比较,吡格列酮组血糖、LVIDd和LVIDs显著降低（P<0.05、0.01）,CO显著升高（P<0.05、0.01）;吡格列酮低、高剂量组心肌间质胶原纤维显著减少,胶原容积分数显著降低（P<0.01）;吡格列酮组TNF-α和IL-6表达水平显著降低（P<0.01）;吡格列酮组TGF-β1和Smad3蛋白相对表达量显著降低（P<0.01）;作用均呈剂量相关性。结论 吡格列酮通过抑制炎症反应以及TGF-β1/Smad3信号通路,发挥抗糖尿病大鼠心肌纤维化的作用。     

柚皮素通过调控TGF-β1/smad通路抑制肝纤维化

目的研究柚皮素(naringenin,NGN)对小鼠肝纤维化的抑制作用及机制。方法TGF-β1孵育LX2细胞24 h,构建体外纤维化模型,NGN(100、200μmol·L^-1)处理细胞;喂饲8~10周龄雄性C57BL/6小鼠蛋氨酸-胆碱缺乏饲料6周,诱导小鼠肝脏纤维化模型,同时灌胃给予NGN(100 mg·kg^-1),研究NGN抑制肝纤维化的作用及机制。qRT-PCR检测α-SMA、col1和col3的基因水平;Western blot检测α-SMA、col1、TGF-β1、p-smad2和p-smad3的蛋白水平;HE染色和天狼猩红染色分别检测小鼠肝脏组织形态和纤维化程度。结果体内外实验均表明,与模型组相比,NGN处理明显降低了α-SMA、col1和col3的mRNA和蛋白表达水平,同时明显抑制TGF-β1/smad通路的激活。HE染色和天狼猩红染色结果同样表明,NGN处理与模型组相比明显降了MCD饲料诱导的肝脏纤维化程度。结论NGN可明显抑制TGF-β1诱导的LX2细胞纤维化及蛋氨酸-胆碱缺乏饲料诱导的小鼠肝纤维化,机制与其抑制TGF-β1/smad通路激活有关。     

夏枯草总三萜调控ERK、TGF-β1/Smad通路对肝纤维化大鼠的保护作用研究

目的研究夏枯草总三萜(TTP)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠的保护作用及其分子机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、TTP(25、50、100 mg·kg-1)组和阳性对照组(秋水仙碱0.1 mg·kg-1),除正常组外,其余各组分别于大鼠背部皮下注射CCl40.1 ml·(100 g)-1,每周2次,连续12周,自造模第5周起开始给药,各给药组分别给予相应的药物,正常组、模型组给予等体积的溶媒,每天1次。实验结束后,比色法测定血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;放免法测定透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)含量;同时取固定部位肝组织,苏木精伊红染色(HE)、Masson染色观察肝纤维化程度;制备100 g·L-1肝匀浆,进行丙二醛(MDA)、超(过)氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、羟脯氨酸(Hyp)含量测定;RT-PCR法检测α-SMA、Procollagen I、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA表达;Western blot法检测pERK蛋白表达。结果与模型组相比,TTP(25、50、100 mg·kg-1)给药组不仅能降低肝纤维化大鼠ALT、AST、HA、CⅣ、PCⅢ、Hyp水平,改善肝脏病变程度,降低MDA水平,增强SOD以及GSH-Px活性,还可抑制肝组织中α-SMA、Procollagen I、Smad2、Smad3及p-ERK表达,升高Smad7表达。结论夏枯草总三萜对CCl4诱导的肝纤维化大鼠具有较好的保护作用,其机制可能与下调p-ERK表达,调控TGF-β1/Smad信号通路有关。     

三七总苷对酒精性肝损伤大鼠肝脏TGV-β1／Smads、CTGFmRNA表达的影响

目的 研究三七总苷对酒精性肝损伤大鼠肝脏TGF-β1/Smads和CTGF表达的影响。方法 大鼠灌服白酒-玉米油-吡唑混合液14周,建立酒精性肝损伤模型。成模大鼠随机分成模型组、三七总苷组（高、低剂量组）、水飞蓟素组,同时另设正常对照组,均治疗4周后,测定肝功能、大鼠肝组织TGF-β1、Smad3、Smad7、CTGFmRNA的表达量。结果 与模型组比较,三七总苷组能明显降低血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）以及总胆红素（TB）水平,减少肝组织TGF-β1、Smad3、Smad7、CTGF mRNA的表达量;不同剂量组之间,差异有统计学意义（P〈0.05）;高剂量三七总苷组与水飞蓟素组之间,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 三七总苷与对酒精性肝损伤大鼠肝脏TGF-β1/Smads、CTGF表达有抑制作用。     

鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠肝星状细胞TGF-β1信号传导通路的影响

目的研究外源性转移生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的激活作用,观察鬼针草总黄酮(total flavonoids of Bidens Bipinnata L,TFB)对HSC中smad2/7和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达的影响,以探讨TFB抗肝纤维化的作用及分子机制。方法采用Collagenase Ⅳ胶原酶原位肝灌注法分离HSC,MTT法观察TFB对TGF-β1刺激下HSC增殖的作用,ELISA法检测HSC自分泌TGF-β1和产生Ⅰ型胶原的影响;RT-PCR法观察分析TFB对TGF-β1刺激下HSC中smad2/7和Ⅰ型胶原基因表达的影响;Westernblot法观察TFB对TGF-β1刺激下HSC中smad2蛋白表达的影响。结果TGF-β1明显促进HSC增殖、自分泌TGF-β1和产生胶原,促进HSCsmad2、Ⅰ型胶原mRNA及smad2蛋白的表达,明显抑制smad7mRNA表达(P<0.05),TFB作用后,TGF-β1刺激的HSC中smads2mRNA、蛋白和Ⅰ型胶原mRNA表达受到抑制,smad7mRNA表达明显上调。结论TFB抗肝纤维化作用可能与其阻断HSCTGF-β1通路进而阻断HSC的活化、增殖有关。     

软肝抗纤方对肝纤维化实验大鼠TGF-β/Smad信号转导通路的影响

目的为进一步阐明TGF-β/Smad信号通路的结构、功能及其与肝纤维化的关系提供理论依据。方法以四氯化碳和二甲基亚硝胺致的两种肝纤维化大鼠模型为基础,用软肝抗纤方治疗肝纤维化,研究模型组和给药组与信号转导系统有关的信号转导分子(TGF-β1、Smad3、Smad7和SARA等)在肝纤维化的变化特点和功能作用。结果中药预防组与中药治疗组较之两组模型组,在肝脏羟脯氨酸含量,TGF-β1、Smad3、Smad7和SARA蛋白的表达,TGF-β1、Smad3、Smad7 mRNA含量等指标上具有显著差异,中药预防组与中药治疗组较之空白对照组无显著差异。结论软肝抗纤方在动物模型对肝纤维化具有一定作用,可做进一步的临床研究。     

抗肝纤饮对实验性肝纤维化大鼠TGF-β1的影响

目的:观察抗肝纤饮对实验性肝纤维化大鼠的防治作用,并探讨其作用机制。方法:48只雄性 SD 大鼠被随机分为正常组、模型组、抗肝纤饮及秋水仙碱组,采用 ih40% CCl_4花生油溶液诱导大鼠肝纤维化模型。造模同时,各组分别灌胃给予抗肝纤饮、秋水仙碱及0.9%氯化钠溶液治疗。于11周末检测大鼠血清透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)、血清转化生长因子β_1(TGF-β_1)的水平,检测肝组织 TGF-β_1阳性面积及 TGF-β_1 mRNA 的表达水平。结果:与模型组比较,抗肝纤饮组血清 HA、CⅣ及 TGF-β_1水平显著下降(P<0.01或 P<0.05),肝组织内 TGF-β_1阳性面积及 TGF-β_1 mRNA 的含量明显下降(P<0.01或 P<0.05)。结论:抗肝纤饮对实验性肝纤维化大鼠有较好的防治作用,其作用机制与降低血清及肝组织内 TGF-β_1有关。     

TGF-β1/Smad信号通路相关因子在颅脑外伤大鼠体内的表达研究

目的 研究转化生长因子-β1/细胞内信号传导蛋白Smad(TGF-β1/Smad)信号通路相关因子在颅脑外伤大鼠体内的表达.方法 建立大鼠颅脑外伤模型,检测血清中的核心蛋白聚糖(Decorin)、TGF-β1、Smad2、Smad3含量,以及脑组织中的TGF-1、Smad2、Smad3、炎症介质刺激组织因子(TF)的含量.结果 结果表明重度损伤组与中度损伤组、轻度损伤组、空白对照组、正常组相比较,脑组织皮质与海马神经细胞的变性、丢失最严重,TGF-β1、Smad2、Smad3、TF血清蛋白的表达最高,血清中Decorin的表达最低.结论 TGF-β1/Smad信号通路与颅脑创伤诊断及损伤程度的判断关系密切,TGF-1信号因子可作为颅脑创伤的诊断、治疗、预后的判断指标.