钙激活性中电导钾离子通道在人子宫颈癌组织中的表达及其在细胞增殖中的作用

目的:研究钙激活性中电导钾离子通道(IKCa1)在宫颈癌组织中的表达变化及其在宫颈癌HeLa细胞增殖中的作用。方法:应用RT-PCR技术检测18例正常宫颈组织及15例宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的表达;利用IKCa1通道的阻断剂(克霉唑)处理宫颈癌HeLa细胞,MTT法观察细胞增殖的变化。结果:宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的阳性表达率及表达水平(分别为73.33%、1.14±0.45)明显高于正常宫颈组织(分别为11.11%、0.86±0.23),P<0.05。克霉唑以浓度和时间依赖的方式阻滞HeLa细胞增殖,抑制HeLa细胞的生长,降低IKCa1 mRNA的表达水平。结论:IKCa1的异常表达可能与宫颈癌的发生、发展密切相关,降低其表达可能抑制宫颈癌细胞的增殖和生长。     

宫颈鳞状细胞癌中p63和VDR蛋白的表达及相关性

目的:探讨p63和维生素D受体(VDR)在宫颈鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)中的表达水平及相关性,为宫颈癌的临床治疗提供参考依据。方法:选取2006~2013年在安徽省立医院经病理学确诊的SCC标本80例,采用免疫组化技术检测宫颈组织中p63和VDR的表达情况。结果:p63和VDR蛋白的表达水平与患者有无淋巴结转移及局部侵袭有关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤大小及临床分期无关(P>0.05);p63与VDR的表达水平呈正相关(rs=0.957,P<0.001)。结论:下调p63可抑制VDR表达,促进肿瘤细胞的转移和侵袭。     

siRNA抑制IKCa1基因表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

目的:研究siRNA(small interfering RNA)抑制钙激活性中电导钾离子通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,IKCa1)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法:构建含有IKCa1基因的siRNA表达载体,脂质体法转染HeLa细胞,通过RT-PCR和Western Blot检测HeLa细胞IKCa1 mRNA和蛋白表达变化;WST-1检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析HeLa细胞周期变化。结果:成功构建针对IKCa1基因的真核表达载体,所获表达载体转染HeLa细胞可使IKCa1mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),并能有效抑制HeLa细胞增殖(P<0.05),使细胞周期停留在G0～G1期,S期细胞明显减少。结论:应用siRNA干扰技术能有效抑制IKCa1基因的表达,同时也可有效抑制宫颈癌HeLa细胞体外增殖活性。     

E-钙粘蛋白、β-环连蛋白、上皮细胞粘附分子在宫颈鳞状细胞癌癌变过程中的表达

目的:探讨细胞粘附分子E-钙粘蛋白、β-环连蛋白、上皮细胞粘附分子在宫颈鳞状细胞癌癌变过程中的表达和意义。方法:通过免疫组织化学方法检测3种细胞粘附分子在正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈鳞状细胞癌中的表达情况。结果:①E-钙粘蛋白的阳性表达率从正常宫颈鳞状上皮、CIN至宫颈鳞状细胞癌逐渐下调;②β-环连蛋白的异常表达率从正常宫颈鳞状上皮、CIN至宫颈鳞状细胞癌逐渐增高;③上皮细胞粘附分子的过表达率从正常宫颈鳞状上皮、CIN至宫颈鳞状细胞癌逐渐增高;④E-钙粘蛋白的阳性表达下调及β-环连蛋白的异常表达与上皮细胞粘附分子的过表达相关,可能在宫颈癌变过程中起协同作用。结论:E-钙粘蛋白、β-环连蛋白、上皮细胞粘附分子参与了宫颈鳞状细胞癌的恶性转化过程,可做为宫颈鳞状细胞癌癌变过程中的分子生物学指标。     

TGF-β1在宫颈鳞状细胞癌组织中表达的意义

目的:观察转化生长因子-β1(TGF-β1)在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达情况,探讨其与宫颈癌发生发展的关系,明确其表达的意义。方法:应用免疫组化SP法检测40例宫颈鳞状细胞癌组织(病理分级Ⅰ~Ⅲ级)中TGF-β1蛋白的表达,与正常宫颈组织及慢性宫颈炎组织中的表达作定量比较。结果:①正常宫颈组织及慢性宫颈炎组织中TGF-β1表达位于上皮细胞的胞浆内,两组表达水平无显著性差异(P>0.05);宫颈鳞状细胞癌中TGF-β1表达位于癌细胞的胞浆内。②宫颈鳞状细胞癌中TGF-β1表达水平明显上升,与正常宫颈组织及慢性宫颈炎组织比较有极显著性差异(P<0.01)。③随着宫颈癌病理分级的增加,TGF-β1表达水平逐步上升,有显著性差异(P<0.05)。结论:本研究提示宫颈鳞状细胞癌的发生发展可能与TGF-β1的高表达有关。     

Ets-1在宫颈鳞状细胞癌组织的表达及其意义

目的探讨Ets-1在宫颈鳞状细胞癌组织的表达及其与临床病理因素的关系。方法收集中国人民解放军第二五一医院2008年1月-2013年12月宫颈鳞状细胞癌根治性手术切除标本54例,应用Eli Vision TM plus免疫组织化学染色两步法检测癌组织及癌旁组织中Ets-1的表达状况,探讨与患者年龄、癌灶直径、癌细胞间质浸润深度、分化程度、TNM分期、术前淋巴结转移及术后5年内复发转移的关系。结果 Ets-1在癌组织表达阳性率为64. 8%(35/54),在癌旁组织表达阳性率为13. 3%(4/30),差异有统计学意义(P<0. 05)。根据患者年龄及癌灶直径分组,组间Ets-1表达阳性率差异均无统计学意义(均P>0. 05);根据癌细胞间质浸润深度、分化程度、TNM分期、术前有无淋巴结转移、术后5年内复发转移及Ki-67表达强度分组,组间Ets-1表达阳性率差异均有统计学意义(均P<0. 05)。结论 Ets-1参与了宫颈鳞状细胞癌的发生发展,其表达上调提示癌组织恶性程度高、进展快及预后差。     

CXCR－4和OPN在食管鳞状细胞癌组织的表达及其临床意义

目的探讨趋化网子受休4（CXCR-4）及骨桥蛋白（osteopontin,OPN）在食管鳞癌中的表达情况及其与各临床病理资料的关系。方法应用免疫组化技术检测60例食管鳞癌组织及其相应痛旁正常组织中CXCR-4和OPN的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果食管鳞癌组织中CXCR-4和OPN的阳件表达率分别为76．7％和80．0％。与癌旁正常组织表达率10．0％和5．0％相比差异有统计学意义（P〈0．05）。CXCR-4和OPN的表达与淋巴结转移状态、肿瘤临床分期有关（P〈0．05）。结论CXCR-4和OPN在食管鳞癌中的表达与食管鳞癌的发生、发展相关,表达增高可能预示食符癌发展较快、病程较晚、存在淋巴结转移,二者的联合检测可为食管痛的诊断、治疗提供重要信息,可能成为临床判断预后和指导治疗的重要指标,也为临床寻找有效治疗食管癌的方案提供了新的思路。     

宫颈癌组织中E-钙粘素基因5’端CpG岛甲基化与蛋白表达的关系

目的:探讨宫颈癌组织中E-钙粘素(E-Cad)基因5’端CpG岛甲基化与蛋白表达的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)和免疫组织化学法分别检测10例正常宫颈鳞状上皮、31例宫颈癌组织中E-Cad基因5’端CpG岛的甲基化状况与蛋白表达情况,并分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。结果:1正常宫颈鳞状上皮组织中未发现存在E-Cad基因甲基化状态,而在宫颈癌组织中E-Cad基因的甲基化率为54.84%(17/31);2宫颈癌组织中存在E-Cad蛋白表达降低或缺失,阳性率仅为38.71%(12/31),显著低于正常宫颈组织的100.00%(10/10),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:E-Cad基因5’端CpG岛甲基化是宫颈癌中该基因失活的机制之一,可能与宫颈癌的发生、发展有关。     

Skp2、C-myc在宫颈癌组织中的表达及意义

目的 探讨Skp2、C-myc在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理指标的关系.方法 采用免疫组化SP法检测正常宫颈、宫颈内瘤样病变各10例、宫颈癌组织30例中Skp2、C-myc的表达.结果 Skp2在宫颈癌组织中阳性表达率为46.7%,高于宫颈内瘤样病变(均为阴性)(P<0.05)和正常宫颈组织(均为阴性)(P<0.05).Skp2在宫颈癌组织中的表达与临床分期、组织分化有关,与淋巴转移无关(P>0.05).C-myc在宫颈癌组织中阳性表达率是83.3%,显著高于宫颈内瘤样病变(P<0.01)和正常宫颈(阴性表达)(P<0.01).C-myc阳性表达与临床分期有关,与分化程度及淋巴转移无关.结论 C-myc可能与宫颈癌的发生发展有关,Skp2的表达提示预后不良.Skp2、C-myc蛋白的检测可为判断宫颈癌恶性进程和预后提供重要参考.     

Ang2和VEGF在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的:探讨Ang2和VEGF在正常宫颈上皮、子宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达及相关性研究。方法:采用免疫组化S-P法,从蛋白水平检测Ang2和VEGF在20例正常宫颈组织、32例宫颈上皮内瘤变、52例宫颈癌组织中的表达。结果:Ang2和VEGF在子宫颈癌中的表达明显高于子宫颈上皮内瘤变和正常宫颈上皮,三者差异显著;VEGF在子宫颈上皮内瘤变与正常宫颈上皮中的表达相比差异显著;Ang2和VEGF的表达水平均与子宫颈癌的临床分期、有无淋巴结转移相关,而与患者年龄、组织学类型、分化程度无关。结论:Ang2和VEGF参与宫颈癌血管生成,影响癌瘤的发生与发展;VEGF在正常宫颈组织向宫颈上皮内瘤变及宫颈癌转变过程中起到重要作用。     

非酒精性脂肪肝小鼠肝组织PPAR和UCP-2表达

目的探讨过氧化物酶增殖活化受体α(PPARα)和解偶联蛋白2(UCP-2)在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝组织中的表达。方法雄性成年ICR小鼠30只随机分成3组,每组10只,即对照组(普通饲料)、模型A组(普通饲料4周+高脂饲料4周)、模型B组(高脂饲料8周),分别测定肝脏指数并制作肝脏病理切片,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,测定小鼠肝组织中PPARα和UCP-2 mRNA表达。结果对照组、模型A、B组小鼠肝指数分别为(3.89±0.87)%、(7.42±0.95)%、(9.38±1.07)%,模型组小鼠肝指数均高于对照组(P<0.01),模型小鼠肝脏脂肪变性明显;模型A、B组小鼠肝组织中PPARα mRNA表达量分别为(0.63±0.33)、(0.45±0.19),低于对照组的(1.16±0.27)(P<0.01),模型A、B组小鼠肝组织中UCP-2 mRNA表达量分别为(0.67±0.76)、(0.89±0.52),高于对照组的(0.25±0.13)(P<0.01)。结论发生NAFLD的小鼠肝组织中PPARα和UCP-2 mRNA表达异常。     

Ca2+-activated K+ channels involved in duodenal dismotility induced by ethanol

The purpose of this study was to investigate the role of K⁺channels in duodenal dismotility induced by ethanol in vitro.The amplitude of spontaneous contractions was reduced by ethanolin longitudinal and circular muscle, while frequency did notchange. Charybdotoxin antagonized ethanol-induced inhibitionof the amplitude of spontaneous contractions. Ethanol decreasedACh-induced contractions and this effect was cancelled out bycharybdotoxin. Ca²⁺-activated K⁺ channels may be involved induodenal dismotility induced by ethanol.     

宫颈癌组织中P21 mRNA的表达及临床意义

目的研究P21在宫颈癌和相应癌旁组织中的表达以及与临床病理参数之间的关系。方法收集2010年1月—2016年2月巴彦淖尔市医院就诊的子宫颈癌患者40例,从宫颈癌组织及相应癌旁组织中提取RNA后反转录成c DNA,以GAPDH作为内参,利用PT-PCR技术对P21基因的表达情况进行分析计量资料采用t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果宫颈癌组织和相应癌旁组织中P21 mRNA对GAPDH的相对丰度值分别是(0.16±0.26)和(0.30±0.28),两组表达差异有统计学意义(P0.05),并且宫颈癌组织中P21 mRNA表达水平与病理分化程度、国际妇产科联盟(international federation of gynecology and obstetrics,FIGO)分期、淋巴结转移、浸润深度有关,与组织学类型和年龄无关。结论 P21在宫颈癌组织中低表达,可能与宫颈癌的发生发展密切相关。     

Hps和bFGF在宫颈癌的表达

目的:探讨Hps(heparanase,乙酰肝素酶)和bFGF(basic fibroblast growth factor,碱性成纤维细胞生长因子)与宫颈癌发生、发展及预后的关系。方法:取该院宫颈癌住院手术患者组织标本89例、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)41例、正常宫颈组织35例,采用免疫组化SP法对Hps和bFGF的表达进行检测。结果:宫颈癌组织中Hps和bFGF的免疫积分明显高于宫颈CIN组织及正常宫颈组织。而在CIN和正常宫颈组织间比较差异无统计学意义。Hps和bFGF的表达与宫颈癌的临床分期、血管浸润和淋巴结转移有关。结论:Hps和bFGF可能在宫颈癌的发生、发展及预后中起着重要作用。     

环氧化酶-2和血管内皮生长因子-C在宫颈癌中的表达及意义

目的探讨环氧化酶(COX-2)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变组织和正常宫颈组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测50例宫颈癌组织,50例宫颈上皮内瘤变组织及50例正常宫颈组织中COX-2和VEGF-C的表达,从而研究两者在宫颈病变组织中的表达情况及相关性。结果 COX-2在宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变组织和正常宫颈组织中的阳性率分别为90.00%,54.00%和16.00%,且在宫颈癌组织中的表达与其他两组比较差异具有统计学意义(χ~2=27.682,P<0.05),在不同级别宫颈上皮内瘤变组织中表达差异具有统计学意义(χ~2=18.313,P<0.05);VEGF-C在宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变组织和正常宫颈组织中的阳性率分别为24.00%,52.00%和92.00%,且在宫颈癌组织中的表达与其他两组比较差异具有统计学意义(χ~2=25.585,P<0.05),在不同级别宫颈上皮内瘤变组织中表达差异具有统计学意义(χ~2=17.133,P<0.05);经Spearson相关性分析,两者在宫颈癌组织中的发生、发展过程中存在负相关(r=-0.425,P<0.05)。结论 COX-2和VEGF-C在宫颈癌的发生、发展中起了一定的作用,且两者共同参与了宫颈癌的发生和发展。     

Snail、E-cadherin mRNA在宫颈病变中的表达及临床意义

目的:探讨snail、E-cadherin mRNA在宫颈癌变过程中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用原位分子杂交方法,检测snail、E-cadherin mRNA在70例宫颈鳞癌、35例宫颈鳞状上皮内瘤变(CIN)和15例宫颈慢性炎症组织中的表达。结果:①70例宫颈鳞状细胞癌组织中,snail mRNA阳性率为80%(56/70),分别高于宫颈鳞状上皮内瘤变组织60%(21/35)和宫颈慢性炎症20%(3/15),差异均有统计学意义(χ2=4.773,P<0.05和χ2=18.215,P<0.05);70例宫颈鳞状细胞癌组织中,E-cadherin mRNA阳性率为21.4%(15/70),分别低于宫颈鳞状上皮内瘤变组织48.6%(17/35)和宫颈慢性炎症93.3%(14/15),差异均有统计学意义(χ2=8.113,P<0.05和χ2=28.414,P<0.05)。②snail mRNA的表达在淋巴结转移组明显高于无转移组(χ2=4.386,P<0.05),而在不同年龄、FIGO分期、病理分级及间质浸润深度之间snail mRNA水平无明显变化(P>0.05);E-cadherin mRNA的表达在淋巴结转移组明显低于无转移组(χ2=3.956,P<0.05),而在不同年龄、FIGO分期、病理分级及浸润深度之间E-cadherin mRNA水平无明显变化(P>0.05)。③宫颈组织中snail mRNA与E-cadherinmRNA的表达成负相关(P<0.05)。结论:snail mRNA高表达与E-cadherin mRNA低表达可能是宫颈癌变过程中的重要生物学标志,联合检测snail mRNA与E-cadherin mRNA有助于宫颈癌早期诊断和预后评价。     

白术对人妊娠子宫平滑肌细胞膜钙依赖钾通道电流的影响

目的:研究中药白术(Atractylodes macrocephala)对正常晚孕子宫平滑肌细胞及经白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)作用后的子宫平滑肌细胞钙依赖钾通道电流(BKca)的影响,以探讨白术对早产时宫缩的抑制作用及电生理机制。方法:①急性分离人晚孕子宫平滑肌细胞,采用Axopatchl-D膜片钳放大器测全细胞模式下的单个平滑肌细胞大电导的钙离子依赖钾通道电流(BKca);②测定灌流液中含不同浓度的白术时,子宫平滑肌细胞BKca的变化;③测定灌流液中含IL-6(10ng/ml)时全细胞模式下BKca;继而测定灌流液中含有不同浓度的白术时,子宫平滑肌细胞BKca的变化。结果:10ng/mlIL-6可抑制BKca的幅值约(36.9±13.7)%(n=10,P<0.01),灌流液中含2mg/ml白术时增强BKca的幅值约(36.7±22.6)%(n=10,P<0.01),对于IL-6作用后的细胞,2mg.mL-1白术增强BKca的幅值约(45.2±13.7)%(n=10,P<0.01)。结论:白术可以兴奋晚孕子宫平滑肌细胞及IL-6作用后的子宫平滑肌细胞的BKca,且对IL-6作用后的子宫平滑肌细胞BKca的兴奋作用强于对正常子宫平滑肌细胞,证明它有助于维持妊娠时子宫平滑肌的膜电位和静息状态,为开发中药治疗早产提供一定的理论依据。