NS-398和顺铂联合作用对人肺腺癌增殖的影响及其机制初步探讨

背景与目的　近年的研究结果显示COX 2抑制剂具有抑制肿瘤生长、增强化疗药物疗效的作 用。NS 398是一种选择性COX 2抑制剂,可抑制肺癌细胞的增殖并增强化疗药物的疗效。但NS 398与顺 铂联合作用对肺腺癌细胞增殖的影响及其作用机制目前尚不清楚。本研究旨在明确NS 398对顺铂肺腺癌 细胞增殖抑制作用的影响,探讨NS 398与顺铂的联合作用对细胞凋亡以及细胞周期的影响。方法　采用 MTT比色法检测NS 398和顺铂联合作用对肺腺癌细胞增殖的影响,吖啶橙和溴化乙啶荧光染色法观察肺 腺癌细胞凋亡情况,流式细胞仪PI染色法分析两药联合处理的肺腺癌细胞凋亡率和细胞周期的改变。结果 　联合NS 398后SPC A 1细胞顺铂IC50降低百分率为43.34%～69.61%,A549细胞为48.25%～62.44%, 两药联合为轻度协同～协同作用。NS 398与顺铂联合组作用24和48小时诱导肺腺癌细胞的凋亡率显著增 高,联合组48小时和72小时的S期细胞比例亦明显增高。NS 398和顺铂联合作用诱导的肺腺癌细胞凋亡 率与S期细胞比例呈正相关(r=0.882,P=0.01)。结论　NS 398可以增强顺铂对肺腺癌细胞增殖的抑制作 用,两种药物具有协同作用。NS 398与顺铂的协同作用可能与凋亡机制有关。     

高温合并顺铂对人肺腺癌细胞株H1299的协同杀伤作用

Objective： To observe the synergistic effects of hyperthernia and cisplatin on human lung adenocarcinoma cell line H 1299. Methods： Cells treated with or without hyperthermia at 42 ℃ for 2 h were detected cisplatin sensitivity with CCK-8 assay. After managed with hyperthermia at 42 ℃ for 2 h, ciplatin 10 μg/mL for 24 h or both of two sides, inhibition ratio was detected with CCK-8 assay and flow cytometry analyzed DNA contents in every phase of cell proliferation. Results： After hyperthermia, IC50 values of cell to cisplatin decreased from 9.51 μg/mL to 6.07 μg/mL. CCK-8 assay showed hyperthermia and ciplatin had synergistic killing effects, and FCM also showed hyperthermia had significant effects on cell cycle with increase of Go/G1 phase population and reduction of S phase population. Conclusion： Hyperthermia can significantly increase the sensitivity of H1299 cell line to cisplatin.     

Amorphigenin联合顺铂对人肺腺癌A549/DDP细胞的协同抗肿瘤作用

背景与目的 Amorphigenin是从紫穗槐属植物的种子中分离提取的鱼藤酮类化合物,研究发现amorphigenin对多种肿瘤细胞具有增殖抑制作用。本研究拟探讨amorphigenin对人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP的抗肿瘤作用及其可能的分子机制。方法采用CCK-8法测定A549/DDP细胞的增殖;克隆形成实验测定A549/DDP细胞的克隆形成;流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot技术检测caspase-3、PARP和LRP蛋白的表达。结果Amorphigenin可抑制A549/DDP细胞的增殖48 h[半数抑制浓度（half maximal inhibitory concentra-tion, IC50）]为（2.19±0.92）μmol/L、抑制克隆形成及诱导细胞凋亡。此外,Amorphigenin与顺铂联合可协同地抑制A549/DDP细胞生长和促进凋亡;降低耐药蛋白LRP蛋白的表达。结论 Amorphigenin可抑制A549/DDP细胞增殖和促进细胞凋亡;amorphigenin可能是通过抑制耐药蛋白LRP蛋白表达,进而与顺铂对A549/DDP细胞产生协同抑制作用。     

耐顺铂人肺腺癌细胞系A549^DDP耐药机理进一步探讨

应用递增浓度的方法建立了一株顺铂（ＣＤＤＰ）耐药细胞系Ａ５４９ＤＤＰ。用溴化乙啶荧光分光光度法测定细胞内Ｐｔ－ＤＮＡ链间交联物（ＩＣＬ）；用无焰原子吸收光谱法测定细胞浆内及细胞核内铂含量；用流式细胞法及荧光显微镜测定铂的外排速度。结果显示：耐药细胞Ａ５４９ＤＤＰ较亲代敏感细胞Ａ５４９对ＣＤＤＰ耐受性增加８．９倍，与亲代敏感细胞Ａ５４９相比，Ａ５４９ＤＤＰ胞浆内及核内ＣＤＤＰ积聚分别为亲代细胞的１６．９％与２４．３％，铂含量与ＣＤＤＰ浓度正相关；Ａ５４９ＤＤＰ外排ＣＤＤＰ的功能较Ａ５４９明显增强，ＩＣＬ形成量低８４．１％，而修复功能增强２倍。结果提示：Ａ５４９ＤＤＰ细胞内ＣＤＤＰ积聚减少和修复功能增强是ＣＤＤＰ的主要耐药机理。     

胸膜腔内注入顺铂并闭式引流治疗肺腺癌胸水

1980年8月～1989年11月.我们采用胸膜腔内注入大剂量顺铂合并闭式引流、治疗2例肺腺癌恶性胸水,取得较好疗效,报告如下。一、治疗方法①X线或B超对引流点定位,引流点选择在腋中线胸水最低位置的上一肋间。②患者取半卧位,局麻后,在引流点作     

紫杉醇、顺铂联合方案治疗肺腺癌（附22例分析）

紫杉醇(Paclitaxel)是一种新型抗微管药物,具有独特的作用机理,对多种肿瘤,特别是乳腺癌、卵巢癌有显著的疗效.我们于1996年3月～1997年12月使用国产紫杉醇、顺铂联合方案化疗治疗肺腺癌患者22例.现将结果报告如下:1 资料和方法1.1 病例资料全组患者22例中,男性17例、女性5例,年龄37岁～73岁中位年龄55岁,均经病理学和/或细胞学检查证实,病期为Ⅲ～Ⅳ期,Karnofsky评分50～100分,中位75分.1.2 药物紫杉醇:紫素注射液,由中国医学科学院药物研     

高温合并顺铂对人肺腺癌细胞株H1299的协同杀伤作用

目的:观察高温合并顺铂对人肺腺癌细胞株H1299的协同杀伤作用。方法:用CCK-8法检测高温处理或未处理的细胞对顺铂的敏感性。单独42℃作用2h、顺铂10μg/ml作用24h和两者联合作用后,采用CCK-8法检测细胞抑制率和流式细胞仪分析细胞各时相DNA含量,观察两者对细胞毒性和细胞周期的影响。结果:高温作用后,细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)从9·51μg/ml降低至6·07μg/ml;高温和顺铂联合作用对细胞有明显的协同杀伤作用,流式细胞检测也显示高温对细胞周期有明显的影响,G0/G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显下降。结论:高温可以明显提高H1299细胞对顺铂的敏感性。     

CXCR4的表达与肺腺癌顺铂耐药的临床研究

摘 要：［目的］ 分析CXCR4在肺腺癌中的表达及其与铂类耐药的关系。［方法］ 采用免疫组化SP法检测CXCR4在71例ⅢA期肺腺癌中的表达,分析其表达与肺腺癌顺铂耐药及预后的关系。［结果］ CXCR4在71例ⅢA期肺腺癌中的阳性表达率为85.9%。耐药组肺癌患者与敏感组相比,CXCR4表达升高,且预后差,两组比较差异有统计学意义(P<0．05)。［结论］CXCR4蛋白阳性表达与ⅢA期肺腺癌顺铂耐药有关。     

醛氢叶酸钙、氟尿嘧啶、顺铂联合化疗晚期肺腺癌

自Ｍａｃｈｏｖｅｒ等首次报告氟尿嘧啶 (5 ＦＵ)和醛氢叶酸钙(又名亚叶酸钙ＣＦ)治疗胃肠道腺癌以来 ,国内外报告ＣＦ 5 ＦＵ ＤＤＰ治疗晚期胃肠道腺癌日益增多 ,且取得了有效率达 35 %～ 5 2 %的良好效果。目前对晚期肺腺癌缺乏良好的化疗方案 ,我们试用ＣＦ 5 ＦＵ ＤＤＰ(简称ＣＦ ＦＰ方案 )化疗 ,取得了较好的近期疗效。材料和方法一　研究对象　本组共 36例 ,均为初治病人 ,男 15例 ,女 2 1例 ,年龄最小 2 4岁 ,最大 72岁 ,中位年龄 5 8岁。均经病理证实为肺腺癌 ,其中低分化腺癌 18例 ;中分化腺癌 6例 ;高分化腺癌 12例。…     

人肺腺癌A549/DDP耐药细胞减弱顺铂诱导的细胞凋亡

目的：探讨人肺腺癌Ａ５４９／ＤＤＰ耐药细胞的多药抗药机理。方法;应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、原位ＤＮＡ断裂点的末端标记法观察细胞亡的状况,用免疫组化法检测ｂｃｌ－２基因的表达。结果：癌细胞在顺铂作用下产生了典型的凋亡形态学改革。３μｇ／ｍｌ,５μｇ／ｍｌ,７μｇ／ｍｌ顺铂作用４８小时,Ａ５４９细胞ＤＮＡ裂解片断呈现典型的阶梯状排列条喧,而在５μｇ／ｍｌ、７μｇ／ｍｌ顺铂作用４８小时,Ａ５４９／     

丝裂霉素、长春花碱酰胺和顺铂联合治疗晚期肺腺癌

目的:评价丝裂霉素、长春花碱酰胺和顺铂联合治疗晚期肺腺癌的疗效和毒性.方法:32例不能手术的肺腺癌Ⅲ～Ⅳ期,MVP方案化疗:丝裂霉素6mg/m~2,静脉冲入,第1、8天;长春花碱酰胺2.5mg/m~2,静脉冲入,第1、8天;顺铂60～80mg/m~2,静脉滴注,第3天,水化.每3周为一周期,二周期后评价疗效.结果:部分缓解率(12/32)40.6%.毒副反应主要为恶心、呕吐和白细胞下降.结论:MVP方案是治疗晚期肺腺癌疗效较高的方案.     

人肺腺癌干细胞对顺铂和卡铂的药物敏感度分析

目的:分析人肺腺癌干细胞(lung adenocarcinoma stem cell, LASC)对顺铂(cisplatin,DDP)和卡铂(carboplatin,CBP)的药物敏感度.方法:人肺腺癌细胞SPC-A1、AG及CPA-Y2经DDP和CBP作用后,应用CCK-8(cell counting kit-8)比色法检测细胞存活率,应用免疫荧光检测法测定药物生存细胞(drug surviving cell,DSC)的表型特征.通过磁性细胞分选技术分离肺腺癌干细胞,应用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)示踪技术检测DSC中的肿瘤干细胞,分析DSC对DDP和CBP的药物敏感度.结果:LASC具有细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cell, BASC)表型(OCT4~+CCSP~+SP-C~+).将此类癌干细胞(CD221~+)与肺腺癌分化细胞(CD221~-)混合后检测DSC发现,后者具有OCT4~+BASC表型.DSC对铂类药物具有显著抗性.结论:肺腺癌干细胞对DDP和CBP具有显著耐药性,可能是化疗后肿瘤复发的根源.     

顺铂对人肺腺癌细胞作用与ERCC1表达的相关性研究

背景与目的核苷酸切除修复机制可修复顺铂(DDP)造成的DNA损伤,作为其中的关键酶之一,切除修复交叉互补基因1(ERCC1)表达可能与DDP耐药有关。本研究的目的是证实ERCC1表达与DDP作用的关系,推测ERCC1在DDP耐药中的作用。方法选择人肺腺癌细胞A549及其耐DDP细胞株A549/DDP为研究对象,RT-PCR及免疫细胞化学方法检测不同浓度、不同作用时间DDP干预后细胞中ERCC1的表达,采用MTT法检测A549/DDP细胞耐药指数。结果10μmol/LDDP作用12h,A549细胞中ERCC1 mRNA表达开始增高,随着作用时间的延长,ERCC1 mRNA的表达逐渐增高,在72h组ERCC1 mRNA表达最强,为66.69%±5.30%。浓度为5μmol/L的DDP即可刺激A549细胞中ERCC1基因水平上升,而随着DDP浓度的增加,ERCC1 mRNA水平逐渐上升,20μmol/L组达高峰(79.50%±5.46%),为对照组的3.9倍。蛋白表达的增高趋势与mRNA基本平行,但二者幅度不完全一致。与亲本细胞比较,经长期小剂量DDP诱导的耐药株A549/DDP中ERCC1表达明显增高。结论随着小剂量DDP作用时间的延长,A549细胞中ERCC1 mRNA和蛋白的表达量增加,推测ERCC1可能参与了继发耐药的形成。     

顺铂对人肺癌SPCA-1细胞端粒酶活性的影响

目的 观察顺铂(DDP)对人肺癌SPCA-1细胞端粒酶活性的影响。方法 不同浓度的DDP处理体外培养的人肺癌SPCA-1细胞72h，非放射性标记的改良TRAP法测定端粒酶活性，MTT法测定细胞增殖抑制，透射电镜、流式细胞仪观察细胞凋亡。结果 DDP可抑制SPCA-1细胞端粒酶活性，随DDP浓度增大，端粒酶活性抑制增强。MTT结果显示DDP抑制SPCA-1细胞增殖且抑制率有浓度依赖性。透射电镜可观察到典型的细胞凋亡形态学，流式细胞仪结果表明DDP诱导SPCA-1细胞凋亡在一定浓度范围内呈剂量依赖性。结论 端粒酶活性的抑制可能是DDP发挥抗肺癌活性的作用机制之一，端粒酶活性可作为评价DDP抗肺癌化疗效果的指标之一。     

苏拉明联合顺铂对肺腺癌小鼠移植瘤生长和转移的影响

背景与目的:新近研究发现新生血管生成在肿瘤生长、转移以及转移灶的生长过程中起重要作用。本研究观察苏拉明联合顺铂对肺腺癌细胞LA795的T739小鼠异体移植瘤生长和转移的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:建立肺腺癌细胞LA795的T739小鼠异体移植瘤模型,将32只接种LA795细胞T739小鼠随机分成4组,每组8只。对照组:每只小鼠每天生理盐水0.2ml腹腔注射;顺铂组:顺铂2mg·(kg·d)-1于接种后第4、11、18天各一次;苏拉明组:苏拉明10mg·(kg·d)-1;顺铂 苏拉明组:顺铂2mg·(kg·d)-1于接种后第4、11、18天各腹腔注射一次 苏拉明10mg·(kg·d)-1。用药16日,用药中观察肿瘤生长情况,于接种后第24天处死各组小鼠,取出双肺并剥离皮下肿瘤,计算出肺转移发生率,计数各组小鼠肺表面转移结节数并算出肺表面结节转移抑制率。收集移植瘤标本行光镜观察,采用免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织微血管密度(microvesseldensity,MVD),血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)及核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)的表达和原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果:顺铂组、苏拉明组、顺铂加苏拉明组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组,其抑瘤率分别为23.0%、34.4%、56.3%,而联合用药组抗瘤作用进一步增强。光镜观察顺铂组、苏拉明组、顺铂加苏拉明组肿瘤细胞出现坏死,苏拉明组和顺铂加苏拉明组肿瘤间质中血管数减少。各用药组NF-#B的表达都比对照组减少,凋亡指数比对照组明显提高,差异有显著性(P<0.01);苏拉明组及联合组与对照组和顺铂组相比肺表面转移结节数明显下降,同时肺转移发生率、皮下肿瘤MVD、VEGF的表达也明显下降,相反顺铂组对此则无明显改变。结论:苏拉明可明显抑制肺腺癌细胞在小鼠体内的生长和转移,与顺铂联用有协同作用,其作用机制可能与抑制其微血管形成、促进细胞凋亡有关。     

国产吉西他滨联合顺铂治疗晚期肺鳞癌及肺腺癌疗效分析

目的观察国产吉西他滨（泽菲）联合顺铂对晚期肺鳞癌与肺腺癌治疗疗效差别,为临床上晚期肺癌的化疗药物筛选提供依据。方法肺鳞癌组36例与肺腺癌组34例分别接受吉西他滨（1000 mg/m2）加顺铂（75 mg/m2）化疗,每21 d为1周期,每2个周期评价疗效。结果鳞癌36例和腺癌组34例均能进行临床评价。鳞癌组中部分缓解（PR）14例（38.9%）,稳定（SD）16例（44.4%）,进展（PD）6例（16.7%）,有效率（RR）为38.9%,疾病控制率（DCR）为83.3%,中位肿瘤进展时间（TTP）为5.7个月,中位生存期为12个月,1年生存率为47.2%（17/36））。腺癌组中PR 11例（32.4%）,SD 18例（52.9%）,PD 5例（14.7%）,RR 32.4%,DCR 85.3%,中位TTP为5.3个月,中位生存期为9个月,1年生存率为32.4%（11/34）。结论吉西他滨对肺鳞癌与肺腺癌的疾病控制率相近,但对鳞癌表现出比腺癌更高的生存时间与生存率。     

Stage IV ovarian clear cell adenocarcinoma treated effectively by chemotherapy with etoposide and cisplatin (EP)

We report a case of stage IV ovarian clear cell adenocarcinoma (OCCA) in a 72-year-old woman who was treated postoperatively with etoposide combined with cisplatin (EP). The patient exhibited bulky intrapelvic and para-aortic lymph nodes with metastases to the cervical lymph nodes. The primary lesion was resected and, postoperatively, she received one course of combination chemotherapy consisting of cyclophosphamide, 500 mg/m²; doxorubicin, 50 mg/m²; and cisplatin, 70mg/m² (CAP), followed by six courses of combination chemotherapy consisting of etoposide, 80mg/m² days 1 through 5 and cisplatin, 70 mg/m² on day 5 every 4 weeks. After five courses of EP, the lymph node metastases had virtually disappeared. The patient is now disease-free 21 months after the initial surgery. These findings suggest that EP may be useful in treating OCCA.     

STUDY ON THE EXPRESSION OF CYCLOOXYGENASE-2 IN HEPATOCELLULAR CARCINOMA CELL LINES AND ON THE GROWTH INHIBITION EFFECT OF NS-398

Objective： To investigate the expression of cyclooxygenase -2 （COX-2） in hepatocellular carcinoma cell lines and to explore the effect of NS-398, a selective inhibitor for COX-2, on HepG-2 cell line. Methods： lmmunohistochemistry and RT-PCR were used to investigate COX-2 expression in 6 HCC cell lines. MTT and Flowcytometry were used to evaluate the effect of the selective inhibitor of COX-2, NS-398, on HepG-2 cell lines. Results： All six HCC cell lines showed COX-2 expression at protein level. Five out of 6 cell lines showed COX-2 expression at mRNA level. NS-398 could suppress the growth of HepG-2 cell line, in a time and dose dependant manner. Conclusion： NS-398, a selective inhibitor of COX-2, showed inhibition effect on HepG-2 HCC cell line. The efficacy of inhibition was time and dose dependent, providing a new evidence for chemoprovention of hepatocellular carcinorma with COX-2 selective inhibitors.