表皮生长因子相关蛋白家族

表皮生长因子（ＥＧＦ）相关蛋白是一组具有ＥＧＦ相似结构及类似生物学功能的糖蛋白，均为ＥＧＦ受体的配体。本文综述了ＥＧＦ相关蛋白的基本生物学特性及生物学功能特点，着重于ＥＧＦ相关蛋白相互关系的分析与比较。     

白介素-1和血小板源性生长因子对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-3表达的影响

目的:观察白介素-1(IL-1)和血小板源性生长因子(PDGF)对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达的影响。方法:用Western蛋白印迹法(Western blot)检测MMP-3蛋白水平,采用电泳迁移率变动分析(EMSA)法测AP-1结合活性,用RT-PCR法检测MMP-3的mRNA水平。结果:白介素-1(20μg/L)和PDGF(20μg/L)联合使用显著增加MMP-3蛋白表达,提高AP-1结合活性,使MMP-3的mRNA水平明显增高。结论:白介素-1和血小板源性生长因子联合使用可刺激MMP-3生成。     

雌激素诱导胎儿血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2分泌和活化

目的: 探讨雌激素对胎儿血管平滑肌细胞(HVSMC)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)分泌及其活化的影响。方法: 分别以不同浓度的雌二醇与体外培养的HVSMC作用24h,明胶酶谱法检测细胞培养上清液中明胶酶活性。结果: 随着雌二醇剂量增加,MMP-2的酶原形式(pro-MMP-2)和MMP-2活性形式逐渐增强。0.1 nmol/L、1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L雌二醇组pro-MMP-2分别比对照组高9.4%±8.2%(P>0.05)、73.0%±13.7%(P<0.05)、229.2%±42.2%(P<0.01)、428.4%±72.3%(P<0.01), MMP-2活性形式分别比对照组高39.8%±12.9%(P>0.05)、127.2%±20.4%(P<0.01)、428.4%±37.6%(P<0.01)、683.4%±50.9%(P<0.01)。结论: 雌二醇以剂量依赖性方式促进pro-MMP-2分泌和活化。     

基质金属蛋白酶-9、金属蛋白酶组织抑制因子-1、血管内皮生长因子和转化生长因子β-1在甲状腺乳头状癌和滤泡癌的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子β-1(TGFβ-1)表达与甲状腺乳头状癌和滤泡癌分化、浸润、转移的关系.方法 采用免疫组织化学EnVision法检测85例乳头状癌和59例滤泡癌中MMP-9、TIMP-1、VEGF和TGFβ-1的表达.结果 MMP-9、TIMP-1、VEGF、TGFβ-1表达于癌细胞的胞质,体现于阳性率和阳性强度两方面.乳头状癌在MMP-9、TIMP-1、VEGF和TGFβ-1的表达阳性率(83.5%、81.2%、90.6%和75.3%)和强度均低于或相近于滤泡癌(93.2%、86.4%、89.9%和78.0%).乳头状癌中有转移组的四种免疫学指标表达均高于无转移组;滤泡癌低分化型组在MMP-9、VEGF、TGFβ-1的表达均高于高分化型组,仅TIMP-1阳性率与阳性强度则显示相反表达.提示随两种癌分化程度的下降和出现转移MMP-9、TIMP-1、VEGF、TGFβ-1表达逐渐增高呈正相关关系,而且两种癌的VEGF、MMP-9表达均高于TIMP-1、TGFβ-1,后两者的阳件强度相对较低.结论 综合检测MMP-9、TIMP-1、VEGF和TGFβ-1四种免疫学指标,对探讨甲状腺乳头状癌和滤泡癌分化、浸润、转移和评估预后具有一定参考价值.     

人食道鳞癌细胞在表皮生长因子刺激下可产生基质金属蛋白酶9

人食道鳞癌细胞在表皮生长因子刺激下可产生基质金属蛋白酶９［英］／ＳｈｉｌｎａＩ…／／ＢｒＪＣａｎｃｅｒ．－１９９３，６７（４）．－７２１～７２７肿瘤细胞破坏及穿透基底膜是其扩散的重要步骤。有报道肿瘤可分泌多种降解基质蛋白的酶类。作者曾用免疫组化方法证...     

p21 Ras和表皮生长因子受体蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达

目的探讨p21 Ras及表皮生长因子受体在喉鳞状细胞癌发病机制中的表达及相关性分析。方法选取50例喉鳞状细胞癌组织(实验组)及10例正常喉黏膜组织(对照组),应用免疫组织化学方法检测两组组织中p21 Ras和表皮生长因子受体的蛋白表达,并进行统计学分析。结果与对照组相比,p21 Ras蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的阳性表达率显著升高(分别为40.0%和72.0%,P0.05),且与喉鳞状细胞癌临床分期、分化程度及淋巴结转移密切相关(P0.05);与对照组相比,EGFR在喉鳞状细胞癌组织中的表达显著升高(分别为20.0%和76.0%,P0.05),且与喉鳞状细胞癌淋巴结转移密切相关(P0.05),而与性别、肿瘤发生部位、分化程度、临床分期无关(P0.05)。相关性分析结果显示,EGFR与p21 Ras表达呈正相关(r=0.81,P0.05)。结论 p21 Ras和EGFR在喉鳞状细胞癌组织中的高阳性率可作为喉鳞状细胞癌发生的预测指标,在伴有淋巴结转移组的强阳性表达提示二者在喉鳞状细胞癌发展过程中起重要作用。     

表皮生长因子受体,c—erbB—2蛋白和组织蛋白酶D在乳腺癌中的表达

表皮生长因子受体、ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和组织蛋白酶Ｄ在乳腺癌中的表达叶学正刘思齐李进宋容彭玉梅杨家祥一、材料和方法１．材料：收集我所１９８０～１９９２年间根治切除的腋窝淋巴结无转移（ＡＮＮ）乳腺癌１０５例，在癌与癌旁每例取材４块以上。平均每例取淋巴结...     

食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子、表皮生长因子和表皮生长因子受体mRNA的表达

目的 探讨食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子(NS),表皮生长因子(EGF)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA的表达及其相互关系. 方法 采用原位杂交技术检测62例食管鳞状细胞癌组织,31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中NS、EGF和EGFR mRNA的表达阳性率,并分析食管鳞状细胞癌患者不同临床病理参数间NS、EGF和EGFR mRNA的表达阳性率及三者之间的相关性. 结果 正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞状细胞癌组织中NS mRNA的阳性表达率分别为21.0%(13/62)、25.8%(8/31)和69.4%(43/62);EGF mRNA阳性表达率分别是40.3%(25/62)、48.4%(15/31)和77.4%(48/62);EGFR mRNA阳性表达率分别是30.6%(19/62),45.2%(14/31)和75.8%(47/62).食管鳞状细胞癌组织中NS、EGF和EGFR mRNA的阳性表达率与肿瘤的组织学分级,浸润深度及淋巴结转移有关(均P<0.05).食管鳞状细胞癌组织中NS mRNA表达与EGFmRNA和EGFR mRNA的表达呈正相关(分别为r=0.394,r=0.604,P<0.05). 结论 食管鳞状细胞癌组织中NS mRNA与EGF mRNA和EGFR mRNA的表达呈正相关,NS mRNA、EGF mRNA和EGFR mRNA在食管癌的发生、发展过程中可能起重要作用.     

肝星状细胞基质金属蛋白酶-2表达及其调控机制分析

基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)是细胞外基质降解的最重要蛋白水解系统 ,探讨ＭＭＰｓ与肝星状细胞细胞外基质 (ＥＣＭ)关系已成为国际研究肝脏纤维化的热点。我们使用不同条件培养肝星状细胞 ,观察星状细胞分泌ＭＭＰ 2酶活性及ｍＲＮＡ表达 ,研究细胞外基质重塑的分子生物学机制 ,探讨细胞外基质与ＭＭＰｓ表达之间的相互作用。一、材料和方法 :1 制备含有底物不同的三种培养基[1] :(1)聚苯乙烯培养基。单纯的培养基 ,不需任何处理。 (2 )制备Ⅰ型胶原涂层的培养基 :聚苯乙烯培养皿浸泡在 0 3ｍｇ/ｍｌ 0 0 0 1ｍｏｌ/ＬＨＣｌ,ｐＨ 3 0猪的…     

shRNA沉默HBx下调HepG2.2.15细胞基质金属蛋白酶2的表达

目的探讨HBx小发夹RNA(shRNA)对HepG2.2.15细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响。方法采用psiHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞,反转录PCR评估沉默效率;MTT法检测转染后HepG2.2.15细胞增殖情况;实时定量PCR(qRT-PCR)检测MMP-2 mRNA表达;Western blot法检测MMP-2蛋白表达的变化。结果反转录PCR检测HBx基因的沉默效率为53.6%;MTT检测结果显示转染24、48、72 h后HepG2.2.15细胞的增殖受抑制,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);psiHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞后,qRT-PCR和Western blot检测结果显示,HepG2.2.15细胞中MMP-2基因的mRNA水平和蛋白水平表达分别有不同程度的下调,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 RNA干扰技术抑制HepG2.2.15细胞中HBx基因的表达,可抑制细胞增殖,下调HepG2.2.15细胞中MMP-2的表达。     

转化生长因子β1和基质金属蛋白酶2在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

基质金属蛋白酶(MMP)在肿瘤的侵袭和转移过程中起重要作用[1],转化生长因子-β1(TGF-β1)也与肿瘤的发生、发展密切相关,在调节细胞的生长与分化过程中也具有广泛的作用.     

EGCG对结肠癌HT-29细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对人结肠癌细胞株HT-29基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响。方法应用RT—PCR法和Westernblot法检测EGCG干预前后HT-29结肠癌细胞中MMP-9mRNA及MMP-9蛋白表达。结果EGCG25、50、100μg／ml作用于结肠癌细胞株HT-2948h后,MMP-9mRNA及MMP-9蛋白的表达量随着EGCG浓度的增加而下降,结果有统计学差异（P〈0．05）。结论EGCG可显著抑制HT-29细胞中MMP-9mRNA及MMP-9蛋白的表达,呈剂量依赖性。     

表皮生长因子受体在肝细胞癌及胆管细胞癌中的表达

目的：比较表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ） 在肝细胞癌及胆管细胞癌中表达的差异。方法：采用免疫组化及原位杂交方法检测９２ 例肝细胞癌及５０ 例胆管细胞癌组织中ＥＧＦＲ蛋白及ｍ ＲＮＡ的表达。结果：９２ 例肝细胞癌标本中,４２ 例ＥＧＦＲ 蛋白或ｍＲＮＡ阳性,占４５－７％ 。５０ 例胆管细胞癌中,３６ 例ＥＧＦＲ蛋白或ｍＲＮＡ 阳性,占７２－０ ％ 。结论：与肝细胞癌相比,胆管细胞癌的发生、发展与ＥＧＦＲ 表达增高的关系更加密切。     

c-erbB-2和表皮生长因子受体蛋白在人脑胶质瘤中的表达

ｃ－ｅｒｂＢ－２和表皮生长因子受体蛋白在人脑胶质瘤中的表达刘旭文浦佩玉一、材料与方法１．组织标本：１９９２～１９９５年，连续收集我院和天津市脑系科医院手术切除组织标本。对照组取材为８例内减压术中切除的正常脑组织。实验组为５０例胶质瘤组织，按ＷＨＯ脑瘤...     

表皮生长因子通过间隙连接蛋白信号转导调节间隙连接通讯

细胞间隙连接通讯 (GJIC)是细胞获取外界能量、信息的一种细胞间直接的通讯方式 ,其连接通道是一种亲水性的膜通道 ,允许细胞间分子量小于 1KDa的离子、分子的交换和代谢。细胞膜通道的装配蛋白称细胞间隙连接蛋白 (connex-in,CX) ,通道的形成和启闭 (gating process)受细胞内外的PH值、膜电压、膜脂及膜的流动性、Ca2 浓度、CX磷酸化等的调节。GJIC有十分重要的生理功能 :1GJIC可协调不同细胞、组织间的代谢或电传导性。 2 GJIC与胚胎发育 ,细胞分化过程有密切关系。在大多器官 ,GJIC在细胞分裂早期即存在 ,并参与协调细胞分…     

尿激酶型纤溶酶原激活物系统对骨巨细胞瘤细胞基质金属蛋白酶-2和组织基质金属蛋白酶抑制物-3表达的影响

目的:研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)信号转导对骨巨细胞瘤基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制物-3(TIMP-3)的调节。方法:用免疫组化检测骨巨细胞瘤组织中uPAR、MMP-2和TIMP-3的表达。用免疫共沉淀法检测uPA对瘤细胞信号转导通路的p44蛋白磷酸化水平。用蛋白印迹法检测用uPA和uPAR抗体处理后瘤细胞MMP-2和TIMP-3蛋白表达。结果:(1)uPAR主要表达在部分单核基质细胞和一些多核巨细胞的胞膜上;(2)MMP-2主要表达在瘤细胞的胞浆,在多核巨细胞,其表达有明显的极向性;(3)在骨巨细胞瘤组织TIMP-3表达量低于MMP-2,在多核巨细胞也显示极向性表达;(4)将uPA-ATF加入培养的骨巨细胞瘤细胞后,细胞信号通路上的p44蛋白磷酸化水平明显增高。用uPAR抗体处理后,细胞p44蛋白磷酸化水平明显降低。说明uPA-ATF参与细胞信号转导,而且受uPAR拮抗剂的影响;(5)uPA-ATF信号通路上调MMP-2和TIMP-3的表达,而uPAR抗体则下调MMP-2和TIMP-3的表达。结论:本实验首次直接证明uPA-ATF通过信号转导能调节MMP-2和TIMP-3的表达,而后者则在骨巨细胞瘤局部骨质吸收中起重要作用。     

PRL-2基因转染对肝细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响

目的:研究PRL-2基因增强肿瘤细胞侵袭及转移能力的机制。 方法:采用脂质体转染的方法将PRL-2基因表达质粒转染至正常永生化肝细胞系CL1中，G418筛选阳性克隆。应用明胶酶谱法检测转染肝细胞分泌MMPs 酶谱变化，Western blotting 及RT-PCR检测转染肝细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的变化。以PRL-2磷酸酯酶特异性抑制剂处理转染细胞，观察抑制PRL-2活性对上述指标的影响。 结果:经过 8周G418筛选及RT-PCR和Western blotting鉴定,获得稳定表达PRL-2的细胞亚系PRL-2-CL1。转染后的CL1细胞分泌MMP－9 、活性型MMP－9 和MMP－2 ,均显著高于转染前CL1细胞的MMPs 分泌(P<0.01);使用特异性抑制剂后， MMP－9 、活性型MMP－9 和MMP－2活性显著降低(P<0.01)。Western blotting及RT-PCR检测显示PRL-2-CL1细胞MMP2、MMP9蛋白及mRNA含量均较转染前显著升高(P<0.05)，TIMP-2则显著降低(P<0.05)；使用抑制剂后，可以逆转上述变化。 结论:PRL-2在永生化肝细胞中获得稳定、高效表达，PRL-2基因增强肝细胞侵袭及转移能力与其提高细胞MMP2、MMP9表达，降低TIMP-2有关。     

全反式维甲酸可增强大鼠系膜细胞基质金属蛋白酶-2表达

一、材料与方法１．大鼠系膜细胞（ＭｓＣ）的培养与鉴定：１５０～２００ｇＳＤ大鼠购自本校动物部，取肾皮质，分离肾小球，培养与鉴定ＭｓＣ按本实验室常规方法进行［１］。实验用细胞为１０～１５代。２．Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法检测基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）ｍＲＮＡ：当ＭｓＣ长至亚融合状态后，分别在完全培养液中加入全反式维甲酸（ＡＴＲＡ，Ｓｉｇｍａ公司）１０－６、１０－７、１０－８、１０－９、０ｍｏｌ／Ｌ处理２４小时；另在亚融合状态ＭｓＣ加１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸分别处理０、６、１２、２４、４…