抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体8F8轻链可变区基因的克隆及序列分析

本文用基因工程技术,从8F8杂交瘤细胞提取总RNA,逆转录合成cDNA,应用PCR快速克隆出8F8单抗的轻链可变区基因V_L,并对8F8单抗V_L的核苷酸序列和相应编码的氨基酸序列进行了测定和推导。 1 杂交瘤细胞系 抗HFRSV血凝素McAb 8F8株培养于RPMI-1640培养液(含20％小牛血清)中。     

肝癌单抗重链可变区基因的克隆及序列测定

从分泌与肝细胞肝癌特异性强并具有良好人体内导向作用的鼠源性单克隆抗体的杂交瘤细胞ＨＡｂ２５中提取ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ，用合成的寡核甘酸引物从中扩增出抗体重链可变区基因。将此基因克隆到ｐＵＣ１９质粒中，测定了此可变区基因的全序列。经计算机分析，结果表明基因长度为３６０ｂｐ，编码１２０个氨基酸，是具有功能性的抗体可变区基因，在核苷酸序列上与小鼠重链ＶＨ１８６．２家族同源性最高，属免疫球蛋白重链可变区基因９个家族中的第三族     

大鼠抗汉滩病毒单抗重链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析

大鼠抗汉滩病毒单抗重链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析程卫青，杨为松，徐海峰，白雪帆，尚高峰（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３２）刘健，郭虹汾，李斯德（上海市肿瘤研究所免疫室，上佝２０００３２）目前基因工程抗体的研究正方兴未艾。制备基因工...     

抗HLA－A2单抗重链可变区基因的克隆及其序列分析

从５株抗ＨＬＡ－Ａ２单抗杂交瘤细胞株中提取ｍＲＮＡ，以特异性引物采用ＰＣＲ技术，扩增和克隆出单抗可变区重链基因，并采用双脱氧链式终止法及计算机基因文库测定和分析了其全部的氨基酸序列，对抗体的生物学特性的研究具有重要意义，为构建基因工程抗体奠定了基础。     

抗HLA—A2单抗重链可变区基因的克隆及其序列分析

从５株抗ＨＬＡ－Ａ２单抗杂交瘤细胞株中受提取ｍＲＮＡ，以特异性引物采用ＰＣＲ技术，扩增和克隆出单抗可变区重链基因，并采用双脱氧链式终止法及计算机基因文库测定和分析了其全部的氨基酸序列，对抗体的生物学特性的研究具有重要意义，为构建基因工程抗体奠定了基础。     

抗CD8单抗轻,重链可变区基因的克隆和序列分析

采用反转录－ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）法，从分泌特异性抗ＣＤ８单抗的杂交瘤细胞中扩增出该抗体轻，重链可变区（ＶＨ，ＶＬ）基因，并测定了其序列，经计算机分析，ＶＨ和ＶＬ基因均为新发现的基因序列，符合功能重排的鼠抗体可变区基因特征。     

抗CD3单抗轻、重链可变区基因的分离克隆及序列测定

抗CD3单克隆抗体能阻断身体中全T细胞功能是T细胞功能的特异抑制物。该抗体已用于多种器官移植排斥反应的防治,再生障碍性贫血及骨髓移植GVHD的治疗,显示     

CEA单抗轻重链可变区基因的克隆和序列分析

从分泌具有高亲和力和特异性的小鼠抗癌胚抗原（ＣＥＡ）的单抗杂交瘤细胞株Ｃ５０中提取总ＲＮＡ，通过ＲＴＰＣＲ扩增并克隆了抗体的轻、重链可变区基因。核苷酸序列分析表明所克隆基因分别为抗体轻、重链可变区基因。     

抗迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列分析

目的克隆并分析迟缓爱德华菌抗独特型单克隆抗体(mAb)VH基因。方法从分泌迟缓爱德华菌抗独特型mAb的杂交瘤细胞株(1E11)中提取总RNA,利用RT-PCR技术,扩增迟缓爱德华菌抗独特型抗体VH基因,并将其克隆到PBS-Tvector中进行序列分析。结果VH基因的全长序列为339bp,编码113个氨基酸。通过NCBI/BLAST/N和IMGT数据库(Lefrance,2001)分析表明,VH基因符合小鼠IgGV区基因的特征含有4个框架区(FR),3个抗原互补决定区(CDR)及两个抗体特征性的半胱氨酸。结论成功地克隆了迟缓爱德华菌抗独特型mAbVH基因,为进一步构建迟缓爱德华菌抗独特型抗体基因工程疫苗奠定了基础。     

抗鳗弧菌独特型单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列测定

鳗弧菌感染是养殖及野生海水鱼的重要疾病之一 ,大面积发病会给养殖渔业带来巨大经济损失。目前 ,对鱼鳗弧菌感染的防治主要是利用抗生素及减毒、灭活疫苗。抗生素的长期使用易使鱼体产生耐药性 ;减毒疫苗的安全性较难把握 ;灭活疫苗的抗原性较弱且制备过程中残存的杂质还可能使鱼体出现炎症甚至死亡。针对鳗弧菌保护性表位制备的抗鳗弧菌独特型单克隆抗体 (ｍＡｂ)具有良好的安全性及免疫原性[1] ,但大量生产成本较高。为此 ,我们应用ＲＴ ＰＣＲ从分泌抗鳗弧菌独特型ｍＡｂ的杂交瘤细胞株 4Ａ6中 ,扩增了该ｍＡｂ的重链可变区 (ＶＨ)基因…     

抗HSV糖蛋白单克隆抗体重链可变区DNA的克隆及序列分析

作者从分泌具有高中和活性和高保护作用的抗ＨＳＶ型共同性糖蛋白Ｃ的鼠源性单抗的杂交瘤细胞１Ａ１２／４Ｄ５中提取ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ。用合成的寡核苷酸引物从中扩增了抗体的重链可变区基因，并克隆入质粒，随机挑取两个阳性克隆进行核苷酸序列分析，见所克隆基因确可编码小鼠抗体的重链可变区。     

狂犬病毒单抗重链可变区基因的克隆及在原核细胞中 …

狂犬病是一种烈性传染病 ,一旦被带狂犬病毒的动物咬伤或抓伤 ,常规处理是注射狂犬病毒灭活疫苗 ,但抗体产生较慢 ,对严重咬伤者影响治疗效果 ,主张在注射疫苗的同时注射抗狂犬病毒的免疫血清或单克隆抗体。但目前所能获得的上述制剂均来自动物 ,进入人体后易引起过敏反应[1,2 ] ,而人的免疫血清及单克隆抗体又相当难获得。因此近年来分子生物学的发展使基因工程抗体得以产生并取得了令人瞩目的成就。自1989年Ｗａｒｄ等[3 ] 成功地克隆并表达了抗裂解酶单抗ＶＨ单域抗体后 ,国内外相继报道了许多这方面成功的例子。我们利用基因工程技术表…     

抗HSV糖蛋白单克隆抗体重链可变区DNA的克隆及序列…

作者从分泌具有高中和活性和高保护作用的抗ＨＳＶ型共同性糖蛋白Ｃ的鼠源性单抗的杂交瘤细胞１Ａ１２／４Ｄ５中提取ＲＮＡ、逆转录成ｃＤＮＡ。用合成的寡核苷酸引物从中扩增了抗体的重链可变区基因，并克隆入质粒，随机挑取两个阳性克隆进行核苷酸序列分析，见所克隆基因确可编码小鼠抗体的重链可变区。     

抗人ClqMcAb轻、重链可变区基因的克隆、序列分析及轻链可变区基因的表达（摘要）

抗人ＣｌｑＭｃＡｂ轻、重链可变区基因的克隆、序列分析及轻链可变区基因的表达（摘要）陈克敏，朱锡华应用ＰＣＲ技术，从一株抗人ＣｌｑＭｃＡｂ杂交瘤细胞基因组ＤＮＡ及反转录合成ｃＤＮＡ中，扩增、克隆分别获得抗人Ｃｌｑ轻、重链可变区基因，序列分析表明：抗人Ｃ...     

抗角蛋白mAb AK37轻重链可变区基因的克隆及序列分析

一些表皮过度增殖性皮肤病（银屑病和基底细胞癌等）［１ ,２］ ,常发生角蛋白组分的异常变化。本室以往的研究表明 ,抗角蛋白自身抗体 (ＡＫａｕｔｏＡｂ)及抗角蛋白的单克隆抗体 (ｍＡｂ)对这些疾病具有良好的疗效。但由于鼠源性ｍＡｂ用于人体时能诱导人体产生抗鼠抗体（ＨＡＭＡ）［８］,且易引起过敏反应 ,因而限制了其临床应用 ,有必要对其进行人源化改造。为此 ,我们采用反转录ＰＣＲ(ＲＴ ＰＣＲ)方法 ,从分泌抗角蛋白ｍＡｂ的鼠源性杂交瘤细胞中 ,克隆了该ｍＡｂ的轻、重链可变区基因 ,并做了序列分析 ,为进一步研制基因工程抗体奠…