EGFR、pEGFR蛋白在非小细胞肺癌中的表达意义

  目的  探讨伴微乳头成分的肺腺癌(pulmonary adenocarcinoma with a micropapillary pattern, MPPAC)上皮间质转化和增殖调亡特征, 为临床评价其恶性潜能提供理论依据。  方法  根据2011年发表的肺腺癌新分类诊断标准, 以是否伴有微小乳头状结构(micropapillary pattern, MPP)将120例肺腺癌病例分为64例MPP阳性组, 56例MPP阴性组。免疫组织化学法检测Vimentin、E-cadherin、Capase-3、pEGFR的表达。  结果  120例肺腺癌病例中pECFR在女性(P=0.035)、非吸烟(P=0.017)患者中高表达。Vimentin在MPP阳性组的表达(28.1%)高于MPP阴性组(16.1%)并且其多表达于微乳头结构腔内散落的细胞; Caspase-3在MPP阳性组高表达(P=0.001)。  结论  微乳头结构的腔内散落细胞表现间质表型有利于癌细胞浸润转移, 伴乳头结构的肺腺癌有其独特的分子生物学特征。     

伴微乳头成分的肺腺癌EGFR KRAS基因突变和临床病理学特征相关研究

  目的   探讨伴微乳头成分的肺腺癌(pulmonary adenocarcinoma with a micropapillary pattern, MPPAC) EGFR、KRAS基因突变情况及其临床病理学特征。   方法   根据2011年的肺腺癌新分类诊断标准, 以是否伴有微小乳头状结构(micropapillary pat tern, MPP), 将144例肺腺癌病例分为MPP阳性组77例和MPP阴性组77例。MPP阳性组中又按MPP所占比例分为(+、++、+++) 三亚组。RT-PCR法检测两组EGFR、KRAS基因突变情况。   结果   在144例肺腺癌病例中EGFR突变62例(43.1%), KRAS突变9例(6.25%), EGFR突变与性别(P=0.018) 和肿瘤体积(P=0.016) 有关。MPP阳性组EGFR突变率高于MPP阴性组(P < 0.001);KRAS突变率低于MPP阴性组(P=0.016)。EGFR基因突变频率在MPP三亚组中无明显不同(P=0.932)。   结论   伴微乳头结构的肺腺癌EGFR突变频率高于肺腺癌其它亚型, KRAS突变频率低于肺腺癌其它亚型, 说明其有独特的分子生物学特点。      

伴微乳头结构肺腺癌的病理和临床特征研究进展

2011年,国际肺癌研究协会（InternationalAssociationfortheStudyof LungCancer,IASLC）、美国胸科学会（Americanthoracicsociety,ATS）和欧洲呼吸学会（European Respiratory Society,ERS）同时将微乳头结构（micropapillary pattern,MPP）为主型肺腺癌划分为一种独立的病理类型,并将其定义为微乳头型肺腺癌（micropapillary-predominant adenocarcinoma,MPA）,其组织学特异性和临床特殊性受到了学者的广泛关注。伴微乳头结构肺腺癌（lung adenocarcinoma with a micropapillary pattern,MPPAC）常具有侵袭性强、转移率高、术后易复发等预后不良的生物学行为。目前,MPPAC的临床诊断有赖于术后病理组织学检查,但针对其病理学异质性、分子生物学特点、临床特征和预后等方面的系统性研究较少。本文对MPPAC的病理和临床特征相关研究进展作一综述。     

微乳头型肺腺癌为主的MSCT特征初探

目的：探讨微乳头型肺腺癌为主的多层螺旋CT（multislice spiral computed tomography,MSCT）特征,以提高对该病的认识。方法：回顾性分析天津医科大学肿瘤医院2011年6 月至2014年8 月经手术病理证实的18例微乳头型肺腺癌（微乳头成分>50%）为主的MSCT特征。结果：本组18例中1 例为弥漫型肺癌,3 例为中央型肺癌,14例为周围型肺癌。14例周围型肺癌直径为1.3～8.5 cm,平均直径为3.56cm,其中8 例直径≥ 3 cm;13例呈分叶状,9 例边缘可见长短毛刺,7 例可见胸膜凹陷征,5 例紧贴胸膜及与胸膜粘连,1 例内侧可见支气管截断征,4 例周围伴阻塞性炎症,1 例伴钙化,2 例病变较大密度不均,4 例肿物内可见含气支气管征,2 例呈实性与磨玻璃混杂密度。18例中16例病变增强CT值（Δ CT）为13～80HU,平均47.5 HU,其中Δ CT≥ 15HU者15例,Δ CT≥ 20HU者15例。2 例胸膜增厚伴右侧胸腔积液,病理证实1 例胸膜转移;1 例右侧胸腔积液,病理证实同侧胸膜转移;1 例合并双侧胸腔及心包少量积液,双肺多发磨玻璃密度结节影。8 例可见纵隔或肺门淋巴结肿大,强化密度不均,6 例均经手术病理证实存在淋巴结转移;4 例经手术病理证实存在淋巴结转移,但CT检查中未见明显肿大淋巴结。结论：微乳头型为主肺腺癌在女性非吸烟的老年患者中多见,以周围型肺癌多见,且基本具备周围型肺癌分叶征、毛刺征及胸膜凹陷征的典型表现,实性为主,强化较明显,淋巴结转移发生率高。     

康莱特注射液调控胆固醇代谢以抑制肺腺癌A549细胞的恶性生物学行为

目的：明确康莱特注射液（KLTi）通过调控胆固醇代谢对肺腺癌A549 细胞恶性生物学行为的抑制作用。方法：构建A549 细胞体外培养模型,设置空白对照组（CON组）、KLTi组、顺铂（DDP）组及KLTi+DDP 组,分别给予对应药物干预,采用CCK-8法检测不同分组的药物干预对A549 细胞增殖的影响,并确定IC50 值用于后续实验;使用细胞划痕实验、平板克隆形成实验、 Transwell 侵袭实验观察不同分组药物对A549 细胞恶性生物学行为的影响;流式细胞术检测不同分组药物对A549 细胞晚期凋亡水平的影响;WB法检测各组细胞上皮间质转化（EMT）相关蛋白表达,ELISA 法检测促炎因子释放水平。采用比色法检测细胞胆固醇含量水平的组间差异,借助WB法检测胆固醇代谢相关膜通道蛋白ATP结合盒转运蛋白A1（ABCA1）及功能蛋白ATP柠檬酸裂解酶（ACLY）、肽基脯氨酰异构酶B（PPIB）表达水平差异。结果：KLTi 及DDP对A549 细胞抑制作用具有时间及剂量依赖性（均P<0.05）,最终选择2 mg/mL KLTi、3 μg/mL DDP作为干预剂量,按分组加药干预48 h后显示,KLTi 单用或联合DDP均可抑制A549 细胞克隆形成、迁移、侵袭能力且促进其晚期凋亡,KLTi+DDP 组的效果更加明显（P<0.05 或P<0.01）; KLTi 单用或联合DDP 可通过调控E-cadherin、vimentin、snail 蛋白表达从而影响A549 细胞EMT 进程（P<0.05 或P<0.01）,同时下调IL-6 及IL-8的释放水平（P<0.05 或P<0.01）。KLTi 单用及联合DDP 均可以明显降低A549 细胞胆固醇含量（P<0.05 或P<0.01）,并且对ABCA1、ACLY、PPIB 表达具有调控作用,联合组的效果更加明显（P<0.05 或P<0.01）。结论：KLTi 可能通过调控胆固醇代谢水平及相关通道蛋白抑制肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为及EMT进程。     

光甘草定对肺腺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制

目的：探讨光甘草定对肺腺癌细胞A549 恶性生物学行的影响及其分子机制。方法：常规方法培养A549 细胞和人正常肺上皮细胞BEAS-2B,用不同浓度的光甘草定和或顺铂对其进行处理,通过结晶紫染色、CCK-8 法检测光甘草定、顺铂对A549、BEAS-2B细胞增殖活力的影响,Transwell 小室实验、细胞划痕实验检测光甘草定对A549 细胞侵袭、迁移能力的影响,流式细胞术检测光甘草定对A549 细胞凋亡的影响,3D超低黏附板培养法培养A549 细胞后采用CCK-8法检测光甘草定对A549 细胞增殖的影响,WB法检测光甘草定对A549 细胞中上皮间质转化（EMT）相关蛋白表达的影响;构建A549 细胞移植瘤模型后检测光甘草定、顺铂对移植瘤的生长以及移植瘤组织中EMT相关蛋白表达的影响。结果：光甘草定、顺铂呈剂量依赖性地显著抑制A549 细胞的增殖（P<0.05 或P<0.01）、细胞迁移（P<0.05 或P<0.01）和侵袭能力（P<0.05 或P<0.01）,光甘草定能诱导A549 细胞凋亡（P<0.01）,抑制A549 细胞中N-cadherin、snail 和vimentin 蛋白的表达,促进E-cadherin 蛋白表达;光甘草定、顺铂均能抑制A549移植瘤的生长,抑制移植瘤组织中Ki67、N-cadherin、snail 和vimentin 蛋白的表达、促进E-cadherin 蛋白的表达。结论：光甘草定可通过抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导A549细胞凋亡,其机制可能与其抑制细胞的EMT进程而产生抑癌作用有关。     

藏红花素对人肺腺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用及机制研究

目的探讨藏红花素（Crocin）对肺腺癌SPC A1细胞增殖和凋亡的影响及可能的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同浓度（1、2、4、8、16mg／ml）的Crocin对人肺腺癌SPC A1细胞体外生长的抑制作用,倒置显微镜下观察细胞形态学改变;采用Annexin V FITC／PI荧光双标流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;采用RT PCR法检测凋亡相关分子p53、Bax和Bcl-2的mRNA表达水平。结果 Crocin作用SPC-A1细胞24、48、72h后,细胞生长受到明显抑制且呈剂量依赖性。不同浓度Crocin处理48h后,倒置显微镜下SPC-A1细胞形态表现为皱缩、变圆等细胞凋亡性状。不同浓度Crocin处理48h后,各浓度组SPC-A1细胞的凋亡率增加且呈剂量依赖性;随着Crocin作用浓度的增加,SPC-A1细胞生长更多地阻滞在G₀／G₁期,而S期、G₂／M期的细胞比例逐渐降低。RT-PCR法检测显示,随着Crocin浓度的增加,SPC-A1细胞中p53、Bax mRNA水平上调和Bcl-2 mRNA水平下调。结论 Crocin可以抑制人肺腺癌SPC-A1细胞增殖和诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡,这可能与其对p53、Bax和Bcl-2的调控有关。     

黏蛋白13在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞恶性生物学行为的影响与可能的机制

目的：探讨黏蛋白13(MUC13)在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及EMT的影响与可能的机制。方法：通过癌症基因组图谱（TCGA）和高通量基因表达（GEO）数据库分析MUC13在肺腺癌组织与正常肺组织、癌旁组织中的差异表达。qPCR法和WB法检测人肺腺癌细胞NCI-H1395、NCI-H1975、H1299、A549和人正常肺上皮细胞BEAS-2B中MUC13 mRNA和蛋白的表达水平。利用si RNA技术敲低A549细胞中MUC13表达,实验分为si-MUC13组、NC组和si-MUC13+IGF-1组。通过克隆形成实验、流式细胞术和Transwell实验分别检测敲低MUC13对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,WB法检测敲低MUC13对A549细胞上皮钙黏素（E-cadherin）、神经钙黏素（N-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT等蛋白表达的影响。结果：MUC13 mRNA和蛋白在肺腺癌组织和细胞中均呈高表达（均P<0.01）,选取表达水平较高的A...     

THBS2在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化的影响

目的:研究血小板反应蛋白2（thrombospondin 2,THBS2）在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞H1299和A549迁移能力、侵袭能力、上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的影响,并探究分子机制。方法:运用TIMER和GEPIA数据库分析THBS2 mRNA在泛肿瘤和肺腺癌组织中的表达,利用UALCAN数据库分析THBS2 mRNA在I-IV期肺腺癌组织中的表达差异,通过HPA数据库检测THBS2蛋白在肺腺癌组织中的表达情况。通过免疫印迹实验（Western blot）检测THBS2在人正常支气管上皮细胞（BEAS-2B）和肺腺癌细胞（H1299、A549）中的表达情况。应用质粒转染技术在肺腺癌细胞H1299和A549中分别过表达和敲低THBS2。细胞划痕实验和侵袭实验（Transwell）检测细胞迁移和侵袭能力。Western blot验证THBS2过表达和敲低效率,同时检测EMT相关蛋白和MMP2的表达水平。结果:TIMER数据库与GEPIA数据库检索结果显示THBS2 mRNA在肺腺癌组织中高表达（P＜0.001）。UALCAN数据库分析证明,与正常肺组织相比,THBS2 mRNA在I-IV期肺腺癌组织中均显著表达（P＜0.001）。HPA数据库结果显示,THBS2蛋白在肺腺癌组织中呈现中高等强度表达。细胞划痕实验、Transwell实验和Western blot结果表明,THBS2在人正常支气管上皮细胞和肺腺癌细胞中的表达有显著差异（P＜0.01）;过表达THBS2可增加肺腺癌细胞H1299和A549迁移与侵袭能力（P＜0.01）,EMT相关蛋白E-cadherin表达水平减少,而N-cadherin和Vimentin表达水平增加（P＜0.01）;相反的,敲低THBS2可抑制肺腺癌细胞H1299和A549迁移与侵袭能力（P＜0.01）,EMT相关蛋白E-cadherin表达水平增加,而N-cadherin和Vimentin表达水平减少（P＜0.01）。结论:THBS2在肺腺癌组织中高表达;THBS2在肺腺癌细胞（H1299、A549）中的表达均显著高于人正常支气管上皮细胞（BEAS-2B）;THBS2在肺腺癌细胞H1299和A549中的过表达和敲低影响迁移、侵袭和EMT的过程,可作为肺腺癌治疗的新型潜在靶点。     

沉默HOXB7基因表达在电离辐射诱导肺腺癌细胞上皮间质转化和迁移中的作用

目的:探讨HOXB7对电离辐射诱导的肺腺癌细胞上皮间质转化和迁移能力的影响。方法:采用Western blot 检测蛋白表达变化,划痕实验和 Transwell迁移实验检测电离辐射对肺腺癌A549细胞迁移能力的影响。结果:用不同剂量X-射线辐照A549细胞,发现2 Gy X-射线辐照HOXB7表达量最高;用2 Gy X-射线辐照A549细胞,发现辐照后第3天HOXB7表达量最高;Western blot 检测发现电离辐射明显上调上皮间质转化标志蛋白的表达;划痕实验及Transwell 迁移实验证明电离辐射增强A549细胞迁移能力。沉默HOXB7 后,电离辐射诱导的A549细胞上皮间质转化及迁移能力明显减弱。结论:HOXB7是电离辐射诱导肺腺癌细胞上皮间质转化和迁移的关键蛋白。     

芝麻素对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨芝麻素对人肺腺癌A549细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用及其机制,为开发抗肿瘤中药提供实验和理论依据。方法 应用MTT法检测芝麻素对A549细胞株的抗增殖及细胞毒性作用;应用倒置显微镜、HE染色法来观察肿瘤细胞的形态学变化;应用免疫细胞化学技术检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达变化;AnnexinV/PI双染色法分析细胞凋亡率及测定细胞Bcl-2及Bax表达水平。结果 芝麻素对A549细胞株均有明显抑制作用,且呈现出浓度和时间依赖性;倒置显微镜观察发现实验组细胞体积变小变圆,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱;HE染色结果发现实验组细胞质脱水浓缩,伊红染色增强等典型的细胞形态学变化,免疫细胞化学检测发现实验组细胞Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达增加与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞仪分析结果示芝麻素40 μg/m1作用48 h后,细胞主要阻滞在S期;Bcl-2蛋白的表达降低,Bax蛋白的表达升高。结论 芝麻素对人肺腺癌A549细胞株具有抑制增殖作用,并呈浓度和时间依赖性佳;芝麻素诱导凋亡作用机制可能与细胞周期发生S期阻滞有关;芝麻素由死亡受体通路和线粒体通路共同完成凋亡的启动和执行。     

Clinicopathological Significance of Micropapillary Pattern in Lung Adenocarcinoma

The aim of this study was to elucidate the clinicopathological characteristics of the micropapillary (MP) subtype and its correlation with survival in lung adenocarcinoma. We investigated the clinicopathological characteristics, including the incidence, sex, smoking history, tumor size, lymph node metastasis, lymphovascular invasion, distant metastasis, genetic alteration, and prognosis in lung adenocarcinoma with the MP pattern through a meta-analysis. From 48 eligible studies, 19,502 lung adenocarcinomas were included. The incidence rate of the MP pattern was 0.101 [95% confidence interval (CI) 0.075–0.136]. There was no significant difference between stage I and III tumors. Lung adenocarcinoma with the MP pattern showed higher rates of lymphatic invasion (0.526, 95% CI 0.403–0.645). MP pattern was found in 0.150 (95% CI 0.008–0.790) of lung adenocarcinoma with distant metastasis. In lung adenocarcinoma with the MP pattern, the estimated rates of ALK, EGFR, and KRAS mutations were 0.102 (95% CI 0.027–0.322), 0.620 (95% CI 0.444–0.769), and 0.118 (95% CI 0.027–0.393), respectively. The MP pattern of lung adenocarcinoma was significantly correlated with worse overall and disease-free survival rates (hazard ratio 1.704, 95% CI 1.216–2.387, and 2.082, 95% CI 1.541–2.813, respectively). Taken together, identification of the MP pattern in lung adenocarcinoma is useful for prediction of clinicopathological characteristics and prognosis of patients.     

细胞增殖和凋亡在先天性肺囊肿形成中的作用

背景与目的:观察细胞增殖与凋亡相关蛋白在先天性肺囊肿中的表达特征,探讨其在先天性肺囊肿发病中的作用.材料与方法:选用儿童正常肺组织5例及先天性肺囊肿病变周围相对正常肺组织5例作为对照,先天性肺囊肿30例为病例组,采用免疫组化法检测Ki-67、Bcl-2和Bax的表达.结果:先天性肺囊肿囊壁Ki-67和Bax的表达明显强于2个对照组(P均＜0.05);Bcl-2的表达明显弱于2个对照组(P＜0.01);Bax/Bcl-2的比值明显高于2个对照组(P均＜0.01);先天性肺囊肿中,Bax和Bcl-2的表达在无纤毛上皮细胞中明显低于纤毛上皮细胞(P＜0.01);Bax/Bcl-2的比值在无纤毛上皮细胞中明显高于纤毛上皮细胞(P＜0.01).结论:先天性肺囊肿中细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达明显强于对照组,提示细胞增殖和凋亡的失调在先天性肺囊肿的发生发展中起重要的作用.     

Imaging Phenotyping Using Radiomics to Predict Micropapillary Pattern within Lung Adenocarcinoma

IntroductionLung adenocarcinomas (ADCs) with a micropapillary pattern have been reported to have a poor prognosis. However, few studies have reported on the imaging-based identification of a micropapillary component, and all of them have been subjective studies dealing with qualitative computed tomography variables. We aimed to explore imaging phenotyping using a radiomics approach for predicting a micropapillary pattern within lung ADC.MethodsWe enrolled 339 patients who underwent complete resection for lung ADC. Histologic subtypes and grades of the ADC were classified. The amount of micropapillary component was determined. Clinical features and conventional imaging variables such as tumor disappearance rate and maximum standardized uptake value on positron emission tomography were assessed. Quantitative computed tomography analysis was performed on the basis of histogram, size and shape, Gray level co-occurrence matrix–based features, and intensity variance and size zone variance–based features.ResultsHigher tumor stage (OR = 3.270, 95% confidence interval [CI]: 1.483–7.212), intermediate grade (OR = 2.977, 95% CI: 1.066–8.316), lower value of the minimum of the whole pixel value (OR = 0.725, 95% CI: 0.527–0.98800), and lower value of the variance of the positive pixel value (OR = 0.961, 95% CI: 0.927–0.997) were identified as being predictive of a micropapillary component within lung ADC. On the other hand, maximum standardized uptake value and tumor disappearance rate were not significantly different in groups with a micropapillary pattern constituting at least 5% or less than 5% of the entire tumor.ConclusionA radiomics approach can be used to interrogate an entire tumor in a noninvasive manner. Combining imaging parameters with clinical features can provide added diagnostic value to identify the presence of a micropapillary component and thus, can influence proper treatment planning.     

多西他赛与吉非替尼序贯应用对人肺腺癌细胞H1975存活及凋亡通路的研究

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosinekinase inhibitors,TKIs)被用于治疗进展性晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),然而最初接受EGFR-TKIs治疗有反应的患者,大部分会在10个月左右出现获得性耐药。绝大多数报告称T790M的突变是产生获得性耐药的主要原因,约占获得性耐药的50%。本研究旨在探索多西他赛和吉非替尼序贯应用对肺腺癌细胞H1975增殖和凋亡通路的作用。方法 M法检测细胞的增殖。等效线图法和联合指数(combination index,CI)法评估多西他赛和吉非替尼序贯作用的效价。流式细胞术检测细胞凋亡和周期分布,Hoechest 33258染色法检测凋亡形态。化学比色发光法检测Caspases的活性。结果等效线图法和联合指数法均显示多西他赛序贯吉非替尼组较其它序贯作用组明显抑制了细胞增殖,增加了细胞的凋亡。细胞周期分布实验结果显示与吉非替尼序贯多西他赛组主要把细胞抑制在G0/G1期相比较,多西他赛序贯吉非替尼组主要把细胞抑制在G2/M期。在肺腺癌H1975中,所有序贯模型组都主要通过活化Caspase-8/Caspase-3来诱导激活细胞凋亡通路。结论先用多西他赛再用吉非替尼治疗模式可能是TKIs耐药后T790M突变肺癌的一个新选择。     

多烯紫杉醇和姜黄素联用对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的研究姜黄素和多烯紫杉醇对肺腺癌A549细胞增殖及调亡的影响,并探讨两种药物的合用是否可增强抗癌作用及降低不良反应。方法体外培养肺腺癌细胞系A549细胞,采用 MTT 法计算细胞抑制率;Giemsa 染色法观察细胞形态学变化;流式细胞仪分析细胞的凋亡率。结果经MTT法检测显示,姜黄素能明显抑制A549细胞的生长,多烯紫杉醇50 μg/ml与姜黄素5、10、20 μmol/L联用对A549细胞的抑制作用明显大于两药单用时的抑制作用（P<0.01）;Giemsa染色显示多烯紫杉醇与姜黄素联用后诱导细胞凋亡的作用增强,可见典型的凋亡小体;流式细胞仪结果表明姜黄素能增加多烯紫杉醇的细胞凋亡率,其作用呈剂量依赖性。结论姜黄素与多烯紫杉醇可协同抑制人肺腺癌A549细胞的增殖;二者联合化疗有增效减毒作用。     

韧带样型纤维瘤病中细胞增生与凋亡

背景与目的：韧带样型纤维瘤病发生于深部软组织，具有局部浸润性生长和复发倾向，但不转移的特点。研究发现该瘤常有Wnt信号通路异常。因此本工作分析p-catenin、cyclinD1、Ki-67和c-myc蛋白表达，研究韧带样型纤维瘤病中细胞增生和凋亡，探讨其发生发展的机制。方法：采用TUNEL的方法分析韧带样型纤维瘤病中细胞凋亡，透射电镜观察细胞增生及凋亡，免疫组织化学EnVision^＋两步法检测采用TUNEL的方法分析韧带样型纤维瘤病中细胞凋亡，透射电镜观察细胞增生及凋亡，免疫组织化学EnVision^＋两步法检测上述4种蛋白的表达。结果：β-catenin表达于胞核及胞质，阳性率为47．8％（33／69），阳性病例的c-myc表达阳性率（69．7％，23／33）显著高于阴性病例的c-myc阳性率（22．2％，8／36），两者之问有正相关关系（pearson’s R=0．477），而cyclinD1的表达没有显示出这种相关性和差异。Ki-67表达阴性。透射电镜下没有看到提示细胞凋亡或增生的结构。细胞凋亡指数在0．01-0．05之间，c-myc和cylinD1表达阳性病例的凋亡指数显著低于阴性病例。结论：韧带样型纤维瘤病中细胞增生不明显，凋亡明显受阻。Wnt信号通路异常及其他遗传学异常引起的肿瘤发生发展可能是通过抑制细胞凋亡实现的。     

重楼皂甙Ⅰ对肺腺癌细胞株PC9增殖及凋亡的影响

[目的]评价重楼皂甙Ⅰ对肺腺癌细胞株PC9增殖和凋亡的影响.[方法]以体外培养的肺腺癌细胞株PC9为研究对象,MTT法检测重楼皂甙Ⅰ对PC9细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测重楼皂甙Ⅰ对PC9细胞周期的影响,Annexin-V-FITC/PI双染法检测重楼皂甙Ⅰ对PC9细胞凋亡的影响,Western blot法检测重楼皂甙Ⅰ对PC9细胞Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达的影响.[结果]不同浓度重楼皂甙Ⅰ能有效抑制PC9细胞的增殖,且呈时间浓度依赖性(P＜0.01).2.5.μg/ml重楼皂甙Ⅰ作用PC9细胞12h、24h、48h后,出现G2/M期阻滞.2.5μg/ml重楼皂甙Ⅰ作用PC9细胞24h、48h后,细胞凋亡率明显增加,与对照组相比,具有统计学差异(P＜0.01).2.5μg/ml重楼皂甙Ⅰ作用PC9细胞48h后,Bcl-2蛋白表达降低、Bax及caspase-3蛋白表达增加,与对照组相比,亦具有统计学差异(P＜0.01).[结论]重楼皂甙Ⅰ能抑制PC9细胞的体外增殖,且抑制作用表现出时效和量效关系,其机制可能与G2/M期阻滞、促进细胞凋亡、降低Bcl-2蛋白表达、增加Bax及caspase-3蛋白表达有关.