下丘脑室旁核FKBP5在电针调节创伤应激后HPA轴中的作用

 目的   观察创伤应激后电针调节下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴的活性变化,并探讨下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN) FKBP5在其中的作用。方法   模拟脏器探查术建立创伤模型。60只SD雄性大鼠随机分为对照组、创伤1天组、创伤3天组、创伤7天组及电针干预组,每组12只。检测出创伤后应激高峰,给予电针作为干预,刺激双侧“三阴交”(SP-6)和“足三里”(ST-36)穴位,观察干预组与非干预组HPA轴的恢复情况。各组于相应时间点进行体温测量,免疫组化染色法检测下丘脑PVN c-fos和FOSB的表达,放射免疫分析法测定血清激素水平,Western blot检测FKBP5的表达。结果   创伤1天组与对照组相比,大鼠的体温水平明显升高［(37.90±0.21)℃ vs.(37.20±0.25)℃,P<0.05］,下丘脑PVN c-fos表达(1.00±0.16 vs.2.30±0.22,P<0.01)和FOSB表达(1.00±0.08 vs.2.00±0.33,P<0.001)明显升高;与创伤1天组比较,电针干预组大鼠血清促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)(33.80±4.88 vs.28.20±3.31,P<0.05)及CORT (338.39±29.51 vs.280.85±30.39,P<0.01)、下丘脑PVN FKBP5表达(3.30±0.47 vs.2.50±0.42,P<0.05)显著下降。结论   HPA轴活性在创伤后1天达到最高,电针能下调创伤后HPA轴活性,其可能通过FKBP5发挥作用。     

大鼠室旁核CRF神经元在烫伤应激中的变化

目的;探讨丘脑下部室旁核（ＰＶＮ）促肾上腺皮质释放因子（ＣＲＦ）在伤应激中的作用,方法：在大鼠清醒状态下给予标准的２５％Ⅲ度皮肤伤,伤后２４ｈ杀动物,用免疫细胞化学ＡＢＣ法显示ＰＶＮ的ＣＲＦ阳性神经元和正中隆起内的ＣＲＦ阳性纤维,结果用显微图像分析技术处理。     

应激大鼠室旁核神经元c-fos的表达

目的：为下丘脑室旁核参与应激反应提供形态学资料。方法：对铃声刺激大鼠为应激动物模型用免疫组织化学ABC法显示下丘脑室旁核神经元即早基因c-fos的表达。结果：铃声刺激使鼠室旁核神经元。尤其是小细胞亚核神经元c-fos表达显著增加。结论：下丘脑室旁核神经元在铃声刺激下处于活动状态。参与应激反应。     

大鼠中缝大核在下丘脑室旁核镇痛中的作用

在大鼠下丘脑室旁核及(PVN)和中缝大核区埋藏套管,用行为测痛方法,观察向PVN和中缝大核(NPM)注射药物后的痛阈变化.向PVN分别注射谷氨酸钠10μg/μl盐酸吗啡10μg/μl,痛阈显著升高.这种变化可被NRM注射纳络酮所翻转.说明NRM可能参与了PVN的镇痛过程.     

精神应激与生理应激对大鼠焦虑行为的影响

目的 比较精神应激与生理应激对SD大鼠焦虑行为的不同影响.方法 采用旁观电击大鼠应激模型作为精神应激模型,以旷场实验、高架十字迷宫实验评估精神应激大鼠与生理应激大鼠的焦虑行为.结果 在旷场实验中,外周格数、中央格数、以及修饰数均是生理应激组[分别是(21.60±22.99)个、(4.20±3.26)个、(5.80±2.35)次]低于精神应激组[分别是(47.60±20.87)个、(6.00±3.43)个、(7.00±2.69)次],精神应激组低于正常对照组[分别是(55.80±14.54)个、(7.00±3.47)个、(13.40±5.01)次],差异具有显著性;在高架十字迷宫实验中,开放臂次数以及开放臂时间也是生理应激组最低,精神应激组居中,正常对照组最高,差异具有显著性.结论 在旁观电击大鼠应激模型中,生理应激大鼠的焦虑水平较精神应激大鼠明显.     

齐拉西酮早期干预对创伤后应激障碍模型大鼠行为的改善作用及机制

目的 观察齐拉西酮早期干预对改良单次延长应激(single prolonged stress and foot shock,SPS&S)模型大鼠行为的改善作用及大脑磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase,pERK1/2)表达的影响.方法 24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、齐拉西酮组以及齐拉西酮+ U0126组,每组6只.对照组正常饲养;模型组为SPS&S处理组;齐拉西酮组为SPS&S造模结束后,每天灌胃齐拉西酮( 2.5 mg/kg),连续7d;齐拉西酮+U0126组为SPS&S造模结束后,连续7d给予齐拉西酮,并在每次齐拉西酮灌胃后0.5h,腹腔注射U0126(MEK1/2抑制剂)(0.5 mg/kg).各组在处理结束24h后,采用旷场和高架十字迷宫检测大鼠行为表现,并且在行为实验完成后处死大鼠,以蛋白质印迹法(Western blot)检测大脑pERK1/2的表达水平.结果 在旷场实验中,模型组大鼠水平活动度,中央活动次数[分别为(76.23±54.76) cm,(4.60±1.14)次]低于对照组[分别为(343.77±74.22) cm,(12.40±3.36)次]和齐拉西酮组[分别为(274.98±83.56) cm,(12.00±2.92)次],差异有统计学意义(均P＜0.01),而与齐拉西酮+U0126组[分别为(138.14±41.98)cm,(5.00±1.58)次]相比,差异无统计学意义(均P＞0.05).在高架十字测试中,各处理组在大鼠开臂进入次数和停留时间上的差异性与旷场实验的结果一致.Western blot结果显示,模型组pERK1/2的表达水平明显低于对照组和齐拉西酮组,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 齐拉西酮能改善PTSD动物的焦虑样行为,而且这种作用可能是通过上调pERK1/2的表达实现的.     

大鼠下丘脑室旁核的肽能神经元分布

用免疫组化研究了大鼠下丘脑室旁核(PVN)中催产素(OXY),加压素(VP)、P物质(SP)、促肾上腺皮质释放激素(CRF)、促甲状腺释放激素(TRH)、神经降压肽(NT)、胆囊收缩素(CCK)、生长抑素(SOM)、甘丙肽(GAL)、亮氨酸—脑啡肽(L—ENK),血管活性肠肽(VIP)、促肾上腺皮质激素(ACTH)样等12种肽能神经元胞体的分布,并用图象分析仪对肽能神经元胞体面积,周长、最大径、最小径、灰度进行测量分析。结果显示PVN中存在上述12种肽能神经元胞体,其中SP、TRH、SOM、L—ENK样胞体主要分布在小细胞亚核。GAL、OXY、VP及ACTH样胞体主要分布在大细胞亚核,其余两者分布部位相似。图象分析表明大细胞亚核中各种肽能神经元胞体的大小基本相似,但GAL和VP样胞体的形状和灰度与其他肽能神经元胞体不同。小细胞亚核中各种肽能神经元胞体的大小不同,其中以NT样胞体最大,胞体的形状和灰度亦各不相同。     

大鼠室旁核大细胞加压素神经元在烫伤应激中的变化

目的：探讨室旁核（ＰＶＮ）的大细胞核加压素（ＶＰ）神经元在烫伤应激中的作用。方法给予大鼠标准的２５％Ⅲ度皮肤烫伤,用免疫组织化学ＡＢＣ法显示ＰＶＮ的ＶＰ阳性神经元和正中隆起（ＭＥ）内的ＶＰ阳性纤维。结果：①烫伤大鼠ＰＶＮ代表平面ＶＰ神经元的总面积大,免疫染色增强,以大细胞ＶＰ神经元增加为主。②ＭＥ内带的ＶＰ免疫染色阳性纤维的面积密度和免疫染色强度均增加;在ＭＥ外带,ＶＰ阳性纤维的面积密度增加而免疫     

下丘脑室旁核在针刺改善心脏功能中的作用*

经脉脏腑与脑之间的联系近年来被广泛关注。既往研究已经证实,针刺可明显调节心脏功能,其作用机制与神经系统的调控密切相关。下丘脑室旁核（PVN）是参与内脏功能调节的重要神经核团,学者们围绕针刺调节心脏功能的神经机制开展了大量研究,文中从针刺调节PVN神经元活动、神经递质释放、减少PVN内炎性细胞因子表达、降低应激反应、调控自主神经活动等方面探讨PVN在针刺调节心脏功能中的作用机制,以期为进一步揭示针刺效应的神经调控机制奠定基础。     

脂多糖对大鼠下丘脑室旁核GABABR1阳性神经元的激活作用

目的:探讨大鼠下丘脑室旁核(PVN)-氨基丁酸B受体亚单位1(GABABR1)阳性神经元对脂多糖(LPS)刺激的反应. 方法:将大鼠腹腔注射LPS建立免疫应激模型,对照组注射等量的生理盐水,采用免疫荧光双标记与激光共聚焦显微镜技术,观察大鼠下丘脑室旁核内神经元Fos和GABABR1的标记情况以及它们在同一神经元内是否有共标记. 结果:腹腔注射LPS可使大鼠PVN内表达Fos神经元数量显著增高,且PVN内部分神经元可同时被Fos和GABABR1双重标记,双重标记的神经元大约占Fos神经元的30%,占GABABR1的24%. 结论:下丘脑室旁核部分GABABR1阳性神经元参与了LPS诱导的免疫应激反应,它们可能在下丘脑-垂体-肾上腺轴的调节方面起重要作用.     

去窦弓神经大鼠下丘脑室旁核和视上核FOS和NADPH-d共存分布

目的:探讨大鼠下丘脑室旁核和视上核神经元型一氧化氮合酶神经元是否参与中枢压力感受性反射通路.方法:应用Fos免疫组织化学结合还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学双重染色的方法,观察去窦弓神经术(SAD)后2 h Fos和NADPH-d在室旁核和视上核内的分布情况.结果:SAD大鼠室旁核小细胞部、大细胞部和视上核内有大量Fos表达,并与NADPH-d部分共存;NADPH-d/Fos双标记阳性神经元的比例分别为6.8%、72.1%和47.1%.在假手术组和正常对照组大鼠上述核团内偶见Fos阳性神经元,未观察到NADPH-d/Fos双标记神经元.结论:下丘脑室旁核和视上核内的神经元型一氧化氮合酶神经元可被SAD特异性激活,提示其参与了中枢压力感受性反射通路所介导的心血管活动的中枢调节.     

可卡因-苯丙胺调节转录肽蛋白疫苗在吗啡镇痛及其耐受中的作用

目的:检测可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)蛋白疫苗在吗啡镇痛及其耐受中的作用.方法:利用基因克隆技术构建Pgex-4T3-CART55-102表达质粒,通过谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析法纯化出GST-CART蛋白. 实验分为6组:空白对照组,生理盐水组,GST 弗氏佐剂组,CART蛋白疫苗5 μg组、10 μg组和20 μg组,免疫两次后热板法对各组进行痛反应检测.皮下注射6 mg/kg吗啡进行镇痛效应检测,计算最大镇痛效应百分率(MPE%).随后建立吗啡耐受模型,并于末次给药12 h后皮下注射6 mg/kg吗啡进行耐受效应检测.结果:CART蛋白疫苗本身对基础痛阈没有影响(P>0.05).10 μg CART蛋白疫苗组显著降低了吗啡镇痛效应(P<0.05).对比生理盐水组,疫苗组显示出抗耐受的潜力,其中10 μg组MPE%增高具有显著性差异(P<0.05).结论:CART蛋白疫苗本身对痛反应没有影响,但削弱了吗啡的镇痛效应,同时对吗啡镇痛耐受具有拮抗作用.     

清醒大鼠下丘脑室旁核内GABA对压力感受性反射的影响

目的 探讨下丘脑室旁核(PVN)内γ-氨基丁酸(GABA)对压力感受性反射的作用及其机制.方法 本实验在给清醒自由活动大鼠静脉注射苯肾上腺素诱发压力感受性反射的条件下,用脑部微量透析法和高效液相色谱法测定PVN区细胞外液中的GABA含量变化,并利用两种GABA受体阻断剂进一步探讨其具体的作用机制.结果 ①静脉注射苯肾上腺素诱发压力感受性反射时,PVN区域细胞外液中的GABA水平出现明显的增加,增加到注射前的(225.14±65.72)%(P<0.05);②PVN局部边灌流GABAA受体阻断剂Bicuculline,边用苯肾上腺素诱发压力感受性反射,血压的增加幅度显著高于对照组(P<0.05),而心率下降幅度与对照组比无明显差异(P>0.05),导致压力感受性反射敏感性(△HR/△MAP)明显低于对照组(P<0.05);③PVN局部灌流GABAB受体阻断荆Saclofen对压力感受性反射中的血压和心率的变化值以及压力感受性反射敏感性均未产生明显的影响.结论 静脉注射苯肾上腺素引起PVN局部GABA释放,可能通过GABAA受体对压力感受性反射起易化作用.     

河北省农村居民饮酒行为特征调查分析

目的 了解河北省农村居民饮酒行为特征及影响因素,为开展农村地区控制有害饮酒行为的综合干预提供科学依据.方法 采用多阶段整群随机抽样方法,对河北省2市4县1088名有饮酒行为的农村居民进行问卷调查.结果 每天饮酒者达31.3％,饮酒频率≥3次/周者501人（46.0％）;调查对象的饮酒频率和饮酒类型在不同性别、居住地、文化程度及年龄组间差异有高度统计学意义（P＜0.01）;男、女性有害饮酒率分别为92.2％,8.7％,差异有高度统计学意义（P＜0.01）;有害饮酒者的酒后不良行为反应率为78.8％,与非有害饮酒者比较,差异有高度统计学意义（P＜0.01）.结论 河北省农村居民饮酒行为普遍,饮酒频率高,有害饮酒行为流行严重,建议加强综合干预,减少因有害饮酒行为导致的社会和健康问题.     

室旁核注射apelin-13对大鼠胃缺血/再灌注损伤的影响

目的 研究室旁核注射apelin-13对胃缺血/再灌注(GI/R)损伤的作用及细胞机制.方法 室旁核注射apelin-13,制备GI/R模型;用Western-blot方法检测胃黏膜细胞的凋亡以及凋亡相关基因c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的磷酸化水平.结果 与单纯GI/R组相比,室旁核注射apelin-13能明显增加GI/R后胃黏膜细胞的损伤,同时可以升高caspase-3蛋白表达及JNK的磷酸化水平.结论 室旁核注射apelin-13对大鼠GI/R损伤具有加重作用.     

大鼠急性颅脑伤后下丘脑生长抑素神经元的变化

应用免疫细胞化学和图像分析等技术，观察鼠性颅脑伤室旁核生长抑素神经元的变化。结果表明，损伤初期ＳＳ神经元数目和免疫反应面积均明显减少；伤后３ｈ和６ｈＳＳ含量逐渐增加，恢复至正常水平。     

旋转刺激对清醒大鼠下丘脑室旁核内几种氨基酸含量的影响

目的为探讨下丘脑室旁核（PVN）参与应激反应的具体神经化学机制，本实验观察了旋转刺激时清醒大鼠PVN内几种氨基酸含量的变化。方法给予清醒大鼠旋转刺激，同时利用脑部微量透析法收集PVN区细胞外液的透析样本，然后用高效液相色谱法测定透析样本中几种氨基酸的含量。结果旋转刺激导致PVN区域细胞外液中的天冬氨酸、甘氨酸和丙氨酸明显增加，而谷氨酸、谷氨酰胺和牛黄酸含量无明显变化。结论室旁核内的天冬氨酸、甘氨酸和丙氨酸可能与旋转刺激的应激反应调节有关。     

糖尿病大鼠下丘脑室旁核nNOS免疫阳性神经元的变化

目的观察糖尿病大鼠下丘脑室旁核(PVN)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元数目的变化,探讨PVN内NO在糖尿病发展中的作用机制。方法建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型,于第2、7、12周末取脑组织进行ABC免疫细胞化学法染色,定量分析PVN内nNOS免疫阳性神经元数目变化。结果2周时糖尿病组大鼠PVN内nNOS免疫阳性神经元数目与对照组相比无显著差异(P>0.05);7、12周时糖尿病组大鼠PVN内nNOS免疫阳性神经元数目显著高于对照组(P<0.05)。结论PVN内nNOS免疫阳性神经元数目在糖尿病中、后期明显升高,糖尿病状态下PVN内nNOS活性改变可能与糖尿病神经内分泌及肾上腺素能途径改变有关。     

下丘脑室旁核对大鼠胃缺血/再灌注损伤保护作用的细胞机制

目的 研究电刺激下丘脑室旁核（PVN）对胃缺血/再灌注损伤（GI/RI）大鼠胃黏膜细胞凋亡和增殖的影响,探讨电刺激PVN对GI/RI保护作用的细胞机制.方法 采用电刺激、电解损毁PVN的手段,以夹闭大鼠腹腔动脉30 min、松开 动脉夹恢复血流灌注1 h制备GI/RI模型,计算胃黏膜损伤指数,检测胃黏膜细胞的凋亡和增殖情况.结果 夹闭大鼠腹腔动脉30 min,再灌注1 h后可造成胃黏膜的明显损伤,电刺激PVN后GI/RI明显减轻,而且胃黏膜细胞的增殖增加,凋亡减少.结论 电刺激PVN对GI/RI具有明显的保护作用.这种保护作用是通过促进胃黏膜细胞增殖、抑制胃黏膜细胞凋亡而实现的.