循环肿瘤细胞液体活检技术研究现状及应用前景

目前,随着富集和捕获循环肿瘤细胞(CTCs)技术的发展,研究转移起始时刻的癌细胞特征成为可能。因此,CTCs将有望成为癌症患者进行实时检测治疗效果及预后评价的有效指标。然而,由于血液中CTCs数量有限,并且转移过程中癌细胞表型不断改变,使得CTCs利用受到限制。目前已发展出多种不同方法在体内外扩展CTCs,旨在研究具有干细胞特性的功能性转移起始CTCs的特征,并以此得到新的诊疗工具。本综述叙述了已有的CTC体外培养和CTC来源的异种移植,以识别由CTCs起始的转移相关的分子机制,还讨论了EMT与CTC特征的关系,以及这些特征如何与肿瘤微环境中的其他因素相互作用,导致了肿瘤细胞在远处器官的扩散和增殖。     

循环肿瘤细胞检测技术在脑胶质瘤中的研究进展

脑胶质瘤是最常见的原发性颅内肿瘤,具有相当高的发病率和死亡率.循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)检测技术是液体活检的重要组成部分.CTCs携带了肿瘤组织的遗传和生物学信息,为肿瘤转移、进展、化疗敏感性和耐药性提供新的视角和维度.脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF...     

循环肿瘤细胞在可手术乳腺癌患者中的检出率及特征分析

目的：探讨循环肿瘤细胞（ CTCs ）在可手术乳腺癌患者外周血中的水平及与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法收集T2～4 N0～3 M0可手术乳腺癌患者126例。抽取入组患者7.5 mL外周血,使用CellSearch系统检测CTCs。分析CTCs与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果在126例患者中,有9例患者检测到CTCs,检出率为7.1％。 CTCs阳性组的Ki67为（51±20）％,CTCs阴性组的Ki67为（33±23）％（ P＝0.04）。可手术乳腺癌患者外周血检出CTCs与患者年龄、月经状态、肿块大小、淋巴结状态、AJCC分期、病理类型、病理学分级、ER、PR、HER2状态以及分子分型无关。结论7.1％的可手术乳腺癌患者检测到CTCs,CTCs与Ki67相关。     

IsoFluxTM系统在乳腺癌循环肿瘤细胞检测中的应用分析

目的探讨运用IsoFlux~(TM)系统在乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells,CTCs)检测中的临床应用价值。方法回顾性分析深圳市人民医院甲乳外科2015年12月～2017年5月收治的23例女性乳腺癌患者运用IsoFlux~(TM)系统进行循环肿瘤细胞检测的临床资料,并将CTCs数量与肿块大小、TNM分期的关系进行统计学分析。结果 23例乳腺癌患者中,可手术乳腺癌患者22例,术前使用IsoFlux~(TM)系统全部检测到CTCs,阳性捕获率100%,每7.5 m L全血样本中CTCs数目2～4201个不等,中位数173.5个;另1例为乳腺癌术后2年出现双肺多发结节、怀疑肺转移的患者,未检测到CTCs,根据CTCs结果对其肺部结节初步排除肺转移可能。22例可手术乳腺癌患者的肿块大小和log(CTCs)显著相关,CTCs的数量与乳腺癌TNM分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)不存在显著的相关性。结论此次将IsoFlux TM系统应用于乳腺癌CTCs检测的探索性研究初步证明,该系统敏感性高、捕获力强,是乳腺癌患者CTCs检测的一个理想选择,有助于监测乳腺癌术后的复发和转移情况。     

小细胞肺癌患者循环肿瘤细胞(CTC)检测的 应用价值评估

目的 分析小细胞肺癌(SCLC)者循环肿瘤细胞(CTC)检测的应用价值情况.方法 便利选择2013年12月—2016年12月宝应县人民医院收治的288例SCLC者为研究对象,另取健康体检者70名,良性疾病组56例为对照者.使用免疫磁珠阴性富集和免疫荧光化学染色法,分析静脉血内CD45-/CTC/CK18+数量,随访104例化疗者,分析SCLC者CTC检测价值.结果 和良性疾病者(3.57％)以及对照组(5.71％)相比,SCLC组(64.58％)的CTC检查结果差异有统计学意义(P<0.05).对照组中CTC阳性率为5.7％,SCLC者临床分期IIIA,IIIB和IV期阳性率分别为32.1％,56.9％以及78.1％.组间数据差异有统计学意义(P<0.05).经单变量分析证实,肿瘤T和N分期与CTC阳性无相关性,远处转移与其结果呈正相关(P<0.05).阴性富集肿瘤回收率为92.0％,阳性对照细胞株H460和A549经荧光抗体染色后上述两种细胞株中存在细胞角蛋白CK18以及CK19.肺癌者敏感性以及特异性为98.2％以及72.9％.调查区间内生存者共计248例CTC数量为2～4个,无显著上升,其临床特征为CTC阳性全身多发性转移,PS分数低.结论 该实验所使用的检测方式简便可行,特异性和敏感性较高,CTC阳性和疾病分期,是否吸烟,治疗效果和转移呈现相关性,CTC越高,证实患者预后不良     

循环肿瘤细胞用于肝细胞癌诊断和预后评估的研究进展

肝细胞癌是临床上常见的消化系统恶性肿瘤,预后较差。肝细胞癌的早期诊断有助于临床早期干预,提高患者生存率。体液活检是近年来较受关注的恶性肿瘤早期筛查诊断方法,其具有无创、准确、可重复的优点。循环肿瘤细胞(CTC)检测属于体液活检技术之一,在肝细胞癌的诊断和预后评估中具有重要的临床价值。本文就CTC在肝细胞癌诊断和预后评估中的应用价值进行综述。     

循环肿瘤细胞的研究进展

循环肿瘤细胞(CTC)是指经过自发或因临床诊疗操作由原发灶或转移灶释放然后进入外周血循环的肿瘤细胞,研究表明其是恶性肿瘤患者术后复发和发生远处转移的一个重要原因.随着检测技术的不断提高,CTC检测逐渐成为一种新颖的无创性检测手段,在早期诊断恶性肿瘤、监测复发、治疗疗效与预后评估等方面的应用在临床上越来越普遍.同时由CTC衍生出来的循环肿瘤脱氧核糖核酸(ctD-NA)检测也成为了临床研究热点.本研究收集国内外有关CTC及ctDNA文献进行综述.     

Perioperative search for circulating tumor cells in patients undergoing radical cystectomy for bladder cancer

Objective

Despite having an organ confined tumor stage at the time of radical cystectomy, a certain number of bladder cancer patients will develop local or distant metastases over time. Currently there are no reliable serum markers for monitoring and evaluating risk profiles of urothelial cancers. Several studies suggest that detection of Circulating Tumor Cells (CTC) may correlate with disease status and prognosis at baseline and early in the treatment of cancers. The presence of CTCs in whole blood before and during radical cystectomy could provide further information on disease status, and could be used as an indicator to determine the need for adjuvant or even perioperative chemotherapy.

Methods

From 03/2009 to 05/2009, five patients with histologically proven transitional cell carcinoma of the urinary bladder participated in this study. All patients were admitted to the hospital for radical cystectomy (rCx). A standard or extended lymph node dissection was performed in all cases. Preoperative CT or MRI scans revealed no distant or local metastases. Median age was 66.8 years (55-81 yrs). After obtaining informed consent from each patient, approximately 30 mL of peripheral blood was taken immediately before rCx and again during surgical removal of the urinary bladder from the patients'' body. As additional parameters, operation time (OR) for surgical removal of the bladder and the amount of blood volume that was used for the detection of CTCs were recorded. Obtained blood samples were processed using the Cell-Search System (Veridex^©) within 48 hours of collection. CTCs were identified and quantitated using the Cell-Search System, followed by re-evaluation of the provided results by specially trained and experienced personal. (CS, SH)

Results

CTCs were detected before and during surgical removal of the urinary bladder in one of five patients (20%). In the one patient positive for CTC, two CTCs were detected in the blood sample that was obtained before surgery (analyzed blood volume was 25 mL). There was one CTC detected in the blood sample that was obtained during surgical removal of the urinary bladder (analyzed blood volume was 27 mL). There was no rise in the amount of CTCs during surgical procedure. The final pathological report of this patient showed an advanced tumor stage (T3b, N0, R1). In the other patients, no CTCs were detected at all, neither before rCX nor right after surgical removal of the bladder. Pathological stage for these patients ranged from pT1m G3 -pT2b G3. None of these patients showed lymph node involvement. An average of 14.6 lymph nodes (5-40 LNs) were obtained. OR time to surgical removal of the urinary bladder ranged from 60 minutes to 150 minutes (mean 82 min.).

Conclusions

Although only a very small group of patients was analyzed in this study, the presence of CTCs seems to be correlated with an advanced tumor stage. Therefore the detection of CTCs could be used for an optimized assessment of a patient''s disease status in urothelial cancer. A further aim of this study was to assess whether surgical manipulation during radical cystectomy is associated with a release of CTCs into the vascular system. None of the patients who were negative for CTCs before surgery showed CTCs during surgical removal of the bladder, suggesting that there was no release of CTCs during surgery. However, further study is needed to prove these findings and evaluate the significance of CTCs as an indicator for therapeutic decisions.     

循环肿瘤细胞和播散肿瘤细胞对食管癌患者预后的meta分析

目的 用循环肿瘤细胞(CTCs)和播散肿瘤细胞(DTCs)预测食管癌患者的预后仍存在争议,本文旨在探究食管癌患者CTCs/DTCs是否与患者临床病理特征、预后及生存状况存在相关性.方法 通过PubMed、Web of Science、Embase及Cochrane数据库检索所有CTCs/DTCs相关研究.制定文献纳入/排除标准并依此选择文献.以比值比(OR)、相对危险度(RR)、风险比(HR)和95％可信区间(95％ CI)作为效应指标,用Review Manager5.3、Statal2.0软件进行计算和分析.结果 共纳入19项研究,包含1766例食管癌患者.Meta分析显示,CTCs/DTCs与患者下列临床病理参数:肿瘤分期(OR=1.95)、浸润深度(OR=1.99)、淋巴结转移(OR=2.44SEN)、远处转移(OR=5.98sEN)、分化程度(OR=1.67)、淋巴脉管转移(OR=4.48);预后:复发(RR=6.86SEN)、转移(RR=3.22);生存状况:总体生存率(OS)整体分析(HR=3.46)、无病生存率/无进展生存率(DFS/PFS)整体分析(HR=3.00)显著相关.结论 食管癌患者CTCs/DTCs与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、分化程度、淋巴脉管转移、复发、转移显著相关,也与总体生存率、无病生存率/无进展生存率显著相关.因此,CTCs/DTCs可作为食管癌患者临床预测指标.     

肺癌患者循环癌细胞的检测及临床应用

在肺癌早期已有微转移发生,肿瘤细胞进入血液循环是肿瘤发生远处转移的关键步骤之一.检测循环肿瘤细胞的方法,如聚合酶链反应、免疫磁珠技术、流式细胞术、细胞自动检测系统已有较快发展.循环肿瘤细胞的检测将影响肺癌的临床分期和治疗.     

晚期非小细胞肺癌外周血CTC 与肿瘤组织EGFR 表达的相关性

目的 探讨晚期非小细胞肺癌（NSCLC）外周血循环肿瘤细胞（CTC）与肿瘤组织表皮生长因子受体（EGFR）表达的一致性。方法 利用流式细胞术及免疫组织化学染色配对检测66 例NSCLC患者外周血CTC 和肿瘤组织EGFR 的表达水平。给予EGFR 酪氨酸激酶抑制剂治疗1 个月后进行疗效评价。比较CTC 与肿瘤组织EGFR 表达的一致性,并分析其与患者临床因素、疗效及预后的相关性。结果 外周血CTC 与肿瘤组织EGFR 表达一致率为69.7%。CTC 与肿瘤组织EGFR 的表达在不同组织学类型间比较,差异有统计学意义（P <0.5）,在不同性别、年龄、分期、体力活动状态评分方面比较,差异无统计学意义（P >0.05）。EGFR 高表达组疾病控制率高于低表达组（CTC ：87.5% vs 35.3% ;肿瘤组织：72.7%vs 36.4%）（P <0.05）。生存分析结果显示,EGFR 高表达组有更长的无进展生存期（CTC ：8 个月 vs 2 个月;肿瘤组织：6 个月 vs 2 个月）和总生存期（CTC：20 个月 vs 13 个月;肿瘤组织：16 个月 vs 14 个月）（P <0.05）。结论 晚期NSCLC 患者外周血CTC 和肿瘤组织EGFR 表达的一致性好,两者对酪氨酸激酶抑制剂治疗的疗效及预后具有一定的预测价值。外周血CTC 作为肿瘤组织的替代检测标本是可行的。     

实时荧光定量PCR法检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值

目的:比较运用实时荧光定量PCR法联合不同生物标志物细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)?乳珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)?小黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的临床价值?方法:运用实时荧光定量PCR法检测人乳腺癌细胞株MCF-7中的生物标志物CK19?hMAM?SBEM的表达情况,对20例健康志愿者和20例乳腺良性疾病患者(对照组人群)进行检测以确定CK19?hMAM?SBEM在外周血中的基础表达水平,检测94例可手术乳腺癌患者外周血中CK19?hMAM?SBEM表达情况?结果:人乳腺癌细胞株MCF-7中CK19?hMAM?SBEM均有表达,Ct值分别为13.87?34.47?20.14;40例对照组人群中有1例表达CK19,另有1例表达hMAM,未检测到SBEM表达;94例可手术乳腺癌患者中CK19表达率49%?hMAM表达率34%?SBEM表达率13%,联合CK19?hMAM?SBEM阳性率为56%?结论:运用多标志物(CK19?hMAM?SBEM)联合的实时荧光定量PCR法检测乳腺癌外周血CTCs具有较高的敏感性,同时特异性并不降低?     

胃癌患者围手术期循环肿瘤细胞变化及其与临床病理分期的相关性

目的 了解胃癌患者围手术期外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)数量的变化及其与肿瘤病理分期的相关性。方法 应用肿瘤细胞微流控芯片技术检测手术前1天、手术后1周胃癌患者CTCs,并与其临床病理资料进行对比,阐明两者之间的相关性。结果 在92例胃癌患者中,术前外周血CTCs阳性者58例,阳性率为63%;CTCs阳性的胃癌患者与肿瘤浸润深度、脉管侵犯、神经侵犯都具有相关性（P=0.02）;术后1周60.5%患者CTCs消失或减少,CTCs数量没有变化甚至增多者主要见于TNM分期晚（Ⅳ期）患者。结论 胃癌患者外周血中CTCs与其临床病理分期具有密切相关性。     

循环肿瘤细胞检测与临床应用进展

循环肿瘤细胞是指自发或因诊疗操作脱离实体瘤原发灶或转移灶而进入外周血循环的肿瘤细胞,其已被研究证实是包括乳腺癌、肺癌、胰腺癌、结直肠癌等在内的多种癌症的诊断和预后标志物,有助于肿瘤的体外早期诊断、耐药性监测,判断预后及生存分析,检测肿瘤复发、评价药物疗效以辅助治疗决策及调整治疗方案.但目前循环肿瘤细胞的检测方法仍存在一定的局限性,研究出具有更高灵敏度和特异性的检测新方法将有助于循环肿瘤细胞在临床上的应用.本文将从循环肿瘤细胞的检测技术、临床应用以及临床应用展望等方面对循环肿瘤细胞检测的研究进展和临床应用作一简述.