磺胺二甲嘧啶对FRTL-5细胞合成、分泌甲状腺球蛋白的影响

[目的 ]研究磺胺二甲嘧啶对FRTL 5细胞株合成、分泌甲状腺球蛋白的影响 ,并探讨FRTL 5细胞株用于筛选环境甲状腺素干扰物的可能性。 [方法 ]FRTL 5细胞分别经 0 .5、1.0、2 .0、4.0、和 8.0 μg/ml磺胺二甲嘧啶染毒处理48h后 ,用MTT实验检测磺胺二甲嘧啶对细胞活力的影响以确定染毒浓度 ;以MTT实验最大无作用浓度作为最高染毒浓度 ,另设中、低浓度共 3组染毒细胞 ,用放射免疫法测定染毒 48h后培养液中细胞分泌甲状腺球蛋白的浓度 ;用活细胞爬片的免疫组化染色观察最高浓度处理组细胞胞质中合成甲状腺球蛋白的表达水平 ,并用透射电镜观察细胞的超微结构。[结果 ]根据MTT实验 ,确定染毒浓度为 0 .5、1.0和 2 .0 μg/ml,随磺胺二甲嘧啶浓度的增大 ,FRTL 5细胞培养液中甲状腺球蛋白的浓度逐渐降低 ,其中 1.0 μg/ml浓度组与对照组相比差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,2 .0 μg/ml浓度组培养液中未能检出甲状腺球蛋白 ;免疫组化染色可见染毒组细胞胞质中合成的甲状腺球蛋白表达显著减弱 ,图像分析结果显示其灰度值的差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;细胞超微结构观察发现染毒组细胞出现粗面内质网扩张。 [结论 ]通过损伤甲状腺滤泡细胞的粗面内质网 ,而影响甲状腺球蛋白的合成与分泌 ,这可能是磺胺二甲嘧啶干     

磺胺二甲嘧啶对FRTL-5细胞基因表达谱的影响

目的研究磺胺二甲嘧啶对FRTL5细胞基因表达谱的影响,探讨环境甲状腺素干扰物的作用机制。方法指数生长期细胞经20μgml磺胺二甲嘧啶处理24h后,用TRIzol法提取RNA,用9753位点的cDNA芯片检测基因表达情况,实验组和对照组细胞分别用Cy3dCTP和Cy5dCTP标记,计算Cy3和Cy5的比值,找出差异表达基因。结果芯片经扫描分析后,发现表达有差异的基因共有679条占芯片上基因总数的70%,其中395(40%)条基因表达增加,284(30%)条基因表达下降,涉及基因表达调控、细胞周期调控、细胞免疫,细胞代谢等众多事件。结论磺胺二甲嘧啶对FRTL-5细胞的毒性效应,其机制涉及多种基因。     

应用FRTL-5细胞甄别农药亚乙基硫脲、二甲戊乐灵甲状腺素干扰效应

目的　了解亚乙基硫脲 (ETU)、二甲戊乐灵对FRTL 5细胞分泌甲状腺球蛋白的影响。方法　首先用MTT法测这两种化学物的细胞毒性。然后根据细胞毒性结果确定染毒剂量并用放免法测细胞培养液甲状腺球蛋白的浓度。结果　MTT实验中 ,当二甲戊乐灵浓度大于 5ng μl,亚乙基硫脲浓度大于 36 0ng μl时 ,有明显细胞毒性。亚乙基硫脲和二甲戊乐灵在中高剂量均可引起甲状腺球蛋白浓度显著降低。结论　这两种化学物可能干扰甲状腺球蛋白的合成和分泌。     

不同补碘措施对育龄妇女碘营养及甲状腺功能的影响

目的 评价育龄妇女采取强化补碘措施对其自身碘营养水平及其甲状腺功能的影响.方法 选取每年2次和每年1次对育龄妇女实施口服碘油丸的喀 什地区和阿克苏地区为实验组,以从未投服碘油丸的伊犁地区为对照组,各抽取育龄妇女100名,收集尿液和血液,进行尿碘和游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH...     

有机碘和无机碘对人甲状腺细胞分泌功能影响的体外实验研究

目的 研究有机碘(DIT)和无机碘(KI)对体外培养的人甲状腺细胞(TEC)分泌三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)及甲状腺球蛋白(Tg)功能的影响.方法 取正常甲状腺细胞进行原代细胞培养,将细胞密度调整为2×105/ml,加入DIT和KI溶液(含碘最终浓度分别为0、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4...     

甲状腺素干扰物对甲状腺滤泡细胞分泌甲状腺球蛋白功能的影响

目的了解几种典型甲状腺素干扰物对甲状腺滤泡(FRTL-5)细胞分泌甲状腺球蛋白功能的影响,探讨其干扰甲状腺素水平的细胞学机制及建立甲状腺素干扰物甄别方法的可行性。方法将大鼠FRTL-5细胞体外培养后接种于24孔培养板,每孔细胞数2×105个,待细胞贴壁后分别加入受试物丙硫氧嘧啶、叶枯宁[N,N-甲撑-双(2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑)]、磺胺二甲嘧啶和杀草强,各设1组溶剂对照,置CO2孵箱培养48h后,每孔取1ml培养液,用放射免疫法测定甲状腺球蛋白的浓度。结果4个实验组的甲状腺球蛋白浓度与对照组相比均降低,差异有显著性(P<0.05),且可能存在剂量-效应关系。结论降低甲状腺细胞合成或分泌甲状腺球蛋白可能是这4种甲状腺素干扰物的作用机制之一。FRTL-5细胞分泌甲状腺球蛋白的功能是一个相对灵敏的指标,与其他体内体外实验结合可用于甲状腺素干扰物的一阶段甄别(初筛)方法。     

有机碘和无机碘对人甲状腺细胞凋亡的影响

目的 研究有机碘和无机碘对体外培养的人甲状腺细胞形态和凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法 取正常人甲状腺细胞进行培养,分别设对照(培养液)组和KI组(碘浓度分别为10-7、10-5、10-3 mol/L)及3,5-二碘酪氨酸(DIT)组(碘浓度分别为10-7、10-5、10-3 mol/L),分别加入相应浓度用培养液稀释的DIT和KI溶液,继续培养48 h.采用免疫组织化学技术测定细胞凋亡相关蛋白表达的情况.结果 与对照组相比,10-5、10-3 mol/L KI组和10-3 mol/L DIT组甲状腺细胞Bcl-2表达量较低,10-5、10-3 mol/L KI及DIT暴露甲状腺细胞Bax表达量较高,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);且随着KI或DIT暴露浓度的升高,甲状腺细胞Bcl-2表达量呈下降趋势,Bax表达量呈上升趋势.与相同剂量KI组相比,10-5、10-3 mol/L DIT组甲状腺细胞Bcl-2表达量较高,Bax表达量较低,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 高碘可引起甲状腺细胞形态的改变并增强其细胞凋亡的发生,且DIT对甲状腺细胞的影响弱于KI.     

过量碘对甲状腺细胞凋亡的影响

目的通过研究观察过量碘对甲状腺细胞凋亡相关基因的影响,探讨过量碘促进甲状腺细胞凋亡的机制。方法选取FRTL细胞系为研究对象,正常对照组培养基内不加碘,过量碘组分别含碘(碘化钾)1、5、10、50和100mmol/L,培养24h,流式细胞术测定凋亡细胞的比例,荧光定量PCR法测定5、10、50mmol/L碘剂量组fas、fasL、Bcl-2和Bax的 mRNA水平。结果与正常对照组比较,10、50和100mmol/L碘剂量组FRTL细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。5mmol/L碘组各项指标与正常对照组比较差异无显著性。10mmol/L和50mmol/L碘组fasL和Bax mRNA水平较正常对照组显著升高(P<0.05),Bcl-2 mRNA水平较正常对照组显著下降(P<0.05)。10mmol/L碘组fas与正常对照组比较差异无显著性,50mmol/L碘组fas较正常对照组显著升高(P<0.05)。结论过量碘可通过调节fas、fasL、Bcl-2及Bax的表达而促进影响甲状腺细胞凋亡的发生。     

应用FRTL-5细胞探索五氯苯酚干扰甲状腺激素作用机制

目的利用FRTL-5细胞,在体外研究五氯苯酚干扰甲状腺激素活性的机制。方法设二甲亚砜溶剂对照组(DMSO);高氯酸钠摄碘阳性对照组;五氯苯酚:0.1μg/ml、0.3μg/ml和0.5μg/ml三个剂量组;五氯苯酚处理FRTL-5细胞24小时,用3H掺入法测其对FRTL-5细胞DNA合成的影响,放免法测其对培养液中甲状腺球蛋白浓度的影响;用五氯苯酚、高氯酸钠处理FRTL-5细胞12和24小时后,用同位素125I测摄碘能力的变化。结果3H掺入法显示五氯苯酚各剂量组对FRTL-5细胞DNA合成无显著影响;放免法显示五氯苯酚0.3μg/ml和0.5μg/ml剂量组显著降低甲状腺球蛋白浓度;五氯苯酚处理FRTL-5细胞12小时后,0.3μg/ml和0.5μg/ml剂量组使FRTL-5细胞摄碘能力显著增强,处理24小时后,FRTL-5细胞摄碘能力无显著改变,但有降低的趋势,高氯酸钠阳性对照组使FRTL-5细胞摄碘能力在12小时和24小时都极显著降低。结论五氯苯酚干扰甲状腺激素作用可能与其使甲状腺球蛋白浓度的改变有关。     

杀草强影响Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮细胞甲状腺球蛋白的机制研究

目的 探讨杀草强影响Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRTL-5细胞)甲状腺球蛋白(TG)的机制.方法 1、10和100μg/ml杀草强处理FRTL-5细胞后,用3H掺入法测杀草强的细胞毒性;放免法和免疫细胞化学法测杀草强对TG、甲状腺转录因子1(TTF-1)的影响;免疫荧光法检测杀草强对细胞表面促甲状腺素受体(...     

二价金属转运体1参与脉络丛上皮细胞铅吸收的机制

目的研究二价金属转运体1(DMT1)参与脉络丛上皮细胞系Z310细胞铅转运的机制。方法采用原子吸收分光光度法检测Z310细胞铅吸收的时间效应。免疫荧光法观察DMT1在Z310细胞内的表达。采用siRNA干涉DMT1表达,荧光实时定量PCR检测DMT1的表达水平。原子吸收分光光度法检测DMT1 siRNA干涉对细胞铅吸收影响。结果醋酸铅暴露后,Z310细胞铅吸收量呈时间-依赖性增高;DMT1在Z310细胞中有较丰富的表达,主要在胞质中呈较均匀的分布。与阴性对照组相比,siRNA干涉后,Z310细胞DMT1 mRNA表达水平下降了74.8%。DMT1siRNA干涉后细胞铅吸收量减少了52.3%(P0.01)。结论在脉络丛上皮细胞吸收铅的过程中,DMT1起到重要的转运作用。     

离子碘和分子碘过量对甲状腺功能与形态影响

目的　比较离子碘和分子碘过量对非碘缺乏Wistar大鼠甲状腺功能和形态的影响及差别。方法　固相免疫放射分析法测定实验大鼠血清TSH ,放射免疫分析法测定血清TT4 、TT3 。砷铈分光光度法测定尿碘。光、电镜下观察甲状腺内形态学变化 ,用图像分析仪测量滤泡上皮细胞高度和滤泡腔面积。结果　补充 840 μg碘 /L 90d时 ,可使血清TSH值增高 ,但是未见显著性差异。血清TT4 明显高于双蒸馏水 (DDW )组 ,P <0 0 5,但同剂量离子碘和分子碘比较 ,血清TT4 值无显著性差异。补碘组光、电镜下可见滤泡腔面积增大 ,滤泡上皮细胞变扁 ,细胞核染色深 ,滤泡融合破裂 ,巨滤泡形成 ,毛细血管减少。超微结构显示甲状腺滤泡上皮细胞内质网扩张 ,次级溶酶体增多 ,微绒毛减少 ,染色体浓集。与DDW组相比 ,滤泡上皮细胞高度明显降低 ,滤泡腔面积增大 ,P均 <0 0 5。相同剂量离子碘和分子碘比较无显著性差异。结论　碘摄入浓度 >840 μg/L时 ,会对大多部分甲状腺滤泡上皮细胞产生抑制和破坏 ,使血清TT4 值明显增高 ,离子碘和分子碘对甲状腺影响无明显区别