Effects of advanced glycosylation end products on proliferation and cytosolic free calcium in cultured rat aortic smooth muscle cells

目的：研究糖基化终产物（ＡＧＥＰ）对主动脉平滑肌细胞增殖的影响及其与［Ｃａ２＋］ｉ的关系．方法：采用同位素掺入法分别测定ＤＮＡ和蛋白质合成；Ｆｕｒａ２ＡＭ测定［Ｃａ２＋］ｉ．结果：ＡＧＥＰ以浓度、时间相关的方式促进［３Ｈ］ＴｄＲ与［３Ｈ］Ｌｅｕ掺入细胞，随ＡＧＥＰ作用时间、糖化时间延长，掺入率增加明显．ＡＧＥＰ增加［Ｃａ２＋］ｉ，与时间、浓度相关，但随ＡＧＥＰ作用时间延长（４０分钟后）而有所降低，ＢＳＡ修饰中葡萄糖浓度的增加，糖基化时间延长，［Ｃａ２＋］ｉ也呈上升趋势．结论：ＡＧＥＰ刺激平滑肌细胞增殖，并与细胞［Ｃａ２＋］ｉ浓度增加有关．     

Inhibitory effect of trapidil on proliferation of cultured rat aortic smooth muscle cells induced by endothelin-1

目的：观察曲匹地尔（Ｔｒａ）对内皮素１诱导的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增生的影响．方法：测定ＶＳＭＣ数目，［３Ｈ］ＴｄＲ参入细胞ＤＮＡ的放射活性及ＶＳＭＣ的细胞周期分布．结果：内皮素１１００ｎｍｏｌ·Ｌ－１处理大鼠ＶＳＭＣ后，细胞数，［３Ｈ］ＴｄＲ摄取及细胞分裂增殖活性等分别增加１３４％±２３％，２１２％±７１％和８６％±１８％，Ｔｒａ５，５０，５００μｍｏｌ·Ｌ－１对上述参数的抑制率分别为１２％－４８％，３５％－５４％和１５％－４７％．Ｔｒａ５０μｍｏｌ·Ｌ－１和５００μｍｏｌ·Ｌ－１对未经内皮素处理的细胞的生长无明显作用．结论：Ｔｒａ对内皮素１诱导的培养大鼠ＶＳＭＣ的增生具有阻抑作用．     

Effects of Ro 31-8220 on smooth muscle cell proliferation induced by fibrinogen degradation products

目的：研究纤维蛋白原降解产物的致有丝分裂原活性及一种新型ＰＫＣ抑制剂Ｒｏ３１８２２０（Ｒｏ）的作用．方法：大鼠主动脉平滑肌细胞增殖采用结晶紫染色法测定．结果：纤维蛋白原降解产物促进大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖，Ｒｏ（００１－１μｍｏｌ·Ｌ－１）剂量依赖地抑制增殖．结论：Ｒｏ抑制纤维蛋白原降解产物诱导的平滑肌细胞的增殖．     

Actions of 8-(N,N-diethylamino)-n-octyl-3,4,5-trimethoxybenzoate in vascular smooth muscle cell cultures

Ａｃｔｉｏｎｓｏｆ８（Ｎ，Ｎｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｎｏｃｔｙｌ３，４，５ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏａｔｅｉｎｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｃｕｌｔｕｒｅｓＺｈｏｕＣＨＥＮ，ＳｈｉｒｌｅｙＸＬＬＩＵ，ＧｅｏｒｇｅＣＹ...     

糖基化终产物对培养大鼠主动脉平滑肌细胞二酰基甘油的影响

目的:研究糖基化终产物(AGEP)对主动脉平滑肌细胞信号转导环节之一二酰基甘油(Dia)的影响和维生素E、氨基胍对Dia水平的干预作用.方法:采用放射酶标记、薄层层析、放射自显影技术测定细胞中Dia含量.结果:AGEP-BSA孵育的平滑肌细胞Dia水平在15 s和10min出现两个峰值,对照组和AGEP-BSA 50,11,200 mg·L~(-1)作用SMC的Dia水平分别为(220 ±15)pmol~(-1),(328±15)pmol·L~(-1),(662±33)pmol·L~(-1)和(940±43)pmol·L~(-1). Dia水平也随AGEP-BSA糖基化的程度和修饰BSA的糖浓度增加而增高.维生素E和氨基胍可明显减弱AGEP刺激平滑肌细胞Dia水平升高的效应.结论:AGEP-BSA能升高培养的大鼠血管平滑肌细胞中的Dia水平,维生素E和氨基胍能明显抑制这一效应.     

8-(N,N-Diethylamino)-n-octyl-3,4,5-trimethoxybenzoate reduced (Ca~(2 ))_i elevation induced by histamine,serotonin,and glutamate in cultured calf basilar artery smooth muscle cells

目的：研究８（Ｎ，Ｎ二乙胺）ｎ辛基３，４，５三甲氧基苯甲酸酯对培养乳牛基底动脉平滑肌［Ｃａ２＋］ｉ的作用．方法：采用ＡＲＣＭＭＩＣ阳离子测定系统，测量细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）．结果：在细胞外钙浓度为１３ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，ＴＭＢ８３０μｍｏｌ·Ｌ－１可明显抑制组胺，５羟色胺和谷氨酸引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高．在外钙为零＋依他酸０１ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，ＴＭＢ８３０μｍｏｌ·Ｌ－１可明显降低静息［Ｃａ２＋］ｉ，ＴＭＢ８３０μｍｏｌ·Ｌ－１可几乎完全阻断组胺和５羟色胺增加［Ｃａ２＋］ｉ的作用．结论：ＴＭＢ８降低培养乳牛基底动脉平滑肌静息［Ｃａ２＋］ｉ，抑制Ｈｉｓ，５ＨＴ和Ｇｌｕ引起的［Ｃａ２＋］ｉ的增加．     

卡托普利和依那普利对血管平滑肌细胞内钙的影响(英文)

目的:检测ACE抑制剂对主动脉平滑肌细胞内Ca~(2 )的影响。方法:用荧光标计和图象处理技术。结果:SHR细胞内Ca~(2 )以及KCl,NE和Ang在SHR细胞引起的Ca~(2 )增加多于WKY细胞。Cap和Ena不影响KCl和Ang在WKY细胞的作用,但Cap,Ena和Nif抑制KCl,NE和Ang在SHR细胞的作用。结论:Cap和Ena阻断功能和特异性已改变的电压依赖性钙通道。     

CCDPK反义寡核苷酸抑制bFGF诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖(英文)

AIM: To investigate the role of Ca(2+)-calmodulin dependent protein kinase (CCDPK) on basic fibroblast growth factor (bFGF)-induced vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation and the inhibitory effect of antisense CCDPK oligonucleotides (ODN). METHODS: Before being exposed to bFGF, cultured rat VSMC CCDPK activity was inhibited by pretreatment with either a phosphorothioate-protected 17-mer antisense CCDPK ODN-directed against the initiation of translation sites of the p42 and p44 CCDPK isoform or with CCDPK kinase inhibitor PD98059. All ODN were introduced into cells by liposomal transfection. DNA synthesis was measured by [3H]thymidine incorporation. P44- and p42-CCDPK protein expression and phosphorylation were measured by Western blot. RESULTS: PD98059 inhibited bFGF-induced phosphorylation of CCDPK and DNA synthesis. Antisense CCDPK ODN 0.2-0.8 mumol.L-1 reduced both p44- and p42-CCDPK expression and phosphorylation of CCDPK in a concentration-dependent manner and DNA synthesis induced by bFGF. Lipofectin alone or sense and random CCDPK ODN did not affect p44- and p42-CCDPK protein expression or bFGF-induced phosphorylation of CCDPK or DNA synthesis. CONCLUSION: bFGF-stimulated rat VSMC proliferation is mediated by CCDPK. The antisense CCDPK ODN can inhibit bFGF-induced VSMC proliferation through down-regulating p44- and p42-CCDPK level.     

培养的大鼠主动脉平滑肌细胞表达糖基化终产物受体和地尔硫Zh…

目的：探讨培养的主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）上是否表达糖基化终产物（ＡＧＥＰ）高亲性受体和地尔硫Ｚｈｕｏ对ＡＧＥＰ升高胞浆游离钙的抑制。方法：用放射配基结合方法研究ＡＳＭＣ与ＡＧＥＰ的相互作用；用钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ２－ＡＭ测定ＡＳＭＣ胞浆游离钙。结果：ＡＳＭＣ上有ＡＧＥＰ高亲和性受体表达，其解离常数为６５．３±１．５ｍｏｌ·Ｌ＾－１，最大结合容量１．５７±０．０４ｎｍｏｌ／ｇ细胞蛋白；通过该     

罗格列酮抑制糖基化终产物诱导大鼠血管平滑肌细胞钙化机制

目的探讨罗格列酮抑制糖基化终产物(AGEs)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的可能机制。方法在含10 mmol·L~(-1)β-甘油磷酸培养液中加入200 mg·L~(-1)的AGEs及不同浓度(10~(-7)～10~(-5)mol·L~(-1))的罗格列酮体外培养VSMCs,采用甲-酚酞络合酮方法测定细胞钙含量,real time-PCR检测肿瘤坏死因子α(Tnf-α)、白细胞介素6(Il-6)及糖基化终产物受体(Rage)mRNA表达,Western blotting检测Rage蛋白表达,ELISA法检测细胞上清Tnf-α、Il-6水平。结果 AGEs可使VSMCs钙含量增加,Tnf-α、Il-6及Rage mRNA和蛋白表达增加(P<0.01);罗格列酮组均可降低VSMCs细胞层钙含量,抑制上述影响(P<0.05)。结论罗格列酮可能通过抑制VSMCs Rage表达,降低Tnf-α、Il-6表达和分泌,减轻AGEs诱导的VSMCs钙化。     

降糖舒心颗粒对晚期糖化终产物致离体血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察降糖舒心颗粒对晚期糖化终产物(AGEs)致离体血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响.方法:分离正常大鼠胸主动脉VSMCs,并传代培养,用AGEs造成胸主动脉VSMCs增殖模型.给正常大鼠灌胃降糖舒心颗粒混悬液10d,制备含药血清,采用噻唑蓝(MTT)比色法和3H-TdR掺入试验测定其吸收度和3H-TdR掺入量(cpm值).结果:AGEs能明显促进VSMCs增殖,降糖舒心颗粒含药血清能抑制胸主动脉VSMCs的增殖及3H-TdR掺入(与对照组比P＜0.05或P＜0.01),并呈现一定的量效关系.结论:降糖舒心颗粒对AGEs诱导VSMCs的增殖有一定的抑制作用.     

吡格列酮和厄贝沙坦对糖基化终产物诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察吡格列酮和厄贝沙坦对糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,6～10代的细胞用于实验,糖基化终产物(50,100,200,400 mg·L~(-1))干预血管平滑肌细胞不同时间(0,8,16,24,48 h)后,分别用氨基胍(阳性对照组)、吡格列酮、厄贝沙坦与200 mg·L~(-1)基化终产物共同孵育24 h,四甲基偶氮唑盐微量酶比色(MTT)法检测血管平滑肌细胞增殖。结果：各浓度的糖基化终产物对血管平滑肌细胞作用8 h,细胞增殖不明显,200 mg·L~(-1)糖基化终产物作用48 h,细胞增殖最明显；氨基胍、吡格列酮、厄贝沙坦均能抑制糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖(P＜0．05)。结论：吡格列酮与厄贝沙坦可明显抑制糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖。     

绿茶多酚抑制晚期糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和表型改变是动脉粥样硬化的主要病理基础[1].晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)是一组在蛋白质的氨基和糖的醛基之间非酶性糖基化反应终产物的总称[2].     

超氧阴离子对培养的牛动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响

目的研究超氧阴离子对牛主动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响。方法采用Ｆｕｒａ－２测定牛肺动脉平滑肌细胞内钙及采用胶原凝胶实验方法分析平滑肌细胞的收缩性。结果超氧阴离子作用于平滑肌细胞后使ＡＴＰ（１０μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导的细胞内钙浓度的增加从（２０６± １０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１降到（１４７±１５） ｎｍｏｌ·Ｌ－１。 ５ ｍｉｎ内细胞内钙浓度增加的积分（∫　△［Ｃａ２＋］ｉ·ｄｔ）从（１２．２± ０．５）μｍｏｌ· Ｌ－１·ｓ－１降至（９．８± ０．８）μｍｏｌ·Ｌ－１·ｓ－１。ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ在无钙溶液中诱导的细胞内钙浓度的增加不受超氧阴离子的影响,而在含钙的Ｋｒｅｂａ溶液中,超氧阴离子能使随后的钙释放激活的钙进入（△［Ｃａ２＋］ｉＣＲＡＣ）从（２７．３ ±１．０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１降到（１３．５ ±１．０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１。ＡＴＰ诱导的凝胶面积减少的百分比从２４％±５％降到 ７．４％ ±０．２％;在无钙 Ｋｒｅｂｓ溶液中,ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ诱导的凝胶面积减少的百分比从 ３．５％± ０．６％降到－０．５％±０．７％。结论超氧阴离子通过影响平滑肌细胞的内钙动员而降低它的收缩性。     

氨基胍抑制糖基化终产物促进大鼠胰星状细胞增殖和基质合成的作用

目的：探讨抗糖基化药物氨基胍（ＡＧ） 对高级糖基化终产物（ＡＧＥｓ） 促进大鼠胰星状细胞（ＰＳＣ）增殖和基质合成的干预作用。方法：用非同位素的溴脱氧尿苷（ＢｒｄＵ） 掺入法和时间分辨免疫荧光法测定ＰＳＣ 的增殖过程,以时间分辨免疫荧光法和免疫细胞化学法观察了ＡＧＥｓ 对大鼠ＰＳＣ 纤连蛋白合成的作用,并观察了氨基胍对上述效应的干预作用。结果：ＡＧＥｓ 能以浓度相关的方式明显增强ＰＳＣ的增殖和纤连蛋白的合成, ＡＧ 处理的ＡＧＥｓ上述效应明显减弱。结论：ＡＧ 对ＡＧＥｓ 促进ＰＳＣ增殖和基质合成有明显的抑制作用。     

左旋千金藤定碱对培养牛主动脉血管平滑肌细胞胞内游离Ca~(2+)的影响

目的：研究左旋千金藤定碱（ｌ－ｓｔｅｐｈｏｌｉｄｉｎｅ，ＳＰＤ）对血管平滑肌的作用。方法：采用Ｆｕｒａ－２和ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统测定培养牛主动脉血管平滑肌细胞内游离钙。结果：ＳＰＤ１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１不影响静息［Ｃａ２＋］ｉ，但可剂量依赖地抑制高Ｋ＋引起的［Ｃａ２＋］ｉ增高，其ＩＣ５０为３９．６（９５％可信限２３．４～６７．１）μｍｏｌ·Ｌ－１，但其作用弱于尼群地平；ＳＰＤ１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、５－ＨＴ、ＡＴＰ引起的［Ｃａ２＋］ｉ增高也有明显的抑制作用；高浓度ＳＰＤ对无外钙时去甲肾上腺素引起的［Ｃａ２＋］ｉ增高也有一定的抑制作用。结论：左旋千金藤定碱对培养血管平滑肌细胞电压依赖性钙通道和受体调控性钙通道均有抑制作用；其对电压依赖性钙通道的抑制作用弱于尼群地平。