乳腺癌组织中多药耐药基因的表达及其临床意义

目的探讨多药耐药基因蛋白P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)及DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组化法检测78例原发乳腺癌组织中P-gp、GST-π及TopoⅡ的表达水平。结果(1)78例乳腺癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ表达率分别为28.2%、38.5%和52.8%。(2)P-gp和GST-π表达与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、临床分期、组织学类型无显著差异(P>0.05),TopoⅡ表达与肿瘤大小、远处转移、临床分期、组织学类型无显著差异(P>0.05),但与年龄、淋巴结转移有显著差异(P<0.05)。P-gp和GST-π的表达呈正相关(P<0.05),P-gp和TopoⅡ的表达呈明显负相关(P<0.05),GST-π和TopoⅡ呈明显负相关(P<0.05)。结论(1)部分乳腺癌患者体内原发存在耐药基因,对抗癌药物已产生耐药性。(2)乳腺癌化疗前检测耐药基因P-gp、GST-π与TopoⅡ,对肿瘤的化疗药物选择具有指导作用,对判断预后及研究耐药逆转提供参考价值。     

卵巢癌组织多药耐药基因表达及其临床意义

在卵巢癌的综合治疗中,化疗占据了相当重要的地位,但肿瘤的耐药性往往导致化疗的失败,以至于存活率难以提高。目前备受学者关注的耐药机理之一是由Ｐ糖蛋白介导的多药耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）。我们采用免疫组化方法检测３１例卵巢癌...     

多药耐药基因检测及临床意义的初步研究

采用逆转录一多聚酶链式反应技术（ＲＴ／ＰＣＲ）和免疫细胞化学染色法,探讨多药耐药ＭＤＲＩ基因在小儿急性淋巴细胞白血病中的作用和地位。     

脑胶质瘤中pRB及其相关基因的异常表达

目的　研究视网膜母细胞瘤蛋白 (pRB)及其相关基因在脑胶质瘤中的异常表达情况。方法　用免疫组化的方法对 2 3例脑胶质瘤 (包括 14例星形细胞瘤和 9例胶质母细胞瘤 )以及 6例正常脑组织中 pRB以及cyclinD1、p16基因的表达进行检测。 结果　 2 3例肿瘤中有 8例 pRB缺失(34 8% ) ,17例cyclinD1过度表达 (73 9% ) ,13例 p16缺失 (5 6 5 % ) ,三种因子的异常均与肿瘤分型有关 (P <0 0 1)。由它们组成的调控路径作为整体在肿瘤组织中异常率为 82 6 % (19/ 2 3) ,与正常脑组织 (1/ 6 ,16 7% )相比有显著性差异 (P =0 0 0 6 ) ,而星形细胞瘤 (10 / 14,71 4% )和胶质母细胞瘤(9/ 9,10 0 % )之间并无统计学差别 (P =0 12 4) ,说明此路径异常与肿瘤发生有关而与分型无关。pRB在此调控路径中处于中心位置 ,与肿瘤的恶化有关。 结论　pRB及其相关基因的异常与脑胶质瘤发生关系密切 ,可以作为探讨肿瘤病因 ,诊断和治疗的重要靶位。     

膀胱肿瘤多药耐药基因的表达及其临床意义

目的　探讨膀胱肿瘤多药耐药基因 (MDR- 1m RNA)的表达与临床化疗的相关性。方法　采用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)技术 ,对 2 6例正常膀胱粘膜和 30例膀胱肿瘤 MDR- 1m RNA的表达进行了检测。结果　 2 6例正常膀胱粘膜中 MDR- 1m RNA表达为 15 .4% ,16例初发膀胱癌 MDR- 1m RNA有表达为37.5 % ,14例复发膀胱癌的 MDR- 1m RNA表达为 78.6 % ,并对其进行了临床生物学行为的观察和比较。结论　多药耐药现象在正常膀胱粘膜中有表达 ,在部分初发膀胱癌中有先天性存在 ,RT- PCR方法检测膀胱肿瘤时具有相对敏感、特异、方便、快速和结果可靠等优点     

白血病多药耐药基因的检测及临床应用研究

目的 探讨多药耐药基因（MDRI）在急性淋巴细胞白血病（ALL）中的作用和地位。方法 采用逆转录－多聚酶链式反应技术（RT／PCR）和免疫细胞化学染色法,检测了33例（初治21例和复发12例）急性淋巴细胞白血病患者血液中的MDR1mRNA水平和多药耐药蛋白（P－170）的表达,并对两种方法进行了比较。结果 初治的AL MDR1基因阳性表达率为14．29％,P－170蛋白阳性表达为14．29％,复发的ALL MDR1基因阳性表达率为66．67％,P－170蛋白阳性表达为58．33％（P＜0．01）,有显著性差异。MDR1的基因和蛋白两种而检测方法具有一定的一致性、以RT／PCR方法具有更强的敏感性。结论 复发组比初治组具有更普遍的抗药性,且主要是获得性抗药,MDR1基因表达可作为临床合理地制定化疗方案,预测化疗效果的重要参考指标。     

谷胱甘肽S转移酶π在脑原发性胶质瘤中表达的临床意义

目的：探讨谷胱甘肽S转移酶π（GST-π）在脑原发性胶质瘤中的表达及其临床意义，以进一步深入研究原发性脑胶质瘤多药耐药（MDR）的机制。方法：利用免疫组化技术S-P法检测101例原发性脑胶质瘤及25例正常脑组织中GST-π的表达。结果：GST-π在正常脑组织中没有表达；原发性脑胶质瘤中GST-π的表达率为64.3%(65/101)，阳性表达位于肿瘤细胞表；GST-π在原发性脑胶质瘤中的表达强度与病理分级呈正相关。结论：GST-π在原发性脑胶质瘤中的不同表达与胶质瘤MDR的产生密切相关，检测胶质瘤细胞GST-π的表达可预示不同的化疗敏感性及肿瘤恶性度，有利于指导临床更加合理地选择化疗方案及进行个体化化疗。     

小细胞肺癌多药耐药基因的检测及临床应用研究

目的：探讨多药耐药集团（MDR1）在小细胞肺癌化疗中的作用和地位，方法：采用逆转录－多聚酶链式反应技术（RT／PCR）和免疫细胞化学染色法，检测了32例（初治原发癌21例和复治转移癌11例）小细胞肺癌患者血液中的MDR1mRNA水平和多药耐药蛋白（P－170）的表达，并对两种方法进行了比较。结果：初治的原发癌MDR1基因阳性表达率为14．29％，P－170蛋白阳性表达为14．27％，复治转移癌的MDR1基因阳性表达率为72．73％，P－170蛋白阳性表达为63．64％（P＜0．01），有显著性差异。MDR1的基因和蛋白两种而检测方法具有一定的一致性，以RT／PTR方法具有更强的敏感性，结论：复治转移癌组比初治组具有更普遍的抗药性，且主要是获得性抗药，MDR1基因表达可作为临床合理地制定化疗方案，预测化疗效果的重要参考指标。     

大肠癌耐药基因的表达及临床意义

目的：为研究大肠癌多药耐药基因（MDR-1）表达与临床耐药的关系。方法：应用逆转录-多聚酶链式反应技术（RT-PCR）和免疫细胞化学染色法检测了31例大肠癌患（初治原发癌19例；复治转移癌12例）的MDR-1mRNA水平和多药耐药蛋白（P-170）的表达，并对两种方法进行了比较。结果：初治原发性大肠癌19例中MDR-1mRNA基因阳性表达15.79%,P-170阳性为15.7%；而复发转移癌12例中，MDR-1mRNA基因阳性表达66.67%。而P-170阳性为58.33%。结论：复发性转移癌比初治原发癌具有更普遍的抗药性，且主要是获得性抗药，MDR-1的基因和蛋白质两种检测方法具有一定的一致性。以RT-PCR方法具有更强的敏感性 ，MDR-1基因表达可以作为预测化疗效果的一个重要参考指标。     

脑胶质瘤中表皮生长因子受体磷酸化AKT的表达及临床意义

目的探讨不同病理级别脑胶质瘤中表皮生长因子受体(EGFR)及磷酸化AKT(PAKT)的表达及临床意义。方法收集经手术切除的65例脑胶质瘤标本和5例正常脑组织,行免疫组织化学方法染色,检测EGFR与PAKT表达水平。结果脑胶质瘤组织中EGFR和PAKT的阳性表达率分别为73.84%和63.08%;EGFR和PAKT在Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤的表达率为80.85%和72.34%,均显著高于Ⅰ~Ⅱ级的55.56%和38.89%(P<0.05)。EGFR与PAKT的表达水平呈正相关(r=0.68,P<0.01)。结论 EGFR与PAKT在脑胶质瘤中存在过表达与共表达,且与胶质瘤的恶性程度相关;检测两者表达水平对胶质瘤的早期诊断、靶向治疗及预测患者的预后有重要价值。     

MDR1基因与脑胶质瘤

多药耐药 (ＭＤＲ)是脑胶质瘤化疗失败的主要原因[1] ,而ＭＤＲ1基因是介导多药耐药的重要内在原因之一。它包括原发性和获得性多药耐药。前者指肿瘤细胞固有对化疗药物不敏感 ;后者是指接触抗癌药物后所产生的对该药物和该类药物结构和机理完全不同的另些药物的耐药。本文就近年来ＭＤＲ1基因在脑胶质瘤方面的研究作一综述。1　ＭＤＲ1基因及其表达产物1.1　ＭＤＲ1基因　人类基因中ＭＤＲ含有两个基因ＭＤＲ1和ＭＤＲ2 ,后者也被称为ＭＤＲ3,其中ＭＤＲ1基因被认为与一些肿瘤耐药有关。ＭＤＲ1基因位于 7号染色体上 (7ｑ2 1.1) ,已克隆出…     

胶质瘤中间质细胞衍生因子-1及神经生长因子的表达及临床意义

目的 探讨间质细胞衍生因子-1(SDF-1)及神经生长因子(NGF)在胶质瘤中的表达及临床意义.方法 收集手术切除的人脑胶质瘤病理标本86例为观察组,其中观察组按不同病理级别分为Ⅰ级15例为Ⅰ组,Ⅱ级24例为Ⅱ组,Ⅲ级26例为Ⅲ组,Ⅳ级21例为Ⅳ组,同期随机选择颅脑外伤患者正常脑组织标本84例为对照组,2组组织均使用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测SDF-1与NGF mRNA,同时采用免疫组化法检测2组组织中SDF-1与NGF蛋白的表达情况.比较2组组织中SDF-1与NGF mRNA及蛋白表达情况.结果 观察组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于对照组(P<0.05);Ⅳ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅲ组;Ⅲ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅱ组;Ⅱ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅰ组,胶质瘤组织中SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率随病理级别的增高而增高(P<0.05);胶质瘤组织中SDF-1 mRNA表达量及蛋白阳性率呈正相关(r=0.95,P<0.05),NGF mRNA表达量及蛋白阳性率呈正相关(r=0.96,P<0.05);SDF-1和NGF高表达均是预测胶质瘤预后不良的独立因素(P<0.01),SDF-1和NGF的高表达与胶质瘤患者整体不良预后显著相关.结论 胶质瘤中SDF-1与NGF高表达对病变进展有一定促进作用,二者与肿瘤的病理级别密切相关,两者相互作用,SDF-1与NGF在胶质瘤的发生发展中扮演重要的角色,有望为胶质瘤的临床检测及治疗提供新思路.     

人脑胶质瘤耐药基因ERCC2、MGMT表达之间的相关性及其与预后的关系研究

目的　探讨人脑胶质瘤组织中两种耐药基因ERCC2、MGMT表达之间的相关性及其与预后的关系。方法　采用双管RT PCR方法检测 19例人脑胶质瘤组织中ERCC2和MGMTmRNA水平 ,并分析它们的相关性及其与患者生存时间的关系。结果　ERCC2、MGMT的表达量分别为 (1 4 2± 0 93) ,(2 89± 1 82 ) ,ERCC2与MGMT之间具有极显著的相关性 (P <0 0 1)。与患者的生存时间具有显著的相关性 (P <0 0 5 )。结论　ERCC2、MGMT基因表达之间具有内在的联系 ,共同参与细胞对DNA损伤的修复 ,并形成肿瘤耐药 ;与肿瘤的预后具有明显的相关性。     

顺铂诱导脑胶质瘤U87细胞的PD-L1表达及耐药机制的研究

目的 研究PD-L1的表达对U87细胞的顺铂(cisplatin,CDDP)耐药性的影响。方法 建立U87对CDDP耐药细胞株(U87/CDDP),用不同浓度的CDDP处理24 h后,CCK-8检测U87/CDDP细胞活力以验证耐药性。成功建立U87/CDDP细胞株后转染PD-L1 shRNA,用CCK-8、BrdU染色、流式细胞仪检测U87/CDDP细胞的增殖和凋亡。并分别用qRT-PCR检测PD-L1、Bax、caspase-3、Survivin mRNA的表达,Western blotting检测PD-L1、Bax、caspase-3、cleaved-caspase-3和P53蛋白的表达。结果CCK-8结果表明,U87/CDDP细胞成功建立。用相同浓度的CDDP处理24 h后,转染PD-L1 shRNA的U87/CDDP细胞的细胞增殖率比未转染的U87/CDDP细胞低,细胞凋亡率高。同时,与对照组细胞相比,在转染PD-L1 shRNA并给予CDDP处理的U87/CDDP细胞中,Bax、caspase-3 mRNA和Bax、cleaved-caspase-3和P53蛋白的表达显著增加,PD-L1、Survivin mRNA和PD-L1蛋白的表达显著降低。结论 通过抑制U87细胞中PD-L1的表达可以逆转脑胶质瘤U87细胞对CDDP的耐药性。     

Topo Ⅱ在脑原发性胶质瘤中表达的临床意义(附101例分析)

目的 探讨DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在脑原发性胶质瘤中的表达及其临床意义．以进一步深入研究原发性脑胶质瘤多药耐药(MDR)的机制。方法 利用免疫组化技术S—P法检测原发性脑胶质瘤及正常脑组织中TopoⅡ的表达。结果 TopoⅡ在正常脑组织中没有表达；原发性胶质瘤中TopoⅡ的表达率为59．4％(60／101)．阳性表达位于肿瘤细胞核．TopoⅡ在原发性胶质瘤中的表达强度与病理分级呈负相关。结论 TopoⅡ在原发性胶质瘤中的不同表达与胶质瘤MDR的产生密切相关．检测胶质瘤细胞TopoⅡ的表达可预示不同的化疗敏感性及肿瘤恶性度．有利于指导临床更加合理地选择化疗方案及进行个体化化疗。     

脑胶质瘤中Th1/Th2细胞因子的表达及意义

目的:探讨脑胶质瘤Th1/Th2细胞因子不平衡表达状况及其意义。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测脑胶质瘤组织中以IL-2I、FN-γ代表的Th1类细胞因子和以IL-4I、L-10为代表的Th2类细胞因子的表达。结果:30例胶质瘤组织标本各细胞因子的阳性表达率为:IFN-γ13.33%I、L-2 16.67%I、L-4 56.67%I、L-10 76.67%。Th1类细胞因子总的表达率为15%,Th2类为66.67%,Th2类细胞因子的表达明显高于Th1类(P<0.01)。10例人正常脑组织标本中只有2例表达IFN-γ,4例表达IL-10,无其它细胞因子的表达,两类细胞因子之间的表达差异无显著性(P>0.05)。结论:脑胶质瘤存在明显的Th1/Th2失衡,可能与脑胶质瘤的发生、发展及免疫逃逸有关。     

PTEN在脑胶质瘤表达的定性研究

目的 探讨抑癌基因PTEN在脑胶质瘤的表达情况及其临床意义。方法 应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法,检测45例胶质瘤组织与23例正常脑组织PTEN基因外显子1-9、1-8、5-9、5-8 mRNA失表达情况。结果 在45例肿瘤组织中,PTENmRNA平均失表达率为55.6％（25／45）。正常脑组织无1例失表达。胶质瘤组织和正常脑组织中PTENmRNA失表达水平存在明显差别（P〈0.05）。胶质瘤中PTENmRNA失表达水平与患者年龄、性别无关,但随着恶性程度分级增高其失表达水平明显升高（P＜0.05）。结论 PTENmRNA表达水平的异常在胶质瘤的发生和发展过程中起着重要作用。     

脑胶质瘤中CLDN-7基因甲基化状态及蛋白表达的研究

目的探讨脑胶质瘤血浆中CLDN-7基因的甲基化状况及蛋白表达的关系。方法采用巢式PCR、亚硫酸氢盐测序PCR（BSP）及免疫组织化学技术方法,检测56例脑胶质瘤血清标本中CLDN-7基因启动子区CpG岛的甲基化状态,分析其甲基化程度、蛋白表达和临床资料之间的相关性。结果脑胶质瘤患者血清中CLDN-7基因启动子区甲基化率为35.3%（18/51）,按WHO病理分级,其中低级别（Ⅰ～Ⅱ级）组胶质瘤中基因启动子区甲基化率25.0%（9/36）低于高级别（Ⅲ～IV级）组甲基化率60.0%（9/15）,两者之间存在显著差别（P〈0.05）;甲基化蛋白表达阳性率为55.6%（10/18）,未甲基化的蛋白阳性表达率为84.8%（28/33）。结论 CLDN-7基因启动子区CpG岛中存在甲基化现象,与脑胶质瘤发生有关;基因的甲基化率与蛋白表达呈负相关关系。