昆布多糖分离纯化及其抗肿瘤活性的研究

目的 纯化昆布多糖,并筛选其抗肿瘤活性。方法 DEAE-52纤维素及Sephadex G-200柱色谱分离纯化得到7种不同的昆布多糖组分,经抗肿瘤活性筛选出活性较好的昆布多糖Ⅱ,再经Sephadex G-200柱色谱及高效液相凝胶渗透色谱鉴定质量分数,并进行抗肿瘤活性筛选。结果 Sephadex G-200柱色谱及高效液相凝胶渗透色谱鉴定昆布多糖Ⅱ-B为单一成分,昆布多糖Ⅱ对人胃癌SGC-7901、肝癌HepG-2的IC₅₀分别为649.8、592.2 μg/mL。结论 昆布多糖Ⅱ-B具有明显的抗肿瘤活性。     

白及多糖BSP-1的分离纯化、结构表征及抗肿瘤活性研究

目的从白及Bletillastriata块茎中分离纯化多糖BSP-1,并对其结构和抗肿瘤活性进行研究。方法将提取的粗多糖经DEAE-cellulose柱色谱分离得到3个多糖组分BP-1、BP-2、BP-3。BP-1通过SephadexG-200柱色谱纯化后得到组分BSP-1。采用HPGPC、IR、GC、GC-MS、甲基化及~1H-、~(13)C-NMR等方法对该多糖的结构进行表征,并考察BSP-1抗肿瘤活性。结果测得BSP-1相对分子质量为4.72×10~5,由葡萄糖和甘露糖组成。主链由β-1,4甘露糖,侧链由末端连接的葡萄糖组成,其物质的量比为8∶1。体外肿瘤细胞活性实验表明,BSP-1能抑制肝癌Hep G2细胞的增殖。BSP-1体内可显著抑制裸鼠的瘤质量,抑制率为66.42%。结论 BSP-1的结构确定为进一步阐明和开发白及中多糖类成分提供了一定的参考。     

低分子量灰树花多糖的分离、纯化和抗肿瘤活性

目的：从灰树花菌丝体中分离纯化低分子量多糖并进行结构鉴定和抗肿瘤活性检测．方法：采用大孔吸附树脂和离子交换纤维素进行分离，SephadexG200柱层析纯化，HPGFC测定分子量，紫外光谱、红外光谱、薄层色谱和高效液相色谱和气相色谱等进行纯度和结构鉴定．用荷瘤小鼠检测抗肿瘤活性．结果：得到大、小两种多糖组分，其中低分子量多糖为白色粉末状，分子量约为2600，单糖组成为D-葡萄糖，含α—1，3，α-1，6，α-1，4-糖苷键，对S180肉瘤、EAC腹水瘤、Heps实体瘤都有明显抑制作用。结论：分离得到一种灰树花菌丝体多糖，为低分子量的α-葡聚糖，初步药效试验表明其具有抗肿瘤作用。     

黄黑小斑蝥纤溶活性蛋白分离纯化及性质研究

目的以药用斑蝥(Mylabris)为原料,从其中分离纯化得到一种具有纤溶性的蛋白MFP(Fibrinolyric Protein of Myla-bris)。方法采用硫酸铵分段盐分、透析和DEAE-32纤维素离子交换层析等纯化方法进行分离纯化,SDS-PAGE电泳测定其分子量,纤维蛋白平板法测定其纤溶活性。结果该目的蛋白相对分子质量约为95.5 kD,其水解纤维蛋白的相对比活力为14.7 u/mg;该成分在35℃下最稳定,65℃及以上活性丧失,金属离子K+,Na+对其活力无影响,Mn2+,Ca2+对其有明显抑制作用,最适pH为6.0。结论研究分离出的斑蝥活性蛋白确为一种具有纤溶性的蛋白组分,并证明其纤溶作用机理为纤溶酶原激活;体外溶栓实验表明,其对血栓的溶解具有一定作用;溶血实验结果表明,该纤溶活性蛋白溶液无溶血反应。     

虎眼万年青多糖的分离纯化和抗肿瘤活性研究

 目的 从虎眼万年青中提取、分离水溶性多糖,初步研究其特征和抗肿瘤活性。方法 采用热水提取,乙醇沉淀,Sevag法脱蛋白,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱色谱和Sephadex G-75凝胶过滤柱色谱分离纯化,得到虎眼万年青均一多糖OCAP-2-2。毛细管区带电泳法（CZE）分析单糖组成;采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定多糖纯度和相对分子质量;动物移植性实体瘤的瘤重实验法研究对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用,采用细胞体外培养技术,MTT法检测对人白血病细胞株K562细胞的增殖抑制作用。结果 经过分离纯化得到的均一多糖组分OCAP-2-2主要由葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖等4种单糖组成,其相对分子质量之比为2.16∶1.26：0.88∶1.00,平均相对分子质量9.84×104,总糖含量为92.3%,总糖醛酸含量为6.21%,蛋白质含量为3.68%;在0.1～100 μg·mL-1内与荷瘤对照组相比,OCAP-2-2对小鼠S180肉瘤有显著的抑制活性,其中多糖浓度为100 μg·mL-1时抑瘤率达（53.16±4.23）% (P＜0.001）;OCAP-2-2对K562细胞有明显的增殖抑制作用（P＜0.01）,在多糖浓度为0.10 μg·mL-1时,增殖抑制率最高为（39.83±7.31）% (P＜0.01）。结论 OCAP-2-2具有很高的抗肿瘤活性,可以探索作为一种潜在的天然抗肿瘤药物。     

低分子量姬松茸多糖提取分离及抗肿瘤活性筛选的研究

姬松茸(agaricus blazei murill,ABM)是一种药食兼用的真菌,其抗癌作用被认为居抗癌真菌之首[1-3]。多糖是发挥抗肿瘤作用的主要活性成分,目前,对姬松茸粗多糖研究较多,对分子量在10万以下的多糖研究很少。笔者认为,低分子量多糖也含有活性集团,应该具有药理活性,具有深入研究价值。本实验对姬松茸粗多糖进行分离纯化,得到4种低分子量多糖,通过脾淋巴细胞增殖实验和对肿瘤细胞抑制实验,筛选出抗肿瘤活性高的多糖ABMⅡ。材料1·取材姬松茸粗提物,购于浙江庆元博瑞药业有限公司(多糖含量为46·7%)。2·仪器和药品、试剂UV-2550型紫外分光…     

一种在多糖分离纯化过程中新的脱蛋白方法

目的　寻找一种在多糖 (香菇多糖 )分离纯化过程中适宜的脱蛋白方法。方法　以正交试验法为主。结果　通过正交试验法找到了一种在多糖 (香菇多糖 )分离纯化过程中新的脱蛋白方法。 5因素 3水平正交试验的结果表明 ,影响脱蛋白率 ( DPR)的主要因素是 B(正丁醇 )、次主要因素是 D(乙醇 ) ,而因素 C(甲醇 )和 E(氯化钠 )的影响则较小 ;影响 DPR的主次顺序为 B>D>A(氯仿 ) >E>C。 DPR随着正丁醇浓度的增加而变化很大 ,开始缓慢上升 ,然后迅速降低 ;随着乙醇浓度的增大 ,DPR逐渐降低 ;而当氯仿浓度增大时 ,DPR则开始上升 ,然后下降 ;当甲醇浓度增大时 ,DPR则变化很小。脱蛋白的最佳条件是 A2 B2 C1 D1 E2 ,即在氯仿 4 0 %、正丁醇 10 %、甲醇 2 %、乙醇4 0 %、氯化钠 0 .0 1%的条件下 ,杂蛋白的去除率最高。验证性试验结果表明 ,在此条件下 ,杂蛋白的去除率达99.98 %。通过反复试验 ,还找到了适用于工业化生产的包括香菇原料的蒸煮、煮沸样品的浓缩、粗多糖的沉淀和脱色、粗多糖的干燥等在内的原料预处理的最佳工艺。结论　这种新的脱蛋白方法具有工艺简单、无需贵重设备、加工成本低、容易放大等特点 ,特别适合于多糖类产品的精制或其他需要去除杂蛋白的单元操作     

升麻糖蛋白的分离纯化及鉴定

从中药升麻中提取升麻多糖,经DEAE纤维素(DEAE-52)柱层析得CF-Ⅰ、CF-Ⅱ、CF-Ⅲ三个组分。CF-Ⅰ经Sepharose CL-4B凝胶层析柱纯化后,琼脂糖凝胶电泳和Superdex-200柱层析证明其为均一组分。红外和紫外光谱鉴定其成分是一种糖蛋白,不含核酸和色素。气相色谱测定其单糖组分有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖,它们的摩尔比为11.94∶2.18∶1.38∶1;Superdex-200FPLC法测定其分子量为5.8×105,比色法测其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为78%、14.4%、23%。高碘酸氧化和Sm ith降解推测CF-Ⅰ多糖的结构主要以1→4、1→6糖苷键连接而成的。     

山楂果总黄酮的提取分离及体外抗肿瘤活性

山楂Crataegus pinnalifida Bge.系蔷薇科植物，含有多种生物活性物质，如三萜酸、黄酮等。其中黄酮类成分有降压、调血脂、增加冠脉流量、强心、抗肿瘤等药理作用。“。由于山楂果实中果胶含量很高，给提取分离工作带来很大困难，因此对山楂有效成分的定量研究多集中于山楂叶和山楂核。本实验采用4种方法提取山楂果中的总黄酮并进行含量测定，结果表明以60％乙醇为溶剂，超声提取，经大孔吸附树脂分离，提取效率较高，且方法简便易行。山楂提取物的抗肿瘤活性已有报道，但其作用机制未见报道。本实验采用激光扫描共聚焦显微镜技术，通过给药前后细胞内钙和DNA含量变化对山楂果总黄酮体外抗肿瘤作用机制进行初步探讨。     

梅花鹿鹿角脱盘总肽的分离纯化及其抗肿瘤活性研究

目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘总肽,以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘总肽的抗肿瘤活性。方弦采用酸提醇沉、真空旋转蒸发及冷冻干燥提取鹿角脱盘总肽,再经SephadexG-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定总肽的蛋白质浓度,SDS-PAGE电泳分析总肽中的蛋白质,MTT法和流式细胞仪检测鹿角脱盘总肽对小鼠乳腺癌细胞系MA782增殖的影响和细胞周期的变化。结果分离纯化出鹿角脱盘总肽粗提物,其蛋白质含量为91．800％;SDS—PAGE分析显示,鹿角脱盘总肽中主要含有11kDa,18kDa,40kDa,64kDa和80kDa5种多肽,总肽对小鼠乳腺癌细胞的增殖具有明显抑制作用,细胞周期各期细胞比例变化明显,当总肽浓度为30mg／L时,作用72h后细胞抑制率最高为69．200％,G0／G1期细胞百分比为81．621％,S期细胞百分比为8．983％。结论鹿角脱盘总肽对乳腺癌细胞具有抑制作用,为深入研究鹿角脱盘的抗肿瘤活性提供了实验依据。     

糖槭皂苷体内外抗肿瘤作用研究

目的：研究糖槭皂苷的抗肿瘤活性,开发新的抗肿瘤药物资源。方法：采用超声波提取法提取、大孔树脂法富集糖槭皂苷;采用MTT法观察糖槭皂苷对肝癌SMMC7721细胞和胃癌SGC7901细胞的增殖抑制作用,以荷瘤小鼠为模型,观察糖槭皂苷体内抗肿瘤作用。结果：MTT法结果表明,与阴性对照组相比较,糖槭皂苷可显著抑制肝癌细胞SMMC7721和胃癌细胞SGC7901的活性,并呈量-效关系;糖槭皂苷能抑制小鼠瘤重,并且能提高免疫器官指数。结论：糖槭皂苷具有明显的抗肿瘤活性,具有开发价值。     

白芍多糖的制备、理化性质及抗肿瘤活性研究

目的：研究中药白芍中多糖的制备、理化性质及对小鼠路易斯肺癌和S180肉瘤的抗肿瘤活性。方法：采用水提醇沉方法提取白芍中多糖（BSEP）,测定其糖和糖醛酸含量、元素组成、单糖组成;同时采用小鼠路易斯肺癌足趾皮下接种模型和S180肉瘤腋皮下接种模型考察BSEP的抗肿瘤活性。结果：BSEP的提取率分别为1．56％,糖含量为80．56％,糖醛酸含量为3．33％,单糖组成分析为91．7％的葡萄糖,4．19％的半乳糖以及2．83％的阿拉伯糖。生物活性表明BSEP样品分别以200,100mg·kg^-1剂量ip×10qd的治疗方案,对小鼠体内路易斯肺癌足趾接种模型的肿瘤抑制率分别为54．58％和43．33％,对小鼠S180肉瘤皮下接种模型的肿瘤抑制率分别为47．08％和38．98％。结论：BSEP是主要以葡萄糖组成,且含有少量糖醛酸的多糖,具有一定的抗肿瘤活性,对小鼠路易斯肺癌的疗效稍优于S180肉瘤模型。     

白芍多糖的制备、理化性质及抗肿瘤活性研究△

目的：研究中药白芍中多糖的制备、理化性质及对小鼠路易斯肺癌和S180肉瘤的抗肿瘤活性。方法：采用水提醇沉方法提取白芍中多糖（BSEP）,测定其糖和糖醛酸含量、元素组成、单糖组成;同时采用小鼠路易斯肺癌足趾皮下接种模型和S180肉瘤腋皮下接种模型考察BSEP的抗肿瘤活性。结果：BSEP的提取率分别为1.56％,糖含量为80.56％,糖醛酸含量为3.33%,单糖组成分析为91.7%的葡萄糖,4.19%的半乳糖以及2.83%的阿拉伯糖。生物活性表明BSEP样品分别以200,100mg·kg-1剂量ip×10qd的治疗方案,对小鼠体内路易斯肺癌足趾接种模型的肿瘤抑制率分别为54.58%和43.33%,对小鼠S180肉瘤皮下接种模型的肿瘤抑制率分别为47.08%和38.98%。结论：BSEP是主要以葡萄糖组成,且含有少量糖醛酸的多糖,具有一定的抗肿瘤活性,对小鼠路易斯肺癌的疗效稍优于S180肉瘤模型。     

肿节风注射液体外抗肿瘤作用的实验研究

目的：测定肿节风注射液（ZJF）体外对人肺癌A-549、结肠癌HCT-29、胃癌BGC-823的活性。方法：用细胞生长曲线法、MTT试验、形态学观察研究了肿节风注射液（ZJF）的体外抗肿瘤作用。结果：肿节风注射液（ZJF）对A-549、HCT-29、BGC-823三种人系肿瘤细胞均有较强的体外细胞毒作用，且呈浓度依赖性。结论：肿节风注射液（ZJF）具有体外抗肿瘤作用。     

裙带菜茎中硫酸多糖的分离纯化及分析鉴定

用热水从裙带菜茎中提取多糖,乙醇沉淀,Sevag法除蛋白,并采用DEAE-52和Sephadex G-200柱对其进行分离纯化,得到三种多糖纯品F2、F3和F4,纯度鉴定为均一组分.紫外光谱显示不含蛋白质、多肽及核酸,通过硅胶G色谱分析,F2、F3和F4中的单糖有半乳糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖醛酸,F2中除这四种单糖外,还含有葡萄糖和鼠李糖.     

豆豉多糖的提纯及成分分析

目的分离纯化及初步分析永川豆豉中的多糖。方法豆豉经热水提取、低温减压浓缩、三氯醋酸洗去蛋白、流水透析、SephadesG-75柱层析分离纯化制得永川豆豉多糖。以硫酸-苯酚法测定其总糖含量,采用新华中速滤纸纸色谱和硅胶G薄层色谱分析多糖各组分的单糖组成。结果永川豆豉经紫外吸光光谱扫描具有多糖特征吸收峰,多糖含量可达0.25%,初步分析由D-甘露糖和乳糖等单糖组成。结论从豆豉中可提取和分离多糖。     

茯苓酸性多糖分级提取及其抗肿瘤活性比较

目的：以不同碱度分级提取茯苓酸性多糖,进行抗肿瘤活性比较研究,以期探讨茯苓酸性多糖的构效关系。方法：将茯苓饮片分别用70％乙醇和水提取后的药渣,依次用0．1—1．0mol·L^-1 10个梯度氢氧化钠（NaOH）溶液分级提取,得到10种茯苓酸性多糖组分提取物;采用MTT法测定对HepG2肿瘤细胞抑制率,比较10种分级酸性多糖体外抗肿瘤活性大小。结果：0．9和1．0mol·L^-1 NaOH提取的茯苓酸性多糖对肿瘤细胞抑制率最高。结论：茯苓酸性多糖抗肿瘤活性与其酸性强弱相关。     

半夏蛋白抗肿瘤活性组分的提取分离

目的分离半夏蛋白的抗肿瘤活性组分,研究该半夏蛋白组分的抗肿瘤作用。方法用凝胶柱分离纯化半夏粗总蛋白,采用四氮唑蓝比色法(MTT法)观察半夏蛋白对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制,应用流式细胞术(FCM)检测其对细胞凋亡的影响。结果半夏粗总蛋白中30%硫酸铵沉淀部分、60%硫酸铵沉淀部分对肿瘤抑制的量效关系不明显,30%硫酸铵沉淀部分经分离后0.05mol/L和0.1mol/LNaCl的洗脱峰呈现较好的量效关系,且对Bel-7402细胞的抑制作用与空白对照组有显著性差异。30%硫酸铵沉淀蛋白有促进Bel-7402细胞凋亡的作用。结论半夏蛋白中30%硫酸铵沉淀部分对Bel-7402细胞生长具有明显抑制作用及促进Bel-7402细胞凋亡的作用。     

10种蟾蜍甾烯类化合物对宫颈癌细胞Hela的细胞毒性及构效关系分析

目的:本研究比较蟾蜍甾烯(Bu)类化合物体外对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用,并探讨化合物结构与其抗肿瘤活性之间的相关性。方法:采用改良MTT法测定不同浓度的蟾蜍甾烯(Bu)类化合物与Hela细胞共培养一定时间后对细胞的增殖抑制作用;分析10种化合物化学结构与细胞毒性的相关性。结果:10种蟾蜍甾烯类化合物对Hela细胞有明显的增殖抑制作用,其作用强度大小依次为BulBtArgHelTelDebCtlCbgGtlRbg。含有14-氧环的A型母核的活性明显低于含有14-OH的B型结构母核。在相同母核中,对仅含一个羟基的化合物,存在乙酰基使细胞毒性增强。结论:10种蟾蜍甾烯类化合物均能有效抑制Hela细胞的增殖,呈现明显的剂量依赖性和构效关系。