补阳还五汤及拆方对脑缺血后髓过氧化物酶活性及神经细胞凋亡的影响

目的探讨补阳还五汤及其拆方对脑缺血后髓过氧化物酶（MPO）活性及神经细胞凋亡的影响。方法制备大鼠局灶性脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、黄芪组、活血组，分光光度法检测各组大鼠脑组织MPO活性，TUNEL法检测各组大鼠脑组织神经细胞凋亡。结果与假手术组相比，模型组缺血侧脑组织MPO活性及TUNEL阳性神经细胞数目显著升高；与模型组相比，补阳还五汤组、黄芪组、活血组缺血侧脑组织MPO活性降低，TUNEL阳性神经细胞数目减少；与拆方组（黄芪组、活血组）比较，补阳还五汤组作用最强。结论补阳还五汤及其拆方可降低脑组织MPO活性，减轻脑缺血后的炎症反应，并可抑制神经细胞凋亡，这可能是补阳还五汤对脑缺血损伤起保护作用的机理之一。补阳还五汤的作用明显优于其拆方，说明方中益气、活血中药配伍具有协同作用。     

补阳还五汤对沙鼠脑缺血后海马CA1区细胞形态结构与细胞凋亡的影响

目的研究补阳还五汤对沙鼠脑缺血损伤后海马CA1区细胞形态结构与细胞凋亡的影响.方法采用沙土鼠双侧颈总动夹闭脑缺血再灌注模型,于再灌注后120 h取大脑半球,在解剖显微镜下定位海马,切取海马,切片机切片后观察神经细胞超微结构和神经细胞凋亡情况.结果补阳还五汤可使海马CA1区神经细胞和毛细血管变性、死亡减轻,并可使海马CA1区神经细胞的凋亡数目明显减少.结论补阳还五汤可能通过减轻神经元的溃变、死亡,减少神经细胞的凋亡而发挥抗脑缺血的作用.     

补阳还五汤含药脑脊液对受损皮质神经细胞应激反应的调节作用

目的:观察补阳还五汤含药脑脊液对受损皮质神经细胞应激反应的调节作用.方法:在离体培养5天的大鼠皮质神经细胞中分别加入不同的含药脑脊液,37℃孵育24h,然后加入10μmol/L谷氨酸继续孵育60min.通过MTT法检测细胞生存活力;RT-PCR法检测即早基因的表达;扫描电镜观察细胞形态变化.结果:补阳还五汤含药脑脊液能很好的提高细胞生存活力,抑制即早基因的表达.结论:中药复方补阳还五汤能对抗皮质神经细胞的谷氨酸损伤,其机制可能通过抑制即早基因c-fos、c-jun的表达,防止皮质神经细胞凋亡.     

补阳还五汤对前脑缺血再灌注损伤沙鼠p38MAPK/神经细胞凋亡通路的影响

目的:探讨补阳还五汤注射对脑缺血再灌注损伤的治疗作用及机制。方法:88只雄性蒙古沙鼠随机分成对照组、模型组和补阳还五汤高剂量组(51.48mg/kg)、低剂量组(25.74mg/kg)。Kirino的方法制作沙鼠前脑缺血模型。术后1、6h,1d、3d、7d尼氏染色观察海马区神经细胞组织形态变化,免疫组化法和Western-Blot法检测海马区磷酸化p38MAPK和Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测凋亡细胞,术后7～13d八臂迷宫法测试动物学习记忆功能。结果:与对照组比较,脑缺血后海马神经元结构损伤明显、磷酸化p38MAPK表达水平、Caspase-3蛋白表达、凋亡神经细胞数量增加;大鼠的习记忆功能下降;与模型组比较,补阳还五汤组中大鼠的习记忆功能得到改善、神经元形态结构损伤减轻、磷酸化p38MAPK蛋白、Caspase-3蛋白以及神经细胞凋亡数量回降,上述变化在高剂量补阳还五汤组更为明显。结论:补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤有治疗作用,其机制与调控p38MAPK信号通路,抑制神经细胞凋亡有关。     

补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤大鼠线粒体分裂蛋白Drp1、Fis1及细胞色素C表达的影响

目的:观察补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤大鼠线粒体分裂蛋白Drp1、Fis1及细胞色素C表达的影响。方法:将45只健康SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、补阳还五汤组各15只,模型对照组以及补阳还五汤组给予Bannister's颈动脉引流法以建立大鼠缺血再灌注脑损伤的动物模型,补阳还五汤组于造模造模后腹腔给药补阳还五汤0.4ml/(kg·d)1次,共用药7d,其余两组给予使用方式、剂量及使用频率和补阳还五汤组相同至实验结束。比较各组大鼠情况、神经功能缺损评分、海马神经细胞凋亡率、Drp1,Fis1和cyt-c的表达水平、Ca~(2+)荧光强度、钙调神经磷酸酶活性比较。结果:治疗后,与正常对照组相比,模型对照组及补阳还五汤组Drp1、Fis1及cyt-c表达水平较高(P0.05),神经功能评分较高(P0.05),海马神经元细胞凋亡率较高(P0.05),Ca~(2+)浓度及钙调神经磷酸酶活性较高(P0.05);与模型对照组相比,补阳还五汤组Drp1、Fis1及cyt-c表达水平较低(P0.05),神经功能评分较低(P0.05),海马神经细胞凋亡率较低(P0.05),Ca~(2+)浓度及钙调神经磷酸酶活性较低(P0.05)。结论:补阳还五汤可在一定程度上下调缺血再灌注脑损伤大鼠Drp1、Fis1、cyt-c的表达水平以及海马神经细胞凋亡率,抑制线粒体分裂减轻大鼠海马神经元缺氧复氧损伤,缓解脑缺血进一步损伤,有望为临床治疗方面提供新的干预方法。     

补阳还五汤对慢性脑缺血大鼠脑组织形态学的影响

目的:探讨补阳还五汤对慢性脑缺血大鼠脑组织形态学的影响。方法:SD大鼠,采用双侧颈总动脉结扎法复制慢性脑缺血大鼠模型。大鼠随机分为5组,即假手术组(给予等体积的生理盐水)、模型组(给予等体积的生理盐水)、补阳还五汤低剂量组[中药低剂量组,剂量为20 g/(kg·d)]、补阳还五汤高剂量组[中药高剂量组,剂量为40 g/(kg·d)]、阳性对照组[金纳多组,剂量为0.045 g/(kg·d)],每组10只大鼠,连续给药4周。结果:HE染色及焦油紫染色显示慢性脑缺血大鼠模型脑组织疏松,顶叶皮质轻度缺血性改变,神经元减少,细胞排列松散,海马CAI区神经细胞数目明显减少,排列紊乱;而各给药组大鼠脑组织损伤程度、细胞减少数目均有所缓解。结论:补阳还五汤能保护慢性脑缺血大鼠海马CAI区神经细胞,改善神经细胞的死亡。     

针药结合治疗中风后遗症的临床对比研究

目的:通过改变补阳还五汤中黄芪的剂量,观察不同黄芪剂量的补阳还五汤结合针刺治疗对中风后遗症的临床疗效。方法:将96例患者随机分为3组。补阳还五汤A组,32例,黄芪用量30g,常规针刺治疗;补阳还五汤B组,32例,黄芪用量从30g逐渐加量到210g,无常规针刺治疗;补阳还五汤C组,32例,在B组基础上结合普通针刺治疗。三组均以15天为1个疗程,治疗2个疗程后观察治疗前后血沉、血球压积、全血比黏度的改善及临床疗效。结果:补阳还五汤C组与补阳还五汤A组和补阳还五汤B比较,治疗后血液流变学改善情况差异均有显著性意义(P<0.05);补阳还五汤A组和补阳还五汤B比较,无显著性差异(P>0.05);总有效率补阳还五汤A组和补阳还五汤B比较差异无显著性意义(P>0.05);补阳还五汤C组与补阳还五汤A组和补阳还五汤B比较,总有效率均有显著性差异(P<0.05)。结论:补阳还五汤治疗对中风后遗症的治疗疗效与黄芪剂量改变有关系。结合针刺效果更好。     

补阳还五汤治疗腰椎间盘突出症术后下肢麻痹的临床观察

应用补阳还五汤治疗腰椎间盘突出症髓核摘除术后下肢麻痹 85例 ,与西药治疗的 85例作疗效对比分析 ,结果中药组优良率达 95 .3% ,西药组为 81 .2 % ,表明补阳还五汤能促进神经细胞的再生 ,改善神经细胞的血液供应 ,促进神经营养代谢 ,故对周围神经损伤有治疗作用。     

星蒌承气汤和补阳还五汤对脑缺血大鼠细胞凋亡Fas/Fasl和Caspase-3调控的影响

目的:观察星蒌承气汤和补阳还五汤对脑缺血神经细胞凋亡Fas/Fasl和Caspase-3的影响,以明确其阻抑神经细胞凋亡的机制。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、星蒌承气汤和补阳还五汤组;线栓法制备大脑中动脉阻塞模型;星蒌承气汤(5.0 g·kg-1)、补阳还五汤(13.0 g·kg-1)、尼莫地平(10.8 mg·kg-1)组大鼠分别于造模前4 d灌胃,造模后每日1次;缺血后1,3,7 d取大鼠脑组织,免疫组织化学法检测Fas,Fasl,Caspase-3表达。结果:假手术组大鼠可见少许Fas(16.60±1.36),Fasl(19.40±1.72)和Caspase-3(16.35±1.63)表达;大鼠缺血后1,3,7 d的Fas(45.83±1.44,36.25±1.60,31.37±2.27),Fasl(44.27±2.25,37.68±2.01,34.15±1.55)和Caspase-3(37.18±2.78,29.50±2.07,25.26±3.04)表达均增强(P<0.01);与模型组比较,各用药组Fas,Fasl表达减弱,尼莫地平组缺血后1 d,星蒌承气汤和补阳还五汤各组Caspase-3表达减弱;各星蒌承气汤和补阳还五汤组7 d的Fas,Fasl表达、星蒌承气汤组3 d的Caspase-3表达均较尼莫地平组减弱;星蒌承气汤组缺血后1 d的Fas和Fasl,3 d的Fas和Caspase-3表达均较补阳还五汤组减弱。结论:脑缺血可引起细胞凋亡Fas/Fasl调控的表达上调,星蒌承气汤和补阳还五汤可下调Fas/Fasl及Caspase-3表达,星蒌承气汤阻抑Fas和Fasl及Caspase-3的作用较补阳还五汤早而显著,以缺血后1 d的调控作用最为明显。     

补阳还五汤联合运动训练对脑梗死大鼠神经元突触重建的影响

目的 :研究补阳还五汤联合运动训练对脑梗死大鼠神经元突触重建的影响。 方法 :用自体血栓经导管注入右侧大脑中动脉建立大鼠局灶性脑梗死模型,分别给予生理盐水、运动训练、补阳还五汤以及补阳还五汤联合运动训练处理,观察神经功能损伤情况,脑组织中突触体素P38(P38) 和生长相关蛋白-43(GAP-43)的动态表达变化。 结果 :运动训练、补阳还五汤和联合治疗均能够使大鼠神经功能损伤评分降低,P38,GAP-43表达增加,以联合治疗组最为明显。 结论 :补阳还五汤联合运动训练可改善脑缺血后神经行为症状,促进神经细胞突触再生重建,两者联合具有协同增效的作用。     

补阳还五汤对 AD大鼠海马区 NF-κBp65 mRNA基因表达的影响

目的：本课题紧紧围绕着NF-κB/IκB-α通路观察补阳还五汤对AD模型大鼠神经细胞的保护作用,从分子水平探讨补阳还五汤对AD的神经细胞作用机制。方法：将70只Wistar雄性大鼠分为7组：补阳还五汤高、中、低剂量组、阳性对照组、空白组、假手术组以及模型组,每组10只。采用大鼠单侧海马区定向注射Aβ1-40复制AD动物模型,通过实时荧光定量PCR技术观察NF -κBp65mRNA、IκB-αmRNA和 BACE1 mRNA 基因表达的影响。结果：补阳还五汤能升高 AD 大鼠海马区 IκB -αmRNA基因的表达,减少NF-κBp65 mRNA及BACE1 mRNA基因的表达。结论：补阳还五汤对AD大鼠的神经元具有保护作用,其机理可能是通过减少AD大鼠的核转录因子NF-κBp65的表达,同时抑制BACE1的转录和翻译而实现的。     

补阳还五汤治疗缺血性中风的实验研究进展

近10年(特别是近5年)补阳还五汤治疗缺血性中风的实验研究进展,从基因表达、促生长相关蛋白43和突触素、降低兴奋性氨基酸细胞毒性、抑制神经细胞凋亡、抗氧化、抑制自由基、抗钙超载、促血管内皮生长因子等方面阐述补阳还五汤治疗缺血性中风的作用机制。     

补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠皮质神经细胞凋亡的影响

目的　研究补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠皮质神经细胞凋亡的影响。方法　将 36只SD大鼠随机分为 3组 :假手术组 (P ,n =12 )、模型对照组 (C ,n =12 )、补阳还五汤组 (B ,n =12 )。线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型 ,脑缺血再灌注 4 8h后TTC染色计算脑梗死体积 ,TUNEL染色检测神经细胞凋亡 ,免疫组化方法检测缺血侧皮质Bcl- 2 /Bax的表达 ,电镜观察线粒体的变化。结果　脑缺血再灌注后缺血侧皮质神经细胞凋亡增多 ,同时Bcl- 2表达减少 ,Bax表达增多 ,Bcl- 2 /Bax比值下降 ,线粒体肿胀且大多破裂。补阳还五汤干预后 ,细胞凋亡减少 ,脑梗死体积减小 ,Bcl- 2 /Bax比值上升 ,线粒体肿胀减轻。结论　补阳还五汤可能通过抑制神经细胞凋亡而减小脑梗死体积 ,其机制可能是通过上调Bcl- 2 /Bax比值 ,保护线粒体 ,防止发生线粒体通透性转变。     

芪棱汤对脑缺血-再灌注大鼠 Caspase- 3蛋白表达的影响

目的观察芪棱汤对脑缺血再灌注大鼠Caspase-3蛋白表达的影响。方法采用颈内动脉线栓加环扎法复制大鼠脑缺血再灌注模型,于再灌注后不同时间点采用免疫组化法检测大鼠Caspase-3蛋白表达,采用TUNEL法检测凋亡细胞数。结果补阳还五汤组与芪棱汤组Caspase-3蛋白表达明显低于模型组,芪棱汤组Caspase-3蛋白表达明显低于补阳还五汤组;补阳还五汤组及芪棱汤组均能减少缺血半暗带神经元细胞的凋亡,而以芪棱汤组尤为显著。结论芪棱汤可以通过抑制Caspase-3蛋白表达,减少神经细胞的凋亡,达到神经保护作用。     

补阳还五汤对全脑缺血模型大鼠再灌不同时点皮层神经元钙浓度的影响

目的采用钙离子图像分析技术，研究补阳还五汤预干预对全脑缺血大鼠皮层神经元内Ca^2＋浓度的影响，探讨Ca^2＋信号异常参与缺血性神经元损伤的机制及补阳还五汤抗脑缺血的分子机制，为中药复方的研究探索新的思路和方法。方法参照改良的Pulsinelli四血管闭塞法制备全脑缺血大鼠模型，缺血后的大鼠分别在存活2、12、24、48及72h后进行皮层神经细胞急性分离、负载荧光指示剂Fura-2／AM，用钙离子成像系统检测单个神经细胞内Ca^2＋的浓度。结果补阳还五汤预干预除再灌12h时点之外，可显著降低其他各时点大脑皮层神经元内Ca^2＋浓度，对缺血再灌后的2次Ca^2＋堆积均表现明显的抑制作用。结论降低缺血再灌注不同时点皮层神经元内Ca^2＋浓度是补阳还五汤抗脑缺血的重要机制之一。     

补阳还五汤治疗缺血性中风疗效机制研究进展

补阳还五汤是治疗缺血性中风病的名方效方,可据辨证应用于中风病各期病程中。鉴于目前中风病急性期的研究文献质量不高,不推荐急性期常规运用。补阳还五汤疗效机制复杂,既涉及抗炎、抗栓、改善血液流变性、保护血脑屏障、降同型半胱氨酸、促血管新生等血管相关机制,也涉及抗自由基损伤、抗兴奋性氨基酸毒性、调控热休克蛋白、改善红细胞膜ATP酶活性、纠正离子代谢紊乱、提高脑组织能量代谢、促神经发生、抗神经细胞凋亡等脑组织保护机制。然而目前研究多局限于某一机制或某几种机制,尚不能阐明补阳还五汤复方的多靶点综合效应特点,基于临床的方证代谢组学的提出有望开启补阳还五汤复方疗效机制研究的新篇章。     

基于NLRP3炎性小体研究补阳还五汤对脑低灌注大鼠的脑保护作用

目的:观察脑低灌注损伤后大鼠海马组织NLRP3及其下游分子Caspase-1的表达,探讨补阳还五汤的影响及其作用机制。方法:双侧颈总动脉阻断建立脑低灌注模型,HE染色观察海马病理组织学改变,免疫组化法测定海马NLRP3、Caspase-1的水平。结果:脑低灌注导致大鼠海马神经细胞数量减少,核萎缩,细胞排列松散,间隙变大,排列不规则;补阳还五汤可有效改善脑低灌注所致的海马损伤。模型组NLRP3、Caspase-1的表达明显高于正常组(P0.01);补阳还五汤组大鼠海马组织NLRP3、Caspase-1的表达明显低于模型组(P0.05)。结论:补阳还五汤可能通过抑制脑低灌注中NLRP3炎性小体的激活发挥脑保护作用。     

基于炎症反应探讨补阳还五汤对AD模型小鼠的神经保护作用及机制

目的探讨补阳还五汤对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的脑神经保护作用及其机制。方法将60只AD模型小鼠分为补阳还五汤高、中、低剂量组(37.07 g/kg、18.54 g/kg、9.27 g/kg)、脑复康组(吡拉西坦0.62 g/kg)和模型组(等体积生理盐水),另选12只C57小鼠为假手术组(等体积生理盐水)。以上各组连续给药20 d,末次给药后断头取脑,然后采用HE法观察各组脑组织形态学异常;ELISA法检测炎性相关因子TNF-α和IL-6的表达;IHC法检测凋亡相关因子Bcl-2和Bax的表达;采用WB法检测信号通路p38MAPK/NF-κB的蛋白表达。结果补阳还五汤组的神经细胞排列较为规整,细胞炎性肿胀情况减轻,尼氏小体有所增加,空泡化减少;与模型组相比,补阳还五汤中、高剂量组TNF-α和IL-6的表达明显下降(P 0.01),抗凋亡因子Bcl-2表达上升,促调亡因子Bax表达下降(P 0.01、P 0.05),NF-κB和p38MAPK蛋白的表达也都出现了下降现象(P 0.01)。结论补阳还五汤可以抑制AD模型小鼠脑组织炎症反应,减少神经细胞凋亡,并推测此神经保护作用可能与调控炎症通路p38MAPK/NF-κB有关。     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白通路及神经功能影响

目的 观察补阳还五汤对脊髓损伤(SCI)大鼠磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路及神经功能影响。方法 将96只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补阳还五汤组、阻断组,每组24只。除正常组外均采用改良Allen法建立SCI模型。补阳还五汤组于术后第2天开始用补阳还五汤浓缩液0.217 g/(kg·d)灌胃;阻断组除每日补阳还五汤浓缩液灌胃外,予雷帕霉素3 mg/kg腹腔注射;模型组、正常组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。共3周。每组分别随机选取6只大鼠,采用联合行为评分(CBS)评价各组大鼠脊髓神经功能恢复情况,然后处死取SCI节段组织,分别采用蛋白免疫印迹法(Western blot)和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各实验组大鼠神经细胞巢蛋白(Nestin),以及通路中Akt、mTOR的蛋白及mRNA表达水平。结果 补阳还五汤组CBS低于模型组、阻断组(P<0.05)。模型组、阻断组CBS组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测结果显示,与正常组比较,模型组Akt、mTOR蛋白相对表达量均升...     

补阳还五汤对脑出血大鼠模型相关蛋白表达的作用

目的:研究补阳还五汤对脑出血大鼠模型基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、谷氨酸(Glu)及PI3K、AKT表达的作用。方法:选取90只SD大鼠,以随机抽签法分成模型组、正常对照组及补阳还五汤组。模型组与补阳还五汤组建立脑出血模型,造模后第2 d。补阳还五汤组行补阳还五汤灌胃,模型组行生理盐水灌胃,给药14 d。比较3组MMP-9、TIMP-1、Glu,脑组织PI3K、AKT以及Bcl-2、BAX蛋白表达。结果:补阳还五汤组、模型组的MMP-9、TIMP-1、Glu均高于正常对照组,且补阳还五汤组MMP-9、Glu低于模型组,而TIMP-1高于模型组(均P<0.05);补阳还五汤组、模型组脑组织PI3K、AKT蛋白表达较正常对照组更高,补阳还五汤组脑组织PI3K、AKT蛋白表达较模型组更高(均P<0.05);补阳还五汤组、模型组脑组织Bcl-2、BAX蛋白表达均高于模型组,补阳还五汤组脑组织Bcl-2、BAX蛋白表达较模型组更高(均P<0.05)。结论:补阳还五汤可改善脑出血大鼠MMP-9、TIMP-1、Glu,可由激活PI3K/AKT信号转导通路,调控Bcl-2、BAX表达,继而发挥保护脑组织作用。