碱性成纤维细胞生长因子对人体外培养牙髓细胞增殖的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养的人牙髓细胞增殖和分化的影响.方法 以常规体外组织块培养法获得牙髓细胞,采用MTT比色测定bFGF对牙髓细胞的影响.结果 bFGF在1～100ng/ml浓度范围内,可促进人牙髓细胞的增殖,与对照组相比差异显著(P<0.01).bFGF最小显效浓度是1ng/ml,而10ng/ml的bFGF促增殖作用最强,与1ng/ml的bFGF相比差异显著(P<0.01),但与100ng/ml的bFGF无显著差异(P>0.05).从第3天起,与对照组相比bFGF对人牙髓细胞有显著的促增殖作用(P<0.01).结论 bFGF能明显促进人牙髓细胞的增殖,在牙髓组织康复治疗中起到重要作用.     

体外培养碱性成纤维细胞因子对人牙周膜成纤维细胞生物学特性的影响

目的：探讨体外培养过程中,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人牙周膜成纤维细胞（hPDLFs）生物学特性的影响。方法：体外分离培养人牙周膜成纤维细胞并鉴定,加入不同浓度bFGF（1ng／ml、10ng／ml、50ng／ml、100ng／ml）培养,MTT方法检测细胞增殖情况;并对细胞进行矿化诱导,检测细胞的碱性磷酸酶活性。结果：hPDLFs呈星形或长梭形,免疫组化波丝蛋白阳性,角蛋白阴性,证实该细胞来源可靠。bFGF在一定浓度范围内,与细胞增殖成正比,而在本实验培养条件下（10％FBS）bFGF最大效应浓度为10ng／ml。矿化诱导条件下,碱性磷酸酶活性明显增加,在联合应用bFGF的情况下,100ng／ml组碱性磷酸酶活性明显高于其他组。结论：不同浓度bFGF对人牙周膜成纤维细胞生物学行为的影响不同,在一定浓度条件下,低浓度bFGF促进人牙周膜成纤维细胞的增殖,而高浓度bFGF作用于人牙周膜成纤维细胞可能更易于分化。     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙髓细胞迁移和碱性磷酸酶活性的影响

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对体外培养人牙髓细胞迁移和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:以组织块培养法体外获得人牙髓细胞,采用Transwell培养法和ALP活性检测法,观察10 ng/mL bFGF对体外培养人牙髓细胞迁移和分化能力的影响。结果:bFGF可显著诱导体外培养牙髓细胞迁移,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),并能抑制细胞ALP活性(P<0.05),随着培养时间延长,该抑制作用更加显著(P<0.05)。结论:bFGF能促进牙髓细胞迁移,抑制ALP活性,在牙本质牙髓复合体修复中可能发挥重要作用。     

神经生长因子对人牙髓细胞增殖与分化作用的研究

目的 研究神经生长因子对体外培养的人牙髓细胞增殖和分化作用的影响。方法 组织块法行人牙髓细胞的原代培养后，采用四唑盐比色法和酶动力学方法，测定不同浓度（1、10、100U／mL）的神经生长因子对体外培养的第5-8代人牙髓细胞增殖及碱性磷酸酶活性的作用。结果 与对照组相比，10U／mL的神经生长因子可显著促进人牙髓细胞的增殖（P〈0．05）；100U／mL的神经生长因子可显著促进碱性磷酸酶的活性（P〈0．01）。结论 不同浓度的神经生长因子可显著促进人牙髓细胞的增殖与分化。     

RA和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究

目的:探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,RA)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化为神经细胞的可行性。方法:体外分离培养DPSCs并进行克隆化,检测STRO-1的表达。将DPSCs分别接种于含有不同浓度RA、bFGF或二者结合的诱导液,MTT法检测细胞增殖能力,免疫荧光法检测微管相关蛋白(microtubule-associated protein-2,MAP-2)、神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果:克隆来源细胞的STRO-1表达阳性。0.5μg/ml RA或20 ng/ml bFGF单独应用促增殖作用最强(P<0.05),bFGF单独作用各组及对照组均未检测出神经元样细胞。RA作用各组检测到阳性细胞。而0.5μg/ml RA与20 ng/ml bFGF联合应用的增殖和分化效应均优于其它组。透射电镜观察到幼稚神经元样细胞。结论:RA和bFGF联合应用可在体外有效诱导人DPSCs转化为神经细胞。     

SHH和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究

目的：研究体外使用音猬因子（SHH）、碱性成纤维生长因子（bFGF）体外诱导人牙髓干细胞（DPSCs）分化为神经细胞的可行性,以优化人牙髓干细胞向神经细胞分化的诱导条件。方法：从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法培养分离的原代人牙髓干细胞,并进行克隆化培养,检测间充质干细胞特异性标志物STRO-1的表达。将人牙髓干细胞分别接种于含有不同浓度诱导液,MTT法检测不同时间、两种因子单独或联合对细胞增殖能力的影;免疫荧光法检测抗微管相关蛋白（MAP-2）、神经元烯醇化酶（NSE）、胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果：克隆来源细胞的间充质干细胞特异性标志物STRO-1表达阳性。100μg/L音猬因子SHH与20μg/L碱性成纤维生长因子bFGF单独作用促增殖作用最强（P〈0.05）,碱性成纤维生长因子bFGF单独作用各组及对照组均未检测出神经元样细胞。音猬因子SHH作用各组检测到阳性细胞。而100μg/L音猬因子SHH与20μg/L碱性成纤维生长因子bFGF联合增殖和分化作用均优于其它组。透射电镜观察到神经元样细胞表现。结论：100μg/L音猬因子和20μg/L碱性成纤维生长因子联合可以在体外有效诱导人牙髓干细胞分化为神经细胞。     

表皮生长因子对牙囊细胞增殖活性的影响

目的：研究表皮生长因子（EGF）对体外培养的大鼠牙囊细胞增殖活性的影响。方法：原代培养Wistar大鼠牙囊细胞,选择生长良好的第3代细胞,分别加入不同浓度的EGF（0.5、1、5、10、50 ng/mL）与牙囊细胞共孵育5 d,MTT法对比观察不同浓度的EGF对牙囊细胞增殖活性的影响。数据采用SPSS 13.0软件包进行方差分析。结果：在EGF浓度为5～10 ng/mL时,牙囊细胞的增殖活性显著增高（P〈0.05）,10 ng/mL时达到最高（P〈0.01）。结论：EGF可作用于牙囊细胞,合适浓度的EGF能显著增加牙囊细胞的增殖活性。     

bFGF、TGF-β对人牙髓干细胞增殖和分化能力的影响

目的：探讨bFGF和TGF-β对体外培养的人牙髓f细胞增殖和分化能力的影响。方法：采用MTT法分别测定了bFGF和TGF-β作用不同浓度、不同时间单独或联合作用对人牙髓干细胞增殖能力的影响。通过碱性磷酸酶活性检测、细胞形态学观察及DSP、DMP-1免疫组化染色来检测这两种因子对人牙髓十细胞分化能力的影响。结果：0～40ng／mL范围内，bFGF单独作用能显著促进人牙髓干细胞的增殖，EL具有浓度和时间依赖性，而TGF～8促增殖作用较弱；两肯联合作用，促增殖作用无显著提高，而促分化作用显著增强，不仪细胞形态明显改变，而且碱性磷酸酶活性显著提高，DSP、DMP-1呈阳性表达，向成牙本质细胞样细胞分化。结论：bFGF和TG-β对体外培养的人牙髓干细胞增殖和分化具有重要作用，为对探讨影响人牙髓干细胞增殖和分化的因素提供参考依据。     

rhBMP—2和rhTGF—β1联合应用对人牙髓细胞增殖的影响

目的：观察不同浓度的rhBMP-2和rhTGF-β1单独或联合应用对体外培养人牙髓细胞增殖的影响。方法：MTT法。结果：rhBMP-2对人牙髓细胞无增殖作用,rhTGF-β1在浓度为1.0μg/L时对人牙髓细胞有增殖效应。两者联合应用各浓度组对人牙髓细胞增殖无交效应（P＞0.05)。结论：rhBMP-2和rhTGF-β1联合应用对人牙髓细胞增殖无叠加或抵消作用。     

碱性成纤维生长因子促进牙龈间充质干细胞增殖作用的研究

目的:体外研究碱性成纤维生长因子(bFGF)促进牙龈间充质干细胞(GMSCs)增殖的作用.方法:酶消化法获得原代GMSCs,克隆化培养后进行干细胞鉴定.取第4代GMSCs,以含有10％胎牛血清的α-MEM作为基础培养基,分别加入0、0.5、1、5、10、20 ng/ml 5种不同浓度bFGF培养1～9 d,用CCK-8法检测细胞增殖.结果:GMSCs可以通过酶消化法获得,具有干细胞特性;0.5～20 ng/ml的bFGF均能促进GMSCs的增殖,在0.5～ 10 ng/ml范围内促增殖作用随浓度增加和培养时间延长而增强.结论:bFGF对GMSCs增殖能力具有浓度依赖性和时间依赖性促进作用.     

碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-1对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化能力的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胰岛素样生长因子(IGF)-1对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化能力的影响。方法经10ng/mlbFGF(或)和100ng/mlIGF-1刺激4d后,在410nm波长,检测牙髓细胞的碱性磷酸酶活性值;经矿化液诱导后,采用VonKossa染色法检测不同组细胞的矿化能力。结果培养4d后,IGF-1组及bFGF加IGF-1组均高于对照组(P<0.05),而且bFGF加IGF-1组高于IGF-1组(P<0.05),而bFGF组吸光度值与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论IGF-1可促进牙髓细胞向具有矿化能力的细胞分化,而bFGF可能起协同促进作用。     

Induced migration of dental pulp stem cells for in vivo pulp regeneration

Dental pulp has intrinsic capacity for self-repair. However, it is not clear whether dental pulp cells can be recruited endogenously for regenerating pulp tissues, including mineralizing into dentin. This work is based on a hypothesis that dental pulp stem/progenitor cells can be induced to migrate by chemotactic cytokines and act as endogenous cell sources for regeneration and mineralization. Dental stem cells (DSCs) were isolated from adult human tooth pulp and seeded on the surfaces of 3D collagen gel cylinders that were incubated in chemically defined media with stromal-derived factor-1α (SDF1), basic fibroblast growth factor (bFGF), or bone morphogenetic protein-7 (BMP7). Significantly more cells were recruited into collagen gel by SDF1 or bFGF than without cytokines in 7 days, whereas BMP7 had little effect on cell recruitment. BMP7, however, was highly effective, equally to dexamethasone, in orchestrating mineralization of cultured DSCs. Cell membrane receptors for SDF1, bFGF, and BMP7 were up-regulated in treated DSCs. Upon in vivo delivery, bFGF induced re-cellularization and re-vascularization in endodontically treated human teeth implanted into the dorsum of rats. Thus, endogenous dental pulp cells, including stem/progenitor cells, may be recruited and subsequently differentiated by chemotaxis of selective cytokines in the regeneration of dental pulp.     

恒牙牙根发育过程中牙髓中碱性成纤维细胞生长因子的表达

目的　研究人的年轻恒牙和成熟恒牙牙髓中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达及分布特征,探讨 bFGF在恒牙牙根发育过程中的作用。方法　对牙髓标本的石蜡切片进行bFGF的免疫组化染色,并做图像定量分析。结果　bFGF在牙根刚开始发育、发育过程中及发育完成后的牙髓中的阳性表达呈逐渐减弱。结论　bFGF在人正常发育的牙髓组织中,随着牙根的逐渐发育而呈现不同特征的表达,因而参与牙髓的发育和成熟。     

碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中的表达

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中表达和意义。方法:用免疫组化方法检测碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中的表达。结果:碱性成纤维细胞生长因子在成牙本质细胞层强阳性表达, 在牙髓其它细胞和血管内皮细胞阳性表达;碱性成纤维细胞生长因子受体在成牙本质细胞层弱阳性表达,牙髓其它细胞为阴性。结论:碱性成纤维细胞生长因子及其受体在反应性及修复性牙本质形成过程中可能起重要作用。     

碱性成纤维因子用于犬牙盖髓剂的实验研究

目的探讨碱性成纤维因子(bFGF)对犬牙髓损伤修复的影响。方法选取健康英国小猎兔犬牙齿64颗,分为bFGF盖髓组、Dycal盖髓组及ZOE盖髓组。进行直接盖髓术,观察术后14天和28天修复性牙本质形成及牙髓组织学变化。免疫组化检测骨形成蛋白表达情况。结果术后14天:实验组及阳性对照组有纤维性基质形成,无牙本质桥形成;术后28天:实验组及阳性对照组有骨样牙本质桥、管状牙本质形成,阴性对照组无牙本质桥形成。结论bFGF在体内能够有效诱导牙髓细胞分化,形成修复性牙本质。     

血小板血浆对人牙髓细胞增殖的影响

目的：观察血小板血浆及其细化成分对人牙髓细胞增殖的影响。方法：使用因正畸而拔除的人牙的牙髓细胞，用细胞定量测定试剂盒测定细胞增殖情况。结果：5％的多血小板血浆（platelet-rich plasma，PRP）、5％和10％的洗净血小板（washed platelet，WPLT）均明显地促进了人牙髓细胞的增殖，而且WPLT的作用较PRP更显著。乏血小板血浆（platelet-poor plasma，PPP）呈浓度依赖性地抑制了人牙髓细胞增殖，5％WPLT促进人牙髓细胞增殖的作用。结论：去除血浆成分的WPLT对培养的人牙髓细胞增殖有明显的促进作用；血浆中可能存在对抗血小板生长因子作用的因子。