热休克蛋白90与肺癌

随着工业化发展及环境污染的加重,肺癌发病率和病死率呈上升趋势,但其治疗效果仍无突破性进展。热休克蛋白（HSP）是机体在应激（高温、缺氧、感染等）状态下合成的一组蛋白质分子,参与相关蛋白的折叠、装配、细胞内运输及蛋白质降解等过程。随着分子生物学的发展,HSP与肿瘤的关系逐渐被认识,HSP90逐渐成为治疗肿瘤的新靶点。     

热休克蛋白与肺癌

热休克蛋白,作为细胞抵抗外界刺激的产物,能够快速清除异常或变性蛋白而保护细胞免受损伤。近年来研究发现肿瘤细胞中热休克蛋白的水平高于正常细胞,过度表达的热休克蛋白在肿瘤的发生发展过程中起重要作用,且影响肿瘤的治疗效果。本文概述了近年来关于热休克蛋白与肺癌相关性的研究,对用于肺癌治疗的热休克蛋白抑制剂研究现状做了总结和展望,为研究肺癌发病机理及开发高效肺癌药物提供相关参考。     

热休克蛋白在肿瘤免疫方面的研究进展

热休克蛋白（HSP）是细胞在应激条件下产生的一类高度保守的蛋白质,已被证实是一个强有力的免疫佐荆,在肿瘤免疫中充当了多重角色,对研制临床上有实用价值的肿瘤疫苗有重要的意义。此文综述了热休克蛋白及其在肿瘤免疫中的作用机制和在临床肿瘤疫苗研发中的应用前景。     

针灸预处理对心肌缺血再灌注损伤兔不同时间热休克蛋白27、70、90表达的影响

目的:探讨针灸预处理诱导热休克蛋白(HSP)表达对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)兔延迟保护作用的机制。方法:新西兰大耳白兔随机分为假手术组、模型组、电针组和艾灸组,每组18只,各组按预处理后不同时相再分为0、24、48h3个亚组,每组6只。电针组及艾灸组造模前电针或艾灸"内关",每次20min,每日1次,共治疗5d。各组于预处理5d后0、24、48h行冠脉结扎法复制心肌缺血再灌注模型。HE染色观察左心室肌病理变化,电镜观察左心室肌超微结构变化。免疫组化法检测兔心肌组织HSP 27、HSP 70、HSP 90的表达。结果:各组预处理家兔的HE染色及超微结构结果显示,与假手术组比较,模型组心肌损伤较严重,肌纤维紊乱,部分溶解,小血管扩张;与模型组比较,电针组及艾灸组心肌损伤较轻,肌纤维大多正常,肌丝间局灶性水肿减少,线粒体丰富。在不同时相,模型组心肌HSP 27、HSP 70、HSP 90表达与假手术组比较差异均无统计学意义(P0.05)。在0h时,各组兔心肌HSP 27表达差异均无统计学意义(P0.05);在24、48h时,电针及艾灸组比模型组的心肌HSP 27表达均明显增强(P0.05,P0.01)。在0、24h时,艾灸组的HSP 70表达均高于模型组(P0.05,P0.01),而且在24h时,艾灸组HSP 70的表达明显高于电针组(P0.05);在48h时,艾灸组及电针组HSP 70的表达均明显高于模型组(P0.01)。0、24、48h各组的HSP 90表达差异均无统计学意义(P0.05)。结论:电针与艾灸"内关"对兔MIRI均有预保护作用,可减轻兔心肌组织病理改变,其作用与心肌组织HSP 27及HSP 70表达的增强有关,且这种预保护效应存在时间差异,体现在24、48h时更为明显,提示电针与艾灸均具有延迟性保护作用。     

针灸与热休克蛋白60、热休克蛋白70和细胞凋亡关系研究进展

细胞凋亡是基因控制的细胞主动死亡的过程,是细胞程序性死亡的形式.在正常情况下,细胞凋亡与细胞增生保持着一定的规律性.当细胞正常增生和分化被扰乱,导致增生和凋亡异常时,就会诱发疾病.热休克蛋白(HSP)是一类高度保守的应激蛋白,广泛存在于真核和原核生物体内.     

肺癌热休克蛋白70-多肽复合物的抗肿瘤免疫效应研究及其与热证的相关性

目的:观察不同证候患者肺癌组织热休克蛋白70-多肽复合物(HSP70-PC)对人类肺癌A-549细胞的抗肿瘤免疫效应,探讨其抗瘤效应是否存在证候相关性。方法:运用ADP亲和层析、DEAE离子交换层析、SDS-PAGE、Westem-blot、细胞培养、MTT检测等方法从人体肺癌组织及远端正常肺组织分离纯化HSP70-PC,观察不同证候患者肿瘤来源HSP70-PC对人外周血单个核细胞(PBMC)的激活增殖效应及致敏淋巴细胞对人肺癌A-549细胞的肿瘤细胞毒杀伤效应。结果:①热证癌PC组和非热证癌PC组促淋巴细胞增殖效应较空白对照组显著升高;所致敏淋巴细胞对人肺癌细胞均有很强的杀伤效应,与空白对照组相比,有显著性差异。②热证癌PC组较非热证癌PC组促淋巴细胞增殖效应及肿瘤细胞毒杀伤效应均有明显增高趋势。③肺癌患者远端正常肺组织HSP70-PC未见显著刺激淋巴细胞增殖作用,杀伤效应也未见明显升高。结论:人类肺癌组织HSP70-PC能够诱导针对人肺癌细胞的抗肿瘤免疫效应,其抗瘤效应很有可能与热证存在相关性。     

热休克蛋白、免疫及针灸

1　概述热休克蛋白 (ＨｅａｔＳｈｏｃｋＰｒｏｔｅｉｎ ,ＨＳＰ)是在热休克反应过程中 ,细胞内正常蛋白合成关闭并诱导产生的一组蛋白质 ,它能保护组织细胞免受骤起的热休克损伤 ,形成热耐受性以防御随后发生的热休克或其他紧急状态。这一现象最早 ( 1962年 )是由Ｒｉｔｏｓｓａ发现的 ,果蝇在温度升高 (热休克 )时 ,其唾液腺多线染色体发生蓬松现象并有转录活性。推测这种现象是由于与氧化磷酸化的解偶联相关的某些化学修饰引起的 ,他把这种现象称为“热休克反应”。其后的研究表明 ,除热应激以外的许多其他理化因素 ,如感染、缺氧、重金…     

重复电针预处理对兔脊髓缺血损伤后热休克蛋白90表达的影响

目的 :探讨重复电针刺激“足三里”穴对脊髓缺血性损伤保护作用的部分机理。方法 :1 6只成年雄性新西兰大白兔随机分成两组 (各组n =8) ,即对照组、电针预处理组。对照组每天静脉给予戊巴比妥钠 3 0mg/kg,连续 5d ;电针预处理组每天静脉给予戊巴比妥钠 3 0mg/kg,同时给予电针刺激双侧“足三里”穴 ,3 0min/d ,连续 5d。最后 1次预处理结束后 2 4h ,夹闭肾下腹主动脉2 0min ,制作兔脊髓缺血模型 ;并于 48h后处死动物取脊髓 (L5～ 7)制作标本 ,行免疫组织化学染色。结果 :再灌注 48h脊髓前角的HSP 90表达电针预处理组明显多于对照组 (P <0 .0 1 )。结论 :重复电针刺激“足三里”行预处理诱导缺血耐受的机理可能与增强HSP 90在脊髓前角的表达相关。     

应激、热休克蛋白与针灸防病保健

本文作者从应激及应激产生的热休克蛋白的生物学意义的角度，探讨分析针灸防病保健的作用。认为针灸在刺激机体相应的腧穴时．可使机体产生适度应激，并诱生一定量的热休克蛋白．从而激发机体的自身潜能，提高机体抵抗疾病与应变能力。热休克蛋白在针灸防病保健的作用中充当重要的角色。     

热休克蛋白70研究的现状及展望

热休克蛋白（heat shock proteins,HSPs）是一组广泛存在于微生物和动、植物体内的生物进化中高度保守的多肽蛋白。由于这类蛋白的合成与热休克反应有关,故命名为热休克蛋白（heat shock protein,HSP）。除了高热之外,多种应激原如重金属、饥饿、缺氧、缺血等都可以诱导HSP的表达,但人们习惯上仍称为HSP或热应激蛋白（heat stress protein,HSP）,有时也称为应激蛋白（stress protein,SP）。根据HSP的相对分子质量,主要的HSP被分成6个家族：大分子量HSP家族、HSP90家族、HSP70家族、HSP60家族、小分子量HSP家族和泛素。其中HSP70是HSPs中最保守、最重要的一族,在大多数生物中含量最多,在应激反应中最敏感,因而是HSPs中最受关注、研究最深入的一种。     

乳腺癌细胞中热休克蛋白70的检测

对乳腺癌细胞中热休克蛋白70进行鉴定分析,用乳腺癌细胞株SKBR-3作为实验材料,采用裂解液裂解在42℃处理后的人乳腺癌细胞株SKBR-3,离心后,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）、Western—blot检测进行蛋白分子量鉴定。纯化后获得的蛋白中包含相对分子质量为70KD的蛋白,采用Western—blot方法可以从人乳腺癌SKBR-3细胞株中检测得相对纯度较高的HSP70。     

热休克蛋白与围绝经期综合征防治相关性研究

围绝经期妇女机体内环境急剧变化,多系统出现动荡与紊乱,机体处于一种生理性应激状态,但机体具有自调能力,这种能力可以帮助机体去调整与维持机体的自稳状态。倘若这种能力较弱或机体内环境变化得过于剧烈,使机体难以达到新的平衡,便会使围绝经期的生理性应激转变成的病理性应激,导致围绝经期综合征及围绝经期的易生疾病。热休克蛋白是细胞在应激反应中诱生的具有广泛性与非特异性的细胞保护蛋白,作为分子伴侣参与机体诸多生理病理过程。由于围绝经期应激反应中诱生的热休克蛋白与围绝经期时机体诸多环节如免疫、抗氧化、雌激素受体、胰岛素受体功能等密切相关,因此探讨热休克蛋白在围绝经期机体中的作用,对于防治围绝经期综合征具有重要意义。     

针刺对脑缺血大鼠热休克蛋白70表达影响的研究进展

针刺治疗脑缺血性疾病具有良好的疗效,越来越受到国内外医学界的广泛关注,其治疗机制成为现代医学研究的热点.热休克蛋白70（heat shock protein70,HSP70）作为脑缺血诱导的神经元保护性物质,具有抗脑缺血后细胞凋亡、清除细胞内异常蛋白和减少氧自由基产生等作用.现将HSP70与缺血性脑损伤的关系及针刺对缺血性脑损伤过程中HSP70的影响综述如下.     

电针"内关"对缺血性心肌细胞热休克蛋白90表达影响的实验研究

目的：观察电针刺激对急性心肌缺血家兔心肌热休克蛋白90（HSP90）表达的影响。方法：将30只健康家兔随机分为正常对照组（组1，n=10），结扎组（组2，n=10），结扎＋针刺组（组3，n=10），采用结扎家兔冠状动脉左前降支的方法，建立急性心肌缺血实验模型。各组家兔均在观察结束后，取下家兔左心室前壁缺血心肌，用免疫组化法观察缺血心肌组织中热休克蛋白90的表达。结果：针刺组HSP90表达增强，与结扎组对比有显著性意义。且ECG指标亦恢复至结扎前。结论：电针能缓解家兔心肌缺血的症状，增强缺血心肌热休克蛋白90（HSP90）的表达；提示针刺“内关”穴对心肌缺血的保护作用可能是多靶点、多环节的，至少它可以通过促进保护性应激蛋白（HSP90）合成增加的作用来达到。     

针灸、热休克蛋白70与细胞保护

热休克蛋白70(HSP70)是一种非特异性细胞保护蛋白，针灸可诱导其产生。本文综述了针灸、热休克蛋白及细胞保护三者间的联系，并认为通过采用针灸诱导热休克蛋白70的产生，从而保护各器官组织是值得研究的课题。     

热休克蛋白70与重症急性胰腺炎严重程度的关系

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)与重症急性胰腺炎严重程度之间的关系。方法在重症急性胰腺炎大鼠模型复制成功后1 h、5 h、10 h,分别收集胰腺组织和血清;采用RealTime-PCR方法分别测定胰腺组织中HSP70 mRNA的表达情况,采用碘-淀粉比色法测定血清中淀粉酶水平,采用ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果在模型复制成功后1 h、5 h、10 h,胰腺组织HSP70 mRNA的表达呈明显下降趋势,大鼠血清中淀粉酶和TNF-α呈明显升高的趋势。结论在重症急性胰腺炎的发生过程中,胰腺组织HSP70表达逐渐下降,而胰腺组织的损伤程度逐渐加重,HSP70的低表达可能促使胰腺炎病情更加严重。     

不同热休克蛋白的比较及其与中医药的关系

热休克蛋白(Heat Shock Protein,HSP)是一组具有重要生理功能,高度保守的蛋白质分子家族。生理、病理及环境因素等都可诱导热休克蛋白产生,故又称为应激蛋白(Stress Protein)。根据分子量大小和同源程度,HSPs可分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60、小分子HSP(sHSP)5个主要的家族。目前对HSP90、HSP70研究最多,而对HSP110研究较少。HSPs有许多共同点,但各个HSP家族都有独特的结构和功能。HSPs对机体具有保护性,故设法寻找一种没有毒副作用的HSPs诱导剂或方法,已成为国内外研究的活跃领域。中医中的针灸和中药能影响HSPs的表达,就HSPs的结构功能及其和中医药的关系做一综述。     

基于热休克蛋白90靶点的苦参碱衍生物C4对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及凋亡的影响

目的 研究基于热休克蛋白90靶点的苦参碱衍生物C4对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及凋亡的影响。方法 采用分子对接和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测苦参碱衍生物C4（0、1、2、4、8 μmol·L^-1）对热休克蛋白90（Hsp90）的调控作用;采用噻唑蓝（MTT）比色法检测衍生物C4（0、0.25、0.5、1、2、4、8、16 μmol·L^-1）对非小细胞肺癌A549细胞活力的影响;采用克隆形成实验检测衍生物C4（0、2、4、8 μmol·L^-1）对A549细胞增殖能力的影响;采用细胞划痕实验检测衍生物C4（0、2、4、8 μmol·L^-1）对A549细胞迁移能力的影响;采用Transwell实验检测衍生物C4（0、2、4、8 μmol·L^-1）对A549细胞侵袭能力的影响;采用流式细胞术检测衍生物C4（0、2、4、8 μmol·L^-1）对A549细胞凋亡能力的影响;采用Western blot检测衍生物C4（0、1、2、4、8 μmol·L^-1）对A549细胞蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、表皮生长因子受体（EGFR）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、p-PI3K、胱天蛋白酶-9（Caspase-9）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X基因（Bax）、B细胞淋巴瘤2相关的细胞死亡激动剂（Bad）蛋白表达量的影响。结果 衍生物C4能有效地与Hsp90蛋白通过水介导的氢键网络与天冬氨酸-51（ASN-51）、甘氨酸-135（GLY-135）、苯丙氨酸-138（PHE-138）的残基相互作用,和PHE-138苯环之间的π-π堆积相互作用有助于增强其亲和力,与空白组比较,衍生物C4可以明显的下调A549细胞内Hsp90蛋白表达（P<0.05,P<0.01）;与空白组比较,衍生物C4可以明显降低细胞活力（P<0.05,P<0.01）;给药24、48、72 h,衍生物C4对A549细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为（12.32±0.14）、（7.79±0.16）、（3.26±0.09） μmol·L^-1;与空白组比较,衍生物C4（2、4、8 μmol·L^-1）使A549细胞克隆形成能力明显下降（P<0.05,P<0.01）,且呈浓度依赖性;与空白组比较,衍生物C4可以明显抑制A549细胞的迁移、侵袭能力（P<0.05,P<0.01）,其中浓度在8 μmol·L^-1时效果最为显著（P<0.01）;与空白组比较,衍生物C4可以显著诱导A549细胞发生凋亡反应（P<0.01）,在0、2、4、8 μmol·L^-1时细胞凋亡率分别为（2.28±0.35）%、（4.97±0.36）%、（8.86±0.50）%、（20.67±0.99）%;与空白组比较,衍生物C4可以明显增加Caspase-9、Bax、Bad蛋白表达量（P<0.05,P<0.01）,使PI3K、p-PI3K、p-Akt、EGFR、Bcl-2蛋白表达量发生不同程度降低（P<0.05,P<0.01）,Akt蛋白的表达量没有发生明显的变化。结论 衍生物C4发挥抗肿瘤的作用是通过抑制细胞活力、增殖能力、迁移和侵袭能力,并且促进细胞的凋亡反应,其发挥作用的机制可能是通过抑制Hsp90/PI3K/Akt信号通路来实现的。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克肺组织热休克蛋白70表达的调控

目的 :观察 :牛珀至宝微丸对内毒素休克肺损伤时热休克蛋白 70 (heatshockprotein ,HSP70 )表达的影响及其与一氧化氮 (nitricoxide,NO)的关系。方法 :静脉注射内毒素 (LPS) 1.5mg/kg ,腹腔注射D -氨基半乳糖 (D -GalN) 10 0mg/kg造成内毒素休克模型 ,用牛珀至宝微丸和AG作对照干预处理 ,检测血浆一氧化氮 (NO)浓度 ,免疫组化方法检测HSP70在肺组织内的表达。结果 :牛珀至宝微丸增强内毒素休克时肺组织HSP70表达 ,降低血浆NO浓度 ,肺损伤减轻。结论 :证实牛珀至宝微丸能增强内毒素休克时肺组织HSP70表达 ,提示牛珀至宝微丸对内毒素休克造成的肺损伤的保护作用可能是通过刺激肺组织HSP70表达增强来调节血浆NO浓度而产生的。