七氟醚预处理对大鼠急性肾缺血-再灌注损伤保护作用的实验研究

目的：探索七氟醚对急性肾缺血-再灌注损伤肾功能的保护作用。方法选择健康 SD 大鼠90只,随机分为三组：伪手术组、对照组及七氟醚预处理组,建立肾缺血-再灌注模型,测定各组大鼠平均动脉压（MAP）、二氧化碳分压（PCO2）、血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）及超氧化物歧化酶（SOD）的变化,HE 染色观察各组大鼠肾组织病理改变。结果随着七氟醚预处理浓度的增加,大鼠 MAP 呈下降趋势,但在七氟醚浓度2％-3％的临床常用剂量范围内,大鼠的 MAP 波动于92．1±6．0 mmHg。各组肾缺血前与再灌注后,PCO2浓度无明显变化。对照组及七氟醚预处理组 BUN 和 Cr 于再灌注后12 h、24 h 均明显高于伪手术组（P ＜0．05）,但七氟醚预处理组再灌注后12 h、24 h 的BUN、Cr 水平均较对照组明显下降（P ＜0．05）。七氟醚预处理组和对照组均较伪手术组血清 SOD 活力减低,但七氟醚预处理组 SOD 活力较对照组高,差异具有统计学意义（P ＜0．05）。肾脏病理观察发现伪手术组肾脏组织结构完整,对照组肾脏外髓部分组织结构严重破坏,而七氟醚预处理组肾脏组织破坏较小,肾小管组织相对完整。结论七氟醚吸入式麻醉能够有效降低 BUN、Cr 水平,保护 SOD 活力,对急性肾缺血-再灌注损伤肾功能具有一定的保护作用。     

p38MAPK和JNK在大鼠肾缺血-再灌注损伤模型中的表达及意义

目的 观察p38MAPK、JNK在肾缺血-再灌注损伤大鼠肾组织中的表达和活化,从而探讨p38MAPK、JNK信号转导通路与肾缺血-再灌注损伤的关系.方法 用缺血1 h再灌注1 h 制备缺血-再灌注模型,20只健康雄性SD大鼠[体质量(200±20)g]随机分为假手术组(n=10)、缺血-再灌注损伤组(n=10).检测肾组织丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性及血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)浓度.观察肾组织光镜、电镜下的形态学变化,用RT-PCR技术检测两组肾组织p38MAPK、JNK mRNA的表达情况,Western印迹法观察p38MAPK、JNK的活化情况.结果 缺血-再灌注损伤后,大鼠肾功能和肾小管上皮细胞明显受损,BUN、Cr、MDA浓度均高于假手术组(P<0.01),SOD活性低于假手术组(P<0.01),p38MAPK、JNK磷酸化蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血-再灌注损伤后磷酸化p38MAPK、JNK呈阳性表达(P<0.01).p38MAPK、JNK mRNA在缺血-再灌注损伤组的表达较假手术组显著增高(P<0.01).结论 肾缺血-再灌注可增加p38MAPK、JNK的磷酸化水平及p38MAPK、JNK mRNA的转录水平,p38MAPK、JNK可能在肾缺血-再灌注损伤中起到至关重要的作用.     

神经肽Y在急性肾缺血再灌注损伤中的变化

目的探讨血浆神经肽Y（NPY）在急性肾缺血再灌注损伤时的变化规律。方法SD大鼠32只,随机分为对照组和缺血再灌注组,每组16只。建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型,缺血再灌注后3h分别检测血浆NPY,血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及观察肾组织的病理学变化。结果与对照组比较,缺血再灌注组血浆NPY,血清BUN、Cr、MDA水平显著升高（P〈0.05）,SOD水平显著降低（P〈0.05）;与对照组比较,缺血再灌注组肾组织病理损伤程度明显加重。结论大鼠急性肾缺血再灌注损伤血浆NPY水平与肾脏受损程度呈正相关,NPY可作为在急性肾缺血再灌注损伤中估计肾脏受损程度的主要检测指标之一。     

趋化因子阻滞剂对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨趋化因子阻滞剂-溶血磷脂酸对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:雄性Wis-tar大鼠,体重(230±20)g,随机分为三组(n=10),即假手术组、模型组及溶血磷脂酸组。建立大鼠肾缺血再灌注模型,在再灌注4 h点检测肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量(ELISA方法)、肾功能指标及光镜观察肾脏病理改变,同时观察溶血磷脂酸(LPA)对上述指标的影响。结果:假手术组大鼠肾脏组织中含有少量MCP-1,模型组MCP-1含量明显升高;LPA组血Cr、BUN比模型组均降低(P<0.01),肾组织MCP-1含量减少(P<0.01),肾脏组织病理学改变减轻(P<0.01)。结论:细胞因子-MCP-1参与了肾脏缺血再灌注损伤,LPA可通过其抗炎作用,抑制单核细胞趋化蛋白-1,保护肾脏缺血再灌注损伤后的肾功能紊乱。     

木兰脂素对肾缺血再灌注损伤大鼠Toll样受体4表达的影响

目的:观察木兰脂素对大鼠肾缺血再灌注损伤时肾组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:采用大鼠肾缺血再灌注损伤模型,雄性SD大鼠45只随机分为假手术组(n=5)、对照组(n=20)和治疗组(n=20)。于再灌注开始前5min静脉注射木兰脂素2mg/kg或等量生理盐水。再灌注达相应时间点时,从各组大鼠取血备测血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)以及血清细胞间黏附分子-1水平,肾组织用于观察病理变化以及作免疫组化分析肾组织TLR4表达情况。结果:治疗组BUN、Cr较相应时间点对照组明显降低,肾组织损伤也较对照组明显减轻。治疗组肾组织TLR4阳性表达多于假手术组,但较对照组明显减少。结论:木兰脂素预处理可减轻肾缺血再灌注损伤,其机制可能是通过抑制TLR4的表达而发挥作用的。     

肾茶总黄酮调节肾缺血再灌注损伤大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用和机制

目的 探究肾茶总黄酮调节实验大鼠缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞凋亡的作用和机制。方法 60只雄性实验SD大鼠,信封法随机编码分为4组（n=15只）,对照组、模型组、肾茶总黄酮小剂量治疗组、肾茶总黄酮大剂量治疗组。模型组、肾茶总黄酮小剂量治疗组和肾茶总黄酮大剂量治疗组均采用手术摘除实验大鼠右侧肾脏,持续阻断左肾动脉1h后恢复灌注的方法建立急性肾缺血再灌注损伤模型,通过酶偶联法测定模型大鼠血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）的变化并比较,确认模型建立成功;对照组、模型组以0.9%氯化钠溶液灌胃,治疗组以肾茶总黄酮溶液灌胃（高剂量400mg/Kg、小剂量100mg/Kg）,治疗4天;TUNEL法检测大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数（AI）;肾组织匀浆后,黄嘌呤氧化酶法测定SOD,化学比色法测定NOS和硫代巴比妥酸法测定MDA含量。结果 模型组Cr（94.76±13.83）、BUN（25.34±2.46）,与对照组Cr（55.41±9.83）、BUN（13.84±1.53）比较显著升高（P＜0.05）,显示造模成功;经肾茶总黄酮大剂量治疗后Cr（68.64±11.21）、BUN（15.13±1.44）、AI（ 4.37±4.29）、NOS（11.57±2.25）和MDA（11.32±0.91）显著降低（P＜0.05）,SOD（ 29.84±5.58）显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 肾茶总黄酮能够减轻肾缺血再灌注损伤大鼠的急性肾损伤（AKI）,这种作用可能通过下调肾小管上皮细胞的凋亡来实现,其机制可能是减少大鼠肾组织内自由基生成,增强其抗自由基损伤的能力。     

氟伐他汀对大鼠肾脏缺血再灌注损伤NF-κB表达的影响

目的 探讨氟伐他汀对大鼠肾缺血再灌注损伤后核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 将36只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和氟伐他汀组,每组各12只.假手术组术前3d每日用等量0.9％氯化钠注射液灌胃后,予2％戊巴比妥钠腹腔麻醉(45 mg/kg),用500U肝素钠腹腔注射,游离双侧肾脏,切除右肾后缝合腹壁.缺血再灌注组实验过程与假手术组相同,但在右肾切除、左肾游离后行左肾缺血实验,将左肾动、静脉用血管钳夹闭45 min后恢复灌流.氟伐他汀组于术前3d每日予氟伐他汀(2 mg/kg)灌胃,余实验过程同缺血再灌注组.术后处死大鼠检测血肌酐(Cr)、尿素(BUN),光镜下观察肾组织病理学改变,蛋白免疫印迹检测NF-κB蛋白表达.结果 缺血再灌注组、氟伐他汀组与假手术组比较,Cr、BUN水平明显增高,NF-κB表达明显增高,肾组织病理学见肾小管损伤加重,差异有统计学意义(P＜0.05).氟伐他汀组与缺血再灌注组比较,上述肾脏损伤指标明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 氟伐他汀能减轻肾缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制NF-κB的表达有关.     

七氟醚预处理大鼠肾缺血-再灌注损伤中HSP70的表达及保护机制

目的 观察七氟醚预处理大鼠肾缺血-再灌注损伤模型中HSP70的表达变化,探讨其保护作用机制.方法 72只SD雄性大鼠随机分为对照组(C组)、缺血-再灌注组(I/R组)、七氟醚预处理组(S组),每组各三个时相(4、12、24 h).所有大鼠于实验结束时测定肾组织过氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平及血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平.观察肾组织病理变化,免疫组化法检测大鼠肾组织热休克蛋白70(HSP70)、核转录因子-κB(NF-κB)的表达情况.结果.与C组比较,I/R组和S组HSP70表达均显著增加(P<0.05);与I/R组比较,S组HSP70表达在12 h达到高峰,并且显著高于I/R组;C组NF-κB几乎不表达,I/R组NF-κB表达显著增加(P<0.05),并且随再灌注时间的延长而增加;S组再灌注4、12、24 h NF-κB表达显著低于I/R组(P<0.05).与C组比较,I/R组和S组MDA显著升高而SOD显著降低(P<0.05);与I/R组比较,S组SOD显著升高而MDA显著降低(P<0.05);与C组比较,随再灌注时间的延长,I/R组和S组BUN、Cr均显著升高;与I/R组比较,S组12、24 h BUN、Cr均显著低于I/R组;S组肾损伤的病理变化较I/R组显著减轻.结论.七氟醚预处理能诱导肾缺血-再灌注大鼠模型HSP70的表达增强和提早表达,减弱NF-κB活化,增加肾缺血-再灌注后氧自由基的清除能力,实现对肾缺血-再灌注损伤的保护作用.     

缺血预处理对大鼠控制性降压肾功能的影响

目的:观察缺血预处理(ischemic preconditioning)对大鼠硝普钠控制性降压肾功能的影响。方法:雄性Wastar大鼠30只,随机分为假手术组(S组)、控制性降压组(C组)、缺血预处理组(I组)。腹腔麻醉后,C组大鼠经股静脉泵注硝普钠,使平均动脉压降至50mmHg并维持120min。S组大鼠只做手术操作,泵注生理盐水。I组大鼠降压前用动脉夹阻断左肾动脉3次,每次5min,间隔5min再灌注。分别于降压前、降压60min、降压后120min检测血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、β2-微球蛋白(β2-MG)和尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG),并观察肾组织的显微结构变化。结果:C组大鼠经控制性降压60min后血BUN、Cr和尿NAG高于S组同时点值(P﹤0.05),降压120min后血BUN、Cr、β2-MG和尿NAG进一步升高,与S组同时点值比较差异有显著性(P﹤0.05)。I组大鼠降压60min后血BUN、Cr和尿NAG低于C组同时点值(P﹤0.05),降压120min后血BUN、Cr、β2-MG和尿NAG均低于C组同时点值,差异有显著性(P﹤0.05)。结论:缺血预处理对大鼠控制性降压肾功能有保护作用。     

N-去硫酸肝素对肾缺血-再灌注损伤防治作用的研究

目的 :研究 N去硫酸肝素对大鼠肾缺血再灌注损伤的防治作用。方法 :建立肾缺血再灌注损伤大鼠模型 ,实验动物随机分为正常对照组和 N 去硫酸肝素治疗及非治疗组。观察大鼠治疗前后肾组织中 P 选择素表达、组织病理学与肾功能的改变 ,以及凝血指标〔包括凝血酶原时间 (PT)和部分激活凝血时间 (KPTT)〕的变化。结果 :缺血再灌注后大鼠肾脏 P 选择素表达增高 ,出现明显组织病理学改变 ,血清尿素氮 (BUN)、肌酐(Cr)水平明显升高〔分别为 (14.5 4± 0 .6 7) mm ol/ L 和 (10 2 .12± 4.76 ) μmol/ L〕;N 去硫酸肝素治疗组肾脏组织中 P选择素表达受抑 (未出现棕黄色颗粒 ) ,病理学改变与肾功能损害减轻 ,且对 PT和 KPTT无明显影响。结论 :N去硫酸肝素对肾缺血再灌注损伤具有防治作用 ,且对凝血指标 PT和 KPTT无明显影响。