术前局部注射^131I—3H11导向治疗胃癌的临床研究

目的 探讨术前应用免疫导向技术治疗胃癌的临床效果。方法 以应用^131I-3H11对6例胃癌病人术前行内镜下癌灶多点注射作为治疗组；选择6例胃癌病人采用FAM方案化疗作为对照组。并对术后标本进行观察。结果 术后病理检查治疗组发现75．0％（12／16）出现癌细胞核固缩、破裂、细胞浆凝固、细胞间质出现炎性细胞浸润；这些变化多以中度为主，重度及无变化较少；而对照组无明显变化。结论 作为胃癌的综合治疗方法，术前胃癌局部注射^131I－3H11具有临床应用前景。     

131I-3H11经不同途径给药的药代动力学比较研究

目的 研究^131I-3H11不同给药途径的药代动力学。方法 将家兔分为3组。即耳静脉、门静脉和腹腔注射组,按4.44MBq/kg体重注射^131I-3H11,给药后固定时刻原则取下静脉血、门静脉血及腹腔液并检测其放射性药物的含量。结果 （1）耳静脉给药后,门静脉与外周静脉血内药物浓度没有明显差别;（2）门静脉给药30min后,门殂脉与外周血静脉血没有明显差别;（3）腹腔给药后,腹腔液中的药物浓度始终保持最高,其峰值浓度分别是外周静脉和门静脉血的37.2倍和5.4倍;门静脉血药物浓度次之,峰值浓度是外周静脉血的6.9倍,至24h仍达1.8倍。结论 ^131I-3H11腹腔给药具有高选择性区域导向治疗的药代动力学特点,腹腔液中高浓度的导向药物主要经门静脉吸收进入肝脏,保持了腹腔、门静脉和肝脏内持久恒定高浓度的导向治疗药物,有利于预防和治疗胃肠癌术后腹腔内复发和肝转移。     

二氧化碳气腹对胃癌腹腔脏器种植转移的影响

目的 研究腹腔镜胃癌手术时CO2气腹对肿瘤腹膜及脏器转移的影响.方法 选用人胃癌细胞(MKN45)悬液1 ml(2 × 107/m1)注入裸鼠腹腔内,建立人胃癌细胞裸鼠腹腔种植模型.2周后,实验裸鼠分为2组:CO2气腹组(30只)和开腹组(30只).7周后,探查肿瘤细胞腹膜种植及各脏器转移情况.结果 CO2气腹组有27只致瘤,其中8只发生戳孔种植,19只发生脏器转移;开腹组有26只致瘤,其中7只发生戳孔种植,19只发生脏器转移,两组差异无统计学意义(x2=0.007,0.240,0.202,0.106,0.042,P＞0.05).结论 CO2气腹没有促进人胃癌细胞裸鼠腹腔脏器转移的发生,腹腔镜胃癌手术具有一定的安全性与可行性.     

CO2气腹对胃癌细胞腹腔种植转移影响的动物实验研究

目的比较不同压力CO2气腹处理的人胃癌MKN-45细胞在裸鼠腹腔内的成瘤数量、重量及裸鼠生存时间，探讨CO2气腹对胃癌细胞侵袭转移能力的影响。方法实验分为4组（对照组和5、10、15mmHg CO2气腹组），即将胃癌细胞在5％CO2 37℃条件下或5、10、15mmHg100％CO2 37℃条件下培养4h，然后收集细胞并将2×10^5个细胞注射入裸鼠腹腔，建立胃癌腹腔转移动物模型。4周后处死裸鼠，观察其腹腔成瘤率、成瘤数量和重量以及裸鼠生存时间。结果各组裸鼠腹腔成瘤数量、肿瘤总重量和生存时间均无显著差异（P〉0．05）。结论在气腹压力≤15mmHg时CO2对胃癌MKN-45细胞在裸鼠腹腔内的种植转移无显著影响。     

胃癌腹膜种植瘤动物模型的构建

目的建立稳定实用的人胃癌鼠腹膜种植瘤模型。方法通过对裸鼠和SCID鼠腹腔注射胃癌细胞株AGS、NCI—N87和SNUl6构建腹膜种植瘤模型,比较不同细胞株模型成功率和生存期的差异。结果裸鼠腹腔种植5×106个AGS、NCI—N87和SNUl6细胞腹膜瘤形成率分别是（3／8、6／8和2／8;SCID鼠腹腔种植5×106个AGS、NCI—N87和SNUl6细胞,腹膜瘤形成率分别是0／6、6／6和6／6。SCID鼠腹膜瘤模型中位生存期：NCI—N87细胞组（10x10。）为74d;SNUl6细胞3个不同剂量组（10×106、20×106和40×106）分别为95、78和44d。结论SCID鼠腹腔种植（20—40）×106个SNUl6细胞可以构建稳定实用的胃癌腹膜种植瘤模型。     

^131I-抗CEA单抗在结肠癌模型及结肠癌患者体内的生物学分布

目的 观察^131I-抗CEA单抗(C50)在结肠癌生物体内的生物学分布．评估^131I-C50在机体内的导向作用及其稳定性。方法 采用改良氯胺T法以^131I-C50进行荷人结肠癌裸鼠及结肠癌患体内生物学分布及肿瘤放免显像研究。每鼠腹腔内注射^131I-C50 100μL(3700kBq)。1,2,3,4和6天后显像并测定各脏器的放射性分布;每例结肠癌患静脉注射^131I-C50 1mg(160 MBq),48～72小时用采用单光子发射型计算机辅助断层仪(SPECT)进行扫描显像,2～3天后于术中采集肿瘤及正常组织并检测其放射性分布。结果 荷人结肠癌裸鼠注射标记抗体后48小时肿瘤区即有放射性浓聚．随着时间的推延．影像渐趋清晰,本底逐渐下降。第6天结束时,瘤／肠和瘤／血放射性计数比值（T/NT)分别为10.40±0.69和0.70±0.08．均达最大值。^131I-C50在结肠癌患体内不同组织的生物学分布则显示：^131I-C50在瘤区明显集聚,T／NT多数达5以上。显像结果清晰,血本底很低。结论 ^131I-C50在生物体内能与肿瘤抗原发生特异性结合．具有很好的导向性,且在内环境下稳定性好,为临床结肠癌导向诊断与治疗提供了可靠的依据。     

不同分化程度人胃癌细胞裸鼠腹腔内种植模型的建立

本文主要应用两种不同分化的人胃癌细胞株SGC7901和MKN45肿瘤悬浮液，制备裸鼠腹腔内种植的动物模型，以期为研究胃癌根治术后肿瘤腹腔内种植提供一个较为可靠、方便的动物模型。     

CO2气腹对胃癌细胞SGC-7901裸鼠腹腔增殖和侵袭能力的影响

目的 通过体内模拟腹腔镜气腹环境,探讨CO2:气腹对裸鼠腹腔胃癌细胞增殖和侵袭转移能力的影响.方法 棵鼠随机分成3组:对照组(A组).行开腹探查;5 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)CO2气腹组(B组);8 mmHg CO2:气腹组(C组);每组9只.人胃癌细胞SGC-7901棵鼠腹腔注射后建立CO2气腹胃癌细胞裸鼠腹腔种植模型,气腹持续1 h.建模后每周秤体质量,观察各组裸鼠生长情况和腹腔成瘤情况.28 d后处死解部裸鼠,记录腹水量、腹腔各脏器、穿刺口和腹壁切口成瘤情况和肿瘤数,测量肿瘤最大径、总重量,并检测胃癌种植瘤组织中乙酰肝素酶(Hpa)mRNA的表达.结果 各组裸鼠成瘤率100%.各组裸鼠体质量、腹腔不同脏器成瘤率、腹水量差异均无统计学意义(P>0.05).肿瘤结节数:A组(7.4±2.5)个,B组(7.3±2.4)个,C组(7.5±2.1)个.肿瘤最大径:A组(7.0±2.2)mm,B组(6.9±2.0)nnn,C组(6.8±1.9)mm;肿瘤重量:A组(0.99±0.30)g.B组(0.87±0.20)g,C组(0.91±0.13)g.Hpa mRNA表达指数:A组0.41±0.07,B组0.45±0.06,C组0.43±0.09,各组间差异均无统计学意义(P>0.05).结论 在5 mmHg和8 mmHg气腹压力下,CO2:气腹不促进胃癌细胞裸鼠腹腔内增殖和侵袭转移,也未明显影响胃癌细胞成瘤组织Hpa mRNA的表达.     

二氧化碳气腹对胃癌MKN-45细胞侵袭能力的影响

目的 探讨CO2气腹对人胃癌细胞在裸鼠体内侵袭能力的影响.方法 建立体外CO2气腹模型,实验组胃癌细胞暴露于CO2气腹2 h(压力分别设为9、12、15 mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa).对照组胃癌细胞普通培养,然后注入裸鼠腹腔(2×106个细胞/只),每组10只.4周后每组取5只处死,记录腹腔及各脏器成瘤情况,剩余裸鼠观察生存时间.结果 各组裸鼠腹腔种植成瘤率、不同脏器成瘤率差异均无统计学意义(P＞0.05).腹腔内成瘤数:对照组(26.40±5.59)个,9 mm Hg组(25.40±5.27)个,12 mm Hg组(25.00±5.43)个,15 mm Hg组(22.40±5.37)个,各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).裸鼠生存分析各组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 常用CO2气腹压力不会促使胃癌细胞裸鼠腹腔侵袭转移,不缩短被接种裸鼠的生存时间.     

术前局部注射

目的探讨术前应用免疫导向技术治疗胃癌的临床效果。方法以应用131I-3H11对16例胃癌病人术前行内镜下癌灶多点注射作为治疗组;选择6例胃癌病人采用FAM方案化疗作为对照组。并对术后标本进行观察。结果术后病理检查治疗组发现75.0%(12/16)出现癌细胞核固缩、碎裂、细胞浆凝固、细胞间质出现炎性细胞浸润;这些变化多以中度为主,重度及无变化较少;而对照组无明显变化。结论作为胃癌的综合治疗方法,术前胃癌局部注射     

抑制黏附分子CD44S阻断胃癌腹膜转移的实验研究

目的：评价细胞表面黏附分子CD44被单克隆抗体封闭后,胃癌细胞黏附、迁移能力及其腹膜种植潜能的变化,为将阻断CD44作为抑制胃癌腹膜转移的治疗策略提供实验依据.方法：用细胞黏附试验及迁移试验（Boyden小室法）评价经抗CD44S单克隆抗体作用后,体外培养的MKN45胃癌细胞与间皮细胞发生黏附的能力及其穿越间皮细胞发生迁移的能力变化.通过建立裸鼠腹膜种植瘤模型,评价抗CD44S抗体处理对胃癌细胞腹膜肿瘤生成能力及荷瘤裸鼠生存时间的影响.结果：经抗CD44S抗体作用后,胃癌细胞MKN45与间皮细胞间的黏附能力明显减弱;经较高浓度抗体处理后,MKN45细胞的迁移能力也有明显下降.体内实验结果提示,接种经抗CD44S抗体处理MKN45胃癌细胞的裸鼠生存时间明显长于对照组（P＜0.01）.结论：黏附分子CD44参与胃癌腹膜转移过程,与肿瘤细胞-间皮细胞间的黏附和肿瘤细胞迁移等步骤密切相关;阻断CD44可作为抑制胃癌腹膜转移的潜在治疗策略.     

放射性碘标记表皮生长因子核素靶向治疗乳腺癌的实验研究

目的　观察放射性核素碘 (13 1I)偶联表皮生长因子 (EGF)对人乳腺癌裸鼠移植瘤的作用 ,探讨其靶向治疗乳腺癌的有效性和可行性。方法　氯胺 T法碘标EGF和人血清白蛋白 ;建立表达表皮生长因子受体 (EGFR)的人乳腺癌荷瘤裸鼠模型 ,36只裸鼠模型分为 6组 ,分别为阴性对照组、阳性对照组、13 1I EGF静脉组、13 1I 白蛋白组、13 1I组和13 1I EGF瘤内注射组 ,每组 6只。观察肿瘤生长增殖情况及放射性核素碘标EGF对正常组织脏器的放射毒副作用。结果　自第 1次给药后第 7天至第2 6天各时间段 ,13 1I EGF静脉和瘤内注射组肿瘤体积与阴性对照组、13 1I组及13 1I 白蛋白组肿瘤体积差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;13 1I EGF静脉和瘤内注射组抑瘤率分别为 82 0 %和 80 7% ,与13 1I组和13 1I 白蛋白组比较 (抑瘤率分别为 7 4 9%、6 91% ) ,差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;光学显微镜和透射电镜下见13 1I EGF静脉和瘤内注射组肿瘤细胞发生了一系列不可逆损害变化 ;未发现肝、肾和骨髓非特异性放射损伤。结论　经EGF转载的13 1I对人乳腺癌裸鼠移植瘤有明显抑制肿瘤细胞增殖生长的作用 ,无明显毒副作用。     

荧光腹腔镜下小鼠胃癌可视化成像的实验研究

目的探讨荧光腹腔镜下小鼠胃癌可视化成像在鉴别肿瘤和正常组织中的价值。方法共20只3~4周龄,体重20 g裸鼠。2只裸鼠右后肢皮下注射0.2 ml高表达HER-2基因的NCI-N87胃癌细胞悬液用于观察背部成瘤情况,1周后当瘤体直径达1 cm左右进行下一步实验观察。将0.2 ml高表达HER-2基因的NCI-N87胃癌细胞悬液注射于12只裸鼠胃黏膜下,建立裸鼠胃癌模型。将量子点与HER-2的单抗结合制作量子点纳米荧光探针。将12只胃癌模型裸鼠分为A、B组,每组6只,A组裸鼠尾静脉注射量子点纳米荧光探针100μl与裸鼠胃癌模型进行体内结合,B组裸鼠尾静脉先注射HER-2单克隆抗体再注射量子点纳米荧光探针100μl,C组6只正常生长的裸鼠尾静脉直接注射量子点纳米荧光探针100μl。最后利用改装后的荧光腹腔镜分别以15、30 min和1、2、4、8、12、24、30 h时间点观察不同时期裸鼠体内胃癌组织及其他部位的荧光显像,标本送检。结果裸鼠种瘤成功,胃癌组织在荧光腹腔镜下完成可视化成像,荧光探针结合后稳定性良好,荧光强度在1 h后达到峰值,30 h后荧光消失。发光组织病理切片证实为胃癌组织,免疫组化证实该组织高表达HER-2蛋白。结论量子点纳米荧光探针性质稳定,荧光强度1 h达到峰值,然后逐渐衰减,荧光腹腔镜下可清晰看到高表达HER-2的NCI-N87胃恶性肿瘤的边界和周围组织及淋巴结的转移情况。     

转基因LIGHT的人脐血间质干细胞对胃癌抑制杀伤作用的研究

目的探讨转基因LIGHT脐血间质干细胞对胃癌的抑制杀伤作用。方法采用慢病毒载体穿梭质粒pGC-FU-LIGHT．在脂质体Lipofectamine2000介导下与结构质粒pHelper1．0和包膜质粒pHelper2．0共转染293T细胞获得慢病毒后分别感染人脐血间质干细胞．获得重组慢病毒感染的脐血间质干细胞（MSC-LIGHT）和空载体慢病毒感染的脐血间质干细胞（MSC）。人胃癌细胞SGC-7901注射到裸鼠腹股沟皮下建立胃癌移植瘤裸鼠模型。荷瘤裸鼠分为MSC-LIGHT组、MSC组和生理盐水组,每组5只,向3组裸鼠瘤周分别注射MSC-LIGHT、MSC及生理盐水。隔日1次,注射3次,第4周取材,观察注射前后瘤体生长情况。反转录PCR和ELISA法测定3组胃癌组织中LIGHT的mRNA和蛋白表达;病理切片观察瘤体的坏死面积。结果MSC．LIGHT组、MSC组和生理盐水组裸鼠肿瘤体积分别为（0．45±0．25）cm3、（0．64±0．36）cm3和（1．21±0．79）cm3,3组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。3组LIGHTmRNA相对表达量分别为2．96±0．27,1．23±0．47和0．73±0．10．蛋白浓度分别为（167．89±2．31）、（73．22±5．74）和（49．66±5．25）ng／L;3组比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）。病理切片显示MSC-LIGHT组坏死面积最大。结论转基因脐血间质干细胞旁分泌LIGHT对胃癌细胞具有明显的抑制杀伤作用。     

TK/GCV、CD/5-Fc系统对结肠癌肝转移抑制作用的实验研究

目的：研究胸苷激酶／丙氧鸟苷（TK／GCV）系统和胞嘧啶脱氨酶／5-氟胞嘧啶（CD／5-Fc）系统对结肠癌肝转移的抑制作用。方法：将40只裸鼠随机分为四组：对照组、TK组、CD组、TK-CD组，每组10只。脾内注射法建立结肠癌肝转移动物模型。对照组：脾内注射SW480细胞，腹腔注射生理盐水；TK组：脾内注射SW480／TK-CD细胞，腹腔注射GCV；CD组：脾内注射SW480／TK-CD细胞，腹腔注射5-Fc；TK-CD组：脾内注射SW480／TK-CD细胞，腹腔注射GCV、5-Fc。观察各组裸小鼠的肝转移率、肝转移瘤数目、电镜下肿瘤组织病理学变化、肿瘤细胞凋亡指数（AD、生存期等指标。结果：各治疗组裸鼠肝转移白9发生率下降，平均肝转移瘤数减少，其动物的生存期延长，肝转移瘤内的癌细胞凋亡率增高。联合基因治疗组效果更好，且TK／GCV与CD／5-Fc有交互协同作用。结论：TK/GCV、CD／5-Fc系统联合应用具有协同效应，可有效地抑制结肠癌肝转移的形成。     

Inhibition of Gastric Cancer Cell Adhesion in Nude Mice by Inraperitoneal Phospholipids

Adhesion of tumor cells to mesothelial cells or extracellular matrix components is a pivotal step in developing peritoneal dissemination after gastric cancer. As phospholipids were found to reduce adhesion formation, especially at sites of peritoneal lesions, we assessed the inhibition of attachment of NUGC-4 gastric cancer cells by local treatment with phospholipids to the peritoneum in nude mice. Gastric cancer cells (1×l0⁶) suspended in either normal saline (controls) or phospholipid suspension 75 mg/kg body weight (PL75) or 150 mg/kg (PL150) were injected intraperitoneally into 90 female BALB/c nu/nu mice. The treatment groups were subdivided into animals with defined peritoneal lesions and animals without lesions. After 30 days the extent of peritoneal carcinosis and the Peritoneal Cancer Index were evaluated. Statistical analysis was performed with two factorial ANOVAs. The level of significance was adjusted according to Bonferrorni (α = 0.00278). During a 90-day observation period the survival rate was determined using the log rank test.After 30 days the intraperitoneal tumor volume was reduced by PL150 up to 0.6 ml (SEM 0.16) and 0.48 ml (SEM 0.09) in mice with peritoneal lesions compared to 0.9 ml (SEM 0.2) and 0.9 ml (SEM 0.1) in the control group (P = 0.04). The mean area of tumor adhesion amounted to 145 mm² (SEM 17) (P = 0.08) and 164 mm² (SEM 32.8) (P = 0.049) with peritoneal lesions after treatment with PL150 [controls: 216 mm² (SEM 28.5) and 245 mm² (SEM 29.3)]. The peritoneal cancer index was 16.4 (SEM 1.7) in the control group and 9 (SEM 1.68) with PL150 (P = 0.0002). In the subgroup with peritoneal lesions, the respective values were as follows: controls: 20.8 (SEM 0.85); PL 150:14.3 (SEM 1.07) (P = 0.0001). We found a prolonged survival rate after treatment with PL150. However, this effect was not significantly different to that seen in the control group. Treatment with PL75 had no significant influence. Phospholipids may be an efficacious and economic tool for reducing peritoneal tumor cell adhesion and consequently the development of peritoneal carcinosis after resection of gastric cancer.     

胃癌腹膜转移相关基因的检测

目的 筛选与胃癌腹膜转移相关的基因,为研究胃癌腹膜转移的机制提供参考.方法 建立裸鼠人胃癌细胞株SGC-7901皮下移植瘤模型,鼠间传3代后移植小瘤块到裸鼠胃壁,收集原发灶和转移灶标本.采用基因芯片技术筛选胃癌原发灶和转移灶间差异表达的基因,并用RT-PCR法检验基因芯片的结果.结果 共建立胃癌原位移植裸鼠15只,胃壁成瘤率为100％(15/15),腹膜转移发生率为40.0％(6/15).芯片杂交分析筛选出192个上调基因和139个下调基因；RT-PCR验证高表达的再生基因Ⅳ(Reg Ⅳ),结果与基因芯片检测情况相符.结论 胃癌原发灶与腹膜转移灶之间存在差异表达的基因,其中部分基因可能在胃癌的腹膜转移中起了促进作用.     

磁性阿霉素隐形脂质体对裸鼠移植性人胃癌的靶向治疗

目的　探讨磁性阿霉素隐形脂质体靶向治疗裸鼠移植性人胃癌的疗效。方法　荷人胃癌的裸鼠为动物模型,尾静脉给药,肿瘤部位放置恒定磁场进行磁导向化疗。结果　磁性阿霉素隐形脂质体靶向MDL( )组对人胃癌的移植瘤有显著抑制作用,体积和瘤重抑瘤率分别为71%和70 % ,显著高于磁性阿霉素隐形脂质体非靶向MDL(- )组(5 7%、5 0 % )和游离阿霉素DOX组(33%、31% )(P <0 .0 5 ) ,空白组细胞凋亡率均低于各实验组,MDL( )组达4 2 % ,高于其他各组(P <0 . 0 5 )。实验期间DOX组体重一直未见增加,而MDL( )组体重平稳增加,且饮食、活动未见明显变化。结论　磁性阿霉素隐形脂质体作为一种新型抗肿瘤药物显示了良好的应用前景。