缺氧对肺动脉内皮细胞PDGF基因及PDGF－B链蛋白表达的影响

应用核酸杂交和定量免疫细胞化学分析技术研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子ＰＤＧＦ基因及ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白表达的影响。结果表明，缺氧能明显增强肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ＿Ｂ链ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达水平无明显改变。免疫细胞化学定量分析也证实ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白染色比正常对照明显增强，与ＰＤＧＦ－Ｂ链基因表达的改变基本一致。提示缺氧可以刺激肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ的表达。ＰＤＦＧ在缺氧引起的肺动脉高压血管构形改建中可能具有重要作用。     

缺氧促进猪肺动脉内皮细胞sis／PDGF—B链基因的表达

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｓｌｏｔ－ｂｌｏｔ杂交技术研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）基因表达的影响，结果表明，缺氧能明显中肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达无明显影响，提示缺氧可能是体内刺激肺动脉内皮细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链基因表达的因素之一，通过肺动脉平滑机细胞增生和收缩，在肺动脉高压血管改建中可能具有重要作用。     

缺氧促进猪肺动脉内皮细胞sis／PDGF－B链基因的表达

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｓｌｏｔ一ｂｌｏｔ杂交技术研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）基因表达的影响。结果表明，缺氧能明显增加肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ一Ｂ链ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ一Ａ链ｍＲＮＡ表达无明显影响。提示缺氧可能是体内刺激肺动脉内皮细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ一Ｂ链基因表达的因素之一，通过控制肺动脉平滑肌细胞增生和收缩，在肺动脉高压血管改建中可能具有重要作用。     

缺氧内皮细胞介导肺动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子mRNA表达

目的探讨缺氧时肺动脉内皮细胞对肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦ自分泌的影响。方法实验分３组：无血清培养组、常氧性内皮细胞条件培养液组及缺氧性内皮细胞条件培养液组。应用原位杂交和图像分析技术检测猪肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ表达。结果无血清培养的肺动脉平滑肌细胞有ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ弱表达;内皮细胞条件培养液明显增加肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ表达,两者分别为无血清培养组的１．８倍和１．７倍（Ｐ＜０．０１）,为常氧内皮细胞条件培养液培养组的１．４倍和１．５倍（Ｐ＜０．０１）。结论缺氧时肺动脉内皮细胞可以介导肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦ的自分泌,可能在缺氧性肺动脉高压血管构形改建中具有重要作用     

低氧致鼠腺泡内肺动脉PDGF—B链蛋白表达的变化

目的：探讨血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）在低氧肺动脉高压血管构形重建发生中的作用。方法：应用免疫组化技术结合计算机图像分析，检测了低氧大鼠腺泡内肺动脉（ＩＡＰＡ）ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白表达水平。结果：常氧时，ＩＡＰＡ仅有ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白弱表达；低氧１天时，ＩＡＰＡ便有较强的ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白表达，定位于ＩＡＰＡ的内皮和中膜，低氧３天至１４天仅分布于中膜；低氧１、３、５、７、１４天各时间点ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白表达分别为常氧组的１．５３、１．５９、１．５６、１．６２和１．４２倍，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论：ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白可能参与了低氧肺动脉高压血管构形重建的发病过程     

缺氧诱导大鼠肺动脉PDGF和c—myc基因表达增强

为了研究生长因子和原癌基因在缺氧所致肺血管结构重建中的作用，我们选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，置于低压仓内模拟海拔５０００米高度持续缺氧７天和１４天。与平原对照组相比，缺氧７天时肺动脉血小板源生长因子Ａ链（ＰＤＧＦ－Ａ）基因表达水平略有升高，而后有下降趋势，缺氧１４天时ＰＤＧＦ－Ｂ链３．５ｋｂｍＲＮＡ表达显著升高。点杂交结果显示：ｃ－ｍｙｃ原癌基因正常时表达水平很低。结果表明，缺氧过程中，ＰＤＧＦ－Ａ链和     

缺氧诱导大鼠肺动脉PDGF和c－myc基因表达增强

为了研究生长因子和原癌基因在缺氧所致肺血管结构重建中的作用，我们选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，置于低压仓内模拟海拔５０００米高度持续缺氧７天和１４天。与平原对照组相比，缺氧７天时肺动脉血小板源生长因子Ａ链（ＰＤＧＦ－Ａ）基因表达水平略有升高，而后有下降趋势；缺氧１４天时ＰＤＧＦ－Ｂ链３．５ｋｂｍＲＮＡ表达显著升高。点杂交结果显示：ｃ－ｍｙｃ原癌基因正常时表达水平很低。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ可见缺氧７天时有２．２ｋｂｍＲＮＡ转录，缺氧１４天时其含量进一步增加为正常的６倍。结果表明，缺氧过程中，ＰＤＧＦ－Ａ链和Ｂ链是顺序表达的，其表达水平与缺氧性肺血管结构重组过程有一定相关。ＰＤＧＦ的促增殖作用是通过ｃ－ｍｙｃ基因产物实现的。     

血小板源生长因子及其受体基因表达在低氧大鼠肺中的变化

本文观察了血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）Ａ、Ｂ链及其α、β受体基因表达在低氧大鼠肺中的变化。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交显示正常大鼠肺中可表达ＰＤＧＦ－Ａ链、Ｂ链和ＰＤＧＦ－α受体、β受体的ｍＲＮＡ。随着低氧时间的延长，ｍＲＮＡ水平迅速增加。ＰＤＧＦ－Ａ、Ｂ链ｍＲＮＡ均在低氧的第二天达高峰，分别为正常的１．５１倍及１．６９倍，且Ｂ链ｍＲＮＡ基本维持在该水平至第七天。ＰＤＧＦ－α、β受体的ｍＲＮＡ在低氧第     

PDGF-B链基因表达的调控及其在常见心血管疾病中的意义

血小板源生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＤＧＦ）是机体普遍存在的促分裂剂,系由两种肽链（Ａ链、Ｂ链）组成的同型或异型二聚体。依不同的细胞来源,有３种形式：ＰＤＧＦ－ＡＡ,ＰＤＧＦ－ＡＢ和ＰＤＧＦ－ＢＢ。ＰＤＧＦ－Ａ链和－Ｂ链分别由ＰＤＧＦ－Ａ链基因和－Ｂ链基因编码。ＰＤＧＦ－Ｂ链主要由内皮细胞和巨噬细胞产生,其基因表达调控异常与常见心血管疾病的发生发展存在着密切关系,内皮细胞功能紊乱日益受到重视,而内皮细胞仅表达Ｂ链,本文就其表达调控,尤其是转录调控的研究进…     

TNFα对血管内皮细胞PDGF-B链基因转录的影响

ＴＮＦα主要由巨噬细胞、Ｔ细胞和ＮＫ细胞产生,是一种在急、慢性炎症过程中均有重要作用的炎症介质。动脉粥样硬化（ＡＳ）是以动脉壁内皮结构、功能损害和平滑肌细胞增殖变化为主的慢性炎症过程。ＡＳ时ＴＮＦα合成增多,且与ＡＳ的严重程度成正比。ＰＤＧＦ是以二聚体（ＡＡ,ＢＢ和ＡＢ）形式存在的促分裂剂。其中,ＰＤＧＦ－Ｂ链由ＰＤＧＦ－Ｂ链基因编码,该基因ｍＲＮＡ在ＡＳ血管内皮细胞中表达明显增高。因此,研究在ＴＮＦα作用下,血管内皮细胞ＰＤＧＦ－Ｂ链基因表达调控的分子机制对于阐明动脉粥样硬化的发病机制具有重要…     

API0134对LDL诱导单核细胞表达PDGF—B,bFGF及平滑肌细胞增？…

目的和方法：应用免疫细胞化学方法，观察穿心莲成分ＡＰＩ０１３４对轻度氧化低密度脂蛋白诱导人血单核细胞表达血小板源生长因子Ｂ链蛋白和碱性成纤维细胞生长因子的影响，并进行平滑肌细胞有丝分裂试验，观察ＡＰＩ０１３４作用后的单核细胞条件培养基（ＣＭ）对＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＳＭＣ ＤＮＡ的影响。结果：ｍｍＬＤＬ可显著促进单核细胞表达ＰＤＧＦ－Ｂ和ｂＦＧＦ，ｍｍＬＤＬ作用后的ＣＭ亦可显著增加＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量     

含人PDGF—B链基因不同上游序列报告基因的构建和表达

本研究构建了含人ＰＤＧＦＢ链基因不同上游序列的荧光素酶报告基因ｐＳＩＳ－１７５８／＋４３Ｌｕｃ和ｐＳＩＳ－４０２／＋４３Ｌｕｃ，经与ｐＳＶβＧａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅＣｏｎｔｒｏｌＶｅｃｔｏｒ共转染血管内皮细胞后，测定了基础水平和ＴＮＦα作用下细胞裂解液中的荧光素酶和β半乳糖苷酶活性。结果表明：在ＴＮＦα作用下，ＰＤＧＦＢ链基因上游序列上调内皮细胞荧光素酶的表达，其主要调控区可能位于－１７５８／－４０３ｂｐ之间。     

山莨菪碱抗血栓形成的机制研究

观察中药山莨菪碱对内毒素脂多糖所致血管内皮细胞表达纤溶酶原激活物抑制剂１的作用和作用机制。方法用胰蛋白酶消化培养人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＸ）;采用酶联免疫吸附试验法和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹方法观察ＨＵＶＥＧＣ条件培养液ＰＡＩ－１蛋白量及ｍＲＮＡ表达用免疫细胞学检测ＨＵＶＥＣ核因子ＮＦ－ｋＢ的核内转移情况,结晶显著啬培养ＨＵＶＥＣ的ＰＡＩ－１蛋白和ｍＲＮＡ表达;然而当山莨菪碱和ＬＰＳ同时作用于ＨＵＶ     

API_(0134)对LDL诱导单核细胞表达PDGF-B、bFGF及平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的和方法：应用免疫细胞化学方法，观察穿心莲成分ＡＰＩ０１３４对轻度氧化低密度脂蛋白（ｍｍＬＤＬ）诱导人血单核细胞表达血小板源生长因子Ｂ链蛋白（ＰＤＧＦ－Ｂ）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的影响；并进行平滑肌细胞（ＳＭＣ）有丝分裂试验，观察ＡＰＩ０１３４作用后的单核细胞条件培养基（ＣＭ）对３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＳＭＣＤＮＡ的影响。结果：ｍｍＬＤＬ可显著促进单核细胞表达ＰＤＧＦ－Ｂ和ｂＦＧＦ，ｍｍＬＤＬ作用后的ＣＭ亦可显著增加３Ｈ－ＴｄＲ的掺入量。ｍｍＬＤＬ的上述作用可被不同剂量的ＡＰＩ０１３４和ＡＰＩ０１３４作用后的ＣＭ所抑制。结论：ＡＰＩ０１３４的作用可能是抗动脉粥样硬化的机理之一。     

小儿哮喘发病中CD23,IFN和IgE的作用及其意义

应用ＡＰＡＡＰ方法，Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ地高标记核酸杂交技术及ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法分别检测哮喘患巴细胞ＣＤ２３ｍＲＮＡ，膜ＣＤ２３分子表达和患儿血浆和淋巴细胞诱生ＩＦＮ－γ水平。结果，哮喘患儿ＣＤ２３ｍＲＮ表达增高，外周血ＰＢＭＣ和Ｂ细胞的ＣＤ２３表达均显著增加，ＩＦＮ－γ诱生水平明显低下，血清ＩｇＥ水平异常升高，Ｂ细胞ＣＤ２３分子表达与ＩｇＥ水平之间显著正相关麻疹疫苗治疗后Ｂ细胞ＣＤ２３分子表达明显     

cAMP,cGMP在大鼠心肌细胞bFGF基因表达调节中的 …

目的：研究ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ在心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达调节中的作用。方法：分离培养大鼠心肌细胞，加入８－溴－ｃＡＭＰ的硝普钠，升高细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ浓度，用原位杂交及免疫细胞化学的方法观察细胞内ｂＦＧＦ的表达，图象分析检测ｂＦＧＦ表达量的变化。结果：在培养中加８－溴－ｃＡＭＰ的心肌细胞，２４ｈ时ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ及蛋白表达均明显高于对照组，４８ｈ、７２ｈ仍然较强表达     

胶质瘤细胞血小板源生长因子B链的纯合二聚体与其受体基因表达和受体活化水平的研究

目的探讨胶质瘤细胞血小板源生长因子Ｂ链的纯合二聚体（ＰＤＧＦＢＢ）及其受体（ＰＤＧＦＲ）基因表达和ＰＤＧＦＲ活化水平在胶质瘤发生、发展中的作用。方法用原位杂交和免疫组化染色观察了７３例不同级别的人胶质瘤组织标本。结果６２例（８４９％）的肿瘤细胞表达ＰＤＧＦＢｍＲＮＡ，其阳性率和阳性肿瘤细胞含量均随肿瘤恶性程度升高而递增。ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ和这两种受体及其信号传递通路活化标记物酪氨酸磷酸化蛋白（ＰＴｙｒ）的阳性率均为１００％。这３种阳性肿瘤细胞密度（个／００５ｍｍ２）彼此间均呈正相关（ｒ＝０８３８～０８９７，Ｐ＜００１），并均随肿瘤恶性程度及肿瘤细胞ＰＤＧＦＢｍＲＮＡ表达水平升高而同步增加，差异均有显著性（Ｐ＜００５～００１）。但各肿瘤组内两种受体阳性肿瘤细胞密度间无显著性差异（Ｐ＞００５）。结论胶质瘤细胞普遍存在ＰＤＧＦＢＢ自分泌环，ＰＤＧＦＲα和ＰＤＧＦＲβ在该自分泌环中均起重要作用，该自分泌环活性异常增加可能对ＰＤＧＦＢＢ及其受体表达有正反馈诱导作用，并可能在胶质瘤发生及恶性进展过程中发挥重要作用。     

血小板衍生生长因子及其受体与病毒性肝炎肝纤维化 …

目的 研究血小板衍生生长因子在病毒性肝炎肝纤维化中的作用。方法 以免疫组化技术检测血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢＢ以及ＰＤＧＦ的β受体（ＰＤＧＦＲ－β）在病毒性肝炎肝组织中的表达。结果 ＰＤＧＦ－ＢＢ及ＰＤＧＦＲ－β在肝组织中的表达与肝纤维化程度明显相关，肝硬变及慢性肝炎Ｓ３￣４期患者肝组织ＰＤＧＦ－ＢＢ及ＰＤＧＦＲ－β表达强度明显高于急性肝炎及慢性肝炎Ｓ０￣２期患者，同时与结蛋白、Ⅲ型前胶原     

慢性阻塞性肺病患者血浆血栓素B_2和6－酮－前列腺素F_（1α）含量的变化及其与肺动脉高压的关系

为了探讨慢性阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）患者血栓素Ａ_２（ＴＸＡ_２）和前列环素（ＰＧＩ_２）与肺动脉高压的关系，我们对伴有和不伴有肺动脉高压的３０例缓解期ＣＯＰＤ患者血浆中血栓素Ｂ_２（ＴＸＢ_２）及６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α））的含量变化进行了观察，还对７例伴肺动脉高压的ＣＯＰＤ患者不同病期的肺动脉平均压（ＰａＰ）、血浆ＴＸＢ_２及６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）．水平作了对比分析。结果发现，缓解期ＣＯＰＤ患者中，伴肺动脉高压者血浆ＴＸＢ_２明显增高，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）显著下降，ＴＸＢ_２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）明显增大，与不伴肺动脉高压者比较，差异非常显著（Ｐ均＜０．０１），而不伴肺动脉高压者的这些指标与正常人的比较，则无统计学意义（Ｐ均＞０．０５）；与急性期比较，ＣＯＰＤ患者缓解期ＰａＰ明显下降，ＴＸＢ_２亦显著降低，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）明显升高，ＴＸＢ_２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）缩小（Ｐ均＜０．０１）；相关分析发现，伴肺动脉高压者ＰａＰ与ＴＸＢ_２呈明显正相关，与６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）呈负相关（ｎ＝２８，ｒ＝＋０．４６、－０．３９，Ｐ均＜０．０５）     

碱性成纤维细胞生长因子的自分泌与反应性星形细胞胶质化

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的自分泌现象及其与反应性星形胶质化的关系。方法在大鼠星形胶质细胞（ＡＳ）原代培养的机械损伤模型上，以免疫细胞化学及原位杂交技术检测ｂＦＧＦ、ＰＣＮＡ、ＧＦＡＰ和ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ的动态变化。结果（１）损伤边缘的ＡＳ于伤后２小时起表达ｂＦＧＦ，１２小时达高峰，２天后回落；（２）损伤边缘的ＡＳ于伤后６小时起表达ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ，１天达高峰，２天后回落；（３）伤后１天起，ＧＦＡＰ表达明显增强，ＡＳ胞体肥大并向损伤区伸出粗大突起，２天时ＧＦＡＰ表达至高峰；（４）损伤边缘的部分ＡＳ从伤后２小时起表达ＰＣＮＡ，１天时达到高峰。结论（１）受损的ＡＳ能自分泌ｂＦＧＦ，这是ＡＳ受损后的早期反应之一，具有促进反应性星形胶质化的作用；（２）反应性星形胶质化时，ＧＦＡＰ表达增强是转录水平上ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ增加的结果；（３）反应性星形胶质化以ＡＳ肥大为主，增生为辅。